PENDAHULUAN
Diare masih menjadi masalah satu pilihan masyarakat. Air minum isi
kesehatan masyarakat di negara
berkembang seperti di Indonesia. Pada
tahun 2013 insiden dan period prevalence
diare untuk seluruh kelompok umur di
Indonesia adalah 3,5% dan 7,0%.
Berdasarkan data surveilans terpadu
penyakit berbasis puskesmas Provinsi
Kalimantan Tengah tahun 2013, kejadian
diare masih tinggi yaitu menduduki urutan
ketiga, dengan insiden dan period
prevalence diare 2,6% dan 5,4%.
Berdasarkan data dari Dinas Kesehatan
Kota Palangka Raya pada tahun 2013
kasus diare di wilayah kerja Puskesmas
Menteng tercatat sebesar 39%.
( Riskesdas, 2013)
Diare merupakan kondisi dimana
seseorang buang air besar dengan
konsistensi lembek atau cair, dan
frekuensinya lebih sering (lebih dari tiga
kali) dalam sehari.5Salah satu penyebab
diare adalah mengkonsumsi minuman
yang terkontaminasi bakteri Escherichia
coli (E.coli).
Escherichia coli (E.coli) merupakan
jenis bakteri Coliform fecal yang secara
normal ada dalam saluran pencernaan
manusia. Dalam keadaan tertentu, E.coli
dapat menyebabkan gangguan saluran
pencernaan jika seseorang mengkonsumsi
makanan atau minuman yang telah
terkontaminasi. (Imam Supardi, 1999)
Keberadaan bakteri Coliform di
dalam air minum merupakan indikator
biologis terkontaminasinya sumber air
terhadap feses manusia atau hewan.7
Berdasarkan Surat Keputusan Menteri
Kesehatan 492/MENKES/PER/IV/2010
nilai MPN Coliform dan jumlah koloni E.
coli diperkenankan ada dalam air minum
adalah tidak ada sama sekali.8 Keberadaan
mikroorganisme dalam air minum menjadi
indikator rendahnya kualitas air minum.
Air minum isi ulang menjadi salah
ulang dapat diperoleh di depot – depot
dengan harga yang terjangkau. Karena itu
banyak rumah tangga yang beralih pada
layanan ini. Keperluan rumah tangga yang
tinggi terhadap air minum menyebabkan
usaha depot air minum isi ulang
bermunculan.
Depot air minum adalah usaha
industri kecil yang melakukan proses
pengolahan air baku menjadi air minum
dan menjual langsung kepada konsumen.
Saat ini usaha depot air minum isi ulang
yang memakai sumber air di kawasan
Tangkiling sedang berkembang di kota
Palangka Raya. Pada wilayah kerja
Puskesmas Menteng, jumlah depot air
minum isi ulang yang memakai sumber air
dari kawasan Tangkling yang telah didata
pada tahun 2013 hingga 2014 adalah
sebesar sembilan belas depot.
Kebutuhan masyarakat yang tinggi
terhadap air minum isi ulang yang bersih
dan aman membuat banyak depot air
minum isi ulang yang memakai sumber air
kawasan Tangkiling sebagai sumber air
baku depot air minum isi ulang.
Berdasarkan hasil survei yang telah
dilakukan, terdapat enam sumber air
kawasan Tangkiling yang berbeda-beda,
terdiri dari enam sumber yang berasal dari
air tanah.
Meskipun depot air minum isi ulang
telah memiliki sistem untuk mengolah air
perbukitan Tangkiling, namun
kemungkinan kontaminasi pada saat
pengolahan air minum isi ulang masih bisa
terjadi. Hal itu bisa terjadi dari kualitas
sumber air kawasan Tangkiling, dan
kebersihan alat pengolahan air minum
yang digunakan.
Berdasarkan penelitian yang
dilakukan Noor Hujjatusnaini, kualitas
mikrobiologi depot air minum isi ulang
berbahan baku air tanah di daerah
perbukitan lebih baik daripada depot air
minum isi ulang berbahan baku air tanah
di daerah perkotaan.
Dari uraian di atas, maka perlu
dilakukan suatu penelitian untuk melihat
kualitas mikrobiologi dari sumber air
kawasan Tangkiling dan depot air minum
isi ulang di wilayah kerja Puskesmas
Menteng yang menggunakan sumber air
dari kawasan Tangkiling.
TUJUAN PENELITIAN
Tujuan dari penelitian ini adalah
mengetahui kualitas mikrobiologi depot air
minum isi ulang yang menggunakan
sumber air dari kawasan Tangkiling di
wilayah kerja Puskesmas Menteng dan
sumber air di kawasan Tangkiling.
Mengetahui kualitas mikrobiologi
kualitas depot air minum isi ulang yang
menggunakan sumber air dari kawasan
Tangkiling di wilayah kerja Puskesmas
Menteng berdasarkan Surat Keputusan
Menteri Kesehatan No.492 / MENKES /
PER/IV/2010.
Mengetahui kualitas mikrobiologi
sumber air di kawasan Tangkiling
berdasarkan Surat Keputusan Menteri
Kesehatan No.492 / MENKES / PER / IV /
2010.
Mengetahui perbandingan kualitas
mikrobiologi depot air minum isi ulang
yang menggunakan sumber air dari
kawasan Tangkiling di wilayah kerja
Puskesmas Menteng dengan sumber air di
kawasan Tangkiling berdasarkan nilai
MPN Coliform, Coliform fecal, dan
jumlah koloni Escherichia coli.
METODE PENELITIAN
Jenis Dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian
deskriptif komparasi eksploratif yang
bertujuan untuk mendeskripsikan kualitas
mikrobiologi sumber air kawasan
Tangkiling dan depot air minum isi ulang
pada depot yang memakai sumber air dari
kawasan Tangkiling di wilayah kerja
Puskesmas Menteng Kota Palangka Raya.
Tempat Dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di
Laboratorium Biologi Institut Agama
Islam Negeri Palangka Raya dalam jangka
waktu dua bulan pada bulan Mei sampa
Juli 2015.
Variabel Penelitian
Variabel penelitian ini adalah depot
air minum isi ulang, sumber air Kawasan
Tangkiling, nilai MPN Coliform, Coliform
fecal, dan Escherichia coli.
Alat dan Bahan
Alat : gelas ukur 10 ml, labu
Erlenmeyer, tabung reaksi, cawan petri,
beaker glass, pipet tetes, mikropipet,
inkubator, oven, hot plate dengan stiker
magnetik, neraca digital, autoklaf, kompor,
tabung Durham, Laminar Air Flow (LAF).
Bahan : sampel sumber air di
kawasan Tangkiling, sampel depot air
minum isi ulang, aquadest, medium Kaldu
Laktosa (beef extract, pepton, laktosa),
medium Brilliant Green Lactose Bile
Broth (serbuk BGLBB), medium Mac
Conkey Agar (serbuk MCA).
PROSEDUR PENELITIAN
Prosedur penelitian meliputi
pengambilan sampel, pembuatan medium
kaldu laktosa (KL), medium brilliant
Green Lactosa Bile Broth (BGLBB),
medium Mac Conkey Agar (MCA).
1. Sterilisasi Alat
Alat – alat yang digunakan dalam
penelitian ini harus disterilkan terlebih
dahulu. Tujuan dari sterilisasi alat alat ini
untuk mematikan semua mikroorganisme
yang terdapat di dalam alat yang
digunakan dalam penelitian. Seluruh alat
yang akan digunakan dicuci bersih dan
dikeringkan, setelah itu semua alat
dibungkus dengan Koran. Kemudian
semua alat tersebut dimasukkan ke dalam
oven sampai suhu menjadi 121oC selama ±
2 jam.
2. Pembuatan Medium Kaldu Laktosa
(KL)
Bahan yang digunakan dalam
pembuatan medium KL Beef extract 3
gram, Pepton 5 gram, Laktosa 5 gram,
Aquadest 100 ml. Seluruh bahan
dimasukkan ke dalam labu Erlenmeyer
250 ml, kemudian medium dipanaskan di
hotplate sambil diaduk secara terus
menerus dan perlahan-lahan sampai
medium larut homogen sempurna.
Sebanyak 6 ml medium kaldu laktosa
dimasukan ke dalam 9 tabung reaksi
kemudian memasukkan tabung durham
yang telah diisi medium kaldu laktosa
pada 9 tabung reaksi dalam posisi terbalik
(jangan sampai terdapat gelembung udara
pada dasar tabung durham). Seluruh
tabung reaksi yang berisi tabung durham
dan medium kaldu laktosa ditutup dengan
menggunakan kapas steril.
3. Pembuatan Medium Brilliant Green
Lactosa Bile Broth (BGLBB)
Bahan yang digunakan dalam
pembuatan medium Brilliant Green
Lactosa Bile Broth (BGLBB) adalahserbuk
BGLBB 40 gram aquadest 100 ml. Seluruh
bahan dimasukkan ke dalam labu
Erlenmeyer 250 ml, kemudian medium
dipanaskan di atas hotplate sambil diaduk
secara terus menerus dan perlahan-lahan
sampai medium larut homogen
sempurna.Sebanyak 6 ml medium BGLBB
dimasukan ke dalam 9 tabung reaksi
kemudian memasukkan tabung Durham
yang telah diisi medium BGLBB pada 9
tabung reaksi dalam posisi terbalik (jangan
sampai terdapat gelembung udara pada
dasar tabung durham).Seluruh tabung
reaksi yang berisi tabung Durham dan
medium BGLBB ditutup dengan kapas
steril.
4. Pembuatan Medium Mac Conkey Agar
(MCA)
Bahan yang digunakan Pembuatan
Medium Mac Conkey Agar (MCA) adalah
serbuk MCA 50 gram dan aquadest 100 ml
Seluruh bahan dimasukkan ke dalam labu
Erlenmeyer 250 ml, kemudian dipanaskan
di atas kompor listrik sambil diaduk secara
perlahan sampai semua medium larut
homogen. Sebanyak 15 ml medium MCA
yang telah larut homogen selanjutnya
dimasukkan ke dalam 3 cawan petri
dengan perlahan-lahan (diusahakan jangan
sampai terdapat gelembung pada
permukaan medium dalam cawan) Seluruh
medium MCA yang telah disiapkan
dibungkus dengan kertas sampul cokelat,
masing-masing kertas terdiri dari 3-4
cawan petri, kemudian diikat (disatukan)
dengan menggunakan tali kasur berwarna
putih.
5. Sterilisasi medium dan alat
Seluruh medium dan alat yang telah
disiapkan selanjutnya disterilisasi dengan
menggunakan autoklaf dan oven.
Sterilisasi medium KL, BGLBB, dan MCA
serta aquadest menggunakan autoklaf pada
suhu 1210C, sedangkan sterilisasi alat-alat
lain yang digunakan dalam penelitian
menggunakan oven kering pada suhu
1500C selama 2 jam.
6. Pengambilan Sampel
Pengambilan sampel dilakukan
dengan cara mengambil air dari keran air
siap minum dari masing – masing sampel
dengan menggunakan labu erlenmeyer
sebanyak 250 ml secara aseptis.
7. Pengujian Tiap Sampel Melalui Tahap
Pengenceran
Analisis sampel air dilakukan
dengan mengambil 1 ml sampel dari 100
ml sampel yang telah dikocok, kemudian
ditambahkan aquadest steril sebanyak 9 ml
sampai diperoleh tingkat pengenceran 10-1,
kemudian juga lakukan dengan tingkat
pengenceran 10-2, 10-3.
8. Uji Pendugaan
Selanjutnya diambil 1 ml dari
masing-masing unit tingkat pengenceran
dan dimasukkan kedalam masing-masing
tabung reaksi yang telah diisi dengan
medium KL dalam tabung Durham.
Kemudian diinkubasikan pada suhu 370C
selama 1-2 x 24 jam.
9. Uji Penegasan
Setelah melewati masa inkubasi
dan hasilnya positif yang ditandai dengan
adanya gelembung udara pada dasar
tabung Durham yang menunjukkan adanya
bakteri Coliform dalam sampel air.
Selanjutnya diambil 1 ml suspense sampel
dari masing-masing tabung reaksi yang
berisi medium KL, kemudian dimasukkan
kedalam masing-masing tabung reaksi
yang berisi medium BGLBB. Selanjutnya
diinkubasikan pada suhu 44,50C selama 1-
2 x 24 jam, kemudian dilakukan
pengamatan. Setelah masa inkubasi, bila
terdapat gelembung udara pada dasar
tabung Durham, berarti sampel air tersebut
positif mengandung bakteri Coliform
fecal.
10. Uji Kepastian
Suspensi dari masing-masing
tabung reaksi yang berisi medium BGLBB
yang menghasilkan gas pada dasar tabung
Durham diambil 0,1 ml sampel, kemudian
diinokulasikan secara aseptik ke atas
permukaan medium MCA. Selanjutnya,
diinkubasikan pada suhu 370C selama 1-
2x24 jam.
11. Analisis data
Kualitas mikrobiologi air diukur
berdasarkan metode MPN, yaitu uji
pendugaan, uji penegasan, dan uji
kepastian. Setelah diperoleh data hasil
terhadap sampel, maka selanjutnya data
akan dibandingkan dengan standar mutu
air minum menurut Keputusan Menteri
KesehatanNo.492/MENKES/PER/IV/2010
.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan penelitian yang telah
dilakukan pada 19 depot air minum isi
ulang yang memakai sumber air dari
kawasan Tangkiling yang berada di
wilayah kerja Puskesmas Menteng dan
sejumlah 6 sampel sumber air dari
kawasan Tangkiling, hasil pengujian
kualitas mikrobiologi berdasarkan pada
MPN Coliform, Coliform fecal dan
pertumbuhan Escherichia coli ( E.coli )
dari masing – masing depot air minum isi
ulang yang terdapat di wilayah kerja
Puskesmas Mentengdan sumber air dari
Kawasan Tangkilingdapat dilihat pada
hasil uji pendugaan, uji penegasan, dan uji
kepastian di bawah ini.
Uji Pendugaan dilakukan untuk
menilai adanya bakteri Coiform dengan
menggunakan medium KL, munculnya
gelembung pada tabung durham medium
KL menandakan bahwa terdapat bakteri
Coliform pada sampel yang diuji.
Gelembung yang timbul pada medium
disebabkan oleh kemampuan bakteri
Coliform dalam memfermentasi laktosa
yang terkandung dalam medium, proses
fermentasi laktosa yang terkandung dalam
medium, proses fermentasi laktosa dimulai
dengan perubahan laktosa menjadi alcohol
dan CO2 kemudian akan bereaksi dengan
air dan membentuk asam karbonat.
 Uji Penegasan dilakukan untuk
meilai bakteri Coliform fecal secara
Spesifik dengan menggunakan medium
BGLBB. Medium ini merupakan medium
selektif yang mengandung garam bile,
yang dapat menghambat pertumbuhan
bakteri gram positif, sehingga hanya
bakteri gram negative saja yang
memfermentasi laktosa dan membentuk
gas setelah mas inkubasi 1-2 x 24 jam
pada suhu 44,50C. Munculnya gelembung
pada medium BGLBB menandakan bahwa
terdapat bakteri Coliform fecal pada
sampel yang diuji. Nilai positif sampel
pada medium BGLBB menunjukkan
adanya reaksi bakteri yang dapat
menggunakan asetat sebagai sumber
karbon. Glukosa dan beberapa karbohidrat
lainnya dipecah menjadi piruvat, dan
fermentasi lebih lanjut menghasilkan
laktat, asetat dan format. Asam Format
oleh hidrogenliase dipecah menghasilkan
CO2 dan H2. (Imam Supardi, 1999)
Uji Kepastian dilakukan untuk
menilai ada atau tidak pertumbuhan
bakteri E.coli. Nilai positif ditandai dengan
koloni yang memilikki bentuk bulat dan
berwarna merah tua pada medium MCA.
Kemampuan E.coli fermentasi laktosa
menyebabkan penurunan pH, sehingga
mempermudah absorbsi Neutral red untuk
mengubah koloni menjadi merah,
sebagaimana tampak koloni E.coli pada
medium MCA.( Noor Hujjatusnaini, 2012)
Keterbatasan Penelitian
Keterbatasan pada penelitian ini
adalah keterbatasan jumlah alat yang
digunakan selama penelitian berlangsung
sehingga tidak bisa mengambil semua
sampel pada saat bersamaan, dan jarak
yang ditempuh pada saat pengambilan
sampel yang diambil saling berjauhan
sehingga mempengaruhi hasil penelitian.
Kesimpulan
1. Kualitas mikrobiologi kualitas depot air
minum isi ulang yang menggunakan
sumber air dari kawasan Tangkiling di
wilayah kerja Puskesmas Menteng tidak
sesuai dengan standar yang ditetapkan
Surat Keputusan Menteri Kesehatan
No.492/MENKES/PER/IV2010.
2. Kualitas mikrobiologi sumber air di
kawasan Tangkiling tidak sesuai standar
yang ditetapkan Surat Keputusan
Menteri Kesehatan No.492 /
MENKES/PER/IV/2010.
3. Kualitas mikrobiologi depot air minum
isi ulang yang menggunakan sumber air
dari kawasan Tangkiling di wilayah
kerja Puskesmas Menteng lebih rendah
dibandingkan dengan sumber air dari
kawasan Tangkiling.
Saran
1. Dapat dilakukan penelitian lebih lanjut
dengan melihat kualitas depot air
minum isi ulang dan sumber air
berdasarkan kualitas fisik dan kimia.
2. Dapat dilakukan penelitian lebih lanjut
dengan melihat kualitas depot air
minum isi ulang dan sumber air
terhadap bakteri lainnya yang bersifat
patogen.
3. Dapat dilakukan penelitian lebih lanjut
dengan metode selain dengan
menggunakan metode Most probable
number ( MPN )
Daftar Pustaka
1. Riskesdas. Hasil Riskesdas 2013.
Badan penelitian dan pengembangan
kesehatan. Kementerian Kesehatan RI;
2013
2. Surveilans terpadu penyakit berbasis
Puskesmas Provinsi Kalimantan
Tengah; 2013
3. Kasus diare yang ditangani menurut
jenis kelamin, kecamatan, dan
Puskesmas Kabupaten/Kota Palangka
Raya; 2013.
4. Ciesla WP, Guerrant RL. Infectious
Diarrhea. In: Wilson WR, Drew WL,
Henry NK, et al editors. Current
Diagnosis and Treatment in Infectious
Disease. New York: Lange Medical
Books; 2003. P.225-68
5. Fardiaz, Srikandi. Analisis
Mikrobiologi pangan. Bogor: Pusat
Antar Pangan dan Gizi;1993.h.160
6. Supardi, Imam dan Sukanto.
Mikrobiologi dalam pengelolaan dan
keamanan pangan. Bandung: Penerbit
Alumni;1999.h.64
7. Keputusan Menteri Kesehatan. Syarat –
syarat danj pengawasan kualitas air
minum
No.492/MENKES/PER/IV/2010, 2010
8. Data Depot Air Minum Dinas
Kesehatan Kota Palangka Raya; 2013-
2014
9. Noor Hujjatusnaini, Kelayakan
Konsumsi Minuman Ringan Di
Lingkungan Kampus STAIN
Palangkaraya berdasarkan kualitas
Mikrobiologi, Kimia, dan Fisik Air,
Laporan Penelitian Individu Dosen
STAIN Palangka Raya, November
2012.h.42
10. Imam Supardi dan Sukamto,
MIkrobiologi Dalam Pengolahan dan
Keamanan Pangan, Bandung:
Alumni, 1999 h.185