Laporan Praktikum Keamanan Pangan PDF

LAPORAN PRAKTIKUM
KEAMANAN PANGAN
Oleh :
KELOMPOK : 7
EUIS NOVI SOLIHATI 25010113120082
UMI ALFIANI 25010113120104
ELISA MAHARANI 25010113120112
ACHMAD RIZKI AZHARI 25010113140258
CRISTIN OKTAVIANA G.Y.A 25010113140266
TITI HAPSARI 25010113140357
ILYA FAROKHA RIZQYANA 25010113130387
AGUSTINA RATRI MAHARANI 25010113130416
FAKULTAS KESEHATAN MASYARAKAT

UNIVERSITAS DIPONEGORO
SEMARANG
2016
HALAMAN PENGESAHAN
1. Judul Kegiatan : Praktikum Keamanan Pangan

2. Penyusun : Kelompok 7
3. Laboratorium/Bagian : Laboratorium Terpadu FKM Undip/
Bagian Kesehatan Lingkungan
4. Lokasi Kegiatan : Laboratorium Terpadu Fakultas Kesehatan
Masyarakat Universitas Diponegoro
5. Waktu Kegiatan : 18 April 2016 – 22 April 2016
Sudah diperiksa isi materi keilmuan dan disetujui.
Semarang, 10 Juni 2016
Kepala Laboratorium Bagian Dosen Pembimbing/Penguji

Kesehatan Lingkungan/
Laboratorium Kesmas
FKM Undip
Yusniar Hanani Darudianti, STP, M.Kes Dr.Dra. Sulistiyani, M.Kes.
NIP. 197109091995032001 NIP. 196809111993032013
Menyetujui,
Kordinator Laboratorium Terpadu
Ir. Laksmi Widajanti, M.Si
NIP. 196608131992032003
ii
KATA PENGANTAR
Dengan memanjatkan puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa penulis
dapat menyelesaikan tugas pembuatan laporan yang berjudul “Praktikum
Keamanan Pagan Kesehatan Lingkungan”. Dalam pembuatan makalah ini,
praktikan mendapat bantuan dari berbagai pihak, maka pada kesempatan ini
penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Dr. Dra. Sulistiyani, M. Kes selaku dosen praktikum yang telah memberikan
kesempatan dan memberi fasilitas sehingga laporan ini dapat selesai dengan
lancar.
2. Semua pihak yang tidak dapat praktikan sebutkan satu persatu yang
membantu pembuatan laporan ini.
Semoga laporan praktikum ini bisa bermanfaat bagi pembaca pada

umumnya dan praktikan pada khususnya, praktikan menyadari bahwa dalam
pembuatan laporan ini masih jauh dari sempurna untuk itu penulis menerima
saran dan kritik yang bersifat membangun demi perbaikan kearah kesempurnaan.
Akhir kata praktikan sampaikan terima kasih.
Semarang, 10 Juni 2016
Praktikan
iii
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ......................................................................................... i

HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................... ii
KATA PENGANTAR ....................................................................................... iii
DAFTAR ISI ...................................................................................................... iv
DAFTAR TABEL ............................................................................................. x
DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... xi
Parameter I Pengenalan Alat & Teknik Pengambilan Sampel Secara Aseptik
BAB I PENDAHULUAN ................................................................................... 1

A. Latar Belakang ........................................................................................ 1
B. Tujuan ..................................................................................................... 2
C. Manfaat ................................................................................................... 2
BAB II TINJAUAN PUSTAKA......................................................................... 3

A. Keamanan Pangan ................................................................................... 3
B. Penjamah Makanan ................................................................................. 4
C. Pemeriksaan Mikrobiologi Penjamah Makanan ..................................... 4
BAB III METODE PRAKTIKUM ..................................................................... 6

A. Waktu Praktikum .................................................................................... 6
B. Tempat Praktikum ................................................................................... 6
C. Alat .......................................................................................................... 6
D. Bahan....................................................................................................... 6
E. Teknik Sampling ..................................................................................... 6
F. Metode yang Digunakan ......................................................................... 7
G. Prosedur Kerja ......................................................................................... 7
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................ 8

A. Hasil Pengamatan .................................................................................... 8
B. Pembahasan ............................................................................................. 15
BAB V PENUTUP .............................................................................................. 16

A. Kesimpulan ............................................................................................. 16
B. Saran ........................................................................................................ 16
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 17
LAMPIRAN ........................................................................................................ 19
iv
v
Parameter II Isolasi, Inokulasi, dan Morfologi Bakteri

A. Latar Belakang ........................................................................................ 26
B. Tujuan ..................................................................................................... 27
C. Manfaat ................................................................................................... 27

A. Isolasi ...................................................................................................... 28
B. Inokulasi .................................................................................................. 29
C. Media PCA (Plate Count Agar) .............................................................. 29
D. Media EMBA .......................................................................................... 30
E. Bakteri ..................................................................................................... 31
F. Jenis Bakteri ............................................................................................ 32
G. Gangguan Kesehatan Akibat Bakteri ...................................................... 33
H. Pencegahan .............................................................................................. 35

C. Alat .......................................................................................................... 37
D. Bahan....................................................................................................... 38
G. Prosedur Kerja ......................................................................................... 40

B. Pembahasan ............................................................................................. 48
BAB V PENUTUP .............................................................................................. 51

A. Kesimpulan ............................................................................................. 51
B. Saran ........................................................................................................ 51
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 52
LAMPIRAN ........................................................................................................ 53
vi
Parameter III Formalin

A. Latar Belakang ........................................................................................ 59
B. Tujuan ..................................................................................................... 60
C. Manfaat ................................................................................................... 60

A. Pengertian Formalin ................................................................................ 61
B. Fungsi Formalin ...................................................................................... 61
C. Karakteristik Formalin ............................................................................ 62
D. Sifat Fisik Kimia Dari Formalin ............................................................. 62
E. Dampak Formalin Bagi Kesehatan ......................................................... 62
F. Tanda dan Gejala Keracunan Formalin................................................... 63
G. Tindakan Pencegahan.............................................................................. 63
H. Karakteristik Sampel ............................................................................... 63

C. Alat .......................................................................................................... 65
D. Bahan....................................................................................................... 65
G. Prosedur Kerja ......................................................................................... 67

B. Pembahasan ............................................................................................. 69
BAB V PENUTUP .............................................................................................. 71

A. Kesimpulan ............................................................................................. 71
B. Saran ........................................................................................................ 71
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 72
LAMPIRAN ........................................................................................................ 74
vii
Parameter IV Boraks

A. Latar Belakang ........................................................................................ 77
B. Tujuan ..................................................................................................... 78
C. Manfaat ................................................................................................... 78

A. Definisi Pangan ....................................................................................... 79
B. Keamanan Pangan ................................................................................... 79
C. Definisi Borak ......................................................................................... 80
D. Karakteristik Boraks................................................................................ 80
E. Peraturan Terkait Boraks......................................................................... 80
F. Uji Kandungan Boraks pada Makanan ................................................... 80
G. Dampak Boraks Bagi Kesehatan ............................................................. 81

C. Alat .......................................................................................................... 82
D. Bahan....................................................................................................... 82
G. Prosedur Kerja ......................................................................................... 83

B. Pembahasan ............................................................................................. 85
BAB V PENUTUP .............................................................................................. 86

C. Kesimpulan ............................................................................................. 86
D. Saran ........................................................................................................ 86
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 87
LAMPIRAN ........................................................................................................ 89
viii
Parameter V Rhodamin B

A. Latar Belakang ........................................................................................ 92
B. Tujuan ..................................................................................................... 93
C. Manfaat ................................................................................................... 93

A. Definisi Pangan ....................................................................................... 94
B. Pewarna Makanan ................................................................................... 94
C. Peraturan Penggunaan Pewarna Pada Makanan ..................................... 95
D. Rhodamin B ............................................................................................ 96
E. Dampak Mengkonsumsi Rhodamin B .................................................... 96

C. Alat .......................................................................................................... 98
D. Bahan....................................................................................................... 98
G. Prosedur Kerja ......................................................................................... 100

B. Pembahasan ............................................................................................. 102
BAB V PENUTUP .............................................................................................. 105

A. Kesimpulan ............................................................................................. 105
B. Saran ........................................................................................................ 105
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 106
LAMPIRAN ........................................................................................................ 108

ix
Parameter VI Metode Hitungan Cawan

A. Latar Belakang ........................................................................................ 111
B. Tujuan ..................................................................................................... 111
C. Manfaat ................................................................................................... 112

A. Pengertian Metode Hitung Cawan .......................................................... 113
B. Pengertian Mikroorganisme Pada Tangan .............................................. 115
C. Peraturan yang Berkaitan Dengan Praktikum ......................................... 116
D. Dampak Terhadap Kesehatan dan Lingkungan ...................................... 116
E. Faktor-faktor yang Mempengaruhi ......................................................... 117

C. Alat .......................................................................................................... 119
D. Bahan....................................................................................................... 119
G. Prosedur Kerja ......................................................................................... 124

B. Pembahasan ............................................................................................. 125
BAB V PENUTUP .............................................................................................. 127

A. Kesimpulan ............................................................................................. 127
B. Saran ........................................................................................................ 127
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 128
LAMPIRAN ........................................................................................................ 130

DAFTAR TABEL

Tabel 4.1 Hasil Praktikum Pengenalan Alat ....................................................... 8
Tabel 4.2 Pengambilan Sampel Secara Aseptis dengan Teknik Swab ............... 14

Tabel 4.1 Hasil Pengamatan Isolasi dan Inokulasi Mikroorganisme .................. 46
Tabel 4.2 Hasil Pengamatan Praktikum Morfologi Bakteri ................................ 47
Paramater III Formalin

Tabel 4.1 Hasil Uji Kandungan Formalin dalam Tahu Kuning........................... 68
Parameter IV Boraks
Tabel 4.1 Hasil Pengamatan Praktikum Boraks pada Cilok ............................... 77
Tabel 2.1 Pewarna Sintetik yang Diizinkan dan Dilarang di Indonesia ............. 95
Tabel 4.1 Hasil Uji Rhodamin B ......................................................................... 101

Tabel 3.1 Perhitungan Koloni Bakteri (SPC) ...................................................... 121
Tabel 3.2 Cara Hitung Cawan Simplo Menghasilkan < 30 Koloni .................... 121
Tabel 3.3 Cara Hitung Cawan Simplo Menghasilkan > 300 Koloni .................. 122
Tabel 3.4 Cara Hitung Cawan Simplo Menghasilkan Antara 30- 300 Koloni ... 122
Tabel 3.5 Cara Hitung Cawan Duplo .................................................................. 123
Tabel 4.1 Hasil Hitung Cawan ............................................................................ 125
x
DAFTAR GAMBAR

Gambar 3.1 Skema Kerja Pengambilan Sampel Secara Aseptis Permukaan
Sela-Sela Jari Responden ................................................................ 7

Gambar 3.1 Skema Kerja Pengambilan Sampel Mikroba (Sela Jari Tangan) .... 40
Gambar 3.2 Skema Kerja Teknik Pengenceran Bertingkat ................................ 41
Gambar 3.3 Skema Kerja Isolasi Mikroogranisme ............................................. 42
Gambar 3.4 Skema Kerja Inokulasi Biakan Murni ............................................. 43
Gambar 3.5 Skema Kerja Pembuatan Film pada Morfologi Bakteri .................. 44
Gambar 3.6 Skema Kerja Pewarnaan Gram pada Morfologi Bakteri ................. 45
Gambar 4.1 Pengenceran Pada 10-3,10-4, 10-5 .................................................... 47
Gambar 4.2 Hasil Isolasi Pada Media PCA 10-4 ................................................ 47
Paramater III Formalin

Gambar 3.1 Skema Kerja Pengujian Kandungan Formalin ................................ 67
Gambar 4.1. Hasil dari pengujian Formalin ........................................................ 68
Parameter IV Boraks
Gambar 3.1 Skema Kerja Pada Metoda Uji Warna Dengan Tes Kit Boraks ...... 83
Gambar 4.1 Hasil Uji Tes Kit Boraks Pada Sampel Cilok ................................. 84
Gambar 3.1 Skema Prosedur Kerja Uji Khusus untuk Rhodamin B .................. 100
Gambar 4.1 Fase Ether Setelah Diberi HCl 10% ................................................ 101

Gambar 2.1 Hasil Identifikasi Bakteri ................................................................ 121
Gambar 3.1 Skema Uji Hitung Cawan ................................................................ 124
xi
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Dalam melakukan percobaan kimia pastinya digunakan alat-alat
pada laboratorium seperti gelas ukur, timbangan, tabung reaksi, autoclave
dan lainnya.Penggunaan alat-alat ini dimaksudkan untuk mendukung kerja
praktikan dalam melakukan percobaan. Dalam melakukan percobaan
kimia pastinya praktikan tidak terlepas dari zat-zat atau larutan kimia yang
berbahaya, beracun,dan mudah terbakar.Dalam praktikum diharapkan
tidak terjadinya kesalahan dalam penggunaan karenaakan mengancam
keselamatan praktikan saat bekerja.
Untuk menghindari kecelakaan saat praktikum, praktikan harus
mempunyai pengetahuaan dan kemapuan yang cukupuntuk menggunakan
alat-alat praktikum secara baik, karena setiapa alat memiliki prosedur yang
berbeda-beda.Oleh karena itu pengenalan alat-alat laboratorium seperti
fungsi dan cara penggunaannya sangat dibutuhkan untuk memudahkan
praktikan dalam melakukan praktikum, memeroleh data yang akurat dan
juga untuk keselamatan praktikan.
Tangan merupakan factor terpenting dalam transmisi semua
penyakit menular. Tangan manusia merupakan media kontak beragam
pathogen dalam lingkungan sekitar dan diatas permukaan tubuh yang
sering bersentuhan dengan tangan. Mikroorganisme terdapat di mana-
mana, oleh karena itu mikroorganisme luar yang tidak dikehendaki dapat
masuk ke dalam biakan murni melalui aliran udara, kontak tangan yang
tercemar, atau melalui tersentuhnya media atau permukaan tabung bagian
dalam oleh benda yang belum disterilkan.Untuk mencegah
mikroorganisme luar yang tidak dikehendaki masuk ke dalam biakan
murni, perlu digunakan teknik aseptik, dimana semua peralatan maupun
media pertumbuhan yang akan digunakan pada teknik ini harus dalam
keadaan steril/aseptik.
1
2
B. Tujuan Praktikum
Tujuan dari praktikum ini adalah agar praktikan daat mengetahui alat
laboratorium yag digunaka untuk praktikum keamanan pangan dan mampu
mengambil sampel secara aseptik dari permukaan tubuh (tangan)
C. Manfaat Praktikum
1. Praktikan mampu mengetahui fungsi alat laboratorium
2. Praktikan mampu mengoperasikan alat-alat laboratorium
3. Praktikan mampu mengetahui prinsip kerja dari alat-alat laboratorium
4. Praktikan mampu mengambil sampel secara aseptik dari media
permukaan luar tubuh( tangan)
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Keamanan Pangan
Makanan yang aman merupakan factor yang penting untuk
meningkatkan derajat kesehatan.1 Dalam Undang-Undang RI Nomor 18
Tahun 2012 tentang keamanan pangan, keamanan pangan didefinisikan
sebagai kondisi dan upaya yang diperlukan untuk mencegah pangan dari
kemungkinan cemaran biologi, kimia, benda-benda lain yang dapat
mengganggu, merugikan, dan membahayakan kesehatan masnusia serta tidak
bertentangan dengan agama, keyakinan, dan budaya masyarakat sehingga
aman dikonsumsi.1
Adapun prasyarat utama dalam menentukan mutu pangan yang baik
adalah keamanan pangannya.2 Prasyarat pangan yang lain seperti nilai gizi,
mutu fisik, dan mutu organoleptic baru dipertimbangkan kemudian setelah
aspek keamanan pangan yang baik telah terpenuhi.2
Keamanan pangan merupakan aspek yang penting dalam kehidupan
sehari-hari.3 Kurangnya perhatian terhadap hal ini sering berdampak pada
gangguan kesehatan.3 Contohnya adalah kejadian keracunan pangan akibat
tidak higienisnya proses pengolahan hingga dengan penyajiannya dan
pengunaan bahan kimia berbahaya yang berisiko menimbulkan penyakit
degeneratif, kanker, bahkan kematian.3
Salah satu masalah keamanan pangan yang sering dijumpai adalah
praktek hygiene dan sanitasi yang masih rendah sehingga bahaya
mikrobiologi sangat mungkin berada pada produk pangan.4 Keberadaan
Escherichia coli pada pangan dapat menunjukkan praktek sanitasi lingkungan
yang buruk, sedangkan adanya Staphylococcus aurens mengidentifikasi
praktek hygiene yang kurang.4
Higiene adalah upaya kesehatan dengan cara memelihara dan
melindungi kebersihan subjeknya seperti mencuci tangan dengan air bersih
dan sabun untuk melindungi kebersihan tangan.5 Sedangkan sanitasi
merupakan upaya kesehatan dengan cara memelihara dan melindungi
3
4
kebersihan dari subjeknya.5 Misalnya menyediakan tempat sampah untuk

mewaspadai sampah agar tidak dibuang sembarangan.5
B. Penjamah Makanan
Penjamah makanan adalah setiap orang yang terlibat dalam bisnis
makanan, yang menangani makanan padalam proses pekerjaannya, atau
sebagai bagian dari tugas mereka sampai batas tertentu, baik makanan
tersebut terbuka atau sebelum dibungkus.6
Perilaku penjamah makanan harus mengikuti kaidah hygiene dan
sanitasi dalam kesahariannya. Kaedah tersebut adalah sebagai berikut:7
a) Tidak makan, minum atau mengunyah (termasuk permen), kecuali
memang bertugas mencicip
b) Tidak memakai perhiasan (termasuk jam tangan), karena dapat menjadi
persinggahan bakteri dan kemudian menkontaminasi makanan
c) Tidak menggunakan fasilitas yang bukan untuk keperluannya
d) Selalu mencuci tangan sebelum dan setelah bekerja juga setelah keluar
dari toilet
e) Tidak meludah dan banyak berbicara serta selalu menuntup mulut pada
saat batuk atau bersin. Jikapun perlu meludah maka jauhi makanan dan
keluar dari ruangan kerja
f) Selalu mengikat dan menutup rambut serta tidak menyisir rambut ddekat
makanan yang akan dan telah diolah
g) Selalu menjaga kuku tetap pendek, bersih, dan rapih. Tidak menggunakan
kuku palsu, pewarna kuku, maupun riasan yang berlebihan.
C. Pemeriksaan Mikrobiologi Penjamah Makanan

Sumber kontaminasi makanan yang paling utama berasal dari pekerja,
peralatan, sampah serangga, tikus, dan faktor lingkungan seperti udara dan
air.8 Pekerja adalah paling besar pengaruh kontaminasinya terhadap makanan.8
Kesehatan dan kebersihan pengolah makanan mempunyai pengaruh yang
cukup besar pada mutu produk yang dihasilkan sehingga diperlukan perhatian
yang serius dalam hal tersebut.8
5
Suatu penelitian di beberapa negara industry menunjukkan bahwa lebih

dari 60% penyakit bawaan makanan disebabkan karena buruknya kemampuan
penjamah untuk mengolah makanan.9 Penyakit-penyakit yang dapat ditularkan
oleh penjamah makanan dari mikroorganisme yang ada di permukaan atau di
dalam tubuh dapat membanyak diri hingga dosis efektif, kondisi yang tepat,
dan kontak langsung makanan atau ketika penyajian makanan.9
Tangan merupakan factor terpenting dalam transmisi semua penyakit
menular.10 Tangan manusia merupakan media kontak beragam pathogen
dalam lingkungan sekitar dan diatas permukaan tubuh yang sering
bersentuhan dengan tangan.10 Makanan dapat terkontaminasi melalui tangan
yang kotor penjamah makanan yang memiliki hygiene yang rendah dalam
penanganan makanan.10 Pemeriksaan mikrobiologis pada tangan penjamah
makanan sering dilakukan yaitu pemeriksaan E. Coli atau Coliform dan S.
aureus.10
Pemilihan metode sampling merupakan tahapan terpenting dalam
pemeriksaan mikrobiologis.11 Pengumpulan sampel harus memenuhi berbgai
kriteria antara lain aseptis dan antiseptis.11 Teknik aseptis adalah suatu metode
atau teknik memindahkan kultur bakteria dari suatu tempat ketempat lain
secara aseptic agar tidak terjadi kontaminasi silang mikroba lain kedalam
kultur.12 Teknis tersebut digunakan sepanjang kegiatan laboratorium
mikrobiologi berlangsung baik alat, bahan, lingkungan sekitar, maupun
praktikan serta petugas laboratorium.13 Pengambilan sampel mikrobiologi
pada permukaan tangan penjamah dapat menggunakan teknik swab ulas, yaitu
menggunakan cotton bud steril untuk mengulas permukaan sela-sela jari
penjamah makanan.14
BAB III
METODE PRAKTIKUM
A. Waktu Praktikum
Praktikum pengenalan, penyiapan, dan penggunaan alat dilaksanakan pada
Senin, 18 April 2016 pukul 13:00-16:00 WIB dan praktikum teknik
pengambilan sampel secara aseptik dari permukaan tangan dilaksankan pada
hari Selasa, 19 April 2016 pukul 08:30 WIB.
B. Tempat Praktikum
Praktikum pengenalan, penyiapan, dan penggunaan alat serta pengambilan
sampel secara aseptik dari permukaan tangan dilaksankan di Laboratorium
Terpadu Fakultas Kesehatan Masayarakat Universitas Diponegoro.
C. Alat
a) Cotton bud steril
b) Tabung reaksi
c) Kapas
D. Bahan
a) Na fisiologis steril
b) Alkohol 70%
c) Sampel (mikroba pada telapak tangan salah satu praktikan)
E. Teknik Sampling
Pemilihan responden untuk pengammbilan sampel mikroba sejumlah satu dari
delapan orang yang berasal dari kelompok 7. Syarat menjadi responden
tersebut yaitu seseorang tidak kontak dengan sabun, alcohol, dan bahan
disinfektan lainnya dalam jangka waktu satu jam sebelum praktikum dimulai.
6
7
F. Metode yang Digunakan

Metode pengambilan sampel mikroba pada permukaan tangan (sela-sela jari)
yaitu metode swab usap menggunakan cotton bud.
G. Prosedur Kerja
Disiapkan cotton bud steril dalam tabung reaksi yang berisi Na fisiologis
steril dan ditutup kapas
Alkohol 70% disemprotkan merata pada tangan praktikan sehingga bebas

kontaminan lain yang tidak diharapkan
Sela-sela jari penjamah (responden) diusap cotton bud steril yang telah
dicelupkan dalam Na fisiologis tanpa disemprotkan alkohol 70%
sebanyak 3 kali putaran
Cotton bud tersebut dimasukkan kembali ke dalam tabung reaksi yang

berisi Na fisiologis steril
Gambar
Tabung reaksi tersebut ditutup dengan kapas dan disiapkan untuk
pengujian lanjutan
Gambar 3.1 Skema Kerja Pengambilan Sampel Secara Aseptis Permukaan
Sela-Sela Jari Responden
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Pengamatan
1. Pengenalan Alat dan Bahan Praktikum Mikrobiologi
Tabel 4.1 Hasil Praktikum Pengenalan Alat
No Alat Gambar Fungsi
1 Autoclave Untuk sterilisasi alat
dan media
2 Gelas Ukur Mengukur Larutan

(250 ml) secara Kuantitatif
3 Erlenmeyer Tempat Reaksi

(500 ml) Larutan
8
9

4 Beaker Tempat Reaksi
Glass Larutan
5 Pipet tetes Memindahkan larutan

dalam jumlah kecil
6 Penjepit Menjepit tabung reaksi

khususnya saat proses
pemanasan
7 Bunsen Sterilisasi jarum

onukulasi /ose
10

8 Kompor Untuk Pemanas ,
/Hot Plate memanaskan EMBA
dan PCA
9 Tabung Untuk media tumbuh

reaksi mikroorganisme
10 Jarum Untuk inokulasi

ose/inokulasi mikroorganisme
11 Rak tabung Tempat tabung raksi

reaksi
11

12 Cawan petri Tempat penanaman/
media tumbuh
mikroorganisme
13 Colony Untuk menghitung

Counter koloni bakteri
14 Vortex Untuk
menghomogenkan
larutan
15 Objek Glass Untuk meletakkan

preparat
12

16 Desk Glass Untuk menutupi
preparat
17 Mikroskop Untuk mengamati

benda/objek renik.
Fungsi bagian
mikroskop :
1) Membentuk
bayangan akhir
yang dapat
langsung
dilihat
2) Membuat
bayangan nyata
benda pada
kaca sediaan
3) Meletakkan
Objek Glass
4) Pengatur Sinar
lensa.
18 Kapas Untuk menyumbat
/membersihkan tabung
reaksi tabung
erlenmeyer dari
kontaminasi
13

19 Jas Lab Pakaian standar
laboratorium
20 Masker Melindungi tubub dari

kontaminan
21 Oven Mensterilisaasi alat-

alat praktikum
sebelum alat
digunakan
22 Inkubator Untuk menginkubasi

mikroorganisme
14
2. Teknik Pengambilan Sampel Secara Aseptis

Tabel 4.2 Pengambilan Sampel Secara Aseptis dengan Teknik Swab
No Gambar Keterangan
Penyiapan cotton bud steril dalam
tabung reaksi yang berisi Na
fisiologis steril.
1 *Pengambil sampel/praktikan:
Agustina Ratri Maharani (kiri)
*Penjamah/responden:
Titi Hapsari (kanan)
Penyemprotan alcohol 70% secara

2
merata pada tangan praktikan
Pengusapan sela-sela jari responden

dengan cotton bud steril yang telah
3
dicelupkan dalam tabung reaksi yang
berisi Na fisiologis steril
Pemasukkan kembali cotton bud ke

dalam tabung reaksi yang berisi Na
4
fisiologis steril, lalu tabung reaksi
tersebut ditutup kapas
Tabel 4.2 merupakan dokumentasi langkah-langkah yang dilakukan

saat praktikum pengambilan sampel secara aseptis dari permukaan sela-sela
jari tangan.
15
B. Pembahasan
Teknik aseptis sangat diperlukan untuk menghindari mikroorganisme dari
kontaminan yang dapt menghambat pertumbuhan sampel mikroba. Teknik
aseptis pada praktikum ini digunakan sepanjang kegiatan baik alat, bahan,
lingkungan sekitar maupun praktikannya.
Alat dan bahan praktikum diterapkan sterilisasi. Sterilisasi dalam
mikrobiologi berart membebaskan tiap benda atau substansi dari semua
kehidupan dalam bentuk apapun. Cotton bud, tabung reaksi, dan Na fisiologis
pada praktikum ini dilakukan sterilisasi dengan alat yaitu autoclave. Autoclave
menggunakan prinsip mematikan mikroba dengan uap panas. Na fisiologis
dimasukkan ke tabung reaksi, lalu cotton bud steril dimasukkan ke tabung
reaksi tersebut. Kemudian tabung reaksi ditutup kapas sehingga cotton dan Na
fisiologis yang ada didalamnya tidak terkontaminasi lingkungan sekitar.
Praktikan dalam kegiatan ini juga disterilasi dengan menyemprotkan
alcohol 70% secara merata pada kedua tangan. Selain melalui panas, mikroba
dapat dihilangkan dengan bahan kimia (disinfektan) salah satunya dengan
alcohol 70%..
Tangan penjamah/responden tidak dilakukan penyemprotan alcohol 70%
karena akan menghilangkan sampel mikroba yang diambil pada praktikum ini.
Kriteria responden yaitu seseorang tidak kontak dengan sabun, alcohol, dan
bahan disinfektan lainnya dalam jangka waktu satu jam sebelum praktikum
dimulai. Hal ini bertujuan mencegah sampel mikroba yang didapatkan pada
permukaan sela-sela jari responden terlalu sedikit untuk diamati pada
praktikum pengamatan morfologi mikroba nantinya.
Pengambilan sampel mikroba pada permukaan tangan yaitu menggunakan
cotton bud steril yang telah dicelupkan Na fisiologis steril dengan cara
mengusapkannya pada sela-sela jari salah satu tangan responden sebanyak 3
putaran sela-sela jari dalam satu perlakuan. Lalu cotton bud tersebut
dimasukkan ke tabung reaksi berisi Na fisiologis steril. Kemudian tabung
reaksi tersebut ditutup kembali dengan kapas steril sehingga tidak terdapat
celah kontaminan luar dapat masuk ke dalam tabung.
BAB V
PENUTUP
A. Kesimpulan
1. Alat alat praktikum yang digunakan saat praktikum keamanan pangan
yaitu autoclave, inkubator, oven , vortex, gelas ukur, erlenmeyer,
beaker Dglass, pipet tetes dan ukur, penjepit, bunsen, tabung reaksi,
rak tabung reaksi jarum inokulasi, kompor listrik, colony counter,
cawan petri, objek glass, kapas , masker, jas laboratorium, desk glass,
dan mikroskop.
2. Setiap alat laboratorium memiliki prinsip kerja dan fungsi yang
berbeda
3. Dalam melakukan pengambilan sampel mikroorganisme harus
dilakukan secara aseptis baik dari segi alat dan bahan yang digunakan
maupun kondisi lingkungan pengambilan sampel.
B. Saran
1. Praktikan diharapkan dapat memahami fungsi dan cara kerja dari alat-
alat laboratorium
2. Praktikan diharapkan dapat mematuhi segala instruksi dalam
laboratorium baik dari asisten praktikum , PLP ,dan dosen .
3. Diharapkan dari pihak fakultas menambah jumlah alat-alat
laboratorium seperti vortex atau autoclave , sehingga kegiatan
praktikum tidak terhambat dikarenakan penggunaan alat oleh
praktikan lain.
16
DAFTAR PUSTAKA
1. Undang-Undang Republik Indonesia Nomor 18 Tahun 2012 Tentang Pangan

2. Yusuf A.L. Studi Keamanan Mikrobiologis Makanan Di Kantin Asrama Putri
Tingkat Persiapan Bersama Institut Pertanian Bogor [Skripsi]. Bogor: Institut
Pertanian Bogor; 2004.
3. Badan Pengawas Obat dan Makanan. Keamanan Pangan Jajanan Anak
Sekolah (PJAS) Serta Upaya Penanggulangannya. Info POM. 2008; 9 (6).
4. R. Wijaya. Penerapan Peraturan Dan Praktik Keamanan Pangan Jajanan
Anak Sekolah Di Sekolah Dasar Kota Dan Kabupaten Bogor [Skirpsi]. Bogor:
Institut Pertanian Bogor; 2009.
5. Hiasinta A.P. Sanitasi Higiene Dan Keselamatan Kerja Dalam Pengolahan
Makanan. Yogyakarta: Kanisius; 2001.
6. National Disease Survellance Centre (NDSC). Preventing Foodborne
Disease: A Focus on the Infected Food Handler. ISBN 0-9540177-5-7; 2004.
7. Fida E. Gambaran Penerapan Food Safety Pada Pengolahan Makanan Untuk
Kru Pesawat Di Aerofood ACS Tahin 2012 [Skripsi]. Depok: Universitas
Indonesia; 2012.
8. Titin A. Pentingnya Higiene Penjamah Makanan Tradisional [Seminar
Nasional Membangun Citra Pangan Tradisional]. Semarang: Universitas
Negeri Semarang; 2005.
9. Sulistyani. Modul Penyehatan Makanan dan Minuman. Semarang: Universitas
Diponegoro; 2002.
10. S.L Tan, H.Y. Lee, F. Abu Bakar, M.S. Abdul Karim, Y. Rukayadi, N.A.
Mahyudin. Short Communication Microbial Quality On Food Handlers’
Hands At Primary School in Hulu Langat District, Malaysia. International
Food Research Journal. 2013; 20 (5): 2973-2977.
11. Anisman. Keracunan Makanan: Buku Ajar Ilmu Gizi. Jakarta: EGC; 2008.
12. Char Palezar. Elements Of Microbiology. New York: Mc Graw Hill Company;
2008
13. R.F.S. Oran dan Paul Jr. J. Hummer. Bioloy Living System. Water Ville: Mc
Milan Company; 2001.
17
18
14. Dina Rahayuning Pangestuti, M. Zen Rahfiludin, Sulistyawati. Petunjuk

Praktikum Keamanan Pangan. Semarang: Laboratorium Terpadu Fakultas
Kesehatan Masyarakat Universitas Diponegoro; 2015
LAMPIRAN
A. Dokumentasi Praktikum Pengenalan Alat dan Teknik Pengambilan

Sampel Secara Aseptis
Autoclave Colony Counter
Inkubator Vortex
Mikroskop Oven
19
20
Penyemprotan alcohol 70% secara merata pada tangan praktikan
Pengusapan sela-sela jari responden dengan cotton bud steril yang telah
dicelupkan dalam tabung reaksi yang berisi Na fisiologis steril
21
B. Lembar Pengesahan Praktikum Pengenalan Alat dan Teknik

Pengambilan Sampel Secara Aseptis
22
C. Laporan Praktikum Uji Boraks Bagian Hasil

23
24
25
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Diketahui bahwa mikroba tersebar di alam, terdapat di lingkungan

mana saja dalam populasi campuran. Boleh dikatakan amat jarang mikroba
dijumpai sebagai satu spesies tunggal di alam. Untuk mencirikan dan
mengidentifikasikan suatu spesies mikroorganisme tertentu, pertama-tama
spesies tersebut harus dapat dipisahkan dari organisme lain, lalu
ditumbuhkan menjadi biakan murni.
Dalam mengisolasi suatu mikroorganisme, dilakukan dengan cara

yang aseptis untuk menghindari terjadinya kontaminasi dengan
mikroorganisme lain. Kebanyakan mikroorganisme dapat diisolasi dan
diinokulasi dalam biakan murni dengan memindahkan suatu koloni secara
cermat, mensuspensikan kembali dalam cairan dan menanamnya kembali
pada medium yang selektif.
Untuk mengidentifikasi suatu biakan murni bakteri hasil isolasi

mula-mula diamati morfologi sel secara mikroskopik melalui pengecetan
atau pewarnaan, salah satunya adalah dengan pewarnaan gram. Pewarnaan
gram merupakan salah satu teknik pewarnaan atau pengecatan yang
dikerjakan di laboratorium mikrobiologi untuk kepentingan identifikasi
bakteri. Morfologi mikroskopik mikroorganisme yang diperiksa dan
sifatnya yang khas terhadap pengecatan tertentu (pengecatan gram) dapat
digunakan untuk identifikasi awal. Dengan metode pengecatan gram,
bakteri dapat dikelompokkan menjadi dua, yaitu bakteri Gram positif dan
Gram negatif berdasarkan reaksi atau sifat bakteri terhadap cat tersebut.
Reaksi atau sifat bakteri tersebut ditentukan oleh komposisi dinding
selnya. Oleh karena itu, pengecatan gram tidak bisa dilakukan pada
mikroorganisme yang tidak mempunyai dinding sel. Dalam proses ini,
olesan bakteri yang sudah terfiksasi dikenai larutan-larutan berikut : zat
26
27
pewarna kristal violet, larutan iodium, larutan alkohol (bahan pemucat),

dan zat pewarna tandingannya berupa safranin.
B. Tujuan Praktikum
1. Praktikan memahami dan mampu melakukan proses isolasi dan

inokulasi mikroorganisme pada sampel bagian permukaan tubuh
(sela jari tangan) dengan media PCA (Plate Count Agar) dan
Media EMBA (Eosin Methylene Blue Agar).
2. Praktikan memahami dan mampu melakukan proses pengenceran

bertingkat.
3. Praktikan mengetahui morfologi bakteri secara mikroskopis

melalui metode pewarnaan gram.
1. Mahasiswa dapat mengetahui cara isolasi dan inokulasi

mikroorganisme pada sampel bagian permukaan tubuh (sela jari
tangan) dengan media PCA (Plate Count Agar) dan Media EMBA
(Eosin Methylene Blue Agar).
2. Mahasiswa dapat melakukan pengenceran bertingkat.
3. Mahasiswa dapat mengetahui langkah-langkah morfologi bakteri

dengan metode pewarnaan gram.
4. Mahasiswa dapat mengetahui perbedaan bakteri gram positif dan

bakteri gram negatif.
5. Mahasiswa dapat mengetahui penggolongan jenis bakteri.

BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Isolasi
Dalam kehidupan sehari hari kita selalu berhubugan dengan berbagai
macam mikroorganisme, baik bakteri, kapang maupun khamir. Untuk
mempermudah dalam mempelajari jenis dan sifat mikroorganisme, maka
mikroorganisme tersebut harus diisolasi dari lingkungan dan dipelihara pada
medium yang sesuai untuk pertumbuhannya1.
Isolasi bakteri merupakan suatu cara untuk memisahkan atau
memindahkan mikroba tertentu dari lingkungan sehingga diperoleh kultur
murni atau biakan murni. Ada beberapa cara yang dapat dilakukan yaitu
dengan cara goresan (streak plate), cara tuang (pour plate), cara sebar (spread
plate), dan mikromanipulator2. Teknik isolasi mikroorganisme adalah suatu
usaha untuk menumbuhkan mikroba diluar dari lingkungan alamiahnya.
Pemisahan mikroorganisme dari lingkungannya ini bertujuan untuk
memperoleh biakan bakteri yang sudah tidak bercampur lagi dengan bakteri
lainya, dan ini disebut dengan biakan murni3.
Di alam, populasi mikroorganisme tidak terpisah sendiri menurut
jenisnya, tetapi terdiri dari campuran berbagai macam sel. Dalam
laboratorium, populasi bakteri ini dapat diisolasi dari ekosistem tanah, air,
maupun udara. Selain itu, isolasi mikroorganisme pun dapat dilakukan dari
berbagai sampel bahan atau jaringan tubuh menjadi kultur murni yang terdiri
darisatu jenis yang dapat dipelajari morfologi, sifat, dan kemampuan
biokimiawinya4.
Proses mengisolasi harus dilakukan dengan cara yang aseptiskarena
untuk menghindari adanya kontaminasi antara mikroorganismelainnya.
Mikroorganisme dapat diisolasi dan diinokulasi dalam biakanmurni dengan
cara memindahkannya lalu menanamnya kembali pada medium baru5.
28
29
B. Inokulasi
Teknik isolasi mikroba yaitu inokulasi yang merupakan suatu teknik
pemindahan suatu biakan tertentu dari medium yang lama ke medium yang
baru dengan tujuan untuk mendapatkan suatu biakan yang murni tanpa adanya
kontaminasi dari mikroba yang lain6.
Inokulasi penanaman bakteri atau biasa disebut juga inokulasi adalah
pekerjaan memindahkan bakteri dari medium yang lama ke medium yang baru
dengan tingkat ketelitian yang sangat tinggi. Untuk melakukan penanaman
bakteri (inokulasi) terlebih dahulu diusakan agar semua alat yang ada dalam
hubungannya dengan medium agar tetap steril, hal ini agar menghindari
terjadinya kontaminasi7. Teknik penanaman (inokulasi), teknik ini merupakan
lanjutan dari pengenceran bertingkat. Pengambilan suspensi dapat diambil dari
pengenceran mana saja tapi biasanya utuk tujuan isolasi (mendapatkan koloni
tunggal) diambil bebrapa pengenceran terakhir.
Ada beberapa metode untuk menginokulasi bakteri sesuai dengan jenis
medium tujuannya. Pada medium agar tegak, dilakukan metode tusuk
menggunakan jarum ose. Pada medium agar miring,dilakukan metode gores
dengan menggunakan loop ose. Pada medium petridisk, dapat digunakan
metode streak plate (metode gores), pour plate (metode tuang) atau spread
plate (metode sebar). Setelah inokulasi, dilakukan proses inkubasi, yaitu
menyimpan medium pada alat atau kontainer pada temperatur tertentu dan
periode tertentu, sehingga tercipta lingkungan yang menyediakan kondisi
cocok untuk pertumbuhan bakteri. Metode gores atau streak plate
menggunakan loop ose dan menggoreskannya ke permukaan medium agar
dengan pola tertentu dengan harapan pada ujung goresan, hanya sel-sel bakteri
tunggal yang terlepas dari ose dan menempel ke medium. Sel-sel bakteri
tunggal ini akan membentuk koloni tunggal yang kemudian dapat dipindahkan
ke medium selanjutnya agar didapatkan biakan murni8.
C. Media PCA (Plate Count Agar)

Mikroorganisme dapat hidup dimana saja seperti air, udara, darat,
termasuk di makanan. Pada beberapa kondisi, jumlah mikroorganisme harus
30
dibatasi, seperti mikroorganisme pada saluran pembuangan limbah dan juga

mikroorganisme pada makanan atau produk susu jumlahnya harus mengikuti
standar-standar yang sudah ditetapkan. Untuk menghitung jumlah
mikroorganisme tersebut biasanya sampel dari makanan atau produk susu atau
dari air limbah tersebut di uji menggunakan media Plate Count Agar (PCA)
dengan metode Total Plate Count (TPC)9.
Plate Count Agar (PCA) atau yang juga sering disebut dengan Standard
Methods Agar (SMA) merupakan sebuah media pertumbuhan mikroorganisme
yang umum digunakan untuk menghitung jumlah bakteri total (semua jenis
bakteri) yang terdapat pada setiap sampel seperti makanan, produk susu, air
limbah dan sampel-sampel lainnya yang juga biasanya menggunakan metode
Total Plate Count (TPC). Plate Count Agar (PCA) merupakan media padat,
yaitu media yang mengandung agar sehingga setelah dingin media tersebut
akan menjadi padat. Plate Count Agar (PCA) pertama kali dikembangkan
oleh Buchbinder, Baris, dan Goldstein pada tahun 1953 atas permintaan dari
American Public Health Association (APHA)9.
Komposisi Plate Count Agar (PCA) dapat bervariasi, tetapi biasanya
mengandung: 0,5% trypton, 0,25% ekstrak ragi, 0,1% glukosa, 1,5% agar-
agar. Plate Count Agar (PCA) mengandung glukosa dan ekstrak ragi yang
digunakan untuk menumbuhkan semua jenis bakteri. Plate Count Agar (PCA)
mengandung nutrisi yang disediakan oleh trypton, vitamin dari ekstrak ragi,
dan glukosa yang digunakan sebagai sumber energi bagi mikroorganisme
sehingga mendukung pertumbuhan dari bakteri. Plate Count Agar (PCA)
bukan merupakan media selektif karena media ini tidak hanya ditumbuhi
oleh satu jenis mikroorganisme tertentu9.
D. Media EMBA
EMB Agar adalah media yang digunakan untuk mengetahui ada atau
tidaknya bakteri coliform di dalam suatu sample. Media Eosin Methylene
Blue Agar ini mempunyai keistimewaan mengandung laktosa dan berfungsi
untuk membedakan mikroba yang memfermentasikan laktosa seperti S.
aureus, P. aerugenosa, dan Salmonella. Mikroba yang memfermentasi laktosa
31
menghasilkan koloni dengan inti berwarna gelap dengan kilap logam.

Sedangkan mikroba lain yang dapat tumbuh koloninya tidak berwarna10.
Fungsi dari eosin dan metilen blue membantu mempertajam perbedaan
warna. Namun demikian, jika media ini digunakan pada tahap awal, kuman
lain bisa juga tumbuh terutama P. Aerugenosa dan Salmonella sp. Hal ini
dapat menimbulkan keraguan. Bagaiamanapun media ini sangat baik untuk
mengkonfirmasi bahwa kontaminan tersebut adalah E.coli10.
Media EMBA adalah medium selektif dan diferensial digunakan
untuk mengisolasi coliform fecal. Eosin Y dan metilen blue adalah
pewarna indikator pH yang bergabung untuk membentuk endapan ungu gelap
pada pH rendah (asam), mereka juga berfungsi untuk menghambat
pertumbuhan organisme yang paling Gram positif. Sukrosa dan
laktosa berfungsi sebagai sumber karbohidrat dapat difermentasi
yang mendorong pertumbuhan coliform. Fermentor yang kuat dari laktosa
atau sukrosa akan menghasilkan jumlah asam yang cukup untuk
membentuk kompleks warna ungu tua. Pertumbuhan organisme ini akan
muncul berwarna ungu tua sampai hitam. Escherichia coli, suatu fermentor
yang kuat, sering menghasilkan warna koloni hijau metalik. Fermentor
lambat atau lemah akan menghasilkan koloni merah muda mukoid atau
berlendir. Biasanya koloni berwarna atau tidak berwarna menunjukkan
bahwa organisme fermentor laktosa atau sukrosa terserbut bukan
merupakan coliform fecal11.
E. Bakteri
Bakteri adalah salah satu golongan organisme prokariotik (tidak memiliki
selubung inti). Bakteri sebagai makhluk hidup tentu memiliki informasi
genetik berupa DNA, tapi tidak terlokalisasi dalam tempat khusus (nukleus)
dan tidak ada membran inti. Bentuk DNA bakteri adalah sirkuler, panjang dan
biasa disebut nukleoi. Pada DNA bakteri tidak mempunyai intron dan hanya
tersusun atas akson saja. Bakteri juga memiliki DNA ekstrakromosomal yang
tergabung menjadi plasmid yang berbentuk kecil dan sirkuler12.
32
Bakteri merupakan salah satu contoh organisme yang memilikisel tipe

prokariotik. Bakteri memiliki ukuran (panjang) berkisar antara 0,15-15μ.
Struktur sel bakteri terdiri dari bagian luar sebagai penutup sel dan
sitoplasma13. Bakteri adalah yang paling berkelimpahan dari semua
organisme. Bakteri ada dimana-mana, di tanah, air, bahkan di dalam tubuh
makhluk hidup14.
F. Jenis Bakteri
Untuk memahami beberapa kelompok organisme, diperlukan klasifikasi.
Tes biokimia, pewarnaan gram, merupakan kriteria yang efektif untuk
klasifikasi. Hasil pewarnaan mencerminkan perbedaan dasar dan kompleks
pada sel bakteri (struktur dinding sel), sehingga dapat membagi bakteri
menjadi 2 kelompok, yaitu bakteri Gram-positif dan bakteri Gram-negatif12.
1. Bakteri Gram Negatif
a. Bakteri Gram Negatif Berbentuk Batang (Enterobacteriacea).
Bakteri gram negatif berbentuk batang habitatnya adalah usus
manusia dan binatang. Enterobacteriaceae meliputi Escherichia,
Shigella, Salmonella, Enterobacter, Klebsiella, Serratia, Proteus).
Beberapa organisme seperti Escherichia coli merupakan flora normal
dan dapat menyebabkan penyakit sedangkan yang lain seperti
salmonella dan shigella merupakan patogen yang umum bagi
manusia.
b. Pseudomonas, Acinobacter dan Bakteri Gram Negatif Lain.
c. Vibrio Campylobacter, Helicobacter, dan Bakteri lain yang
berhubungan.
Mikroorganisme ini merupakan spesies berbentuk batang Gram-
negatif yang tersebar luas di alam. Vibrio ditemukan didaerah
perairan dan permukaan air. Aeromonas banyak ditemukan di air
segar dan terkadang pada hewan berdarah dingin.
d. Haemophilus , Bordetella, dan Brucella
e. Yersinia, Franscisella dan Pasteurella
33
Berbentuk batang pendek Gram-negatif yang pleomorfik.

Organisme ini bersifat katalase positif, oksidase positif, dan
merupakan bakteri anaerob fakultatif.
2. Bakteri Gram Positif
a. Bakteri gram positif pembentuk spora : Spesies Bacillus dan
Clostridium
b. Bakteri Gram-positif Tidak Membentuk Spora: Spesies
Corynebacterium, Listeria, Propionibacterium, Actinomycetes.
c. Staphylococcus: Berbentuk bulat, biasanya tersusun bergerombol
yang tidak teratur seperti anggur.
d. Streptococcus: Merupakan bakteri gram-positif berbentuk bulat
yang mempunyai pasangan atau rantai pada pertumbuhannya12.
G. Gangguan Kesehatan Akibat Bakteri

1. Tuberkulosis Paru (TBC)
Tuberkulosis Paru atau TBC adalah penyakit yang di sebabkan
bakteri Mycobacterium tuberculosi dan Mycrobacterium bovis. Bakteri
tersebut mempunyai ukuran 0,5-4 Mikron x 0,3-0,6, micron dengan bentuk
tipis, lurus atau agak bengkok, bergranular atau tidak mempunyai
selabung, tetapi mempunyai lapisan luar tebal yang terdiri dari lipoid.
Penyakit ini di tularkan melaului udara (droplet nuclei) saat seorang pasien
TBC batuk dan percikan ludah yang mengandung bakteri tersebut terhirup
oleh orang lain saat bernafas.
2. Difteri
Difteria merupakan infeksi akut yang disebabkan oleh
Corynebacterium diphtheriae. Lesi primer biasanya terdapat pada
tenggorokan atau nasofaring dan dicirikan dengan adanya penyebaran
pertumbuhan pseudomembranosa keabu-abuan. Bakteri berbiak pada
tempat tersebut, dan mengeluarkan eksotoksin yang dibawa oleh darah ke
berbagai jaringan tubuh, menyebabkan hemoragik dan kerusakan nekrotik
pada berbagai organ. Strain C. diphtheriae toxigenik dan nontoxigenik
dapat menyebabkan penyakit, hanya strain yang menghasilkan toksin yang
34
menyebabkan manifestasi sistemik yang sering berhubungan dengan

penyakit yang berat atau mematikan.
C. diphtheriae merupakan bakteri bentuk batang ramping, gram-
positif, yang tidak tahan-asam dan tidak membentuk spora. Sel
berukuran 0,5-1,0 (m. Pada apusan pewarnaan, terlihat sebagai sel
tunggal, atau palisade (pagar) dan satu dengan yang lainnya
membentuk formasi sudut V atau L. Formasi mirip-huruf Cina ini
disebabkan oleh "snapping" pergerakan yang dilibatkan ketika dua
sel membelah. Bentuk C. diphtheriae secara umum berupa batang
ketika tumbuh pada media nutrisi yang lengkap.
3. Pertusis
Penyakit infeksi saluran napas akut yang terutama menyerang anak-
anak. Penyakit ini disebabkan oleh bakteri Bordetella pertusis
(Haemophilus pertusis). Bordetella pertusis termasuk kelompok
kokobasilus Gram-negatif, tidak bergerak dan tidak berspora. Bakteri ini
memerlukan media untuk tumbuh seperti media darah-gliserin-kentang
(Bordet-Gengou) yang di tambah penisilin untuk menghambat
pertumbuhan organism lainnya. Bakteri ini berukuran panjang 0,5-1µm
dan diameternya 0,2-0,3µm. Penularan penyakit ini melalui droplet dan
sebagian besar bayi tertular oleh saudaranya dan kadang-kadang oleh
orangtuanya.
4. Tetanus Neonatoru
Tetanus adalah penyakit kekakuan otot (spasme) yg disebabkan oleh
eksotoksin (tetanospasmin) dari organism penyebab penyakit tetanus dan
bukan oleh organismenya sendiri. Penyakit ini disebabkan oleh bakteri
Clostridium tatani yang merupakan bakteri Gram-positif berbentuk batang
dengan spora pada sisi ujungnya sehingga mirip dengan pemukul
genderang. Bakteri tetanus bersifat obligat anaerob yaitu berbentuk
vegetative pada lingkungan tanpa oksigen dan rentan terhadap panas serta
disinfektan. Penularannya itu dengan cara Tetanus masuk kedalam tubuh
manusia biasanya melalui luka yg dalam dengan suasana anaerob (tanpa
35
oksigen) sebagai akibat dari kecelakaan, luka tusuk, luka oprasi, karies
gigi, pemotong tali pusat, dll.
5. Demam Tifoid
Demam Tifoid adalah infeksi akut pada saluran pencernaan yang di
sebabkan oleh bakteri Salmonella typhi. Salmonella adalah bakteri Gram-
negatif, tidak berkapsul, mempunyai flagella dan tidak membentuk spora,
Penularan Penyakit adalah melalui air dan makanan. Bakteri salmonella
dapat bertahan lama dalam makanan. Penggunaan air minum secara masal
yang tercemar bakteri sering menyebabkan terjadinya KLB. Vektor berupa
serasngga juga berperan dalam penularan penyakit.
6. Kusta
Penyebab penyakit kusta adalah bakteri Mycobacterium leprae yang
berbentuk batang dengan ukuran panjang 1-8 mikron, lebar 0,2-0,5
mikron, biasanya berkelompok dan ada yang tersebar satu-satu, hidup
dalam sel, fan bersifat tahan asam (BTA). Bakteri kusta banyak terdapat
pada kulit tangan, daun telinga dan mukosa hidung.
7. Leptospirosis
Leptospirosis adalah infeksi akut yang di sebabkan oleh bakteri
leptospira. Penyakit ini di sebut juga Weil disease, Canicola fever,
Hemorrhagic jaundice, Mud fever, atau Swineherd disease. Genus
Lestospira yang termasuk dalam ordo Spirochaete dari family
Trepanometaceae adalah bakteri yang berbentuk seperti benang dengan
panjang 6-12 µm. spesies Leptospira interrogans adalah spesies yang
dapat menginfeksi manusia dan hewan. Infeksi pada manusia dapat terjadi
melalui kontak dengan air, tanah, dan lumpur yang tercemar bakteri,
kontak dengan organ, darah,dan urine hewan terinfeksi15.
H. Pencegahan
Tindakan pencegahan dapat dilakukan dengan vaksinasi, sterilisasi, dan
pasteurisasi, dan pengawetan bahan makanan.
1. Vaksinasi
36
Vaksinasi adalah pencegahan penyakit dengan pemberian vaksin,

bakteri yang sudah dilemahkan, sehingga tubuh menerima dapat terhadap
bakteri penyebab penyakit tertentu. Beberapa contoh vaksin untuk
pencegahan penyakit yang disebabkan oleh bakteri adalah vaksin kolera
untuk mencegah penyakit kolera, vaksin tifus untuk mencegah penyakit
tifus, vaksin BCG (Bacile Calmette-Guerin) untuk mencegah penyakit
TBC, vaksin DTP (Dipteria-Tetanus-Pertusis vaccines) untuk mencegah
penyakit difterie, pertusis (batuk rejan), dan tetanus), dan vaksin TCD
(Typus Chorela Disentry) untuk mencegah penyakit typus, kholera, dan
desentri.
2. Sterilisasi
Sterilisasi adalah pemusnahan bakteri misalnya dalam pengawetan
makanan. Tujuannya adalah untuk mendapatkan kondisi steril (suci hama),
metodenya disebut aseptis. Sterilisasi dapat dilakukan melalui pemanasan
dengan menggunakan udara panas atau uap air panas bertekanan tinggi.
Sterilisasi dengan udara panas menggunakan oven dengan temperatur 170
– 180°C. Cara ini digunakan untuk mensterilisasikan peralatan di
laboratorium . Sterilisasi dengan uap air panas bertekanan tinggi dilakukan
dengan menggunakan alat yang disebut autoklaf, pada temperatur 115 –
134°C. Autoklaf digunakan untuk sterilisasi bahan dan peralatan.
Sterilisasi pada umumnya digunakan pada industri makanan atau minuman
kaleng, penelitian bidang mikrobiologi, dan untuk memperoleh biakan
murni suatu jenis bakteri.
3. Pasteurisasi
Pasteurisasi adalah pemanasan dengan suhu 63 – 72 derajat celsius
selama 15 - 30 menit. Pasteurisasi dilakukan pada bahan makanan yang
tidak tahan pemanasan dalam suhu tinggi, misalnya susu. Sehingga untuk
mematikan bakteri patogen (Salmonella dan Mycobacterium) dari susu
dilakukan pasteurisasi. Dengan pasteurisasi, rasa dan aroma khas susu
dapat dipertahankan.
4. Pengawetan Bahan Makanan
BAB III
METODE PRAKTIKUM
A. Waktu Praktikum
Praktikum Isolasi dan Inokulasi Mikroorganisme dilaksanakan

pada Selasa, 19 April 2016 pukul 09.00 sampai selesai dan Praktikum
Morfologi Bakteri dilaksanakan pada Jumat, 22 April 2016 pukul 10.30
sampai selesai.
B. Tempat Praktikum
Praktikum Isolasi dan Inokulasi Mikroorganisme dilaksanakan di

Laboratorium Terpadu Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas
Diponegoro.
C. Alat
1. Alat Isolasi dan Inokulasi Bakteri
a. Tabung reaksi 6 buah

b. Cawan petri 4 buah
c. Jarum ose
d. Inkubator
e. Bunsen
f. Kompor
g. Kertas buram
h. Bulb 2 buah
i. Label
j. Tissu
k. Vortex
l. Pipet ukur 6 buah
m. Rak tabung reaksi
37
38
2. Alat Morfologi Bakteri

a. Mikroskop
b. Obyek glass
c. Desk glass
d. Jarum ose
e. Penjepit
f. Bunsen
g. Pipet tetes
h. Rak tabung reaksi
i. Tabung reaksi
j. Spidol
k. Beaker glass
l. Hairdryer
m. Korek api
n. Kapas
D. Bahan
1. Bahan Isolasi dan Inokulasi Bakteri
a. PCA media tegak
b. EMBA media tegak
c. NaCl fisiologis 0,9%
d. Kultur bakteri
e. Alkohol
f. Kapas
g. Korek api
h. Suspensi sample
2. Bahan Morfologi Bakteri
a. Biakan bakteri PCA 10-4
b. Pewarna Gram (Gram A = GV/Kristal violet, Gram B = Lugol,
Gram C = Alkohol, Gram D = Air Fuchin)
c. NaCl fisiologis
d. Immersion oil
39
e. Alkohol
f. Aquadest
E. Teknik sampling
Pada praktikum isolasi dan inokulasi bakteri, sampel yang
digunakan yaitu bagian permukaan tubuh (sela jari tangan) dari salah satu
anggota. Waktu pengambilan sampel yaitu pada hari Selasa, 19 April 2016
pukul 08.30 WIB. Pada praktikum morfologi bakteri, sampel yang
digunakan adalah agar tegak PCA dan EMBA.

Isolasi menggunakan metode agar tuang, sementara inokulasi
menggunakan metode gores menggunakan loop ose dan menggoreskannya
ke permukaan medium agar dengan pola tertentu dengan harapan pada
ujung goresan, hanya sel-sel bakteri tunggal yang terlepas dari ose dan
menempel ke medium. Sel-sel bakteri tunggal ini akan membentuk koloni
tunggal yang kemudian dapat dipindahkan ke medium selanjutnya agar
didapatkan biakan murni. morfologi bakteri menggunakan metode
pewarnaaan gram. Dalam proses ini, olesan bakteri yang sudah terfiksasi
dikenai larutan-larutan berikut : zat pewarna kristal violet, larutan iodium,
larutan alkohol (bahan pemucat), dan zat pewarna tandingannya berupa
safranin.
40
G. Prosedur Kerja
1. Pengambilan Sampel Mikroba Permukaan Tubuh (Tangan)
Tangan disemprot dengan alkohol 70 %
Disiapkan cotton bud dalam Na fisiologis steril
Tangan penjamah jangan disemprot dengan alkohol 70 %
Cotton bud dimasukkan ke Na fisiologis dan ditutup dengan

kapas
Sela sela jari diusap dengan cotton bud steril sebanyak 3 kali
lalu diberi label
Larutan sampel siap digunakan pada uji selanjutnya
Gambar 3.1 Skema Kerja Pengambilan Sampel Mikroba

(Sela Jari Tangan)
41
2. Teknik Pengenceran Bertingkat
5 tabung reaksi berisi 9 ml aquadest dalam keadaaan tertutup kapas

disiapkan dan diberi label pengenceran 10-1, 10-2, 10-3, 10-4, 10-5
5 pipet ukur diberi label masing-masing 10-1, 10-2, 10-3, 10-4, 10-5
dan suspensi
Bunsen dinyalakan dengan korek api
Tabung reaksi suspensi ditutup dan tabung reaksi pengenceran 10-1

dibuka dan mulut tabungnya didekatkan dengan api bunsen
1 ml suspensi diambil dengan pipet ukur dan dimasukkan ke tabung

pengencer 10-1 jika sudah, kedua mulut tabung dilewatkan pada api
dan ditutup kembali
Tabung reaksi pengencer 10-1 ditutup dan 10-2 dibuka dan

dipanaskan mulut tabungnya
1 ml pengencer 10-1 diambil dengan pipet ukur berlabel 10-1 dan

dipindahkan ke tabung pengencer 10-2 , lewatkan kedua mulut
tabung pada api dan ditutup
Hal yang sama dilakukan hingga pengenceran 10-5 menggunkana

pipet ukur berurutan sesuai tabel
Hasil pengenceran siap digunakan pada uji selanjutnya
Gambar 3.2 Skema Kerja Teknik Pengenceran Bertingkat

42
3. Skema Kerja Isolasi Mikroorganisme
Media tegak dipanaskan diatas kompos hingga cair
1 ml suspensi pengenceran 10-3, 10-4, 10-5 dimasukkan ke dalam

masing-masing cawan petri steril (3 buah cawan)
Media cair ditungkan ke masing-masing cawan petri yang berisi

suspensi
Media diratakan dengan menggoyangkan cawan perlahan

membentuk angka 8
Diamkan hingga media padat, semua perlakuan dalam suasana

aseptis
Cawan petri dibungkus kertas dalam posisi terbali dan diinkubasi 2

x 24 jam
Gambar 3.3 Skema Kerja Isolasi Mikroogranisme
43
4. Skema Kerja Inokulasi Biakan Murni
Media EMBA disiapkan dan bunsen dinyalakan
Tabung pengenceran 10-3 dipegang tangan kiri dan jarum

inokulasi dipegang tangan kanan
Jarum inokulasi dipanaskan hingga pijar lalu didinginkan
Jarum inokulasi dimasukkan pada tabung pengenceran 10-3

hingga membentuk gelembung pada jarum ose
Segera disentuhkan pada permukaan media baru, jangan

menekan media hingga rusak
Jarum inokulasi ditarik ke luar perlahan secara zig zag
Mulut tabung dipanaskan dan tabung disumbat kapas
Jarum inokulasi dibakar hingga pijar dan diletakkan pada

tempatnya
Cawan yang berisi media dibungkus dengan kertas buram dalam

posisi terbalik dan diinkubasi 2 x 24 jam
Diamati perubahannya
Gambar 3.4 Skema Kerja Inokulasi Biakan Murni
44
5. Skema kerja Morfologi Bakteri

a) Pembuatan Film
Objek glass dibilas alkohol, dikeringkan dan diberi tanda

bulatan dengan spidol
Diberi satu tetes NaCl fisiologis pada objek glass
Jarum ose dipanaskan hingga pijar, diangin- anginkan
Jarum ose digesekkan zig zag pada biakan bakteri PCA

10-4
Jarum ose yang sudah ada bakteri, diletakkan pada

tetesan NaCl fisiologis lalu diratakan
Dikeringkan dengan melewatkan di atas api hingga

kering
Gambar 3.5 Skema Kerja Pembuatan Film pada

Morfologi Bakteri
45
b) Pewarnaan Gram
Film ditetesi 1 tetes gram A (CGV) selama 30 detik
Dibilas dengan air dan dikeringkan dengan hairdryer
Ditetesi dengan 1 tetes gram B (Lugol) selama 30 detik,

dibilas dengan air dan dikeringkan dengan hairdryer
Ditetesi dengan 1 tetes gram C (Alkohol) selama 30

detik, dibilas dengan air dan dikeringkan dengan
hairdryer
Ditetesi dengan 1 tetes gram D (Air Fuchin) selama 30
detik, dibilas dengan air dan dikeringkan dengan
hairdryer
Preparat ditetesi dengan 1 tetes minyak imersi
Desk glass dipasang dan jangan sampai terdapat

gelembung udara
Preparat siap dilihat menggunakan mikroskop perbesaran

objektif 100x
Gambar 3.6 Skema Kerja Pewarnaan Gram pada
Morfologi Bakteri
46
BAB IV
A. Hasil Pengamatan
1. Isolasi dan Inokulasi Bakteri Mikroorganisme
Tabel 4.1 Hasil Pengamatan Isolasi dan Inokulasi Mikroorganisme
No Pengamatan Sampel Metode Hasil
1. Isolasi Bagian Agar Terdapat

permukaan tubuh Tuang koloni pada
(sela jari tangan) media agar
dengan tegak, ada
pengenceran 10- yang
3 -4 -5
,10 , 10 media berwarna
PCA putih dan
kuning
2. Inokulasi Bagian Media Terdapat

permukaan tubuh tegak (sedikit)
(sela jari tangan) EMBA koloni
dengan bakteri
pengenceran 10-3 berwarna
putih
berbentuk
bulat
Berdasarkan Tabel 4.1 pada isolasi bakteri setelah diberi sampel

dan pengenceran 10-3,10-4, 10-5 pada media PCA melalui metode
tuang, terdapat koloni pada media tegak. Pada inokulasi bakteri setelah
diberi sampel dan pengenceran 10-3 pada media EMBA, terdapat
koloni bakteri yang berwarna putih dan berbentuk bulat.
46
47
Gambar 4.1 Pengenceran Gambar 4.2 Hasil Isolasi Pada
10-3,10-4, 10-5 Media PCA 10-4
Gambar 4.1 Menunjukkan pengenceran yang dilakukan secara

bertingkat mulai dari 10-3,10-4, dan 10-5 . Sementara itu, Gambar 4.2
Menunjukkan hasil isolasi pada salah satu pengenceran yaitu 10-4
terlihat koloni bakteri yang berwarna putih dan kekuningan.
2. Morfologi Bakteri
Tabel 4.2 Hasil Pengamatan Praktikum Morfologi Bakteri
No Media Warna Bentuk Gambar Gram
1. Agar Merah Batang Negatif

tegak koma
PCA
10-4
Berdasarkan Tabel 4.2 Morfologi Bakteri menggunakan media

tegak PCA 10-4 yang kemudian setelah dilihat pada mikroskop
perbesaran 100x didapatkan gambar bakteri yang berbentuk batang
koma dan berwarna merah. Bakteri yang berbentuk batang koma dan
berwarna merah termasuk bakteri gram negatif.
48
B. Pembahasan
1. Deskripsi Pengujian
a. Metode Isolasi dan Inokulasi
Sampel yang digunakan adalah bagian permukaan tubuh (sela jari
tangan). Suspensi sampel dilakukan dengan pengenceran bertingkat
(10-1 sampai 10-5). Proses isolasi dan inokulasi dilakukan dengan cara
aseptis untuk menghindari kontaminasi silang. Dalam proses isolasi
mikroorganisme digunakan media PCA yang dituangkan ke cawan
petri dan di tuang suspensi pengenceran 10-3, 10-4 dan 10-5 lalu cawan
tersebut dibungkus dengan kertas buram dan diinkubasi 2 x 24 jam ke
dalam inkubator.
Metode inokulasi menggunakan media EMBA dan menggunakan
suspensi pengenceran 10-3 . Jarum ose yang sudah dipanaskan,
dimasukkan ke tabung pengenceran dan disentuhkan pada media
EMBA dengan bentuk zig zag. Lalu diinkubasi 2 x 24 jam ke dalam
inkubator.
b. Metode Morfologi Bakteri
Metode yang digunakan dalam morfologi bakteri yaitu dengan
media PCA 10-4 karena dalam media EMBA tidak ditemukan adanya
bakteri. Media PCA 10-4 digunakan karena yang paling banyak
ditumbuhi bakteri. Pertama dilakukan pembuatan film dengan
memindahkan bakteri pada media PCA 10-4 ke objek glass dan ditetesi
dengan NaCl fisiologis lalu dikeringkan di atas api. Kemudian
dilakukan pewarnaan gram berturut – turut dari pewarnaan gram A
(Kristal Violet), gram B (Iodium), gram C (Alkohol) dan gram D
(Safranin), selanjutnya ditetesi dengan minyak imersi lalu preparat
diamati dengan menggunakan mikroskop (perbesaran 100x).
2. Gambaran umum sampel
Dalam praktikum ini, sampel yang digunakan adalah bagian
permukaan tubuh (sela jari tangan) penjamah. Pengambilan sampel
dilakukan dengan mengusap sela-sela jari menggunakan cotton bud
steril sebanyak 3 kali. Setelah itu, cotton bud dimasukkan ke Na
49
Fisiologis dan ditutup dengan kapas. Kemudian dilakukan

pengenceran dengan teknik pengenceran bertingkat sebanyak 5 kali
pengenceran (10-1 sampai 10-5). Pengenceran 10-3, 10-4 dan 10-5
dimasukkan ke dalam media PCA pada cawan petri yang akan
digunakan untuk isolasi mikrorganisme. Pengenceran 10-3
dimasukkan ke dalam media EMBA pada pada cawan petri yang akan
digunakan untuk inokulasi biakan murni. Mikroogranisme pada PCA
10-4 diambil dan diletakkan pada preparat yang akan digunakan untuk
morfologi mikroorganisme.
3. Hasil Pengujian
a. Isolasi dan Inokulasi
Hasil praktikum isolasi mikroorganisme biakan bakteri sampel sela
jari tangan penjamah terdapat biakan mikroorganisme yang berkoloni.
Hal ini dapat dilihat pada cawan dengan pengenceran 10-3, 10-4 dan 10-
5
yang sudah diinkubasi selama 2x 24 jam. Sedangkan hasil inokulasi
biakan murni terdapat sedikit biakan mikroorganisme sehingga
diasumsikan terdapat kesalahan saat praktikum.
b. Morfologi bakteri
Pada morfologi bakteri menggunakan media PCA 10-4 yang paling
banyak ditumbuhi bakteri. Berdasarkan hasil praktikum secara
mikroskopis, dengan metode pewarnaan gram didapatkan bahwa
biakan bakteri memiliki ciri-ciri yaitu bentuk bakteri batang berbentuk
koma, warna bakteri berwarna merah. Dari ciri-ciri tersebut
menandakan bahwa biakan bakteri pada media PCA 10-4 merupakan
jenis bakteri gram negatif.
4. Faktor - Faktor yang Mempengaruhi Pengujian
a. Saat pengambilan sampel inokulasi pada media EMBA jarum ose,
diduga gelembung telah menghilang terlebih dahulu sebelum
disentuhkan ke media EMBA, yang menyebabkan sedikitnya
bakteri pada media EMBA.
b. Adanya kontaminan karena kurang aseptik pada saat praktikum
sehingga menyebabkan bakteri kontaminan ikut tumbuh.
50
5. Dampak
Bakteri yang hidup pada media PCA 10-4 termasuk ke dalam
bakteri gram negatif. Bakteri ini bersifat patogen, contoh bakteri gram
negatif adalah Escherichia, Shigella, Salmonella, Enterobacter,
Klebsiella, Serratia, Proteus, dll yang dapat menyebabkan penyakit
pada manusia meliputi diare, salmonellosis, dan sebagainya.
BAB V
PENUTUP
A. Kesimpulan
1. Praktikum isolasi mikroorganisme menggunakan tangan penjamah
(sela jari tangan) sebagai sampel serta metode yang digunakan adalah
metode tuang. Isolasi mikroorganisme menghasilkan biakan bakteri
yang berkoloni ada yang berwarna kuning dan putih.
2. Praktikum inokulasi mikroorganisme biakan murni menggunakan
tangan penjamah (sela jari tangan) sebagai sampel dan menggunakan
media tegak. Hasil inokulasi biakan murni menghasilkan biakan
bakteri yang kurang sempurna. Hal ini dapat disebabkan beberapa
kemungkinan seperti hilangnya gelembung pada jarum ose sebelum
disentuhkan zig zag pada media baru dan kemungkinan lain
disebabkan kurang terampilnya praktikan dalam pengujian di
laboratorium.
3. Praktikum morfologi bakteri menggunakan media tegak PCA dengan
pengenceran 10-4 . Pengamatan morfologi bakteri secara mikroskopis
melalui metode pewarnaan gram. Hasil dari praktikum ini yaitu
terbentuk biakan bakteri batang koma, warna yang terlihat merah dan
ciri-ciri tersebut menandakan bahwa biakan bakteri termasuk golongan
gram negatif.
B. Saran
1. Praktikan lebih memahami prosedur kerja sebelum melakukan
praktikum agar dapat meminimalkan kesalahan pada pelaksanaannya.
2. Dalam praktikum, semua harus aseptis untuk menghindari adanya
kontaminasi silang.
51
DAFTAR PUSTAKA
1. Rusli. Penuntun Praktikum Mikrobiologi Dasar. Makassar: Universitas

Muslim Indonesia. 2014
2. Buckel, KA. Ilmu Pangan. Jakarta: Universitas Indonesia. 2007
3. Dwyana, Zaraswati. Bahan Ajar Mikrobiologi Dasar. Makassar:
Universitas Hasanuddin. 2011
4. Saskia, Sinta; dkk. Praktikum Mikrobiologi Dasar. Makassar. 2006
5. https://www.academia.edu/16740977/LAPORAN_ISOLASI_DAN_INOK
ULASI_MIKROBIOLOGI_DASAR (Diakses tanggal 4 Mei 2016)
6. Ghoni, Achmad. Isolasi dan Inokulasi Bakteri. 2013
7. Dwidjoseputro. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta: Djambatan. 1998
8. Oetomo, Hadi dan Ratna Sari. Mikrobiologi Dasar dalam Praktek. Jakarta:
PT. Gramedia. 1990
9. http://repository.usu.ac.id/bitstream/123456789/41660/4/Chapter%20II.pd
f (Diakses tanggal 4 Mei 2016)
10. EMB Agar. http://www.mediaagar.com/blog/emb-agar/. 2012 (Diakses
tanggal 4 Mei 2016)
11. http://digilib.unila.ac.id/1374/7/BAB%20II.pdf (Diakses tanggal 4 Mei
2016)
12. http://digilib.unila.ac.id/5690/11/13.BAB%20II.pdf (Diakses tanggal 4
Mei 2016)
13. Dwyana, Zaraswati. Buku Ajar Biologi Sel dan Molekular. Makassar:
Universitas Hasanuddin. 2014
14. Gana, D Mahata. Rahasia Bakteri. Jakarta: PT. Gramedia. 2008
15. http://www.necturajuice.com/berbagai-penyakit-yang-disebabkan-oleh-
bakteri/ (Diakses tanggal 4 Mei 2016)
52
LAMPIRAN
1. Isolasi dan Inokulasi Mikroorganisme
Persiapan Pengenceran Tahap Pengenceran Larutan di vortex
Media PCA Pemasukkan larutan Pemasukkan media PCA ke
pengencer ke cawan cawan
Penggoyangan cawan Media PCA 10-3,10-4, 10-5 Pembungkusan cawan (posisi

didiamkan hingga padat terbalik)
53
Mengambil media baru Membungkus media EMBA Menginkubasi media EMBA
media EMBA dari dan PCA
2. Morfologi Bakteri
Objek glass dibilas alkohol Diberi 1 tetes Na Jarum ose dipanaskan hingga
lalu dibuat bulatan fisiologis pijar
Digesekkan zigzag pada Objek glass dikeringkan Objek glass diwarnai Gram
media PCA 10-4 A sampai D
54
Objek glass dibilasi air Objek glass dikeringkan Objek glass kering
A sampai Gram D dengan hairdryer
Preparat ditetesi imersi Desk Glass dipasang Pengamatan pada mikroskop
55
56
57
58
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Keamanan pangan dapat ditentukan oleh ada tidaknya kontaminasi
dari bahan-bahan yang tidak dapat dicerna seperti plastik, logam, maupun
bahan yang dapat mengganggu pencernaan manusia, secara kimiawi dapat
berasal dari zat-zat kimia berbahaya yang tidak boleh digunakan sebagai
pangan seperti formalin, boraks, dan insektisida serta bahan tambahan
makanan yang dibatasi penggunaannya seperti asam benzoat, askorbat,
laktat sitrat dan bahan tambahan pangan lainnya sesuai dengan SNI 01-
0222-1995. Bahaya mikrobiologi berasal dari adanya bakteri-bakteri
patogen maupun racun yang ditimbulkannya pada bahan pangan.
Tahu merupakan salah satu makanan yang menyehatkan karna
kandungan proteinya yang tinggi serta mutuhnya setara dengan mutu
protein hewani. Hal ini biasa dilihat dari nilai NPU ( net protein utility )
tahu mencerminkan banyaknya protein yang dapat dimanfaatkan tubuh,
yaitu sekitar 65%, disamping mempunyai daya cerna tinggi sekitar 85-
98%. Oleh karna itu, tahu dapat dikonsumsi oleh segala lapisan
masyarakat. Tentu juga mengandung zat guzi yang penting lainya, seperti
lemak, vitamin, dan mineral dalam jumlah yang cukup tinggi.
Tahu selain memiliki kelebihan juga memiliki kelemahan, yaitu
kandungan airnya yang tinggi sehingga mudah rusak karena mudah
ditumbuhi mikroba. Untuk memperpanjaang masa simpan, kebanyakan
industry tahu yang ada di Indonesia menambahkan pengawet. Bahan
pengawet yang ditambahkan tidak terbatas pada pengawet yang diizinkan,
tetapi banyak penggusaha yang nakal yang dengan sengaja menambahkan
formalin.
Formalin banyak ditemukan pada bakso, ikan asin, tahu, mi basah,
kerupuk, daging ayam segar, ikan laut segar, dan manisan buah-buahan.
Badan Pengawas Obat dan Makanan (BPOM) Jakarta mengumumkan 26
jenis kosmetik yang mengandung bahan berbahaya dan zat warna yang
59
60
dilarang, serta 42 jenis permen dan manisan impor China yang

mengandung formalin. Dengan demikian dibutuhkan suatu pengujian
terhadap kandungan formalin pada tahu yang beredar didaerah semarang.
B. Tujuan Praktikum
Tujuan dari praktikum uji kandungan formalin dalam makanan
adalah untuk mengetahui kandungan formalin dalam makanan ( tahu
kuning)
Manfaat dari praktikum uji kandungan formalin dalam bahan makanan
seperti tahu kuning adalah :
1. Memberikan informasi tentang ada atau tidaknya formalin dalam
makanan seperti lontong
2. Menambah wawasan dan dapat mengetahui tahu kuning yang
mengandung formalin berdasarkan hasil reaksi saat praktikum
3. Menambah pengetahuan tentang pengujian dan tata cara menguji
kandungan formalin pada bahan makanan tahu kuning.
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Pengertian Formalin
Formalin sebenarnya adalah bahan pengawet yang digunakan
dalam dunia kedokteran, misalnya bahan pengawet mayat, selain itu juga
digunakan untuk mengawetkan hewan-hewan untuk keperluan penelitian1.
Bahan pengawet formalin adalah bahan tambahan pangan yang dapat
mencegah atau menghambat proses fermentasi, pengasaman atau
penguraian lain terhadap yang disebabkan oleh mikroorganisme. Bahan
tambahan pangan ini biasanya ditambahkan pada makanan yang mudah
rusak, atau makanan yang disukai bakteri atau jamur sebagai media
pertumbuhan2. Formalin mempunyai kemampuan untuk mengawetkan
makanan karena gugus aldehida yang bersifat mudah bereaksi dengan
protein membentuk senyawa methylene. Sehingga protein yang sudah
terikat oleh gugus aldehida tidak bias digunakan oleh bakteri pembusuk
dan membuat makanan tersebut menjadi awet3.
Formalin dikenal sebagai bahan pembunuh hama (desinfektan) dan
banyak digunakan dalam industry. Nama lain dari formalin adalah Formol,
methylene, aldehide, parafonin, morbicid, oxomethane, polyoxymethylene,
glycols, methanol, formoform, superlysoform, formaldehyde, dan
formalith4.
B. Fungsi Formalin
Formalin banyak digunakan dalam berbagai jenis industry seperti
pembuatan perabot, pengawet mayat, dan agen fiksasi di laboratorium.
Penggunaan formalin diantaranya adalah sebagai berikut:
1. Pembunuh kuman sehingga digunakan sebagai pembersih lantai,
gudang, pakaian, dan kapal.
2. Pembasmi lalat dan serangga
3. Bahan pembuat sutra bahan, zat pewarna, cermin kaca dan bahan
peledak
61
62
4. Bahan pembentuk pupuk

5. Bahan pembuatan produk parfum
6. Pencegah korosi untuk sumur minyak
7. Bahan perekat untuk produk kayu lapis5
C. Karakteristik Formalin
Karakteristik dari zat ini adalah mudah larut dalam air, mudah
menguap, mempunyai bau yang tajam dan iritatif, mudah terbakar bila
terjadi kontak dengan udara panas atau api. Rumus kimia formalin adalah
HCHO6.
D. Sifat Fisik Kimia Dari Formalin

Formalin merupakan aldehid dengan struktur yang sederhana,
berupa gas atau cairan tidak berwarna, bersih, bau pedas membusuk,
sangat mudah larut dalam ir hingga 55%, rumus bangun HCHO. Berat
melekul 30,03; titik didih -6oF (-21oC) ; titik beku – 134oF (-92oC) untuk
bentuk anhidrat ; beratjenis pada -20oC ( air ˭ 1) 0,815 ; tekanan uap pada
– 33oC 400 mmHg ; bearat jenis uap (udara ˭ 1) 1,03 untuk larutan cair
dan 1,075 untuk gas, tidak tercampur dengan asam, basa, reduktor, logam,
garam logam, halogen, bahan yang mudah terbakar, proksida, oksidar,
larut dalam alcohol, eter, aseton, benzene, kloroform; TLV 1 ppm.7
E. Dampak Formalin Bagi Kesehatan

Menurut internasional programme on chemical safety (IPCS)
ambang batas formalin dalam tubuh adalah 1mg dalam pangan, formalin
yang boleh masuk dalam tubuh antara 1,4-14 mg.8
Dalam peraturan Menteri Kesehatan Nomor
1168/Menkes/Per/x/1999 di tegaskan bahwa formalin dilarang digunakan
dalam makanan. Hal itu mengingat bahaya serius yang akan dihadapi jika
formalin masuk ke dalam tubuh manusia, yaitu akanmenekanfungsi sel,
menyebabkan kematian sel, dan menyebabkankeracunan.9
63
F. Tanda dan Gejala Keracunan Formalin

1. Menyebabkan rasa terbakar pada mulut, saluran pernapasan dan perut,
sulit menelan, diare, sakit perut, hipertensi, kejang dan koma.
2. Kerusakan hati, jantung, otak, limpa, pancreas, system susunan saraf
pusat, dan gangguan ginjal.
3. Berdasarkan temuan patologis, formal dehid merusak jaringan dan
menyusutkan selaput lenderga merusak hati, gijal, jantung, dan otak. 10
G. Tindakan Pencegahan
1 Terhirup
Untuk mencegah agar tidak terhirup gunakan alat perlindung untuk
pernapasan sepertti masker, kain atau alat pelindung lainya yang dapat
mencegah kemungkinan masuknya formalin kedalam hidung atau
mulut. Bangunan dilengkapi ventilasi ruangan dengan penghisap udara
yang tahan ledakan.
2 Terkena Mata
Gunakan pelindung mata atau kaca mata, penahan yang tahan terhadap
percikan, sediakan Kran air untuk mencuci mata ditempat kerja yang
berguna apabila terjadi keadaan darurat.
3 Terkena kulit
Gunakan pakaian pelindung bahan kimia yang cocok, gunakan sarung
tangan yang tahan bahan kimia.
4 Tertelan
Hindari makan, minum, dan merokok selama bekerja, cuci tangan
sebelum makan.11
H. Karakteristik Sampel
Tahu merupakan hasil olahan dari bahan dasar kacang kedelai
melalui proses pengendapan dan penggumpalan oleh bahan penggumpal.
Tahu ikut berperan dalam pola makan sehari-hari sebagai lauk pauk
maupun sebagai makanan ringan.12
64
Tahu termasuk bahan makanan yang bekadar air tinggi. Besarnya

kadar air dipengaruhi oleh bahan penggumpal yang dipakai pada saat
pembuatan tahu. Bahan penggumpal asam menghasilkan tahu dengan
kadar air lebih tinggi disbanding garam kalsium. Makanan-makanan yang
berkadar air tinggi umumnya kandungan protein agak rendah. Selain air,
protein juga merupakan media yang baik untuk pertumbuhan
mikroorganisme pembusuk yang menyebabkan bahan mempunyai daya
awet rendah13.
Tahu mempunyai daya simpan yang terbatas. Pada kondisi biasa
(suhu kamar) daya tahannya ratarata 1-2 hari. Apabila lebih dari batas
tersebut rasa tahu akan menjadi asam dan busuk sehingga tidak ayak untuk
dikonsumsi sehingga pedagang menggunakan formalin sebagai pengawet.
Tahu yang direndam dalam larutan formalin 2% selama 3 menit dapat
memperpanjang daya tahan simpannya pada suhu kamar selama 4-5 hari14.
BAB III
METODE PRAKTIKUM
A. Waktu
Praktikum uji Formalin dilaksanakan pada hari Rabu, 20 April 2016
pukul 12.30 sampai dengan selesai, bersamaan dengan uji boraks dan uji
Rhodamin B.
B. Tempat Praktikum
Praktikum dilaksanakan di Laboratorium Terpadu Fakultas Kesehatan
Masyarakat Universitas Diponegoro
C. Alat
1. Erlenmeyer
2. Beaker glass
3. Corong
4. Pipet tetes
5. Gelas ukur
6. Timbangan analitik
7. Mortar
8. Spatula
9. Pipet ukur
10. Rak tabung
11. Bulb
12. Tabung reaksi
D. Bahan
1. KMnO4
2. Aquadest
3. Sampel bahan makanan (Tahu kuning)
4. Kertas saring
65
66
E. Teknik Sampling
Sampel yang diuji diambil pagi hari sebelum praktikum dilaksanakan dari
salah satu pedagang sayur di Jalan Cinde Utara Semarang. Tahu kuning
tersebut diproduksi dari pabrik tahu didaerah tersebut dengan kemasaan
seharga 5 ribu rupiah per plastik.

Metode uji yang digunakan dalam praktikum ini adalah uji reaksi untuk
formalin dengan mengunakan larutan KMno4 untuk melihat perubahan warna
yang terjadi pada sampel.
67
G. Prosedur Kerja Pengujian Kandungan Formalin
Sampel makanan (tahu kuning) dengan menggunakan

mortar dan penggerus
Dimasukkan sampel 10 gr kedalam beaker glass dan

ditambahkan 30 ml air panas
Sampel diaduk hingga larut
Sampel disaring menggunakan kertas saring
Diambik 2 ml filtrat dan dimasukkan ke dalam tabung reaksiDiteteskan larutan

KMnO4 sebanyak 1 tetes
Kemudian dikocok hingga tercampur rata
Diamati perubahannya, adanya formalin ditunjukkan dengan hilangnya warna

pink dari KMnO4
Dibuat larutan pembanding, larutan 10ml sampel ditambah 1 tetes formalin dan
1 tetes KMnO4, dikocok hingga tercampur rata
Diamati perubahan warna dan dibandingkan dengan larutan sampel pertama
Gambar 3.1 Skema Kerja Pengujian Kandungan Formalin

BAB IV
A. Hasil Pengamatan
Berikut adalah hasil praktikum uji kandungan formalin dalam sampel
tahu kuning.
Tabel 4.1 Hasil Uji Kandungan Formalin dalam Tahu Kuning
No Nama Perlakuaan uji Setelah Keterangan
Sampel perlakuan uji
1. Tahu Kuning Sampel Setelah ditetsi (+)
disaring,2ml KMno4 1 tetes Positif
filtrat diambil dan divortex mengandung
dan ditetesi selama 1 menit formalin
KMno4 warna pink
hilang menjadi
warna coklat
muda
Keterangan : - ( negatif ) : tidak mengandung formalin

+ ( positif ) : mengandung formalin
Gambar 4.1. Hasil dari pengujian Formalin
68
69
Keterangan Gambar : gambar diatas menunjukkan persamaan warna

pada larutan sampel dan larutan pembanding yaitu berwarna coklat muda
dan itu menunjukkan bahwa sampel positif mengandung formalin.
B. Pembahasan
1. Deskripsi Pengujian
Dalam praktikum ini dilakukan uji kandungan formalin yang
terdapat didalam tahu kuning yang dijual oleh pedagang di daerah
Semarang. Langkah pertama yang dilakukan yaitu menghaluskan sampel
tahu dengan mortar dan penggerus. Setelah itu 10 gram sampel
dimasukkan kedalam beaker glass dan dicampur dengan 30 ml aquadest.
Selanjutnya larutan tersebut disaring dan filtratnya ditambahkan dengan 1
tetes KMno4. Lalu dihomogenkan dengan vortex. Jika warna pink dalam
KMno4 berubah warna maka sampel positif mengandung formalin.
2. Kandungan Formalin Pada Sampel
Dari hasil pengamatan pada tahu kuning, warna sampel mula-mula
berwarna putih kemudian setelah ditetesi dengan KMnO4 sebanyak 1 tetes
terjadi perubahan warna yaitu menjadi berwarna coklat muda. Dengan
demikian, membuktikan bahwa sampel yaitu tahu kuning mengandung
formalin ditandai dengan hilangnya warna pink dari KMnO4. Pada analisis
kuantitatif, perubahan warna pada larutan KMnO4 disebabkan
karena aldehid mereduksi KMnO4 sehingga warna larutan yang asalnya
pink menjadi coklat muda. Berdasarkan pengamatan dibuktikan bahwa
warna larutan sampel dan larutan pembanding sama.
Dalam penggunaan formalin di masyarakat, khususnya pedagang
tahu kuning terdapat faktor perilaku yang mempengaruhi. Berkaitan
dengan perilaku, beberapa hal yang mempengaruhi adalah pengetahuan
dan sikap. Pengetahuan merupakan dominan yang sangat penting dalam
terbentuknya tindakan seseorang. Sikap merupakan komponen yang
sangat penting dalam melakukan tindakan
Ciri-ciri tahu yang mengandung formalin yaitu Tahu yang
bentuknya sangat bagus, kenyal, tidak mudah hancur/rusak/ busuk sampai
70
tiga hari pada suhu kamar (25 derajat Celsius) dan bertahan lebih dari 15
hari pada suhu lemari es ( 10 derajat Celsius), terlampau keras, namun
tidak padat, bau agak menyengat.
Efek jangka pendek yang dialami apabila mengkonsumsi makanan
yang mengandung formalin yaitu :
a. Jika terkena mata, maka akan terjadi iritasi, gatal dan penglihatan
kabur.
b. Jika tertelan maka dapat menimbulkan kerusakan hati, jantung, otak,
limpa, ginjal, dll.
c. Jika terhirup maka dapat menyebabkan iritasi pada hidung,
tenggorokan, batuk, diare dan gangguan paru- paru/ pernafasan.
d. Gangguan menstruasi dan kemandulan pada perempuan.
e. Luka pada ginjal, gangguan pernafasan, daya ingat terganggu, sulit
tidur hingga kanker otak.
f. Jika bersentuhan dengan kulit dapat menyebabkan panas, mati rasa
hingga radang kulit
3. Faktor-faktor yang mempengaruhi pengujian
Dalam pengujian ini faktor yang mempengaruhi hasil dari pengujian
yaitu pada saat penumbukan sampe ( tahu kuning ) kurang halus sehingga
membutuhkan waktu yang lama dalam penyaringan. Selain itu filtrat
sampel yang didapatkan juga tidak maksimal karena banyak endapan
sampel yang masih berukuruanm pebesar. Selain itu dalam penambahan
KMno4 mungkin terdapat kekurang telitian dari praktikan sehingga hasil
larutan sampelnya berwarna coklat muda bukan putih seperti larutan
pembandingnya. Tetapi secara keseluruhan pengujian ini mampu
membuktikan adanya kandungan formalin dalam sampel tahu kuning.
BAB V
PENUTUP
A. Kesimpulan
1. Hasil uji kandungan formalin pada sampel makanan tahu kuning
adalah positif. Hal tersebut dibuktikan dengan perubahan warna yang
terjadi pada sampel setelah ditetesi KMno4 yang semula putih menjadi
coklat muda
2. Berdasarkan peraturan Menteri Kesehatan Nomor
1168/Menkes/per/x/1999 ditegaskan bahwa formalin dilarang
digunakan dalam makanan
B. Saran
1. Selalu menjaga kebersihan dari alat-alat yang digunakan selama
praktikum agar tidak terjadi kontaminasi
2. Dibutuhkan keakuratan dalam proses penambahan zat – zat yang
digunakan sebagai pereaksi untuk menghindari kesalahan hasil akhir
3. Diperlukan ketelitian dalam pengamatan perubahan warna
4. Lebih berhati-hati dalam memilih makanan yang beredar dipasaran
71
DAFTAR PUSTAKA
1. Saparinto,Cahyo dan Diana Hidayat. Bahan Tambahan

Pangan.Yogyakarta:Kanisius.2006
2. Mobonggi,Liska,Asri Silvana Naiu dan Lukma Mile. Uji Formalin Pada
Ikan Teri ( Stolephorus sp) Asin Kering di Kota Gorontalo.
http://kim.ung.ac.id/index.php/KIMFPIK/article/download/7927/7817.201
3 ( diakses tanggal 27 April 2016 )
3. Purawisastra,Suryana dan Emma Sahara. Penyerapan Formalin Oleh
Beberapa Jenis Bahan Makanan Serta Penghilangannya Melalui
Perendaman Dalam Air Panas.
http://ejournal.litbang.depkes.go.id/index.php/pgm/article/viewFile/3112/3
078.2011 ( diakses tanggal 26 April 2016 )
4. Astawan,Made. Mengenal Formalin dan Bahannya. Jakarta : Penebar
Swadaya.2006
5. Haryadi, Singgih. Uji Kandungan Formalin.
http://eltek.polinema.ac.id/public/ (diakses tanggal 25 April 2016 )
6. Sanger,Grace,dan Litha Montolalu. Metode Pengurangan Kadar Formalin
pada Ikan Cikalang (Katsuwonus Pelamis L).
http://repo.unsrat.ac.id/34/1/1_-_Metode_Pengurangan_Kadar.pdf .2008 (
diakses tanggal 26 April 2016 )
7. Sentra Informasi Keracunan Nasional. http://ik.pom.go.id/v2015/( diakses
4 Juni 2016)
8. Mardi,Chanif. Mengenal Bahaya Formalin dalam Makanan. Laboratorium
Biokimia. Jurusan Kimia FMIPA Universitas Brawijaya.
9. Peraturan Menteri Kesehatan RI No 1168/MENKES/PER/X/1999 Tentang
Bahan Tambahan Makanan.Jakarta :Depkes.2002( diakses tanggal 26
April 2016 )
10. Keputusan Kepala Badan Pengawas Obat Dan Makanan Republik
Indonesia Nomor Hk.04.1.23.08.11.07457 Tahun 2011 . Tentang Pejabat
Pengelola Informasi Dan Dokumentasi Di Lingkungan Badan Pengawas
72
73
Obat Dan Makanan. http://www.pom.go.id/ppid/f_KBPOM.pdf ( diakses

tanggal 5 Juni 2016)
11. Departemen Kesehatan RI. Pedoman Manajemen Sumber Daya Manusia
(Sdm) Kesehatan Dalam Penanggulangan Bencana. 2006.
http://www.penanggulangankrisis.depkes.go.id/__pub/files84935Buku_Pe
doman_SDM_Kes.pdf (diakses tanggal 5 Juni 2016)
12. Khomsand, A dan Anwar F.. Sehat itu Mudah,Wujudkan Hidup Sehat
dengan Makanan. Jakarta:PT.Mizan Publika.2008
13. Hamid, M. Kandungan dan Manfaat Tahu. Jakarta:Penebar Swadaya.2012
14. Muchtadi, D. Prinsip Teknologi Pangan Sumber Protein.
Bandung:Alfabeta.2009
LAMPIRAN
Sampel tahu kuning Sampel tahu ditumbuk Sampel ditimbang
Sampel dicampur air panas Sampel di kertas saring Diambil 2ml filtrat
Sampel ditetesi KMno4 Sampel di vortex Hasil pengujian
74
75
76
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Peningkatan kualitas sumber daya manusia salah satunya ditentukan
olehkualitas pangan yang dikonsumsinya. Berdasarkan UU. No 7 tahun 1996
tentang pangan menyatakan bahwa pangan yang dikonsumsi harus memenuhi
beberapa syarat diantaranya aman, bergizi, bermutu, dan tejangkau oleh
masyarakat. Aman yang dimaksud adalah bebas dari cemaran biologi, kimia
dan cemaran lain yangdapat mengganggu, merugikan, dan membahayakan
kesehatan manusia.1
Kondisi makanan dan minuman yang tidak aman sangat merugikan bagi
konsumen karena dapat terinfeksi atau sakit bahkan keracunan dengan
gejalaantara lain mual, sakit perut, muntah, diare bahkan dapat menyebabkan
kejangdan akhirnya fatal bila tidak segera mendapatkan pertolongan.
Penggunaan bahantambahan pangan (BTP) yang memang jelas- jelas dilarang,
seperti bahan pengawet yang melampaui ambang batas yang telah ditentukan.
Dalam kehidupansehari-hari BTP sudah digunakan secara umum oleh
masyarakat termasuk dalam pembuatan makanan. Namun dalam prakteknya
masih banyak produsen makananyang menggunakan bahan tambahan yang
berlebih sehingga dapat menjadi racundan berbahaya bagi kesehatan yang
sebenarnya tidak boleh digunakan dalammakanan, baik mengenai sifat-sifat
keamanan Bahan Tambahan Pangan (BTP).2
Salah satu penyalah gunaaan yang dilakukan oleh produsen adalah
penggunaan boraks sebagai bahan tambahan pangan. Biasanya boraks disalah
gunakan oleh produsen nakal untuk pembuatan kerupuk beras, mie, lontong
(sebagai pengeras), ketupat (sebagai pengeras), bakso (sebagai pengenyal
dan pengawet), kecap (sebagai pengawet), bahkan pembuatan bubur ayam (se
bagai pengental dan pengawet). Padahal fungsi boraks yang sebenarnya adalah
digunakan dalam dunia industri non pangan sebagai bahan solder, bahan
pembersih, pengawet kayu, antiseptik, dan pengontrol kecoa.3
77
78
Sering mengkonsumsi makanan yang mengandung boraks akan

menyebabkan gangguan otak, hati, lemak dan ginjal. Dalam jumlah banyak,
boraks menyebabkan demam, anuria(tidak terbentuknya urin), koma,
merangsang system saraf pusat, menimbulkan depresi, apatis, sianosis,
tekanan darah turun, kerusakan ginjal, pingsan bahkan kematian.3
Berdasarkan uraian diatas maka praktikum ini dlakukan pengujian boraks
pada sampel yang telah ditentukan yaitu cilok yang sering dikonsumsi
mahasiswa dan masyarakat. Pengujian boraks dilakukan dengan metoda uji
warna dengan tes kit boraks.
B. Tujuan Praktikum
1. Mempraktekkan cara atau prosedur pengujian boraks dalam bahan
makanan dengan metode uji warna tes kit boraks
2. Mengetahui adanya kandungan boraks dalam bahan makanan dengan
metode uji warna tes kit boraks
3. Membandingkan kandungan boraks hasil praktikum dengan undang-
undang atau peraturan-peraturan yang terkait dengan keamanan
pangan
1. Praktikan mampu dan paham melakukan uji warna tes kit boraks
dalam bahan makanan
2. Praktikan mampu mengetahui beberapa pangan yang mungkin
mengandung boraks dalam masyarakat
3. Meningkatkan kewaspadaan dan membantu mahasiswa untuk dapat
memilih makanan yang aman (tidak mengandung boraks)
4. Mahasiswa dapat mengetahui dampak terhadap kesehatan akibat
mengkonsumsi makanan yang mengandung boraks
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Definisi Pangan
Pangan adalah segala sesuatu yang berasal dari sumber hayati dan air, baik
yang diolah maupun yang tidak diolah, yang diperuntukkan sebagai makanan
ataupun minuman yang dikonsumsi manusia, termasuk didalamnya adalah bahan
tambahan pangan, bahan baku pangan, dan bahan lain yang digunakan dalam
proses penyiapan, pengolahan, atau pembuatan makanan atau minuman. 4 Kualitas
pangan dapat ditinjau dari aspek mikrobiologis, fisik (warna, bau, rasa, tekstur)
dan kandungan gizinya. Pangan yang tersedia secara ilmiah tidak selalu terbebas
dari senyawa yang tidak diperlukan oleh tubuh, bahkan dapat mengandung
senyawa yang membahayakan tubuh. Sering dengan sengaja ditambahakan bahan
tambahan pangan (BTP) atau bahan untuk memperbaiki tekstur, warna, dan
komponen mutu lainnya kedalamproses pengolahan pangan.5
B. Keamanan Pangan
Untuk melaksanakan Undang-Undang no 7 tahun 1996 dan memberikan
perlindungan kepada masyarakat maka pemerintah menerbitkan Peraturan
Pemerintah no 28 tahun 2004 tentang keamanan mutu dan gizi pangan. Keamanan
pangan adalah kondisi dan upaya yang diperlukan untuk mencegah pangan dari
kemungkinan cemaran biologis, kimia dan benda lain yang dapat mengganggu ,
merugikan dan membahayakan kesehatan manusia. Pangan yang aman serta
bermutu dan bergizitinggi penting peranannya bagi pertumbuhan, pemeliharaan
dan peningkatan derajat kesehatan serta peningkatan kecerdasan masyarakat.6
Karena keamanan pangan muncul sebagai suatu masalah yang dinamis sering
dengan perkembangan peradaban manusia dan kemajuan ilmu dan teknologi,
maka diperlukan suatu system dalam mengawasi pangan sejak diproduksi, diolah,
ditangani, diangkut, disimpan didistribusikan dan dihidangkan.7 Untuk itu
keamanan pangan merupakan aspek yang sangat penting dalam kehidupan sehari-
hari.8
79
80
C. Definisi Boraks
Natriumtetraborat(Na2B4O7.10H2O) adalah campuran garam mineral dengan
konsentrasi yang cukup tinggi yang merupakan bentuk tidak murni dari boraks.
Boraks atau bleng adalah zat aditif yang biasanya digunakan dalam pembuatan
makanan.9 Penggunaan boraks sebahai bahan tambahan pangan selain bertujuan
untuk mengawetkan makanan juga bertujuan agar makanan lebih kompak
(kenyal) teksturnya dan memperbaiki penampakan.10
D. Karakteristik Boraks
Karakteristik pada boraks antara lain :
1. Warna adalah jelas bersih
2. Kilau seperti kaca
3. Kristal transparan adalah transparan tembus ke kaca
4. System hablur adalah monoklin
5. Perpecahan sempurna di satu arah
6. Warna lapisan putih11
E. Peraturan Terkait Boraks

Boraks berdasarkan Peraturan Menteri RI dinyatakan sebagai bahan berbahaya
dan beracun serta dilarang digunakan dalam pembuatan makanan. Pada dasarnya
boraks berbentuk Kristal putih, tidak berbau, dan stabil pada suhu dan tekanan
normal. Didalam air boraks berubah menjadi natrium hidroksida dan asam borat.12
Permenkes RI No 033 tahun 2012 tentang bahan-bahan tambahan
makananmenyatakan bahwa natriumtetrabonate (boraks) digolangkan dalam
bahan-bahan tambahan yang dilarang digunakan dalam makanan. Boraks
dinyatakan dapat menggangu kesehatan bila digunakan pada makanan.13
F. Uji Kandugan Boraks pada Makanan

Ada 2 macam uji kandungan boraks, yaitu uji kandungan boraks secara
kualitatif dan uji kandungan boraks kuntitatif. Uji kandungan boraks secara
kualitatif hanya mampu menunjukkan apakah suatu bahan makanan mengandung
boraks atau tidak tanpa mampu menunjukkan seberapa banyak kandungan boraks
81
didalamnya. Uji kandungan boraks kuntitatif selain dapat menunjukkan apakah

suatu bahan makanan mengandung boraks atau tidak, uji ini juga mampu
menunjukkan seberapa besar kandungan boraks tersebut.14
G. Dampak Boraks Bagi Kesehatan

Sering mengkonsumsi makanan yang mengandung boraks akan menyebabkan
gangguan otak, hati, lemak dan ginjal. Mengkonsumsi boraks dalam kanan secara
tidak langsung dapat erakibat buruk karena sifatnya terakumulasi di dalam tubuh
sedikit demi sedikit. Boraks bukan hanya mengganggu enzim-enzim metabolism
tetapi juga dapat mengganggu alat reproduksi pada pria. Menurut Adidwisastra
tahun 1987 pengaruh racun boraks dalam tubuh meiputi:
1. Kejang – kejang
2. Tidak napsu makan
3. Dehidrasi
4. Dermatitis
5. Sakit kepala
6. Sakit perut sebelah atas, muntah dan mencret
7. Wajah dan kulit pucat15
BAB III
METODE PRAKTIKUM
A. Waktu Praktikum
Praktikum Boraks pada Makanan dilaksanakan pada Rabu, 20
April 2016 pukul 13.00 sampai selesai.
B. Tempat Praktikum
Praktikum Boraks pada Makanan dilaksanakan di Laboratorium
Terpadu Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Diponegoro.
C. Alat
1. Rak dan tabung reaksi
2. Pipet tetes
3. Beaker glass
4. Gelas ukur 10 ml
5. Spatula
6. Bulb
7. Mortar
8. Corong
9. Vortex
10. Timbangan analitik
D. Bahan
1. Tes kit boraks
2. Kertas pH/ lakmus
3. HCl 10%
4. NaOH 10%
5. Sampel (cilok)
6. Aquadest
7. Kertas saring
82
83
E. Teknik sampling
Pada praktikum boraks pada makanan, sampel yang digunakan
yaitu cilok yang berada di jalan sirojudin. Waktu pengambilan sampel
yaitu pada hari Rabu, 20 April 2016 pukul 12.00 WIB.
F. Metode yang digunakan

Dalam praktikum boraks pada sampel cilok menggunakan metode
uji warna dengan tes kit boraks.
G. Prosedur Kerja
Sampel makanan(cilok) dihaluskan dengan mortar
10gr sampel dimasukkan ke dalam beaker glass dan kemudian

ditambahkan air panas 30ml, diaduk hingga larut
10ml sampel dimasukkan ke tabung reaksi dan ditambahkan 3

tetes HCl hingga mencapai pH 1-2, dicek dengan kertas pH
Dicelupkan kertas kit boraks ke dalam sampel, kemudian

diambil dan dikeringkan
Jika warna berubah menjadi merah orange maka diduga sampel

positif mengandung boraks
Dilakukan uji lanjutan dengan meneteskan NaOH hingga terjadi

perubahan warna
Jika berubah warna hijau kehitaman maka positif mengandung

boraks, jika berubah warna merah kecoklatan maka sampel
tidak mengandung boraks
Gambar 3.1 Skema Kerja Pada Metoda Uji Warna Dengan Tes Kit Boraks
BAB IV
A. Hasil Pengamatan
Hasil praktikum uji kandungan boraks pada sampel cilok adalah sebagai
berikut:
Tabel 4.1 Hasil Pengamatan Praktikum Boraks pada Cilok
Sampel Uji Warna Tes Kit Penambahan NaOH
Sebelum Setelah Warna sebelum Warna setelah penambahan
dicelupkan dicelupkan penambahan
Cilok Kuning Kuning Media tegak Terdapat (sedikit) koloni
EMBA bakteri berwarna putih
berbentuk bulat
Keterangan :
Negative (-) : tes kit boraks tidak berubah warna (kuning), setelah
penambahan NaOH, larutan berubah warna menjadi merah kecoklatan
atau tidak berubah warna
Positif (+) : warna tes kit boraks berubah menjadi merah orange,
setelah penambahan NaOH, larutan berubah warna menjadi hijau
kehitaman
Gambar 4.1 Hasil Uji Tes Kit Boraks Pada Sampel Cilok
Gambar 4.1 Menunjukkan kertas tes kit sebelah kiri yaitu hasil uji
pratikum dengan sampel cilok dimana kertas tes kit tidak berubah warna atau
84
85
tetap berwarna kuning (negative) dan kertas tes kit sebelah kanan merupakan
pembanding (positif mengandung boraks)
B. Pembahasan
Pada praktikum ini, pengujian yang digunakan untuk memeriksa ada
tidaknya kandungan boraks dalam sampel cilok digunakan menggunakan uji
kertas tes kit. Proses pengujian diawali dengan menghaluskan sampel cilok
menggunakan mortar. Setelah sampel cilok halus, kemudian ditimbang pada
timbangan analitik untuk memperoleh takaran sampel sebanyak 10 mg.
Setelah sampel ditimbang kemudian sampel dimasukkan ke dalam beaker
glass dan ditambahkan 30ml air panas. Dihomogenkan dengan spatula,
kemudian disaring menggunakan kertas saring. Filtrat yang didapatkan
kemudian diambil menggunakan pipet ukur sebanyak 10 ml dan dimasukkan
ke dalam tabung reaksi.
Filtrat ditambahkan 3 tetes HCl 10% lalu di vortex dengan kecepatan 3-12
selama 1 menit. pH larutan dipastikan diantara 1-2 dengan mencelupkan
kertas pH. Kemudian kertas tes kit dicelupkan ke larutan. Diamati
perubahannya. Sampel (+) jika warna kertas tes kit berubah menjadi merah
orange. Kemudian dilakukan uji larutan dengan ditetesi NaOH sebanyak satu
tetes. Diamati perubahan warnanya. Sampel dinyatakan (+) mengandung
boraks jika berubah menjadi hijau kehitaman dan sampel dinyatakan (-) jika
warna larutan menjadi merah kecoklatan atau tidak berubah.
Hasil praktikum uji boraks dengan sampel cilok menunjukkan hasil negatif
boraks dengan tanda tidak adanya perubahan warna tes kit boraks ketika
dicelupkan ke dalam larutan sampel dan tidak berubah warna keika ditetesi
NaOH. Tidak adanya boraks pada cilok menandakan pedagang cilok tersebut
telah melaksanakan Permenkes No 33 tahun 2012. Pada lampiran II peraturan
tersebut dicantumkan bahwa boraks dilarang penggunaan sebagai ahan
tambahan pangan karena membahayakan kesehatan manusia.
BAB V
PENUTUP
A. Kesimpulan
1. Hasil uji kandungan boraks pada cilok adalah negatif hal tersebut
dibuktikan dengan tes kit boraks yang tidak berubah warna
menjadi merah orange. Setelah itu larutan uji juga ditambahkan
dengan NaOH dan hasilnya warna larutan tidak berubah yaitu putih
pekat.
2. Berdasarkan Peraturan Menteri Kesehatan RI No 33 tahun 2012
tentang Bahan Tambahan Pangan bahwa boraks termasuk kedalam
golongan senyawa yang tidak boleh digunakan ke dalam makanan
karena berbahaya bagi tubuh jika dikonsumsi.
B. Saran
1. Dibutuhkan keakuratan dalam proses penambahan zat-zat yang
digunakan sebagai pereaksi untuk menghindari kesalahan hasil
akhir.
2. Praktikan lebih memahami prosedur kerja sebelum melakukan
praktikum agar dapat meminimalkan kesalahan pada
pelaksanaannya.
3. Dalam praktikum, semua harus aseptis untuk menghindari adanya
kontaminasi silang.
86
DAFTAR PUSTAKA
1. Departemen Kesehatan RI. Farmakope Indonesia Edisi 111. Jakarta:

Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan. 1995.
2. Fadhilah. Identifikasi Kandungan Bahan Tambahan Makanan (BTM) pada
Makanan JajananAnak SDN Kompleks Kota Palopo Tahun 2006.
Makassar : Universitas Hassanuddin.2006.
3. Suhanda, Rikky. Hygiene Sanitasi Pengolahan Dan Analisa Boraks Pad
Bubur Ayam Yang Dijual Di Kecamatan Medan Sunggal Tahun 2012.
Medan : Universitas Sumatera Utara.2012
4. Saparinto, C dan Handayanti, D. Bahan Tambahan Pangan. Yogyakarta:
Kanisius.2006.
5. Hardiansyah dan Sumali. Pengendalian Mutu dan Keamanan Pangan.
Jakarta : Koswara.2001.
6. Cahyadi, W. Analisis dan Aspek Kesehatan Bahan Tambahan Pangan.
Edisi 2 cetakan 1. Jakarta :Bumi Aksara. 2008.
7. Seto, S. Pangan dan Gizi Ilmu Teknologi Industri dan Pembangunan
Internasional. Bogor: Fakultas Teknologi Pertanian. 2001.
8. Syah, D, dkk. Manfaat dan Bahaya Bahan Tambahan Pangan. Bogor :
Himpunan Alumni Fakutas Teknologi.2005
9. Marwati, Siti. Uji Boraks dalam Makanan. Staff.uny.ac.id/sties/default/
files/pendididkan/Siti Marwati,M.Si/ uji boraks dalam makanan.pdf
(diakses tanggal 28 April 2016)
10. Sugiyatmi,Sri. Analisis Faktor-Faktor Risiko Pencemaran Bahan Toksik
Boaks dan Pewarna pada Makanan Jajanan Tradisional yang Dijual di
Pasar-Pasar Kota. Universitas Diponegoro.2006
11. Riandini, N. Bahan Kimia dalam Makanan dan Minuman. Bandung :
Sakthi Adiluhung. 2008
12. Widyanigsih,T.D. dan Murtini,ES. Alternatif Pengganti Formalin Pada
Produk Pangan. Jakarta : Trubus Agrisarana. 2006
13. Stefania,AS. Identifikasi Boraks dalam Bakso yang Dijual pada Warung X
Ciliwung Malang. Malang.2007
87
88
14. Rohman, A dan Sumantri. Analisis Makanan. Bandung : Intitut Teknologi

Bandung.2007
15. Adiswastre,A. Keracunan Sumber Bahaya serta Penanggulangannya.
Jakarta:Gramedia.1987
LAMPIRAN
A. Dokumentasi Praktikum Uji Boraks
Sampel cilok disiapkan 10gr sampel cilok Larutan HCl dan NaOH
Penyaringan sampel pH larutan = 2 Hasil uji tes kit boraks
89
90
B. Lembar Pengesahan Praktikum Hitung Cawan Individu

91
C. Laporan Praktikum Uji Boraks Bagian Hasil

BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Pangan merupakan komoditi utama dalam memenuhi kebutuhan hidup.
Dewasa ini, jenis pangan yang dijual di pasaran sangat beraneka ragam dan
tidak jarang mengandung bahan tambahan makanan.1 Keberadaan bahan
tambahan makanan adalah untuk membuat makanan tampak lebih berkualitas,
lebih menarik serta rasa dan teksturnya lebih sempurna. Zat-zat itu
ditambahkan dalam jumlah sedikit, namun hasilnya memuaskan bagi
konsumen dan produsen.2
Sering tidak kita sadari bahwa dalam makanan yang kita konsumsi sehari-
hari ternyata mengandung zat-zat kimia yang bersifat racun, baik itu sebagai
pewarna, penyedap rasa dan bahan campuran lain. Zat-zat kimia ini
berpengaruh terhadap tubuh kita, sehingga kebanyakan kita akan mengetahui
dampaknya dalam waktu yang lama.
Beberapa jenis bahan makanan yang diuji Badan Pemeriksaan Obat dan
Makanan (BPOM) mengandung bahan berbahaya seperti pewarna tekstil,
kertas, dan cat (rhodamin b), methanyl yellow, dan amaranth. Pemakaian ini
sangat berbahaya karena bisa memicu terjadinya kanker serta merusak ginjal
dan hati yang disebabkan oleh bahan-bahan yang ditambahkan pada jajanan
seperti es sirup atau cendol, minuman ringan seperti limun, kue, gorengan,
kerupuk, dan saus sambal.3
Salah satu pewarna sintetis yang dilarang digunakan sebagai bahan
tambahan pangan adalah Rhodamin B.1 Rhodamin B merupakan zat pewarna
sintetis berbentuk serbuk Kristal berwarna kehijauan, dalam bentuk larutan
pada konsentrasi tinggi berwarna merah keunguan dan konsentrasi rendah
berwarna merah terang.4,5 Termasuk golongan pewarna xanthenes basa, dan
terbuat dari meta-dietilaminofenol dan ftalik anhidrid, suatu bahan yang tidak
bisa dimakan serta sangat berfluoresensi.5
Rhodamine B merupakan zat warna yang berbahaya yang disalahgunakan
dalam mewarnai berbagai makanan dan minuman. Biasanya dalam makanan
92
93
rhodamin digunakan untuk pewarnaan diantaranya kerupuk (58%), terasi

(51%), dan makanan ringan (42%). Konsumsi rhodamin B dalam jangka
panjang dapat terakumulasi di dalam tubuh dan dapat menyebabkan gejala
pembesaran hati dan ginjal, gangguan fungsi hati, kerusakan hati, gangguan
fisiologis tubuh, atau bahkan bisa menyebabkan timbulnya kanker hati.6
Pada praktikum kali ini, mahasiswa diharapkan mampu melakukan
pengujian terhadap kandungan rhodamin pada sampel uji dan mampu
menganalisi hasil yang didapat kaitannya dengan kesehatan.
B. Tujuan Praktikum
1. Praktikan mengetahui adanya kandungan Rhodamin B pada bahan
makanan
2. Praktikan memahami dan mampu melakukan pengujian Rhodamin B
dengan metode uji reaksi khusus Rhodamin B
1. Dapat mengetahui apakah sampel uji sirup burjo mengandung Rhodamin B
atau tidak
2. Mengetahui proses pengujian kandungan zat pewarna Rhodamin B dalam
makanan menggunkan uji reaksi khusus Rhodamin B
3. Meningkatkan kewaspadaan dalam pemilihan pangan yang akan
dikonsumsi
4. Menambah wawasan seputar Rhodamin B pada bahan makanan
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Bahan Tambahan Pangan

Pangan merupakan komoditi utama dalam memenuhi kebutuhan hidup.
Dewasa ini, jenis pangan yang dijual di pasaran sangat beraneka ragam dan
tidak jarang mengandung bahan tambahan makanan.1 Pengertian Bahan
Tambahan Makanan dalam Peraturan Menteri Kesehatan RI No.
772/Menkes/Per/IX/88 No. 1168/menkes/PER/X/1999 secara umum adalah
bahan yang biasanya tidak digunakan sebagai makanan dan biasanya bukan
merupakan komponen khas makanan, mempunyai atau tidak mempunyai nilai
gizi, yang sengaja ditambahkan kedalam makanan untuk maksud teknologi
pada pembuatan, pengolahan, penyiapan, perlakuan, pengepakan, pengemasan
dan penyimpanan.
Tujuan penggunaan Bahan Tambahan Makanan adalah untuk

meningkatkan atau mempertahankan nilai gizi dan kualitas daya simpan,
membuat bahan makanan lebih mudah dihidangkan, serta mempermudah
preparasi bahan makanan. Bahan Tambahan Makanan (BTM) yang diizinkan
penggunaannya antara lain antioksidan, antikempal, pengatur keasaman,
pemanis buatan, pemutih, pengental, pengawet, pengeras, pewarna, penyedap
rasa, dan sekuesteran.7
B. Pewarna Makanan
Zat pewarna makanan merupakan suatu benda berwarna yang memiliki
afinitas kimia terhadap benda yang diwarnainya. Pewarna makanan merupakan
bahan tambahan pangan yang dapat memperbaiki penampakan makanan agar
menarik, menyeragamkan dan menstabilkan warna, serta menutupi perubahan
warna akibat proses pengolahan dan penyimpanan.8
Penambahan bahan pewarna makanan mempunyai beberapa tujuan,
diantaranya adalah memberi kesan menarik bagi konsumen, menyeragamkan
dan menstabilkan warna, serta menutupi perubahan warna akibat proses
94
95
pengolahan dan penyimpanan. Zat pewarna makanan terbagi tiga bagian yaitu
pewarna alami, pewarna identik alami dan pewarna sintetis.9
Pewarna makanan dapat diklasifikasikan berdasarkan asalnya,yaitu
pewarna alami, identik alami, dan sintetik. Pewarna makananyang berasal dari
bahan alam disebut pewarna alami. Pewarna identik alami adalah pewarna
yang dibuat melalui sintesis secara kimia, tetapimempunyai sifat kimia yang
identik dengan pewarna alami. Pewarnasintetik adalah pewarna yang dibuat
melalui sintesis secara kimia.10
C. Peraturan Penggunaan Pewarna Pada Makanan

Di Indonesia,peraturan mengenai penggunaan zat pewarna yang diizinkan
dan pewarna yang dilarang (Tabel 1) diatur melalui SK Menteri Kesehatan RI
No. 772/menkes/Per/IX/88 mengenai Bahan Tambahan Makanan (BTM).11
Tabel 2.1 Pewarna Sintetik yang Diizinkan dan Dilarang di Indonesia
No. Pewarna yang diizinkan Pewarna yang dilarang
Pewarna No Indeks Pewarna No Indeks
Warna (C.I. No) Warna (C.I. No)
1. Amaran 16185 Citrus Red 12156
2. Biru Berlian 42090 Ponceau 3R 16155
3. Eritrosin 45340 Ponceau SX 14700
4. Hijau FCF 42053 Rhodamin B 45170
5. Hijau S 44090 Buinea Green B 42085
6. Indigotin 73015 Magentha 42510
7. Ponceau 4R 16255 Chrysoidine 11270
8. Kuning Kuinelin 15980 Butter Yellow 11020
9. Sunset Yellow 15985 Sudan I 12055
10. Tartrazin 19140 Methanil Yellow 13065
11. Carmoisin 14720 Auramine 41000
12. Oil Orange SS 12100
13. Oil Orange XO 12140
14. Oil Yellow AB 11380
15. Oil Yellow OB 11390
96
D. Rhodamin B
Salah satu pewarna sintetis yang dilarang digunakan sebagai bahan
tambahan pangan adalah Rhodamin B. Rhodamin B merupakan pewarna
sintetis berbentuk serbuk kristal, berwarna hijau atau ungu kemerahan, tidak
berbau, dan dalam larutan akan berwarna merah terang
berpendar/berfluorosensi. Rhodamin B merupakan zat warna golongan
xanthenes dyesyang digunakan pada industri tekstil dan kertas, sebagai
pewarna kain, kosmetika, produk pembersih mulut,dan sabun. Nama lain
rhodamin B adalah Dand C Red no 19. Food Red 15, ADC Rhodamine B,
Aizen Rhodamine, dan Brilliant Pink.12
Rhodamin B adalah zat pewarna yang tersedia di pasar untuk industri
tekstil. Zat ini sering disalahgunakan sebagai zat pewarna makanan dan
kosmetik di berbagai negara. Pangan yang ditemukan mengandung Rhodamin
B diantaranya kerupuk (58%), terasi (51%), dan makanan ringan (42%).6
Pedagang menggunakan Rhodmin B dikarenakan pewarna sintetis memiliki
keunggulan dibandingkan pewarna alami yaitu harganya lebih murah, lebih
mudah digunakan, lebih stabil, lebih tahan terhadap berbagai kondisi
lingkungan, daya mewarnainya lebih kuat dan memiliki rentang warna yang
lebih luas.13
E. Dampak Mengkonsumsi Rhodamin B

Pemakain zat pewarna sintetis dalam makanan dan minuman mempunyai
dampak positif bagi produsen dan konsumen, diantaranya dapat membuat suatu
makanan lebih menarik, meratakan warna makanan, mengembalikan warna
bahan dasar yang telah hilang selama pengolahan ternyata dapat pula
menimbulkan hal-hal yang tidak diinginkan dan bahkan memberikan dampak
yang negatif bagi kesehatan konsumen.
Rhodamine B merupakan zat warna yang berbahaya yang disalahgunakan
dalam mewarnai berbagai makanan dan minuman. Analisis yang menggunakan
metode destruksi yang dilanjutkan dengan metode spektrofometri, diketahui
bahwa sifat racun Rhodamine B tidak hanya disebabkan senyawa organik
97
tetapi disebabkan juga oleh kontaminasi senyawa anorganik terutama timbal

dan arsen. Dengan terkontaminasinya senyawa anorganik (timbal dan arsen)
menyebabkan Rhodamine B berbahaya juka digunakan sebagai pewarna pada
makanan dan minuman. Selain itu di dalam Rhodamine B sendiri terdapat
ikatan dengan klorin (CL yang dimana senyawa klorin ini merupakan senyawa
anorganik yang reaktif dan juga berbahaya.14
Paparan dari Rhodamine B dapat menyebabkan iritasi bila terkena
mata,iritasi kulit dan kemerahan bila terkena kulit. Sifat ini hampir mirip
dengan sifat dari Klorin yang berkaitan di dalam struktur Rhodamine B.
Penyebab lain dari Klorin sangat berbahaya jika dikonsumsi karena Klorin
merupakan senyawa radikal, senyawa radikal adalah senyawa yang tidak stabil.
Dalam struktur Rhodamine kita ketahui mengandung klorin (senyawa
halogen), sifat halogen adalah mudah bereaksi atau memiliki reaktivitas yang
tinggi maka dengan demikian senyawa tersebut karena merupakan senyawa
yang radikal akan berusaha mencapai kestabilan dalam tubuh dengan berikatan
dengan senyawa-senyawa dalam tubuh kita sehingga pada akhirnya akan
memicu kanker pada manusia.
Konsumsi rhodamin B dalam jangka panjang dapat terakumulasi di dalam
tubuh dan dapat menyebabkan gejala pembesaran hati dan ginjal, gangguan
fungsi hati, kerusakan hati, gangguan fisiologis tubuh, atau bahkan bisa
menyebabkan timbulnya kanker hati.12
BAB III
METODE PRAKTIKUM
A. Waktu Praktikum
Praktikum uji Rhodamin B dilaksanakan pada hari Rabu, 20 April 2016 pukul
12.30 sampai dengan selesai, bersamaan dengan uji boraks dan uji formalin.
B. Tempat Praktikum
Praktikum pengujian kandungan zat pewarna merah Rhodamin B dalam
makanan (sampel sirup burjo) dilaksanakan di Laboratorium Terpadu Fakultas
Kesehatan Masyarakat Universitas Diponegoro.
C. Alat
Alat-alat yang digunakan dalam praktikum uji Rhodamin B adalah sebagai
berikut:
1. Gelas ukur
2. Beaker glass
3. Rak tabung reaksi
4. Tabung reaksi (2 buah)
5. Pipet tetes (2 buah)
6. Pipet ukur (2 buah)
7. Bulb
8. Vortex
D. Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam praktikum uji Rhodamin B adalah sebagai
berikut :
1. Sampel bahan makanan (Sirup burjo)
2. HCl 10%
3. NaOH 10%
4. Aquadest
5. Ether
98
99
E. Teknik Sampling
Sampel yang diuji diambil sore hari, sehari sebelum praktikum dari salah
satu tempat makan (burjo) di daerah Tembalang yang notabene nya ramai
dikunjungi konsumen terutama mahasiswa yang berdomisili di wilayah
setempat. Sirup sampel berasal dari pabrikan yang kemudian diambil sebagian
dari botolnya dan ditempatkan dalam wadah plasti ukuran 0,25 kg.

Metode uji yang digunakan dalam praktikum ini adalah uji reaksi khusus
untuk Rhodamin B menggunakan penambahan larutan uji NaOH 10%, ether
dan HCl 10% dalam reaksinya.
100
G. Prosedur Kerja
Sampel sirup burjo dituang sebanyak 2 ml kedalam gelas ukur 10

ml
2 ml sampel lalu dipindahkan kedalam tabung reaksi
Ditambahkan NaOH 10% sebanyak 4 tetes menggunakan pipet

tetes
Ditambahkan lagi 2 ml ether lalu di vortex
Dipisahkan fase ethernya menggunakan pipet ukur dan

dipindahkan ke tabung reaksi lain
Ditambahkan HCl 10 % sebanyak 1-3 tetes (batas 1-3 tetes untuk

memastikan perubahan warna terjadi/tidak)
Diamati perubahan warna yang terjadi.
Gambar 3.1 Skema Prosedur Kerja Uji Khusus untuk Rhodamin B
Keterangan : sampel mengandung rhodamin B jika terdapat warna merah pada

bagian bawah larutan setelah ditetesi HCl 10%
BAB IV
A. Hasil Pengamatan
Hasil praktikum Rhodamin B pada sampel sirup burjo dapat dilihat pada tabel
4.1 sebagai berikut :
Tabel 4.1 Hasil Uji Rhodamin B
Perlakuan Uji
Penambahan Penambahan Penambahan HCl
NaOH 10% (4 Ether (2 ml) dan 10 (1-3 tetes)
tetes) divortex
Perubahan Tidak berubah Terdapat dua Warna fase ether
Warna fase yakni fase tidak berubah
endapan dan fase (bening)
ether
Tabel 4.1 menjelaskan perubahan warna yang terjadi pada sampel sirup burjo
setelah diberi perlakuan
Gambar 4.1 Fase Ether Setelah Diberi HCl 10%
Berdasarkan hasil pengamatan pada tabel 4.1 yang disertai gambar 4.1,
perubahan warna sampel akhir setelah ditetesi HCl 10% adalah bening dan
tidak terdapat endapan/warna merah dibagian bawah sehingga dapat dikatakan
bahwa smpel sirup burjo tidak mengandung Rhodamin B.
101
102
B. Pembahasan
Pada praktikum uji Rhodamin B kali ini, sampel uji yang dignakan
adalah sirup burjo yang berasal dari salah satu burjo di kawasan
Tembalang. Sampel diambil pada sore hari, sehari sebelum praktikum
dilaksanakan menggunakan plastic ukuran 2,5 kg. Metode yang digunakan
dalam pengujian ini adalah uji khusus untuk Rhodamin B. Hal yang
pertama kali dilakukan sebelum pengujian adalah mempersiapkan alat dan
bahan.
Kemudian sampel diukur sebanyak 2 ml menggunakan gelas ukur,
lalu dipindahkan kedalam geras reaksi dan di tambahkan 4 tetes NaOH
10%. Dilanjutkan dengan penambahan 2 ml ether. Lalu larutan di vortex.
Setelah divortex akan terbentuk dua fase pada larutan yakni fase endapan
dan fase ether. Fase ether dipipet dan dipindahkan kedalam tabung reaksi
lain.
Ditambahkan larutan HCl 10% mula-mula satu tetes, jika warna
belum berubah ditambahkan lagi hingga 3 tetes guna memastikan
terjadinya perubahan warna. Setelah itu diamati warna pada larutan. Jika
sampel mengandung rhodamin B maka akan terdapat warna merah pada
bagian bawah larutan.
Sirup merupakan larutan yang terdiri dari air, gula dan formulasi
bahan-bahan tambahan pangan. Bahan tambahan pangan yang digunakan
bertujuan untuk meningkatkan nilai organoleptik, menghambat
15
pertumbuhan mikroba dan memperpanjang masa simpan produk. Sirup
mempunyai variasi rasa dan aroma biasanya diambil dari rasa buah-buahan.
Bahan-bahan yang digunakan dalam pembuatan sirup adalah buah segar,
gula pasir, asam sitrat, natrium benzoat, garam dapur dan air.
Sampel sirup yang digunakan adalah sirup burjo yang berasal dari
salah satu burjo di kawasan Tembalang. Sampel diambil pada sore hari,
sehari sebelum dilakukan pengujian yang ditempatkan dalam wadah plastic
berukuran 0,25 kg.
Berdasarkan pengujian yang telah dilakukan melalui uji reaksi khusus
rhodamin B, didapatkan hasil bahwa perubahan warna akhir sampel
103
menjadi benig atau tidak berwarna yang dapat diartikan bahwa sampel
tidak mengandung rhodamin B dan dapat dinyatakan aman untuk
dikonsumsi.
Rhodamin B merupakan salah satu pewarna sintetis yang dilarang
digunakan sebagai bahan tambahan pangan. Rhodamin B merupakan
pewarna sintetis berbentuk serbuk kristal, berwarna hijau atau ungu
kemerahan, tidak berbau, dan dalam larutan akan berwarna merah terang
berpendar/berfluorosensi. Rhodamin B merupakan zat warna golongan
xanthenes dyes yang digunakan pada industri tekstil dan kertas, sebagai
pewarna kain, kosmetika, produk pembersih mulut,dan sabun. Nama lain
rhodamin B adalah Dand C Red no 19. Food Red 15, ADC Rhodamine B,
Aizen Rhodamine, dan Brilliant Pink.12
Zat ini sering disalah gunakan sebagai zat pewarna makanan dan
kosmetik di berbagai negara. Pangan yang ditemukan mengandung
Rhodamin B diantaranya kerupuk (58%), terasi (51%), dan makanan ringan
(42%).6 .Masih terdapatnya pedagang yang menggunakan Rhodmin B
dikarenakan pewarna sintetis memiliki keunggulan dibandingkan pewarna
alami yaitu harganya lebih murah, lebih mudah digunakan, lebih stabil,
lebih tahan terhadap berbagai kondisi lingkungan, daya mewarnainya lebih
kuat dan memiliki rentang warna yang lebih luas. 13
Rhodamine B merupakan zat warna yang berbahaya yang
disalahgunakan dalam mewarnai berbagai makanan dan minuman. Analisis
yang menggunakan metode destruksi yang dilanjutkan dengan metode
spektrofometri, diketahui bahwa sifat racun Rhodamine B tidak hanya
disebabkan senyawa organik tetapi disebabkan juga oleh kontaminasi
senyawa anorganik terutama timbal dan arsen. Dengan terkontaminasinya
senyawa anorganik (timbal dan arsen) menyebabkan Rhodamine B
berbahaya juka digunakan sebagai pewarna pada makanan dan minuman.
Selain itu di dalam Rhodamine B sendiri terdapat ikatan dengan klorin (CL
yang dimana senyawa klorin ini merupakan senyawa anorganik yang
reaktif dan juga berbahaya.14
104
Paparan dari Rhodamine B dapat menyebabkan iritasi bila terkena

mata,iritasi kulit dan kemerahan bila terkena kulit. Sifat ini hampir mirip
dengan sifat dari Klorin yang berkaitan di dalam struktur Rhodamine B.
Penyebab lain dari Klorin sangat berbahaya jika dikonsumsi karena Klorin
merupakan senyawa radikal, senyawa radikal adalah senyawa yang tidak
stabil. Dalam struktur Rhodamine kita ketahui mengandung klorin
(senyawa halogen), sifat halogen adalah mudah bereaksi atau memiliki
reaktivitas yang tinggi maka dengan demikian senyawa tersebut karena
merupakan senyawa yang radikal akan berusaha mencapai kestabilan dalam
tubuh dengan berikatan dengan senyawa-senyawa dalam tubuh kita
sehingga pada akhirnya akan memicu kanker pada manusia.
Konsumsi rhodamin B dalam jangka panjang dapat terakumulasi di
dalam tubuh dan dapat menyebabkan gejala pembesaran hati dan ginjal,
gangguan fungsi hati, kerusakan hati, gangguan fisiologis tubuh, atau
bahkan bisa menyebabkan timbulnya kanker hati.12
Dalam pengujian kandungan rhodamin B pada sampel sirup burjo
terdapat beberapa factor yang mungkin mempengaruhi hasil yang diadapat
diantaranya pengukuran volume yang tidak kuantitatif karena kesalahan
mengukur ataupun melihat angka yang tertera yang terjadi pada saat
memipet larutan ether sebanyak 2 ml menggunakan pipet ataupun saat
pemindahan sampel dari gelas ukur 10 ml ke tabung reaksi yang
meninggalkan volume sisa pada gelas ukur sehingga terjadi perbedaan
volume pada tabung reaksi yang akan diuji.
BAB VI
PENUTUP
A. Kesimpulan
Berdasarkan hasil pengujian yang telah dilakukan, dapat disimpulkan bahwa
1. Sampel sirup burjo yang digunakan oleh salah satu burjo di kawasan
Tembalang tidak mengandung rhodamin B
2. Berdasarkan Peraturan Menteri Kesehatan RI No. 722/Menkes/Per/IX/1988
tentang bahan tambahan pangan, dapat dinyatakan bahwa sampel sirup
burjo aman untuk dikonsumsi.
B. Saran
1. Diperlukan ketelitian dalam melakukan praktikum agar hasil akurat atau
hampir dibenarkan.
2. Sampel yang digunakan berasal dari satu tempat saja, sehingga tidak
berlaku untuk tempat yang lain. Penulis menyarankan bahwa sebaiknya
dilakukan uji rhodamin B dengan sampel lebih dari satu tempat supaya
memungkinkan mendapatkan hasil yang positif sehingga dapat dilakukan
perbandingan.
3. Lebih berhati-hati dalam memilih makanan dengan warna mencolok yang
hendak dikonsumsi.
105
DAFTAR PUSTAKA
1. Bahaya Rhodamin B sebagai Pewarna pada Pangan. 2015. Diakses melalui:

http://ik.pom.go.id/v2015/artikel/Bahaya-Rhodamin-B-sebagai-Pewarna-
pada-Makanan.pdf, pada 02 Juni 2016
2. Afrianti, L. Teknologi Pengawetan Pangan. Bandung: Alfabeta. 2013
3. Eka Reysa. Rahasia Mengetahui Makanan Berbahaya. Jakarta: Titik Media
Publisher. . 2013
4. Trestiati, Mela. Analisis Rhodamin B pada Makanan dan Minuman
JajananAnak SD (Studi Kasus : Sekolah Dasar di Kecamatan Margaasih
Kabupaten Bandung). Tesis.Pascasarjana Fakultas Kesehatan Lingkungan,
Bandung. 2003
5. Merck Index. Chemistry constant companion, now with a new additon, Ed
14th, 1410, 1411, Merck & Co., Inc, Whitehouse Station, NJ, USA. 2006.
6. Astuti R, Meikawati W, Sumarginingsih. 2010. Penggunaan Zat Warna
“Rhodamin B” Pada Terasi Berdasarkan Pengetahuan dan Sikap Produsen
Terasi di Desa Bonang Kecamatan Lasem Kabupaten Rembang. FKM
Universitas Muhammadiyah Semarang.
7. Cahyadi, W. Analisis Dan Aspek Kesehatan Bahan Tambahan Pangan. Bumi
Aksara. Jakarta. 2008.
8. Cahyadi. W. Analisis & Aspek Kesehatan Bahan Tambahan Pangan. Edisi
Kedua. Jakarta: Bumi Aksara. 2009
9. Mudjajanto, E. S. Tahu, Makanan Favorit yang Keamanannya Perlu
Diwaspadai. 2006.
10. Wijaya, C.H. Bahan Tambahan Pangan: Pewarna. Bogor: Intitut Pertanian
Bogor. 2009.
11. MENTERI KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA. Peraturan Menteri
Kesehatan Republik Indonesia Nomor 722/Menkes/Per/IX/88 tentang Bahan
Tambahan Makanan. Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
1988
12. Achmadi, Fauzi dalam Klub Pompi Badan POM RI. Waspada Penggunaan
Rhodamin B di Makanan Kita. 2014. Diakses melalui
106
107
http://klubpompi.pom.go.id/id/edukasi/artikel/item/319-waspada-
penggunaan-rhodamin-b-di-makanan-kita, pada 02 Juni 2016.
13. Kartina B, Ashar T, Hasan. Karakteristik Pedagang, Sanitasi Pengolahan
Dan Analisa Kandungan Rhodamin B pada Bumbu Cabai Giling di Pasar
Tradisional Kecamatan Medan Baru Tahun 2012. Program Sarjana Fakultas
Kesehatan Masyarakat Universitas Sumatera Utara, Departemen Kesehatan
Lingkungan. 2012.
14. http://eprints.undip.ac.id/43762/3/Dewi_Sri_G2A009095_Bab2KTI.pdf
(diakses pada 02 Juni 2016)
15. Kusnandar, dkk. Teknologi Proses Produksi Minuman Nata de Coco
dalamCup. Universitas Hasanuddin. 2008.
LAMPIRAN
A. Foto-foto saat praktikum
Sampel Sirup Burjo Pemindahan Sampel Penambahan NaOH
Ke Tabung Reaksi 10 %
Penambahan 2ml Larutan di Vortex Pemisahan fase Ether
Ether
Perubahan Warna Akhir
108
109
B. Laporan Sementara
110
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Mikroorganisme merupakan makhluk hidup yang berukuran sangat
kecil yaitu dalam skala micrometer atau micron (μ) atau sepersejuta meter
dan tidak dapat dilihat dengan mata telanjang (mikroskopis).1 Dalam
kehidupan sehari-hari, mikroorganisme biasa disebut kuman atau mikroba.
Bakteri, fungi, virus, dan beberapa jenis cacing termasuk ke dalam golongan
mikroorganisme.
Beberapa mikroorganisme terutama bakteri patogen dapat menjadi
sumber penyebab penyakit. Banyak kasus penyakit yang ditimbulkan oleh
bakteri di seluruh dunia termasuk Indonesia. Kasus mengenai bakteri patogen
paling banyak ditemukan yaitu menginfeksi saluran pencernaan, seperti E.
colli penyebab diare. Maka dari itu, perlu adanya penelitian mengenai jumlah
bakteri dan dimana tempat persebarannya guna meningkatkan kesadaran dan
kewaspadaan terhadap terjadinya infeksi penyakit akibat bakteri. Bakteri
hanya dapat diamati dengan menggunakan mikroskop dan dapat dihitung
dengan metode hitung cawan atau Total Plate Count (TPC). Metode hitung
cawan merupakan metode yang paling banyak digunakan untuk menghitung
jumlah bakteri dalam suatu media biakan bakteri.
B. Tujuan Praktikum
1. Praktikan dapat memahami perhitungan jumlah mikroorganisme dengan
menggunakan metode hitung cawan atau Total Plate Count (TPC).
2. Praktikan mampu melakukan perhitungan jumlah mikroorganisme
dengan menggunakan metode hitung cawan atau Total Plate Count
(TPC).
3. Praktikan dapat mengetahui jumlah mikroorganisme pada cawan dengan
menggunakan metode hitung cawan atau Total Plate Count (TPC).
111
112
1. Praktikan mendapatkan pengalaman melakukan TPC, sehingga dapat
diterapkan saat menjalani proses magang dan/atau bekerja sebagai
sanitarian rumah sakit atau pelayanan kesehatan lainnya.
2. Praktikan dapat lebih menjaga kebersihan diri (personal higienen) dan
sumber makanan/minuman setelah mengetahui jumlah mikroorganisme
pada bahan uji.
3. Praktikan dapat memprediksi dampak kesehatan dan lingkungan yang
ditimbulkan.
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Pengertian Metode Hitung Cawan

Prinsip metode hitungan cawan adalah jika sel mikroba yang masih
hidup ditumbuhkan pada media agar maka sel mikroba tersebut akan
berkembang biak dan membentuk koloni yang dapat dilihat langsung dengan
mata tanpa menggunakan mikroskop.2
Metode hitungan cawan merupakan cara yang paling sensitif karena
memiliki keuntungan, yaitu
1. Hanya sel yang masih hidup yang dihitung,
2. Beberapa jenis mikroba dapat dihitung sekaligus, dan
3. Dapat digunakan untuk isolasi serta identifikasi mikroba karena koloni
yang terbentuk mungkin berasal dari satu sel mikroba dengan
penampakan pertumbuhan spesifik.3,4
Sedangkan kekurangan dari metode hitungan cawan, antara lain:
1. Hasil perhitungan tidak menunjukkan jumlah sel mikroba yang
sebenarnya karena beberapa sel yang berdekatan mungkin akan
membentuk satu koloni.
2. Medium dan kondisi yang berbeda mungkin menghasilkan nilai yang
berbeda.
3. Mikroba yang ditumbuhkan harus dapat tumbuh pada medium padat dan
membentuk koloni yang kompak dan jelas tidak menyebar.
4. Memerlukan persiapan dan waktu inkubasi beberapa hari sehingga
pertumbuhan koloni dapat dihitung.4
Beberapa hal yang perlu diperhatikan dalam proses perhitungan
mikroorganisme dengan metode hitung cawan atau TPC, antara lain:
1. Cawan yang dianalisis adalah cawan dengan jumlah koloni 30-300.
2. Jika beberapa koloni membentuk kumpulan koloni besar, maka dapat
dihitung sebagai satu koloni.
3. Deretan koloni membentuk garis tebal, dihitung satu koloni.
113
114
Metode hitungan cawan dapat dibedakan atas dua cara, yaitu

1. Metode Tuang/Penuangan (Pour Plate)
Pada pengenceran dimasukkan kedalam cawan petri, sebaiknya
waktu antara dimulainya pengenceran sampai menuangkan ke dalam
cawan petri, dilakukan dengan cepat. Kemudian ke dalam cawan petri
tersebut dimasukkan agar cair steril yang telah didinginkan sampai 50ºC
sebanyak kira-kira 15 ml. Selama penuangan medium, tutup cawan tidak
boleh dibuka terlalu lebar untuk menghindari terjadi kontaminasi dari
luar. Setelah penuangan cawan petri segera digerakkan secara hati-hati
agar sel-sel mikroba menyebar secara merata. Hal ini dilakukan dengan
gerakan melingkar atau gerakan seperti angka delapan, setelah agar
memadat, cawan-cawan tersebut dapat diinkubasikan di dalam inkubator
dengan posisi terbalik. Inkubasi dilakukan pada suhu dan waktu tertentu
sesuai dengan jenis mikroba yang akan dihitung. Medium agar yang
digunakan juga disesuaikan dengan jenis mikroba yang akan
ditumbuhkan. Selama inkubasi, sel-sel yang masih hidup akan tumbuh
dan membentuk koloni yang dapat terlihat langsung oleh mata.5
Setiap akhir masa inkubasi, koloni yang terbentuk dihitung. Setiap
koloni dapat dianggap berasal dari satu sel yang membelah menjadi
banyak sel meskipun mungkin juga berasal dari lebih dari satu sel yang
letaknya berdekatan. Perhitungan jumlah koloni dapat dilakukan dengan
menggunakan “Quebec Colony Counter”.4
2. Metode Sebar/Permukaan (Surface/Spread Plate)
Pada metode permukan, agar steril dituangkan kedalam cawan petri
steril dan dibiarkan membeku. Setelah membeku dengan sempurna
kemudian sebanyak 0,1 ml contoh yang telah diencerkan dipipet pada
permukaan agar tersebut. Sebuah batang gelas melengkung (hockey stick)
dicelupkan kedalam alcohol 95 % dan dipijarkan. Setelah dingin, batang
gelas tersebut digunakan untuk meratakan contoh diatas medium agar
dengan cara memutarkan cawan petri di atas meja, kemudian diinkubasi.5
115
B. Pengertian Mikroorganisme Pada Tangan

Mikroba yang bukan merupakan flora normal tubuh dapat ditemukan
dari penularan melalui udara, vektor seperti nyamuk dan kontak langsung
dengan orang yang terinfeksi. Tangan merupakan bagian tubuh yang paling
sering kontak dengan dunia luar dan digunakan sehari-hari untuk melakukan
aktivitas. Hal ini sangat memudahkan terjadinya kontak dengan
mikroorganisme dan mentransfernya ke objek lain.
Jenis bakteri yang banyak terdapat pada permukaan tangan tenaga
medis antara lain Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus aureus,
Staphylococcus epidermidis, Serratia liquefacients, Serratia marcescens,
Pseudomonas aeruginosa, Enterobacter aerogenes, Citrobacter freundii,
Salmonella sp, Basillus cereus, dan Neisserria mucosa.
Gambar 2.1 Hasil Identifikasi Bakteri

Pada gambar di atas, bakteri yang paling banyak ditemukan pada
permukaan tangan yaitu Staphylococcus aureus, disusul Staphylococcus
epidermidis, kemudian Serratia marcescens.
Penelitian menunjukkan bahwa bakteri yang ditemukan pada tangan
tenaga medis dan paramedis adalah Staphylococcus epidermidis,
Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus aureus, Serratia liquefacients,
Serratia marcescens, Pseudomonas aeruginosa, Enterobacter aerogenes,
Citrobacter freundii, Salmonella sp, Basillus cereus, dan Neisserria mucosa.
Bakteri yang terdapat pada tangan setiap orang berbeda-beda, tergantung
116
lokasi yang sering dikunjungi, pekerjaan dan jenis benda-benda yang sering
terjadi kontak langsung dengan tangan.6
Flora normal yang terdapat pada kulit tangan antara lain Staphylococcus
epidermidis, micrococcus, Streptococcus alpha dan nonhemolyticus, difteroid
aerob dan anaerob. S. epidermidis merupakan flora normal yang terdapat pada
kulit manusia, saluran napas seperti hidung, nasofaring dan orofaring.7 Jika S.
epidermidis berpindah ke tempat lain, dapat menyebabkan infeksi.
C. Peraturan yang Berkaitan Dengan Praktikum

Penetapan standar baku maksimum cemaran mikrioorganisme/mikroba
pada bahan konsumsi yaitu merujuk pada Peraturan Kepala Badan Pengawas
Obat Dan Makanan Republik Indonesia Nomor Hk.00.06.1.52.4011 Tentang
Penetapan Batas Maksimum Cemaran Mikroba Dan Kimia Dalam Makanan.
Peraturan ini menjelaskan jenis dan cemaran maksimum mikroba pada
berbagai produk makanan, jenis dan cemaran maksimum mikotoksin pada
berbagai produk makanan, pelanggaran, cara pengawannya.8
D. Dampak Terhadap Kesehatan dan Lingkungan

Mikroorganisme dapat mencemari lingkungan, salah satunya sumber air
bersih. Sumber air bersih yang terkontaminasi bakteri patogen dapat
menyebabkan infeksi pada organisme yang menggunakan air bersih tersebut.
Flora normal yang habitatnya pada bagian tertentu pada permukaan
tubuh jika berpindah pada bagian lain yang bukan habitatnya termasuk
tangan, dapat menyebabkan infeksi. S.aureus yang jumlahnya melebihi 106
per gram dapat menimbulkan toksin yang dapat menyebabkan infeksi pada
kulit.9 Jika S.aureusmenyebar luas dan terjadi bakteremia, dapat terjadi
endokarditis, osteomielitis hematogen akut, meningitis atau infeksi paru, dan
sepsis pada neonatus.7 S. marcescens yang masuk ke dalam aliran darahdan
sistem pernafasan, dapat menyebabkan abses paru, empisema, meningitis,
ISK, endokarditis, septic arthritis, osteomyelitis, peritonitis, sinusitis dan
septicaemia.10 Salmonella sp dapat menimbulkan gastroenteritis.11
117
Salah satu cara untuk mencegah terjadinya persebaran bakteri dengan

jumlah banyak yaitu dengan mencuci tangan. Cuci tangan dapat menurunkan
jumlah kuman di tangan hingga 58%.12 Hasil penelitian menunjukkan bahwa
cuci tangan dengan air mengalir saja tanpa menggunakan antiseptic
meningkatkan jumlah koloni kuman 53,8% dari jumlah semula.13
E. Faktor-faktor yang Mempengaruhi

Beberapa faktor yang dapat mempengaruhi praktikum metode hitung
cawan, diantaranya:
1. Udara
Udara yang masuk ke dalam cawan selama melakukan proses paktikum
penanaman dapat berpengaruh terhadapa jumlah bakteri yang dihitung
karena terjadi kontaminasi bakteri lain.
2. Suhu
Suhu saat pelaksanaan inkubasi mempengaruhi pertumbuhan jumlah
bakteri.
3. Waktu/durasi
Agar/PCA dalam suhu ruangan cepat membeku. Jika penuangan PCA
terlalu lama, PCA akan cepat membeku dan persebaran biakan bakteri
dalam media kurang.
4. Kelembapan
Kelembapan mempengaruhi pertumbuhan bakteri.
5. Koloni yang terbentuk
Terkadang sulit membedakan antara mana koloni yang masih terpisah
dengan koloni yang sedah bergabung membentuk koloni besar. selain itu,
koloni yang kecil juga sulit untuk dihitung karena bentuknya yang terlalu
kecil.
Jumlah bakteri pada tangan tergantung oleh beberapa faktor yaitu:
1. Waktu sejak terakhir cuci tangan, mempengeruhi komunitas bakteri di
tangan.
2. Derajat kontaminasi sesuai dengan kontak.
118
3. Derajat kerentanan seseorang terhadap mikroorganisme. Semakin tinggi

derajat kerentanan seseorang terhadap mikroorganisme maka akan
semakin banyak jumlah mikroorganisme yang singgah.14
BAB III
METODE PRAKTIKUM
A. Waktu Praktikum
Praktikum perhitungan mikroorganisme dengan mengguanakan metode
hitung cawan atau Total Plate Count (TPC) dilaksanakan pada hari Jumat
tanggal 22 April 2016, pukul 08.30 WIB.
B. Tempat Praktikum
Praktikum perhitungan mikroorganisme dengan mengguanakan metode
hitung cawan atau Total Plate Count (TPC) dilaksanakan di Laboratorium
Terpadu Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Diponogero.
Laboratorium Terpadu Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas
Diponogero tepatnya berada di Lantai 3 Gedung D Kampus Fakultas
Kesehatan Universitas Diponegoro.
C. Alat
Alat-alat yang digunakan dalam melakukan perhitungan
mikroorganisme dengan menggunakan metode hitung cawan atau Total Plate
Count (TPC), sebagai berikut.
1. Cawan petri 3 buah
2. Senter/lashlight/cahaya luar ruangan
3. Spidol hitam non-permanen
D. Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam melakukan perhitungan
mikroorganisme dengan menggunakan metode hitung cawan atau Total Plate
Count (TPC), sebagai berikut.
1. PCA yang telah memadat
2. Biakan mikroorganisme dalam PCA
119
120
E. Teknik Sampling
Sampel yang digunakan merupakan biakan mikroorganisme yang
berasal dari permukaan tangan penjamah. Pengambilan sampel dilakukan
dengan cara metode swap. Biakan mikroorganisme telah ditanam pada
praktikum “Isolasi dan Inokulasi Mikroorganisme”, yaitu pada hari Selasa
tanggal 19 April 2016. Sampel yang akan digunakan telah diinkubasi selama
3 hari dan diambil langsung dari inkubator.

Perhitungan jumlah mikroorganisme dilakukan dengan menggunakan
metode hitung cawan atau TPC (Total Plate Count). Prinsip metode hitungan
cawan adalah jika sel mikroba yang masih hidup ditumbuhkan pada media
agar maka sel mikroba tersebut akan berkembang biak dan membentuk koloni
yang dapat dilihat langsung dengan mata tanpa menggunakan mikroskop.
Metode hitungan cawan merupakan cara yang paling sensitif karena
memiliki keuntungan, yaitu hanya sel yang masih hidup yang dihitung,
beberapa jenis mikroba dapat dihitung sekaligus, dan dapat digunakan untuk
isolasi serta identifikasi mikroba karena koloni yang terbentuk mungkin
berasal dari satu sel mikroba dengan penampakan pertumbuhan spesifik.
Beberapa hal yang perlu diperhatikan dalam proses perhitungan
mikroorganisme dengan metode hitung cawan atau TPC, antara lain:
1. Cawan yang dianalisis adalah cawan dengan jumlah koloni 30-300.
2. Jika beberapa koloni membentuk kumpulan koloni besar, maka dapat
dihitung sebagai satu koloni.
3. Deretan koloni membentuk garis tebal, dihitung satu koloni.
Metode hitung cawan yang digunakan pada praktikum ini adalah
metode tuang/penuangan (pour plate). Pengenceran dimasukkan kedalam
cawan petri. Kemudian ke dalam cawan petri tersebut dimasukkan agar cair
steril yang telah didinginkan, selama penuangan medium, tutup cawan tidak
boleh dibuka terlalu lebar untuk menghindari terjadi kontaminasi dari luar.
Setelah penuangan cawan petri segera digerakkan secara hati-hati agar sel-sel
121
mikroba menyebar secara merata. Hal ini dilakukan dengan gerakan

melingkar atau gerakan seperti angka delapan, setelah agar memadat, cawan-
cawan tersebut dapat diinkubasikan di dalam inkubator dengan posisi
terbalik. Setiap akhir masa inkubasi, koloni yang terbentuk dihitung. Setiap
koloni dapat dianggap berasal dari satu sel yang membelah menjadi banyak
sel meskipun mungkin juga berasal dari lebih dari satu sel yang letaknya
berdekatan. Perhitungan jumlah koloni dapat dilakukan dengan menggunakan
“Quebec Colony Counter“.
Jumlah koloni dalam cawan dilaporkan berdasarkan pedoman pelaporan
SPC (Standart Plate Count). Terdapat beberapa cara dalam pelaporan SPC.
Pertama, hasil yang dilaporkan terdiri dari 2 angka, yaitu angka pertama dan
kedua. Jika angka ketiga ≥5, harus dibulatkan 1 angka lebih tinggi pada angka
kedua.
Tabel 3.1 Perhitungan Koloni Bakteri (SPC)
Jumlah Koloni
Per-pengenceran Standart Plate Count Keterangan
10-2 10-3 10-4
234 28 1 2,3 x 104 28 dan 1 < 30
700 125 10 1,3 x 105 700 > 300; 10 < 30
TBUD TBUD 197 2,0 x 106 TBUD > 300
Kedua, jika semua pengenceran menghasilkan <30 koloni, maka hanya
jumlah koloni pengenceran terendah yang dihitung. Hasil dilaporkan sebagai
< 30 x besarnya pengenceran, jumlah sebenarnya dicantumkan dalam tanda
kurung.
Tabel 3.2 Cara Hitung Cawan Simplo Menghasilkan < 30 Koloni
Jumlah Koloni
Standart Plate
Per-pengenceran Keterangan
Count
10-2 10-3 10-4
< 3,0 x 103
16 1 0 3
Hitung pengenceran 10-2
(1,6 x 10 )
122
Ketiga, jika semua pengenceran menghasilkan > 300 koloni, maka

hanya jumlah koloni pengencaran tertinggi dihitung (menghitung ¼ bagian
cawan) kemudian dikalikan 4. Hasil dilaporkan sebagai > 300 x besarnya
pengenceran, jumlah sebenarnya dicantumkan dalam tanda kurung.
Tabel 3.3 Cara Hitung Cawan Simplo Menghasilkan > 300 Koloni
Jumlah Koloni
Per-pengenceran Standart Plate Count Keterangan
10-2 10-3 10-4
> 3,0 x 106 Hitung pengenceran
TBUD TBUD 355
(1,6 x 106) 10-4
> 3,0 x 105 Hitung pengenceran
TBUD 325 20
(1,6 x 105) 10-3
Keempat, jika cawan dari 2 tingkat pengenceran menghasilkan koloni

antara 30 – 300, dan perbandingan antara hasil tertinggi dan terendah dari
kedua pengenceran ≤ 2, tentukan nilai rata-rata kedua nilai dengan
memperhitungkan pengencerannya. Jika perbandingan tersebut > 2, yang
dilaporkan hanya hasil terkecil.
Tabel 3.4 Cara Hitung Cawan Simplo Menghasilkan Antara 30 – 300 Koloni
Jumlah Koloni
Standart Plate
Count
10-2 10-3 10-4
Hitung rata-ratanya karena
293 41 4 3,5 x 104
41000/29300 = 1,4 (< 2)
Hitung pengenceran 10-2
140 32 2 1,4 x 104
karena 32000/14000 = 2,3
123
Tabel 3.5 Cara Hitung Cawan Duplo

Jumlah Koloni
Standart Plate
Count
10-2 10-3 10-4
175 16 1 Rata-rata dari pengenceran
1,9 x 104
208 17 0 10-2
Idem krn perbandingan antara
138 42 2
1,5 x 104 pengenceran 10-3 dan 10-2
162 43 4
adalah 2,4
Rata-rata dari 10-3 dan 10-2
290 36 4
3,1 x 104 krn perbandingan keduanya
280 32 1
1,2
291 36 4 Rata-rata dari pengenceran
3,0 x 104
305 32 1 10-2 meskipun 305 > 300
124
G. Prosedur Kerja
3 cawan petri berisi sampel dan biakan mikroorganisme pengenceran
berbeda (10-3; 10-4; dan 10-5) yang telah diinkubasi 3 hari pada suhu 30-
320C diambil dari inkubator.
Kertas buram pembungkus masing-masing cawan dibuka.
Masing-masing cawan digambar vertikan-horizontal dengan spidol,

sehingga tampak 4 bagian pada cawan.
Mikroorganisme dihitung pada salah satu bagian dengan cara ditantai

dengan spidol dan dibantu oleh penerangan senter.
Hasil perhitungan salah satu bagian cawan dikali 4 agar didapat jumlah
mikroorganisme total dalam cawan.
Jumlah total mikroorganisme setiap cawan dicatat dan dilaporkan sesuai

pedoman pelaporan SPC.
Gambar 3.1 Skema Uji Hitung Cawan

BAB IV
A. Hasil Pengamatan
Berikut merupakan hasil pengamatan perhitungan mikroorganisme
dengan menggunakan metode hitung cawan (TPC) pada sampel permukaan
tangan :
Tabel 4.1 Hasil Hitung Cawan
Jumlah Koloni
“Standar Plate
Perpengenceran Keterangan
Count
10-3 10-4 10-5
> 3,0 x 107
TBUD TBUD 836 7
Hitung pengenceran 105
(8,4 x 10 )
Tabel di atas merupakan pelaporan SPC standar ke-3. Jumlah koloni

pada pengenceran 103, 104, dan 105 lebih dari 300 koloni (sesuai standart
pelaporan SPC), maka jumlah koloni yang dilaporkan pada pengenceran
tertinggi, yaitu pengenceran 105. Jumlah koloni pada pengenceran kelima
didapat 863 koloni, dilaporkan > 3,0 x > . Sedangkan nilai aslinya yaitu 8,4 x
107.
B. Pembahasan
Dari pengamatan cawan berisi agar yang mengandung sampel biakan
mikroorganisme permukaan tangan yang telah diinkubasi selama 3x24 jam di
dapatkan hasil bahwa jumlah koloni bakteri dari pengenceran 10 -3, 10-4, dan
10-5 tidak bisa dihitung karena jumlah koloni bakteri sudah lebih dari 300.
TBUD (Tidak Bisa Untuk Diukur) merupakan istilah dalam pelaporan SPC
yang jumlah koloninya lebih dari 300 koloni. Hasil perhitungan Standart
Plate Count adalah >3,0 x 107, dengan nilai asli 8,4 x 107. Pengenceran yang
dihitung pada pengenceran tertinggi (10-5).
125
126
Peraturan Kepala Badan POM No. HK.00.06.1.52.4011 tahun 2009

tentang Penetapan Batas Maksimum Cemaran Mikroba Dan Kimia dalam
Makanan menetapkan bahwa standart cemaran mikroba pada makanan dan
minuman rata-rata sebesar x.104 koloni/ml.8 Sehingga dapat disimpulkan
bahwa tidak layak mengonsumsi makanan dan minuman langsung
mengguanakan tangan tanpa mencuci tangan terlebih dahulu. Mengonsumsi
makanan menggunakan tangan tanpa mencuci tangan terlebih dahulu dapat
menimbulkan beberapa infeksi, terutama infeksi saluran pencernaan. Selain
itu, kontak langsung permukaan tangan dengan makanan dapat menyebabkan
kontaminasi pada makanan. Cuci tangan dapat menurunkan jumlah kuman di
tangan hingga 58%.12 Hasil penelitian menunjukkan bahwa cuci tangan
dengan air mengalir saja tanpa menggunakan antiseptic meningkatkan jumlah
koloni kuman 53,8% dari jumlah semula.13
Prinsip pengenceran pada perhitungan koloni bakteri adalah semakin
besar pengenceran, maka semakin rendah jumlah bakteri yang ditemukan
dalam cawan. Jumlah koloni bakteri berbanding terbalik dengan tingkat
pengenceran. Hal tersebut sesuai dengan praktikum yang telah dilakukan.
Adapun faktor – faktor kesalahan selama praktikum yang mungkin
terjadi meliputi,
1. Terjadinya kontaminasi melalui udara yang masuk ke dalam cawan selama
melakukan proses paktikum penanaman.
2. PCA dalam suhu ruangan cepat membeku, sehingga persebaran biakan
bakteri dalam media saat penanaman kurang merata.
3. Praktikan kurang cermat dalam menghitung jumlah koloni dalam awan,
sehingga terjadi kesalahan perhitungan.
4. Perhitungan bakteri dilakukan secara manual mengandalkan bantuan sinar
matahari, bukan alat colony counter karena pada saat praktikum tejadi
gangguan listrik.
5. Praktikan sulit membedakan antara mana koloni yang masih terpisah
dengan koloni yang sudah bergabung membentuk koloni besar dan untuk
koloni yang kecil juga sulit dihitung karena bentuknya yang terlalu kecil.
BAB V
PENUTUP
A. Kesimpulan
Berdasarkan praktikum metode hitung cawan yang telah dilakukan,
dapat disimpulkan bahwa:
1. Jumlah koloni bakteri pada sampel permukaan tangan berdasarkan
pelaporan Standart Plate Count adalah >3,0 x 107, dengan nilai asli 8,4 x
107, dan pengenceran yang dihitung pada pengenceran tertinggi (10-5).
2. Peraturan Kepala Badan POM No. HK.00.06.1.52.4011 tahun 2009
tentang Penetapan Batas Maksimum Cemaran Mikroba Dan Kimia dalam
Makanan menetapkan bahwa standart cemaran mikroba pada makanan dan
minuman rata-rata sebesar x.104 koloni/ml lebih kecil dibandingkan
dengan jumlah bakteri pada permukaan tangan yaitu >3,0 x 107.Sehingga,
tidak layak mengonsumsi makanan dan minuman langsung mengguanakan
tangan tanpa mencuci tangan terlebih dahulu.
3. Jumlah koloni bakteri berbanding terbalik dengan tingkat pengenceran.
Hal tersebut sesuai dengan praktikum yang telah dilakukan.
B. Saran
1. Lebih dipastikan kembali semua alat yang akan digunakan dalam
praktikum dapat digunakan.
2. Praktikan harus lebih teliti dalam proses perhitungan koloni bakteri pada
cawan.
3. Setelah diketahui jumlah bakteri yang terdapat pada permukaan tangan,
diharapkan praktikan dapat lebih menjaga higiene diri pribadi
.
127
DAFTAR PUSTAKA
1. Yuwono. Mikrobiologi Kedokteran [online] 2012; Tersedia dari URL:

http://eprints.unsri.ac.id/1786/2/Mikrobiol2012_OK.pdf. Diakses pada 4 Juni
2016.
2. Dwidjoseputro. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta: Djambatan; 1994.
3. Pangestuti, Dina Rahayuning, Zen Rahfiludin dan Sulistyawati. Petunjuk
Praktikum Keamanan Pangan. Edisi Kedua. Semarang: Laboratorium
Terpadu Kesehatan Masyarakat Universitas Diponegoro; 2015.
4. Pelczar, M.J., Chan, E.C.S. Dasar-dasar mikrobiologi. Jakarta: UI Press;
2007.
5. Halubangga, N. Hitungan Cawan [online] 2014; Tersedia dari URL:
http://eprints.ung.ac.id/3357/5/2013-1-48401-821310022-bab2
30072013070923.pdf. Diakses pada 4 Juni 2016.
6. Pratami, Hema A., Ety Apriliana, dan Prambudi Rukmono. Identifikasi
Mikroorganisme Pada Tangan Tenaga Medis dan Paramedis di Unit
Perinatologi Rumah Sakit Abdul Moeloek Bandar Lampung. MAJORITY
(Medical Journal of Lampung University). 2014; 5(2): 85-94.
7. Jawetz, Melnick, and Adelberg’s. Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta: Penerbit
Salemba Medika; 2005.
8. Badan Pengawas Obat dan Makanan RI. Peraturan Kepala Badan Pengawas
Obat dan Makanan Republik Indonesia Nomor HK.00.06.1.52.4011 tentang
Penetapan Batas Maksimum Cemaran Mikroba dan Kimia Dalam Makanan.
Jakarta: Badan POM RI; 2009.
9. Snyder, Peter. Why Gloves are not The Solution to The Fingertip Washing
Problem. Hospitaly Institute of Technology and Management. St. Paul, MN;
2001.
10. Wilfert JN, Barrett FF, Kass EH. Bacteremia due to Sermtia marcescens. N
Engl J Med 1968; 279: 286-289.
128
129
11. Musadad, Anwar dan A. Lubis. Kejadian infeksi nosokomial saluran

pencernaan di rumah sakit di DKI Jakarta. Bul. Penelitian Kesehatan. 1992;
20(2).
12. Girou, E, Loyeau,S, Legrand, P, Oppein,F, Buisson, CB. Efficacy of
Handrubbing with an Alcohol Based Solution versus Standard Hand washing
with Antiseptic Soap: randomised clinical trial. BMJ 2002; 325: 362-5
13. Wulandari, Suci. Pengaruh Cara Mencuci Tangan Terhadap Perubahan
Jumlah Koloni Kuman Pada Paramedis di RSU Kota Semarang. [Skripsi]
Jurnal Fkm Undip E2A096053. 2001.
14. Fierer, N., Costello EK, Lauber CL, Hamady M, Gordon JI, et al. Bacterial
variation in human body habitats across space and time. 2009; 326: 1694–
1697.
LAMPIRAN
A. Dokumentasi Praktikum Hitung Cawan
Proses Penghitungan Bakteri dengan Metode Hitung Cawan
Hasil Hitung Cawan
130
131
B. Lembar Pengesahan Praktikum Hitung Cawan Individu

132
C. Laporan Praktikum Hitung Cawan Individu Bagian Hasil

Laporan Praktikum Keamanan Pangan PDF

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Laporan Praktikum Keamanan Pangan PDF

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

LAPORAN PRAKTIKUM

EUIS NOVI SOLIHATI 25010113120082

UMI ALFIANI 25010113120104

ELISA MAHARANI 25010113120112

ACHMAD RIZKI AZHARI 25010113140258

CRISTIN OKTAVIANA G.Y.A 25010113140266

TITI HAPSARI 25010113140357

ILYA FAROKHA RIZQYANA 25010113130387

AGUSTINA RATRI MAHARANI 25010113130416

FAKULTAS KESEHATAN MASYARAKAT

1. Judul Kegiatan : Praktikum Keamanan Pangan

Semarang, 10 Juni 2016

Kepala Laboratorium Bagian Dosen Pembimbing/Penguji

Yusniar Hanani Darudianti, STP, M.Kes Dr.Dra. Sulistiyani, M.Kes.

NIP. 197109091995032001 NIP. 196809111993032013

Kordinator Laboratorium Terpadu

Ir. Laksmi Widajanti, M.Si

Semoga laporan praktikum ini bisa bermanfaat bagi pembaca pada

Semarang, 10 Juni 2016

HALAMAN JUDUL ......................................................................................... i

Parameter I Pengenalan Alat & Teknik Pengambilan Sampel Secara Aseptik

BAB I PENDAHULUAN ................................................................................... 1

BAB II TINJAUAN PUSTAKA......................................................................... 3

BAB III METODE PRAKTIKUM ..................................................................... 6

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................ 8

BAB V PENUTUP .............................................................................................. 16

DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 17

Parameter II Isolasi, Inokulasi, dan Morfologi Bakteri

BAB I PENDAHULUAN ................................................................................... 26

BAB II TINJAUAN PUSTAKA......................................................................... 28

BAB III METODE PRAKTIKUM ..................................................................... 37

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................ 46

BAB V PENUTUP .............................................................................................. 51

DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 52

Parameter III Formalin

BAB I PENDAHULUAN ................................................................................... 59

BAB II TINJAUAN PUSTAKA......................................................................... 61

BAB III METODE PRAKTIKUM ..................................................................... 65

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................ 68

BAB V PENUTUP .............................................................................................. 71

DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 72

BAB I PENDAHULUAN ................................................................................... 77

BAB II TINJAUAN PUSTAKA......................................................................... 79

BAB III METODE PRAKTIKUM ..................................................................... 82

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................ 84

BAB V PENUTUP .............................................................................................. 86

DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 87

BAB I PENDAHULUAN ................................................................................... 92

BAB II TINJAUAN PUSTAKA......................................................................... 94

BAB III METODE PRAKTIKUM ..................................................................... 98

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................ 101

BAB V PENUTUP .............................................................................................. 105

DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 106

LAMPIRAN ........................................................................................................ 108

Parameter VI Metode Hitungan Cawan

BAB I PENDAHULUAN ................................................................................... 111

BAB II TINJAUAN PUSTAKA......................................................................... 113

BAB III METODE PRAKTIKUM ..................................................................... 119

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................ 125

BAB V PENUTUP .............................................................................................. 127

DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 128

LAMPIRAN ........................................................................................................ 130

Parameter I Pengenalan Alat & Teknik Pengambilan Sampel Secara Aseptik