Genética

Ileana Rubio
Moodle: genetica
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UNIFESP

Tradução
 Genética
Ileana Rubio
Eucariontes X procariontes Moodle: genetica
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 Genética
Ileana Rubio
Estrutura de proteínas Moodle: genetica
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Proteína: moléculas que determinam a forma e a função biológica

Moléculas orgânicas com estrutura complexa e massa molecular elevada.

Polímero de aminoácidos (aa = monómeros)

Dipeptídeo: 2 moléculas de aminoácidos

Tripeptídeo: 3 moléculas de aminoácidos
Polipeptídeo: várias moléculas de aminoácidos
 Genética
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Estrutura de proteínas Moodle: genetica
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Ligação peptídica

N terminal C terminal
 Genética
Ileana Rubio
Níveis de estrutura protéica Moodle: genetica
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primária
terciária

secundária

αhélice
Quaternária
(homo ou hetero dímeros)

Folha pregada
 Genética
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Estrutura protéica Moodle: genetica
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Conformação tridimensional da proteína é definida pela

sequência de aa, estabilizada por interações não covalentes
Proteínas globulares (enzimas)- fibrosas (músculo)

Domínios protéicos- sítio ativo

 Genética
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Estrutura protéica Moodle: genetica
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*: possíveis alterações na estrutura

protéica devido à mutação A2215D.
H: hélix; C: coil; E: b-sheet.
 Genética
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O código genético Moodle: genetica
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• Não é superposto
aa1 aa2 aa3

Código
superposto

Ponto inicial

códon

Código não
superposto

aa1 aa2 aa3

 Genética
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O código genético Moodle: genetica
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• Não é superposto

• A leitura acontece desde um ponto inicial fixo até a ponta da

sequência codificante

• Três bases codificam um aminoácido. As trincas são chamadas de

codons (43=64)

• É redundante: alguns aminoácidos são especificados por mais de um

codon
 Genética
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O código genético Moodle: genetica
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Decifrando o código

RNAm sintético: nucleotídeos + enzima (polinucleotídeo fosforilase)

Primeiro RNAm: poliU= síntese de poli-Fenilalanina

H Gobind Khorana: prêmio Nobel (1968)

 Genética
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O código genético Moodle: genetica
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UNIFESP
 Genética
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O código genético Moodle: genetica
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 Genética
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O tRNA - Adaptador Moodle: genetica
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3’ OH

Sítio de ligação A
de aa, catalisado C
pela enzima C Haste
Aminoacil-tRNA 5’ aceptora
Sintetase (específica) de aa

T loop
D loop

Braço extra

Alça do
anticódon anticodon

C G U
G
Estrutura tridimencional: forma de L
C A mRNA

5’ códon para alanina Códons no mRNA são lidos 5’-3’

Anticódons são orientados e lidos no sentido
3’-5’
 Genética
Ileana Rubio
O tRNA - Adaptador Moodle: genetica
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Dois tRNA superpostos

Estrutura dos tRNA é similar mesmo com

cadeias de nucleotídeos diferentes

anticodon
 Genética
Ileana Rubio
Redundância do código genético Moodle: genetica
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1- Mais de um codon para um aa, tRNAs diferentes que levam aa iguais são os
tRNA isoaceptores CAC e CAU: HIS

2- Oscilação: paremeanto
frouxo do tRNA a
codon diferentes

Alça do anticódon

anticódon Posição oscilante

A G GG

U C C/U mRNA

códon
 Genética
Ileana Rubio
Redundância do código genético Moodle: genetica
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Pareamentos códon-anticódon
permitidos pelas regras de oscilação
 Genética
Ileana Rubio
Redundância do código genético Moodle: genetica
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Diferentes tRNA que podem servir de códon para

serina

Oscilação

Oscilação

Oscilação
 Genética
Ileana Rubio
A síntese protéica acontece nos Moodle: genetica
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ribossomos UNIFESP
 Genética
Ileana Rubio
A síntese protéica acontece nos Moodle: genetica
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ribossomos UNIFESP

rRNA proteínas subunidades Ribossomos

montados
Proteínas (31)

23S 5S
procariotos

2900 bases 120 bases 50S

16S 70S
1540 bases 30S
(21)
eucariotos

28S 5S
4800 bases 120 bases (50) 60S

80S
18S
(33) 40S
1900 bases
 Genética
Ileana Rubio
Os ribossomos Moodle: genetica
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Massa: 2/3 rRNA + 1/3 proteínas

3 sítios de ligação do tRNA

 Genética
Ileana Rubio
Os ribossomos NH3+ Moodle: genetica
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Centro
tRNA desasilado peptidiltransferase
Liberdado do
Sítio E

AAAU C G
5’ GGGUUUAGC 3’

E P A
Centro codificador
Movimento do ribossomo
Os ribossomos

Ativação do aa
 Genética
Ileana Rubio
Ativação do aminoácidos Moodle: genetica
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Processo de duas etapas

Aminoacil-tRNA Sintetase

AMP
 Genética
Ileana Rubio
Início da tradução em procariotos Moodle: genetica
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CÓDON INICIAL
Seqüência
Shine-Dalgarno

A G G A G G U A UG
5’ mRNA
U C C U C C A tRNA Met iniciador
Bactérias: N-formilmet

16S rRNA (30S)

Em bactérias, a complementaridade entre a ponta 3’ do rRNA

da subunidade 16S do ribossomo e a seqüência shine-
dalgarno do mRNA posiciona o códon AUG no sítio P
 Subunidade ribossômica 30S Genética
Ileana Rubio
Fatores de inicação Moodle: genetica
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IF1 UNIFESP

IF3
Início da tradução
em procariotos IF2-fMET-tRNA +mRNA

IF3
fMET
IF3: mantém a 30S dissociada
IF1 e IF2: garantem que o tRNA
IF2
iniciador se ligue ao sítio P
IF1
AUG

Complexo de iniciação 30S

Subunidade 50S

IF1+IF2

fMET

AUG

Complexo de iniciação 70S

 Genética
Ileana Rubio
Início da tradução cap AUG mRNA Moodle: genetica
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em eucariotos Met
Fatores de iniciação + GTP
Subunidade 40S
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Met-tRNA
Desenrola a fita e escanea o RNAm
AUG
eIF4 A,B,G ATP

Componentes de iniciação
Com subunidade 40S ADP+Pi
Met

AUG

Subunidade 60S

Fatores de
iniciação
Met

Em pro e eucariontes os fatores de

iniciação se dissociam antes de
iniciar o alongamento
AUG

Complexo de iniciação 80S

 Centro
Complexo peptidiltransferase
ternário EF-Tu

EF-Tu

E P A Aminoacil-tRNA
liga-se ao sítio A
Forma-se
Ligação peptídica
GTP

translocação EF-G

Alongamento
Pi

GDP
Aminoacil-
tRNA liga-se
ao sítio A

Sai tRNA do sítio E

 Genética
Ileana Rubio
Alongamento Moodle: genetica
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P A

P A

P A
P A
 Alongamento 1. Fatores de liberação
RF1,2,3 reconhecem
códons finalizadores
(UGA,UAA,UAG)
Término da UAA
E P A 2. RF1(UAA ou UAG);
tradução RF2 (UAA ou UGA); RF3
auxilia RF1 e 2

3. RF1 e 2 no sítio A, molécula

de água entra no centro da
peptidiltransferase e libera o
RF1 polipeptídeo e o tRNA no
UAA sítio P.
E P A

4. Subunidades ribossômicas
Clivagem da
Peptidil tRNA RF1 se separam
 Genética
Ileana Rubio
Poliribossomos Moodle: genetica
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Procariontes e
Eucariontes

Vários ribossomos traduzem

simultaneamente a mesma
molécua de RNA
 Genética
Ileana Rubio
Poliribossomos Moodle: genetica
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Associados ao RER em eucariontes

ou à membrana plasmática em bactérias
 Genética
Ileana Rubio
Moodle: genetica
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Diferenças entre a tradução de

Procarionte X Eucarionte
 Genética
Ileana Rubio
Eucariontes X procariontes Moodle: genetica
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PROCARIOTO – MONO OU POLICISTRÔNICO

RNAm procarioto

Cístron: segmento de DNA

EUCARIOTO - MONOCISTRONICO que codifica uma proteína ou
polipeptídeo

RNAm eucarioto
 Genética
Inibição por Antibióticos e Toxinas Ileana Rubio
Moodle: genetica
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Antibiótico: deve matar só o microrganismo

Alvos: ribossomos (diferentes)

Atuam em procariontes
Tetraciclina: liga-se ao sítio A, bloqueia a entrada do tRNA carregado
Neomicina: se liga perto do sítio A, introduz erro na tradução
Cloranfenicol: bloqueia a formação da ligação peptídica
Estreptomicina: liga-se a subunidade menor inibe a iniciação
Eritromicina: inibe a translocação

Atuam em procariontes e eucariontes

Puromicina: entra no sítio A, foram ligação peptídica com o aa do tRNA do
sitio P mas trava o movimento do ribossomo, bloqueia a tradução de pro e
eucariontes (uso no tratamento do câncer)

Atuam em eucariontes
Ciclohexamida: bloqueia a transferência de peptídeos em eucariotos
Toxina Diftérica: inibe a eEF2
Passos na Tradução
1. Componentes necessários para a iniciação da tradução incluem a
interação de subunidades ribossômicas menores e maiores, mRNA, um
aminoacil-tRNA iniciador, GTP e um grande grupo de fatores de iniciação. O
complexo de iniciação é formado pela subunidade ribossômica menor, o
mRNA e o Met-RNA (um tipo especializado de tRNA iniciador ligado à
metionina). O Met-tRNA tem hidrogênio ligado ao códon de iniciação AUG no
mRNA.
2. Formação do complexo de iniciação ribossômico é completado com a
adição da subunidade ribossômica maior. O códon AUG e o Met-tRNA são
posicionados no sítio P (peptidil) do ribossomo.
3. Um novo aminoacil-tRNA é então posicionado no síto A (aminoacil).
4. A ligação covalente entre o aminoácido e o tRNA no sítio P é quebrada.
5. Uma ligação peptídica (covalente) é formada entre os dois aminoácidos.
6. O tRNA vazio é então dissociado do sítio P.
7. A translocação do ribossomo ocorre de modo que o peptidil-tRNA no sítio
A é translocado para o sítio P. Essa translocação é feita pelo fator de
alongamento G( EF-G, também chamado Translocase), que alterna-se entre a
forma GTP e a GDP. A forma GTP de EF-G é a que aciona a etapa de
translocação.
Passos na Tradução
8. O complexo agora parece muito similar ao do início da tradução. O peptidil-
tRNA está no sítio P e o sítio A está vazio e pronto para receber o próximo
aminoacil-tRNA.
9. O aminoácido no sítio P é separado do seu tRNA e a formação da ligação
peptídica acontece com o aminoacil-tRNA no sítio A. O tRNA é liberado do sítio P
e o ribossomo transloca-se de modo que o novo peptidil-tRNA fica no sítio P; o
sítio A está pronto para receber o próximo aminoacil-tRNA.
10. O ciclo de alongamento ( adição de aminoácidos para crescimento da cadeia
polipeptídica) continua para mais formação de ligação peptídica e translocação.
11. um stop códon (UAA, UAG, ou UGA) é posicionado no sítio A; o stop códon
não possui anticódon (um aminoacil-tRNA que faça ponte de hidrogênio com
este códon); por esta razão, nenhum outro aminoácido será adicionado.
12. O stop códon é reconhecido e ligado por uma proteína chamada fator de
terminação ou liberação (RF).
13. O fator de liberação liga-se ao stop códon no sítio A e inicia uma seqüência
de eventos que efetua o término da tradução.
14. A seqüência de término começa com a dissociação da proteína sintetizada do
peptidil-tRNA no sítio P.
15. A separação da proteína sintetizada do ribossomo é seguida pela dissociação
de todas as subunidades.
16. As subunidades ribossômicas e o mRNA podem se reunir com o Met-tRNA
para formar novos complexos de iniciação e a tradução se proteínas pode
começar de novo, produzindo cópias adicionais da proteína.
 Genética
Diferenças entre a tradução de Ileana Rubio
Moodle: genetica
Procarionte X Eucarionte ilerubio@gmail.com
UNIFESP

1: Código genético similar,

AUG = formil-metionina em procariontes
AUG: metionina em eucariontes
2: procariontes: transcrição e tradução simultánea
eucariontes: transcrição e tradução separadas.

3: Procariontes RNAm vida média muto curta.

Eucariontes: mais longa

4: Ribossomos com subunidades diferentes

5: Iniciação da tradução é diferente.

6: Alongamento e término: similares

7: Polirribossomo em ambos organismos