13.3.

2 Sakarifikasi PU terkonsentrasi
Jika ultrafiltrasi mengubah PU menjadi media 'kuat', 'fleksibilitas' dapat diperoleh dengan
total atau sebagian saccharifying polisakarida dalam konsentrat (nM menengah), untuk
mengubahnya menjadi media nM-HH, ION menjadi konsentrasi total gula (dalam gil) dan h
derajat hidrolisis (dalam%) (mengurangi gula x 100/total gula). Dalam hal ini, aktivitas
amilolitik pasca-incubates dipelajari pada bagian sebelumnya memungkinkan persyaratan proses
hidrolisis yang akan dibahas dalam konteks produk yang dihasilkan dari limbah itu sendiri.
Bahkan, menggabungkan pasca-incubates dari A. niger (rendah TAA, glukoamilase
dominan), A. oryzae (tinggi TAA, mantan-amilase dominan) dan media 2M dalam proporsi
volumetrik yang berbeda, adalah mungkin untuk mendapatkan total sakarifikasi glikogen (
Murado et al., 1993). Itu juga mungkin untuk membuat proses hidrolisis kontinyu dalam reaktor
tubular makan dengan campuran pasca-incubates dan 2M menengah, dan mereka
mempertahankan aliran piston cocok karena gradien viskositas negatif yang dihasilkan oleh
penurunan progresif dalam ukuran molekul polisakarida .
Seperti yang diharapkan (lihat bagian 13.2.3 dan Gambar 13.7), penggunaan ini dari
postincubates menggarisbawahi keunggulan dari media bebas sel dari A.oryzae, tetapi juga
membuktikan bahwa kontribusi glukoamilase dari A. niger meningkatkan efisiensi proses dalam
hal tingkat taai rasio hidrolisis, terutama jika hidrolisis diukur khusus sebagai glukosa. Namun
demikian, tidak tampak bahwa pengenceran media bebas sel dari A. oryzae (tinggi T AA)
dengan orang-orang dari A. niger merupakan bijaksana baik, terutama mengingat kontrol relatif,
telah disebutkan, yang kontribusi dari glukoamilase ke TAA dapat disampaikan dalam budaya A.
oryzae.
Penggunaan langsung pasca - incubates tidak dianjurkan baik . Misalkan bahwa jumlah
hidrolisis dengan media yang bebas sel dari A. oryzae dijamin dengan TAA / proporsi glikogen
dari sekitar 0,44 EU / mg dalam campuran inkubasi ( data eksperimen memberikan nilai sedikit
lebih rendah ) , seperti yang ditunjukkan pada Gambar 13.11 , yang membuat mendapatkan
media yang terkonsentrasi untuk pengenceran berikutnya dengan pasca - incubates agak berarti .
Penggunaan bubuk persiapan enzimatik dari A. oryzae tampaknya maka pilihan yang
paling logis . Mengingat kompleksitas interaksi yang diharapkan dalam kondisi seperti ini ,
dengan kemungkinan efek sinergis yang positif ( Fujii dan Kawamura , 1985; Fujii , Homma dan
Taniguchi , 1988) dan mungkin juga yang negatif ( . Miranda et al , 1987) , proses itu dipelajari
dengan cara rencana faktorial lengkap yang melibatkan empat set berikut variabel ( domain
eksperimental dan coding dalam Tabel 13.9 ) :
1 . Konsentrasi awal glikogen dalam campuran inkubasi ( 5 ) . Tingkat variabel ini , yang
merupakan ukuran dari rasio substrat enzymel , diperoleh dengan menambahkan solusi enzimatik
digunakan media nM ( selalu dalam proporsi 0.025:1 v / v ) dengan 50 , 100 dan 150 gil glikogen
2 . Glukoamilase / TAA ratio ( GA ) , dengan nilai-nilai yang diperoleh dengan menambahkan
peningkatan kesatuan 11,3 EU / ml glukoamilase A. niger dengan larutan basa dari persiapan A.
oryzae ( TAA = 1600 EU / ml ; glukoamilase = 11,3 EU / ml ) . Meskipun suplemen
glukoamilase mewakili kontribusi kecil untuk TAA , rasio TAA / glikogen dalam sistem
dianggap 40/50 , 40/100 dan 401.150 .
3 . PH awal .
4 . Waktu hidrolisis ( t ) , variabel terakhir ini dalam satu domain ( 5-25 h) di mana respon
menyimpang minimal dari lineality sebelumnya dikonfirmasi .
Meskipun busung sedikit di hypersurface respon menunjukkan komponen kedua-order
kecil, proses terbukti disesuaikan (a <0,05) ke depan model pertama-order dengan interaksi, di
mana Y adalah persentase hidrolisis ketika nilai-nilai kode yang digunakan untuk variabel
independen:
Y = 69.43 + 5.78GA - 12.94S - 2.25pH + 14.30t + 2.34GASt -2.30SpHt
Gambar 13.12 menunjukkan beberapa permukaan respon yang paling menggambarkan
karakteristik penting dari sistem, termasuk fakta bahwa domain percobaan yang digunakan
melibatkan kondisi tertentu yang memungkinkan hidrolisis lengkap substrat , bahkan pada
konsentrasi lebih dari 100 gil . Pengaruh kuat glukoamilase - meskipun tingkat rendah dan
terutama pada jangka pendek dan pH rendah - sangat menarik , karena tidak sulit untuk
mendapatkan persiapan enzimatik dari A. oryzae withlevels glukoamilase lebih tinggi dari
maksimum yang digunakan pada kesempatan ini , dengan mengurangi , sebagaimana telah
disebutkan , keterbatasan oksigen dalam budaya selama fase pertumbuhan pada tingkat
maksimum. Peningkatan pH ( yang membatasi aktivitas glukoamilase ) mewajibkan penurunan
tingkat substrat untuk mempertahankan respon yang tinggi pada periode singkat saja , pada
waktu yang lama dan rendahnya tingkat glukoamilase tampaknya lebih mudah untuk mendukung
sebuah amilase dengan menaikkan pH .
 Akhirnya, dapat menunjukkan bahwa ketika mengamankan media derajat hidrolisis
berkisar antara 25 sampai 100%, persamaan (2) melengkapi kriteria konsisten untuk definisi
alternatif operasional di mana ekonomi waktu atau persiapan enzim adalah prioritas.
Gambar 13.13 menunjukkan hasil dari dua alternatif tersebut dan menunjukkan tingkat
tinggi penyesuaian dengan nilai-nilai yang diharapkan, serta tidak adanya, dalam semua kasus,
dari dextrines dengan derajat polimerisasi yang lebih tinggi daripada maltotriosa antara produk
hidrolisis.