STOMATAL COMPLEX CONTROLS LEAF GAS EXCHANGE AND

WATER LOSS
Epidermis daun mengandung pori-pori yang menyediakan pertukaran gas antara ruang udara
internal dan lingkungan sekitar. Pembukaan, atau stoma, dibatasi oleh sepasang sel unik yang
disebut sel penjaga (Gambar 8.1). Dalam kebanyakan kasus, sel-sel penjaga pada gilirannya dikelilingi
oleh sel epidermis khusus dan berdiferensiasi disebut sel anak. Stoma, bersama dengan itu
berbatasan dengan sel penjaga dan sel tambahan, disebut sebagai kompleks stomata, atau alat
stomata.

Fitur yang membedakan dari kompleks stomata adalah pasangan sel pelindung yang berfungsi
sebagai katup yang dioperasikan secara hidrolik. Sel penjaga mengambil air dan membengkak untuk
membuka pori ketika CO2 diperlukan untuk fotosintesis, dan kehilangan air untuk menutup pori saat
CO2 tidak diperlukan atau ketika tekanan air mengesampingkan kebutuhan fotosintesis tanaman.
Sifat mekanik, fisiologis, dan biokimia dari sel penjaga telah menarik para cendekiawan hampir sejak
mereka kejadian pertama kali dilaporkan oleh M. Malpighi di akhir abad ketujuh belas. Ketertarikan
yang terus-menerus pada pergerakan stomata dapat dimengerti, mengingat yang terpenting
pentingnya stomata dalam mengatur pertukaran gas dan akibat pada fotosintesis dan produktivitas

Lebih dari 90 persen CO2 dan uap air dipertukarkan antara tanaman dan lingkungannya lewat
melalui stomata. Karena itu Stomata terlibat dalam mengendalikan dua proses yang sangat penting
tetapi bersaing: penggunaan CO2 untuk fotosintesis dan, sebagaimana dibahas dalam Bab 2,
kehilangan air secara transpirasional. Itu penting, Oleh karena itu, untuk mempertimbangkan fungsi
stomata akun ketika mempertimbangkan produktivitas fotosintesis dan hasil panen.

Baru-baru ini, minat tambahan pada fungsi stomata telah didorong oleh pengakuan bahwa
polusi udara seperti ozon (O3) dan sulfur dioksida (SO2) juga masukkan daun melalui stomata
terbuka.

Stomata ditemukan di hampir semua daun tanaman tingkat tinggi (angiospermae dan
gymnospermae) dan sebagian besar tumbuhan bawah (lumut dan pakis) dengan pengecualian
tanaman air terendam dan lumut hati. Di angiospermae dan gymnospermaum yang paling banyak
ditemukan bagian udara termasuk struktur tidak rata seperti bunga bagian dan batang, meskipun
mungkin tidak berfungsi dalam beberapa kasus. Frekuensi dan distribusi stomata sangat bervariasi
dan tergantung pada sejumlah factor termasuk spesies, posisi daun, tingkat ploidi (jumlah set
kromosom), dan kondisi pertumbuhan. SEBUAH frekuensi dalam kisaran 20 hingga 400 stomata mm
– 2 permukaan daun representatif, meskipun frekuensinya 1000 mm − 2 atau lebih telah dilaporkan.
Meskipun ada pengecualian untuk setiap aturan, daun monokotil herba seperti rumput biasanya
mengandung stomata baik pada permukaan adaxial (atas) dan abaxial (bawah) dengan frekuensi
yang kira-kira sama. Stomata terjadi pada baik permukaan atas dan bawah dari dicot herba ' daun,
tetapi frekuensinya biasanya lebih rendah di atas permukaan. Sebagian besar dikot kayu dan spesies
pohon memiliki stomata hanya pada permukaan daun bagian bawah saat daun mengambang
tanaman air (mis., bunga teratai) hanya memiliki stomata di permukaan atas. Dalam kebanyakan
kasus, stomata dilakukan secara acak tersebar di permukaan daun, meskipun dalam monokotil
dengan daun yang berurat paralel, stomata disusun array linear antara vena.

Fitur yang paling mencolok dari kompleks stomata adalah sepasang sel penjaga yang membatasi
pori. Ini sel epidermis khusus memiliki kapasitas untuk menjalani perubahan turgor reversibel yang
pada gilirannya mengatur ukuran aperture di antara mereka. Saat penjaga sel sepenuhnya bersih
apertur terbuka, dan ketika lembek, apertur ditutup. Meskipun ada banyak variasi pada temanya,
secara anatomis kita mengenal dua tipe dasar sel penjaga: tipe graminaceous dan elips ketik
(Gambar 8.1).

Sel-sel pelindung berbentuk elips atau ginjal disebut demikian karena bentuk elips dari bukaan.
Di permukaan lihat, sel-sel penjaga ini menyerupai sepasang kacang merah dengan sisi cekung
mereka ditentang. Di bagian lintas sel kira-kira berbentuk bundar, dengan dinding ventral
berbatasan dengan lubang dan dinding punggung berbatasan dengan sel epidermis di sekitarnya
(Gambar 8.2). Yang dewasa sel penjaga memiliki penebalan dinding yang khas, terutama sepanjang
margin luar dan dalam dinding ventral. Penebangan ini meluas menjadi satu atau dua tepian itu
melindungi tenggorokan stoma. Pada beberapa tanaman, terutama gymnospermae dan spesies
akuatik, bagian dalam birai mungkin kecil atau tidak ada. Langkan luar muncul menjadi adaptasi
arsitektur yang membantu mencegah penetrasi air cair dari luar ke dalam ruang udara subtomatal,
yang seharusnya memiliki konsekuensi bencana untuk pertukaran gas.

Jenis sel penjaga yang sangat ketat sebagian besar terbatas pada anggota Gramineae dan
tertentu monokot lainnya (mis., telapak tangan). Sering digambarkan sebagai berbentuk halter, sel
penjaga berjenis graminaceous memiliki ujung tipis berdinding tipis yang berisi sebagian besar
organel sel (Gambar 8.1). The ‘‘ handle ’dari halter ditandai dengan dinding menebal ke arah lumen.
Pori dalam hal ini biasanya memanjang celah. Sel-sel penjaga diapit oleh dua menonjol sel
tambahan.

CO2 ENTERS THE LEAF BY DIFFUSION

jika fusi CO2 ke dalam daun melalui stoma lebih banyak efisien daripada yang diperkirakan
berdasarkan stomata area sendirian. Pori stomata terbuka sepenuhnya biasanya diukur Lebar 5
sampai 15 μm dan panjang sekitar 20 μm. Gabungan daerah pori stomata terbuka dengan demikian
jumlahnya tidak lebih dari 0,5 hingga 2 persen dari total luas daun. Sejak daun tidak mengandung
pompa aktif, semua CO2 yang diambil ke dalam daun untuk fotosintesis harus masuk dengan difusi
melalui pori-pori yang sangat kecil ini. Orang mungkin berpikir bahwa difusi melalui area terbatas
akan terjadi sangat terbatas, namun telah dihitung bahwa tingkat penyerapan CO2 oleh daun
fotosintesis aktif dapat mendekati 70 persen dari tarif selama menyerap permukaan dengan area
yang setara dengan seluruh daun! Efisiensi difusi yang luar biasa tinggi ini tampaknya terkait dengan
geometri khusus difusi gas melalui pori-pori kecil. Efisiensi tinggi difusi gas melalui stomata dapat
diperlihatkan secara eksperimental dengan mengukur difusi CO2 ke dalam wadah penyerap CO2
agen seperti natrium hidroksida. Wadahnya ditutupi dengan selaput tipis berlubang dengan pori-
pori dimensi yang diketahui. Difusi CO2 melalui membran dapat diukur sebagai jumlah karbonat
yang ada dalam larutan natrium hidroksida setelah, untuk contoh, satu jam. Ditemukan bahwa
tingkat Difusi CO2 melalui membran berlubang bervariasi dalam sebanding dengan diameter pori-
pori, bukan area. Bagaimana dapatkah hasil ini direkonsiliasi dengan hukum Fick, yang menyatakan
bahwa
Rate of diffusion = v = D · A(dc/dx)

HOW DO STOMATA OPEN AND CLOSE?

Pertanyaan ini dapat dijawab dengan terlebih dahulu menanyakan apa kekuatan mekanik
terlibat dalam gerakan sel penjaga. Kekuatan pendorong untuk pembukaan stomata dikenal sebagai
penyerapan air oleh sel-sel penjaga dan akibat peningkatan tekanan hidrostatik. Hasil adalah
deformasi sel lawan yang meningkatkan ukuran pembukaan di antara mereka. Dalam kasus elips sel
penjaga dinding menebal menjadi cekung, sementara dalam sel-sel berbentuk halter menangani
tetapi terpisah tetap sejajar. Penutupan stomatal mengikuti kehilangan air, dan akibatnya
penurunan tekanan hidrostatik dan relaksasi dinding sel penjaga. Deformasi sel pelindung elips
selama pembukaan karena pengaturan struktural penjaga yang unik dinding sel. Dalam sel normal,
pita mikrofibril selulosa melingkari sel di sudut kanan ke sumbu panjang sel. Studi dengan cahaya
terpolarisasi dan mikroskop electron telah menunjukkan bahwa mikrofibril dalam sel penjaga
dinding diorientasikan secara radial, melebar dari wilayah tengah dinding ventral (Gambar 8.4).
Mikrofibril tambahan diatur secara longitudinal di dalam penebalan dinding ventral, berhubungan
silang dengan radial pita dan membatasi ekspansi di sepanjang dinding ventral. Ketika sel-sel penjaga
mengambil air, ekspansi mengikuti jalan yang paling tidak resistan — yaitu mendorong dinding
dorsal yang relatif tipis ke arah tetangga sel epidermis. Ini menyebabkan sel melengkung di
sepanjang permukaan ventral dan membentuk pembukaan stomata. Itu sel-sel pelindung dumbbell
yang berbentuk rumput juga tergantung pada penyerapan air osmotik, tetapi beroperasi dalam
sedikit cara yang berbeda. Dalam hal ini ujung bulat dari sel mendorong satu sama lain saat mereka
membengkak, mengemudi pusat Pegangan terpisah secara paralel dan pelebaran pori di antaranya
mereka.

Apa yang mengontrol pembukaan dan penutupan stomata? Untuk jawab pertanyaan ini, alih-
alih perlu bertanya apa mengatur sifat osmotik sel penjaga. Ini pertanyaan telah terbukti sulit
dijawab, sebagian karena begitu banyak faktor yang tampaknya terlibat dan sebagian karena itu
telah sulit untuk mempelajari metabolisme sel penjaga komplikasi yang diperkenalkan oleh
epidermis di sekitarnya diselesaikan dengan mempelajari perilaku sel penjaga di strip kupas sel
epidermis. Baru-baru ini, teknik untuk persiapan protoplas sel penjaga telah tersedia,
memungkinkan untuk mempelajari metabolisme sel penjaga dan gerakan ion dalam isolasi dan sel
mesofil. Masalah ini sebagian diselesaikan dengan mempelajari perilaku sel penjaga di strip kupas sel
epidermis. Baru-baru ini, teknik untuk persiapan protoplas sel penjaga telah tersedia,
memungkinkan untuk mempelajari metabolisme sel penjaga dan gerakan ion dalam isolasi.

Selama bertahun-tahun berbagai mekanisme telah dilakukan ditawarkan untuk menjelaskan

perubahan konsentrasi osmotic sel penjaga. Sebagian besar berpusat pada pengamatan bahwa sel
penjaga biasanya mengandung kloroplas dan dianggap kompeten secara fotosintesis. Dengan satu
atau lain cara, diusulkan bahwa akumulasi produk fotosintesis — gula dan lainnya molekul kecil —
berkontribusi langsung pada yang diamati perubahan osmotik dalam sel penjaga. Padahal itu benar
bahwa sebagian besar sel penjaga memiliki kloroplas, jumlahnya kloroplas sangat bervariasi. Juga, si
penjaga sel-sel dari beberapa spesies (mis., beberapa anggrek dan beraneka ragam daerah
Pelargonium) tidak memiliki kloroplas tetapi tetap berfungsi penuh. Selanjutnya, para penyelidik
telah tidak dapat mendeteksi tingkat signifikan Rubisco (enzim pengikat karbon utama; lihat di
bawah) dalam sel penjaga dari setidaknya 20 spesies, mengarah pada kesimpulan itu bagian
pengikat karbon dari fotosintesis tidak beroperasi di sel penjaga. Kesimpulannya tidak bisa dihindari:
metabolisme karbon fotosintesis tidak dapat dipanggil sebagai mekanisme umum untuk
menjelaskan gerakan sel penjaga.

Pada akhir 1960-an menjadi jelas bahwa tingkat K + sangat tinggi di sel penjaga terbuka dan
sangat rendah di tertutup sel penjaga (Tabel 8.1). Berbagai teknik, termasuk mikroprob elektron dan
metode histokimia khusus untuk K +, telah mengkonfirmasi bahwa konten K + sel penjaga tertutup
rendah dibandingkan dengan sel sekitarnya anak dan sel epidermis. Saat dibuka, sejumlah besar K +
bergerak dari anak perusahaan dan sel epidermis ke sel penjaga. Akibatnya, sebuah akumulasi K +
dalam sel penjaga sekarang diterima sebagai a proses universal dalam pembukaan stomata.
Pekerjaan ini memberi naik ke hipotesis saat ini bahwa potensi osmotik sel penjaga dan, akibatnya,
ukuran pembukaan stomata, ditentukan oleh tingkat K + akumulasi dalam sel penjaga.

Meskipun kami tidak memiliki pemahaman menyeluruh tentang mekanisme yang terlibat,
informasi yang tersedia tentang penjaga metabolisme sel dan pergerakan stomatal dirangkum dalam
model umum yang ditunjukkan pada Gambar 8.5. Secara luas menerima bahwa akumulasi ion oleh
sebagian besar sel tanaman digerakkan oleh pompa proton bertenaga ATP yang berlokasi pada
membran plasma (Bab 3). Dua baris bukti menunjukkan bahwa pengambilan K + oleh penjaga
stomata sel cocok dengan mekanisme umum ini. Pertama, racun jamur fusicoccin, yang dikenal
untuk merangsang proton aktif ekstrusi oleh pompa, merangsang pembukaan stomata. Kedua,
vanadate (VO− 3), yang menghambat proton pompa, juga menghambat pembukaan stomata. Ini
merupakan bukti yang cukup baik bahwa ekstrusi proton adalah satu dari peristiwa awal dalam
pembukaan stomata. Dengan menghapus Ion bermuatan positif, cenderung ekstrusi proton untuk
hiperpolarisasi membran plasma (mis., turunkan potensial listrik di dalam sel relatif terhadap luar)
serta membentuk gradien pH. Hiperpolarisasi adalah berpikir untuk membuka saluran K + di
membran, yang kemudian memungkinkan pengambilan pasif K + sebagai respons terhadap
perbedaan potensial atau gradien muatan melintasi selaput.

Untuk menjaga netralitas listrik, kelebihan K + ion yang terakumulasi dalam sel harus seimbang
dengan a Counterion membawa muatan negatif. Menurut model yang ditunjukkan pada Gambar
8.5, keseimbangan muatan tercapai sebagian dengan menyeimbangkan penyerapan K + terhadap
ekstrusi proton, sebagian dengan masuknya ion klorida (Cl−), dan sebagian lagi oleh produksi di
dalam sel anion organik tersebut sebagai malat. Pada sebagian besar spesies, produksi malat
mungkin menyumbang sebagian besar counterion yang diperlukan sementara pada yang lain, seperti
jagung (Zea mays), sebanyak 40 persen K + yang bergerak ke dalam sel disertai oleh Cl−. Pada
beberapa spesies yang sel-sel penjaganya kurang kloroplas atau pati, Cl− mungkin yang dominan
lawan

Selain perannya dalam menjaga keseimbangan muatan, akumulasi malat juga membantu
menjaga pH seluler selama akumulasi zat terlarut. Proton ekstrusi akan cenderung menguras
konsentrasi proton intraseluler dan meningkatkan pH sel. Namun, karena malat adalah anion
organik, setiap gugus karboksil (—COO−) mengakumulasi rilis satu proton ke dalam sitosol. Sintesis
malat karenanya cenderung mengisi kembali pasokan proton yang hilang karena ekstrusi dan
mempertahankan pH sel pada tingkat normal. Bukti untuk malat sebagai counterion cukup kuat.
Untuk memulainya, tingkat malat dalam sel penjaga stomata terbuka lima sampai enam kali lipat
dari stomata tertutup. Kedua, sel penjaga mengandung enzim tingkat tinggi phosphoenolpyruvate
carboxylase (PEPcase), yang mengkatalisasi pembentukan malat (Gambar 8.5). Ketiga, disana adalah
penurunan kandungan pati stomata terbuka itu berkorelasi dengan jumlah malat yang terbentuk.
Akhirnya, faktor-faktor yang mempengaruhi pembukaan dan penutupan stomata juga
mempengaruhi aktivitas PEPcase. Sebagai contoh, fusicoccin, yang menginduksi pembukaan
stomata, juga menyebabkan suatu peningkatan konsentrasi malat dan aktivitas PEPcase. Sebaliknya,
asam absisat hormon tanaman, yang biasanya menginduksi penutupan stomata, bermusuhan efek
dari fusicoccin. Efek dari fusicoccin adalah untuk merangsang fosforilasi PEPcase, suatu proses
dikenal untuk mengaktifkan berbagai enzim dan lainnya protein dalam sel.

Akumulasi K +, Cl−, dan malat di vakuola sel penjaga akan menurunkan osmotic potensial dan
potensi air sel penjaga. Itu penyerapan air akan meningkatkan turgor dan menyebabkan stomata
terbuka. Saat ini, ini masih ada model yang berfungsi untuk pembukaan stomata sejak banyak
detailnya belum diverifikasi secara eksperimental.
 Penutupan stomata belum mendapat perhatian yang sama dengan pembukaan, tetapi
umumnya diasumsikan demikian Penutupan dipengaruhi oleh pembalikan sederhana dari peristiwa
mengarah ke pembukaan. Di sisi lain, tingkat penutupan seringkali terlalu cepat untuk bisa
dipertanggungjawabkan hanya dengan kebocoran ion pasif dari sel penjaga, yang mengarah untuk
saran bahwa pompa metabolisme spesifik lainnya bertanggung jawab untuk secara aktif
mengekstraksi ion pada saat penutupan. Salah satu kemungkinan adalah bahwa sinyal penutupan
stomata merangsang penyerapan Ca2 + ke dalam sitosol. Penyerapan Ca2 + akan mendepolarisasi
membran, sehingga memulai suatu rantai peristiwa yang termasuk membuka saluran anion untuk
memungkinkan pelepasan Cl− dan malat. Menurut skenario ini, hilangnya anion selanjutnya akan
mendepolarisasi membran, membuka saluran K + dan memungkinkan difusi pasif K + ke cabang dan
epidermis yang berdekatan sel.

Apa sumber ATP yang memberi kekuatan pada penjaga pompa proton sel? Dua sumber paling
logis akan melakukannya menjadi fotosintesis dalam kloroplas sel penjaga atau respirasi seluler.
Meskipun sebagian besar sel penjaga melakukannya mengandung kloroplas, mereka umumnya lebih
kecil, lebih sedikit melimpah, dan dengan lebih sedikit thylakoids dari pada sel mesofil yang
mendasarinya. Seperti disebutkan di atas, penjaga kloroplas sel tampaknya tidak memiliki mesin
enzimatik untuk fiksasi karbon fotosintetik. Di sisi laintangan, meskipun produksi ATP belum diukur
secara langsung, bukti tidak langsung menunjukkan bahwa mereka mampu menggunakan energi
cahaya untuk menghasilkan ATP, suatu proses dikenal sebagai fotofosforilasi (lihat Bab 5 dan 7).
Fotosintesis mungkin bukan satu-satunya langsung sumber energi, bagaimanapun, sejak pergerakan
stomatal dapat terjadi dalam gelap. Sumber energi alternative adalah respirasi seluler. Sel penjaga
memang memiliki jumlah besar mitokondria dan tingkat pernapasan yang tinggi enzim Mereka
mungkin bisa mendapatkan cukup ATP dari oksidasi karbon melalui fosforilasi oksidatif (lihat Bab 5
dan 10). Tampaknya sel penjaga memiliki lebih dari cukup kapasitas untuk menghasilkan, baik
melalui respirasi atau fotosintesis, semua energi yang diperlukan untuk menggerakkan stomata
pembukaan.

Model yang disederhanakan untuk aliran ion yang terkait dengan sel-sel
penjaga selama pembukaan stomata. Penyerapan kalium didorong oleh pompa ATPase-proton ion
yang terletak di membran plasma. Akumulasi ion dalam vakuola menurunkan potensi air sel penjaga,
dengan demikian merangsang penyerapan osmotic air dan turgor meningkat.

STOMATAL MOVEMENTS ARE ALSO CONTROLLED BY EXTERNAL

ENVIRONMENTAL FACTORS
Peran utama stomata adalah untuk memungkinkan masuknya CO2 ke dalam daun untuk
fotosintesis sementara pada saat yang sama mencegah kehilangan air yang berlebihan. Dalam hal
ini, mereka jelas melayani fungsi homeostatis; mereka beroperasi menjaga kekonstanan lingkungan
internal daunnya. Seharusnya tidak mengherankan jika ditemukan bahwa gerakan stomata diatur
oleh berbagai faktor lingkungan dan internal seperti cahaya, CO2 level, status air tanaman, dan suhu.
Itu mungkin diharapkan, misalnya, stomata itu akan terbuka dalam cahaya untuk menerima CO2
untuk fotosintesis atau tutup sebagian ketika kadar CO2 tinggi untuk menghemat air sambil
membiarkan fotosintesis berlanjut. Di sisi lain, kondisi tekanan air yang ekstrem harus mengganti
fotosintesis langsung tanaman kebutuhan dan mengarah pada penutupan, melindungi daun
terhadap efek pengeringan yang berpotensi lebih merusak. Di secara umum, harapan-harapan ini
telah diverifikasi secara langsung pengamatan. Masing-masing faktor ini secara teoritis dapat
dipelajari secara independen di bawah kondisi yang terkendali laboratorium, tetapi sejauh mana
mereka berinteraksi dalam kondisi alami membuatnya jauh lebih sulit mempelajari efek dari satu
kerabat yang lain. Bahkan, harus diingat bahwa pembukaan stomata bukan Fenomena semua atau
tidak sama sekali. Pada waktu tertentu, luasnya pembukaan stomata dan dampaknya pada
fotosintesis dan kehilangan air akan ditentukan oleh jumlah semua faktor ini dan bukan oleh siapa
saja.

8.4.1 LIGHT AND CARBON DIOXIDE REGULATE STOMATAL OPENING

Baik cahaya dan CO2 tampaknya memberikan kontribusi yang substansial pada siklus harian
pergerakan stomatal. Mereka efeknya juga erat, yang membuatnya sangat sulit untuk membedakan
kontribusi relatif mereka. Di umumnya, konsentrasi CO2 rendah dan stimulasi cahaya membuka
sementara konsentrasi CO2 yang tinggi menyebabkan cepat Penutupan bahkan dalam cahaya.
Respon dari stomata adalah untuk konsentrasi intraseluler CO2 dalam sel penjaga Ingatlah bahwa
permukaan luar epidermis, termasuk sel penjaga, ditutupi dengan kedap CO2 kutikula. Setelah
diinduksi untuk ditutup oleh pengobatan CO2 tinggi, stomata tidak mudah dipaksa untuk dibuka
dengan perawatan dengan Udara bebas CO2. Ini karena sel penjaga tertutup tetap dalam
kesetimbangan dengan kandungan CO 2 yang tinggi udara terperangkap di ruang substomat. Karena
itu, itu adalah kandungan CO2 dari ruang substomatal dari pada suasana sekitar yang paling penting
dalam mengatur pembukaan stomata. Mekanisme aktual oleh CO2 mana yang mengatur
pembukaan stomata tidak dipahami Stomata biasanya terbuka saat fajar.

Juga, stomata ditutup oleh paparan CO2 yang tinggi dapat diinduksi untuk membuka Perlahan
jika ditempatkan dalam cahaya. Kedua tanggapan muncul hasil dari dua efek cahaya yang terpisah;
satu tidak langsung dan satu arah. Efek tidak langsung membutuhkan relatif tinggi tingkat kelancaran
dan biasanya dikaitkan dengan penurunan dalam kadar CO2 antar sel karena fotosintesis pada sel-
sel mesofil. Dengan argumen yang sama, penutupan dari sel penjaga dalam gelap dapat dikaitkan
dengan akumulasi CO2 pernapasan di dalam daun. Interpretasi ini diperkuat oleh observasi bahwa
spektrum aksi untuk fluence sedang hingga tinggi tingkat menyerupai untuk fotosintesis dengan
puncak di keduanya merah dan biru. Dengan demikian nampak bahwa CO2 adalah pemicu utama
dan bahwa, setidaknya dalam daun utuh, efek tidak langsung dari cahaya dapat beroperasi melalui
regulasi kadar CO2 antar sel. Kesulitan yang signifikan dengan ini interpretasi, bagaimanapun, adalah
spektrum aksi yang serupa telah diperoleh untuk kulit epidermis terisolasi. Seperti itu akibatnya
tidak adanya daun utuh berargumen dengan kuat untuk peran penting namun belum ditentukan sel
penjaga kloroplas.

Mungkin salah satu kemajuan yang lebih signifikan muncul dalam beberapa tahun terakhir
adalah demonstrasi tegas dari efek langsung dari cahaya biru rendah-fasih menyala pembukaan
stomata. Jika stomata hanya bergantung pada cahaya aktif fotosintesis, kemungkinan akan
menderita dari dua batasan. Pertama, sel penjaga akan menjadi tidak dapat menanggapi level
cahaya di bawah titik kompensasi cahaya fotosintesis (mis., minimum tingkat kelancaran fotosintesis
yang melebihi pernapasan). Kedua, sistem akan cenderung ekstrim osilasi karena laju fotosintesis
berfluktuasi dengan perubahan cepat dalam PAR. Efek langsung dari cahaya biru pada pembukaan
stomata tampaknya bisa mengelak dari ini keterbatasan.

Efek cahaya biru telah ditunjukkan dalam a berbagai cara. Meskipun pembukaan stomata
dipromosikan oleh cahaya merah dan biru, umumnya lebih sensitive untuk cahaya biru daripada
merah. Dengan tingkat kelancaran rendah, di bawah 15 μmol m − 2 s − 1, cahaya biru akan
menyebabkan pembukaan stomata tetapi lampu merah tidak efektif. Pada tingkat fluence yang lebih
tinggi, stomata membuka di bawah cahaya biru (yang mungkin aktif kedua sistem) secara konsisten
lebih tinggi daripada di bawah merah pada tingkat kelancaran yang sama. Respons stomata menjadi
merah cahaya mungkin tidak langsung, dimediasi oleh sel penjaga kloroplas dan melibatkan produksi
ATP fotosintesis. Spektrum aksi dari respons cahaya biru, menyala sisi lain, adalah tipikal dari
respons cahaya biru lainnya dan mungkin dimediasi oleh cryptochrome, diduga reseptor cahaya biru
(Bab 6). Mode tindakan cahaya biru tidak pasti, tetapi cahaya biru memang menyebabkan
pembengkakan protoplas sel pelindung yang terisolasi. Hasil ini menunjukkan bahwa cahaya biru
bekerja langsung pada sel pelindung. Beberapa peneliti telah melaporkan bahwa cahaya biru
mengaktifkan ekstrusi proton oleh sel penjaga dan merangsang biosintesis malat; keduanya
merupakan prasyarat untuk stomata pembukaan.

Tetapi fungsi apa yang dilayani oleh respons lampu biru dalam kondisi alami? Satu yang menarik
dan masuk akal saran adalah bahwa ia mungkin memiliki peran dalam pembukaan stomata dini hari.
Pembukaan seringkali dapat diamati sebelum matahari terbit, ketika tingkat kelancaran jauh lebih
rendah dari yang diperlukan untuk mendorong fotosintesis. Mereka mungkin juga tetap terbuka
setelah matahari terbenam. Sensitivitas tinggi respons cahaya biru terhadap tingkat fluence yang
rendah bersama dengan proporsi cahaya biru yang relatif tinggi di bawah sinar matahari saat fajar
dan senja menunjukkan bahwa respons cahaya biru dapat berfungsi sebagai sinyal 'cahaya' yang
efektif. Dari sudut pandang ekofisiologis, respons cahaya biru mengantisipasi kebutuhan akan CO2
dan penggerak atmosfer pembukaan stomatal dalam persiapan untuk fotosintesis aktif. Peran lain
yang mungkin adalah untuk merangsang stomata cepat membuka sebagai respons terhadap tabir
surya — tabir surya itu sendiri akan dianalogikan dengan pulsa cahaya biru — untuk memaksimalkan
peluang untuk fotosintesis di bawah ini kondisi tertentu (Bab 14).

8.4.2 STOMATAL MOVEMENTS FOLLOW ENDOGENOUS RHYTHMS

Banyak proses biologis mengalami fluktuasi berkala yang bertahan dalam kondisi lingkungan yang
konstan Fenomena ini, yang dikenal sebagai ritme endogen, dibahas lebih lanjut dalam Bab 25. Telah
ditunjukkan bahwa pembukaan dan penutupan stomata di Tradescantia daun bertahan selama
setidaknya tiga hari, meskipun tanaman dipelihara di bawah cahaya terus menerus. SEBUAH
periodisitas sekitar 24 jam dipertahankan meskipun waktu pembukaan atau penutupan bis digeser
oleh periode gelap enam jam. Hasil seperti in jelas menunjukkan keterlibatan ritme sirkadian
endogen dalam mengendalikan pembukaan stomata, meskipu tidak jelas bagaimana ritme
berinteraksi dengan yang lain rangsangan.

THE PHOTOSYNTHETIC CARBON REDUCTION (PCR) CYCLE

Sekarang kita memahami proses yang terlibat dalam kontrol masuknya CO2 ke dalam daun, akan
kita periksa dalam beberapa detail mekanisme biokimia yang dengannya kloroplas memperbaiki CO2
ini dan mengubahnya menjadi intermediet karbon terfosforilasi yang stabil.

8.5.1 THE PCR CYCLE REDUCES CO2 TO PRODUCE A THREE-CARBON SUGAR

Jalur dimana semua eukariotik fotosintesis organisme akhirnya memasukkan CO2 ke dalam
karbohidrat yang dikenal sebagai fiksasi karbon atau fotosintesis siklus pengurangan karbon (PCR).
Ini juga disebut sebagai siklus Calvin, untuk menghormati Melvin Calvin, yang mengarahkan upaya
penelitian yang menjelaskan jalur tersebut. Memetakan urutan kompleks reaksi yang melibatkan
pembentukan karbon organik dan konversinya menjadi karbohidrat kompleks merupakan kemajuan
besar pada biokimia tanaman. Atas usahanya dan rekan-rekannya, Calvin dianugerahi Hadiah Nobel
untuk bidang kimia pada tahun 1961. Siklus PCR dapat dibagi menjadi tiga tahap primer (Gambar
8.6): (1) karboksilasi yang diperbaiki CO2 di hadapan akseptor lima karbon molekul, ribulosa bifosfat
(RuBP), dan mualaf menjadi dua molekul asam tiga karbon; (2) reduksi, yang mengonsumsi ATP dan
NADPH yang dihasilkan dengan transpor elektron fotosintetik untuk mengubah asam tiga karbon
menjadi triose fosfat; dan (3) regenerasi, yang mengkonsumsi ATP tambahan untuk mengkonversi
beberapa triose fosfat kembali ke RuBP untuk memastikan kapasitas untuk fiksasi CO2
berkelanjutan.

8.5.2 THE CARBOXYLATION REACTION FIXES THE CO2

REAKSI KARBOXILASI TETAPKAN CO2

Strategi Calvin untuk mengurai jalur karbon dalam fotosintesis secara konseptual sangat mudah:
mengidentifikasi produk organik stabil pertama yang terbentuk setelah pengambilan CO2
radiolabeled. Untuk Mencapai ini, budaya ganggang hijau fotosintesis Chlorella pertama kali
diizinkan untuk menetapkan tingkat stabil fotosintesis. 14CO2 kemudian diperkenalkan dan
fotosintesis dilanjutkan untuk berbagai periode sebelumnya sel-sel dijatuhkan dengan cepat menjadi
metanol mendidih. Metanol panas melayani dua fungsi: mendenaturasikan enzim, sehingga
mencegah metabolisme lebih lanjut, sementara pada saat yang sama mengekstraksi gula untuk
selanjutnya analisis kromatografi. Ketika waktu fotosintesis di hadapan 14CO2 berkurang menjadi
sedikit dua detik, sebagian besar radioaktivitas ditemukan pada a asam tiga karbon, 3-fosfogliserat
(3-PGA). Jadi 3-PGA tampaknya menjadi produk stabil pertama fotosintesis. Gula lain yang
menumpuk label nanti pada waktunya mungkin berasal dari 3-PGA. Karena Kelompok Calvin
menentukan bahwa produk pertama adalah molekul tiga karbon, siklus PCR umumnya disebut
sebagai siklus C3. Langkah selanjutnya adalah menentukan molekul apa yang berfungsi sebagai
akseptor — the molekul yang ditambahkan CO2 untuk membuatnya produk tiga karbon. Degradasi
sistematis dari 3-PGA menunjukkan bahwa label 14C didominasi oleh karbon karboksil. Akseptor dua
karbon Molekul akan logis, tetapi pencarian itu panjang dan sia-sia. Tidak ada molekul dua karbon
yang dapat ditemukan. Sebagai gantinya, Calvin menyadari bahwa akseptornya adalah lima karbon
gula keto, ribulosa-1,5-bifosfat (RuBP). Ini ternyata menjadi kunci keseluruhan puzzle. Reaksi adalah
karboksilasi di mana CO2 ditambahkan ke RuBP, membentuk enam karbon antara (Gambar 8.7).
Peralihan, yang sementara dan tidak stabil, tetap ada terikat pada enzim dan dihidrolisis dengan
cepat dua molekul 3-PGA. Reaksi karboksilasi dikatalisis oleh enzim ribulosa-1,5-bifosfat carboxylase-
oxygenase, atau Rubisco. Rubisco adalah protein yang paling berlimpah di dunia, terhitung sekitar 50
persen dari yang larut protein di sebagian besar daun. Enzim ini juga memiliki afinitas tinggi
terhadap CO2 yang, bersama dengan konsentrasinya yang tinggi dalam stroma kloroplas,
memastikan karboksilasi cepat di konsentrasi CO2 di atmosfer yang biasanya rendah. Dengan
demikian, reaksi yang dikatalisasi oleh Rubisco mempertahankan Gradien konsentrasi CO2 (dc / dx)
antara ruang udara internal daun dan udara sekitar untuk memastikan a pasokan konstan substrat
ini untuk siklus PCR.
8.5.3 ATP AND NADPH ARE CONSUMED IN THE PCR CYCLE
Reaksi karboksilasi, dengan G −35 kJ mol − 1, secara energik sangat menguntungkan. Ini pose yang
menarik pertanyaan. Jika kesetimbangan konstan dari reaksi nikmat karboksilasi dengan bebas
negatif yang tinggi perubahan energi, di mana kebutuhan akan input energy dari reaksi cahaya
fotosintesis? Energi itu diperlukan pada dua titik: pertama untuk pengurangan 3-PGA dan kedua
untuk regenerasi akseptor RuBP molekul. Masing-masing persyaratan ini akan dibahas gantinya.

8.5.3.1 Pengurangan 3-PGA

Agar kloroplas terus mengambil CO2, dua kondisi harus bertemu Pertama, molekul produk
(3-PGA) harus terus dihapus dan, kedua, ketentuan harus dibuat untuk menjaga persediaan akseptor
yang memadai molekul (RuBP). Keduanya membutuhkan energi dalam bentuk ATP dan NADPH. 3-
PGA dihilangkan dengan reduksi pada triose fosfat, gliseraldehida-3-fosfat. Ini adalah sebuah reaksi
dua langkah (Gambar 8.8) di mana 3-PGA berada pertama terfosforilasi menjadi 1,3-
bisphosphoglycerate, yang kemudian direduksi menjadi gliseraldehida-3-fosfat (G3P). ATP dan
NADPH yang diperlukan dalam kedua langkah ini adalah produk dari reaksi ringan dan bersama-sama
merupakan salah satu dari dua situs input energi. Hasilnya triose sugar-phosphate, G3P, tersedia
untuk ekspor sitoplasma, mungkin setelah konversi menjadi dihidroksiaseton fosfat (DHAP) (Bab 9).

8.5.3.2 Regenerasi RuBP

Untuk menjaga proses pengurangan CO2, perlu dilakukan memastikan pasokan

berkelanjutan dari molekul akseptor, RuBP. Ini dilakukan oleh serangkaian reaksi melibatkan gula 4-,
5-, 6-, dan 7-karbon (Gambar 8.9, 8.10). Reaksi-reaksi ini termasuk kondensasi a 6-karbon fruktosa-
fosfat dengan triose-fosfat membentuk gula 5-karbon dan gula 4-karbon. Lain triose bergabung
dengan gula 4-karbon untuk menghasilkan a Gula 7-karbon. Ketika gula 7-karbon dikombinasikan
dengan triose-fosfat ketiga, hasilnya adalah dua lebih banyak gula 5 karbon. Semua kaleng gula lima
karbon menjadi isomer untuk membentuk ribulosa-5-fosfat (Ru5P). Ru5P dapat, pada gilirannya,
difosforilasi untuk meregenerasi diperlukan ribulosa-1,5-bifosfat. Efek bersih dari reaksi ini adalah
untuk mendaur ulang karbon dari lima dari setiap enam molekul G3P, dengan demikian
meregenerasi tiga molekul RuBP untuk menggantikannya digunakan dalam reaksi karboksilasi
sebelumnya. Ringkasa Reaksi yang ditunjukkan pada Gambar 8.9 dan 8.10 termasuk tiga molekul
RuBP di setiap sisi persamaan. Ini adalah untuk menekankan bahwa siklus berfungsi untuk
meregenerasi jumlah asli molekul akseptor dan memelihara a reduksi karbon dalam kondisi mapan.
Gambar 8.9 dan 8.10 menunjukkan bahwa untuk setiap tiga putaran siklus (mis., penyerapannya tiga
CO2) ada karbon yang cukup untuk regenerasi jumlah molekul akseptor yang diperlukan ditambah
satu triose fosfat tambahan, yang tersedia untuk ekspor dari kloroplas. Stoikiometri pada Gambar
8.9 dan 8.10 dipilih untuk menggambarkan hal ini. Enam putaran siklus akan meregenerasi 6 molekul
RuBP, meninggalkan setara dengan satu gula heksosa tambahan sebagai produk bersih. Dua belas
putaran akan menghasilkan yang setara dari molekul sukrosa, dan sebagainya. Sebagai aturan umum
perlu untuk menunjukkan bahwa Enzim yang dibutuhkan ada dan aktif sebelum skema metabolisme
yang kompleks dapat diterima sebagai fakta. Siklus PCR Calvin telah memenuhi kriteria ini sejak
semua enzim dibutuhkan oleh skema pada Gambar 8.9 sekarang ditunjukkan dalam stroma. Terlebih
lagi, semua reaksi telah ditunjukkan secara in vitro, dengan kecepatan yang sesuai mendukung laju
maksimal fotosintesis.
 Siklus reduksi karbon fotosintetik (PCR). Angka dalam
kurung menunjukkan stoikiometri. Enzim, ditunjukkan
oleh angka yang dilingkari adalah: (1) ribulose-1,5-
bisphosphate carboxylase / oxygenase (Rubisco); (2) 3-
fosfogliserat kinase dan gliseraldehida-3-fosfat
dehidrogenase; (3) aldolase; (4) fruktosa- 1,6-
bisphosphatase; (5) transketolase; (6) aldolase; (7)
sedoheptulosa-1,7-bisphosphatase; (8, 9) ribulosa-5-
fosfat epimerase; (10) isomerase ribosa-5-fosfat; (11)
ribulosa-5-fosfat kinase.

8.5.4 APA SAJA ENERGETIK DARI SIKLUS PCR?

Gambar 8.9 menunjukkan bahwa selama tiga putaran siklus, yaitu, serapan 3 molekul CO2,
total 6 molekul NADPH dan 9 molekul ATP adalah yg dibutuhkan. Oleh karena itu, pengurangan
masing-masing molekul CO2 membutuhkan 2 molekul NADPH dan 3 molekul ATP untuk rasio ATP /
NADPH 3/2 atau 1,5. Karena setiap NADPH menyimpan 2 elektron, kita dapat melihatnya total 4
elektron diperlukan untuk memperbaiki setiap molekul CO2. Total ini mewakili input energi 529 kJ
mol − 1 dari CO2. Oksidasi satu mol heksosa akan menghasilkan sekitar 2817 kJ, atau 469 kJ mol − 1
dari CO2. Jadi, ituproses reduksi fotosintesis merupakan energy efisiensi penyimpanan sekitar 88
persen. Jika kami sertakan energi yang dikonsumsi dalam bentuk tiga ATP per CO2 (3 × 31,4 kJ mol −
1 = 282 kJ mol − 1) untuk regenerasi RuBP, maka efisiensi penyimpanan energi adalah sekitar 58
persen. Asumsi penting yang mendasarinya perhitungan sederhana ini adalah bahwa semua CO2
ditetapkan oleh siklus PCR sebenarnya tetap di daun. Kemudian dalam bab ini kita akan melihat
bahwa asumsi ini tidak tentu tahan dalam semua kondisi.

8.6 SIKLUS PCR SANGAT SANGATDIATUR

Awalnya diyakini bahwa siklus PCR tidak memerlukan tingkat regulasi yang signifikan,
sebagian karena awal penelitian in vitro dari Rubisco menyarankan rendah, dan mungkin membatasi
tingkat, reaktivitas untuk enzim kritis ini. (Reaktivitas in vivo-nya sekarang diketahui jauh lebih tinggi,
meskipun mungkin masih membatasi tingkat.) Selain itu, tanaman secara luas diyakini oportunistik
dan akan digunakan tersedia cahaya, air, dan CO2 untuk melakukan fotosintesis pada tingkat
maksimum. Namun, sekarang diakui bahwa fotosintesis tidak beroperasi dalam isolasi dan mesin
fotosintesis yang tidak diatur tidak sesuai dengan metabolisme yang teratur dan terintegrasi.
Mengubah level perantara antara terang dan gelap periode dan tuntutan bersaing untuk energi
cahaya dan karbon dengan kebutuhan seluler lainnya (reduksi nitrat, untuk contoh) menuntut
beberapa tingkat regulasi. Yang paling kontrol yang efektif, tentu saja, pada tingkat enzim kegiatan.
Biologi molekuler dikombinasikan dengan klasik kinetika enzim (lihat Kotak 8.1) dan informasi
struktural yang diperoleh melalui kristalisasi protein telah dimulai untuk menjelaskan sifat canggih
fotosintesis regulasi enzim. Faktor utama dalam pengaturan siklus PCR adalah, mungkin tidak
mengherankan, cahaya.
 GAMBAR 8.10 Reaksi ringkasan dari siklus PCR. Tiga putaran siklus menghasilkan regenerasi
3 molekul akseptor ribulosa-1,5-bifosfat (RuBP) ditambah molekul tambahan gliseraldehida 3-fosfat
(G-3-P). Singkatan tambahan adalah: PGA, Asam 3-fosfogliserat; FBP, fruktosa-1,6-bifosfat; F6P,
fruktosa-6-fosfat; E-4-P, erythrose-4- fosfat; XuP, xylulose-5-phosphate; SBP, sedoheptulosa-1,7-
bifosfat; R-5-P, ribulosa-5-fosfat.

GAMBAR 8.11 Sifat autokatalitik siklus PCR. Bila diperlukan, karbon dapat disimpan dalam
PCR cycle (panah putus-putus) untuk membangun jumlah reseptor molekul dan meningkatkan laju
fotosintesis.

8.6.1 REGENERASI RuBP IS AUTOCATALYTIC

Tingkat pengurangan karbon sebagian tergantung pada ketersediaan molekul akseptor yang
memadai, CO2 dan RuBP. Siklus PCR dapat memanfaatkan yang baru diperbaiki karbon untuk
meningkatkan ukuran kumpulan ini, bila perlu, melalui regenerasi autocatalytic dari RuBP. Pada
malam hari, ketika fotosintesis ditutup dan karbon diperlukan untuk aktivitas metabolisme lainnya,
yaitu konsentrasi zat antara dalam siklus (termasuk RuBP) akan jatuh ke level rendah. Akibatnya,
ketika fotosintesis mulai lagi, angka ini bisa sangat parah dibatasi oleh ketersediaan RuBP, akseptor
CO2 molekul. Biasanya karbon tambahan yang diambil melalui siklus PCR diakumulasikan sebagai
pati atau diekspor kloroplas. Namun, siklus PCR memiliki potensi untuk menambah pasokan
akseptor dengan mempertahankannya karbon tambahan dan mengalihkannya ke arah menghasilkan
jumlah RuBP yang semakin meningkat (Gambar 8.11). Lewat sini jumlah akseptor dapat dengan
cepat dibangun di dalam kloroplas ke tingkat yang dibutuhkan untuk mendukung cepat fotosintesis.
Hanya setelah tingkat RuBP telah dibangun hingga tingkat yang memadai akan menarik karbon
penyimpanan atau ekspor. Waktu yang diperlukan untuk membangun tingkat-tingkat yang
diperlukan dari siklus-siklus PCR dalam transisi dari gelap ke terang disebut fotosintesis waktu
induksi. Tidak ada urutan fotosintesis lainnya Reaksi memiliki kapasitas ini, yang dapat membantu
menjelaskan mengapa semua organisme fotosintesis pada akhirnya bergantun siklus C3 untuk
pengurangan karbon. Bagaimana autokatalisis diatur tidak sepenuhnya jelas. Namun yang paling
banya kontrol yang efektif adalah untuk meningkatkan kegiatan Enzim yang menyukai daur ulang
dari mereka yang mengarah ke pati sintesis atau ekspor produk.

8.6.2 KEGIATAN RUBISCO ADALAH DIATUR SECARA LANGSUNG DENGAN CAHAYA

Aktivitas Rubisco menurun dengan cepat menjadi nol saat lampu menyala dimatikan dan
kembali hanya perlahan ketika lampu menyala sekali lagi dihidupkan. Aktivasi cahaya tampaknya
tidak langsung dan melibatkan interaksi kompleks antara Mg2 + fluks melintasi tilakoid, aktivasi CO2,
kloroplas perubahan pH, dan protein pengaktif.

Seperti dicatat dalam bab sebelumnya, transpor elektron yang digerakkan oleh cahaya
mengarah ke pergerakan bersih proton lumen dari thylakoids. Pergerakan proton melintasi
membran tilakoid menghasilkan gradien proton yang setara dengan 3,0 unit pH dan peningkatan
dalam pH stroma dari sekitar pH 5,0 dalam gelap hingga tentang pH 8,0 dalam cahaya. Secara in
vitro, Rubisco umumnya lebih aktif pada pH 8,0 daripada pada pH 5,0. Mg2 + persyaratan untuk
aktivitas Rubisco telah dicatat beberapa tahun lalu. Cahaya juga membawa peningkatan Mg2 + gratis
dari stroma saat bergerak keluar dari lumen untuk mengkompensasi untuk fluks proton dalam arah
yang berlawanan.

Bekerja di laboratorium G. H. Lorimer, lagi menggunakan Rubisco terisolasi secara in vitro, telah
menunjukkan bahwa Rubisco menggunakan CO2 tidak hanya sebagai substrat tetapi juga sebagai
aktivator. Pengaktif CO2 harus mengikat ke situs pengaktif, disebut situs alosterik, yang terpisah dan
berbeda dari situs yang mengikat media (lihat Kotak 8.1). Berdasarkan hal tersebut Dalam studi in
vitro, Lorimer dan Miziorko mengusulkan model untuk aktivasi in vivo yang memperhitungkan
ketiganyan faktor: CO2, Mg2 +, dan pH. Menurut model ini,CO2 pertama bereaksi dengan gugus ε-
amino dari lisin residu di situs alosterik, membentuk apa yang dikenal sebagai a karbamat (Gambar
8.12). Dibutuhkan pembentukan karbamat pelepasan dua proton dan, akibatnya, akan disukai
dengan meningkatkan pH. Mg2 + kemudian menjadi terkoordinasi dengan karbamat untuk
membentuk karbamat-Mg2 + kompleks, yang merupakan bentuk aktif dari enzim.

Namun, percobaan lebih lanjut menunjukkan bahwa dalam model vitro tidak dapat sepenuhnya
menjelaskan aktivasi dari Rubisco di daun. Secara khusus, nilai yang diukur untuk in vivo Mg2 + dan
konsentrasi CO2 serta perbedaan pH tidak cukup untuk menjelaskan lebih dari setengahnya tingkat
aktivasi yang diharapkan. Paradoks ini diselesaikan oleh penemuan mutan Arabidopsis yang gagal
mengaktifkan Rubisco dalam cahaya, meskipun enzim diisolasi dari mutan itu tampaknya identik
dengan yang diisolasi dari wildtype. Analisis elektroforesis mengungkapkan bahwa mutan rca,
demikian sebutannya, hilang protein kloroplas terlarut. Eksperimen selanjutnya menunjukkan bahwa
aktivasi penuh Rubisco dapat dikembalikan secara in vitro hanya dengan menambahkan protein
yang hilang ke campuran reaksi yang mengandung Rubisco, RuBP, dan tingkat fisiologis CO2. Protein
ini telah bernama Rubisco activase untuk menandakan perannya dalam mempromosikan aktivasi
Rubisco yang bergantung pada cahaya.

Rubisco activase diketahui membutuhkan energi dalam bentuk ATP. Protein telah diidentifikasi
di at Setidaknya 10 genus tanaman tingkat tinggi serta hijau alga Chlamydomonas. Jelas bahwa
Activate Rubisco memiliki peran penting dan mungkin ada di mana-mana untuk dimainkan mengatur
fotosintesis eukariotik.

CHLOROPLASTS OF C3 PLANTS ALSO EXHIBIT COMPETING CARBON

OXIDATION PROCESSES
Metode yang paling banyak digunakan untuk menilai tariff fotosintesis di seluruh sel (mis., alga) atau
utuh pabrik adalah untuk mengukur pertukaran gas — baik penyerapan CO2 atau evolusi O2. Paling
tidak, ini adalah proses yang rumit karena ada beberapa yang berbeda dan saling bersaing reaksi
metabolik yang berkontribusi pada pertukaran gas dari sel ganggang atau daun tanaman yang lebih
tinggi. Respirasi seluler (atau mitokondria) adalah contoh yang berlawanan pertukaran gas, karena
menghasilkan evolusi CO2 dan penyerapan O2. Secara historis, itu diasumsikan respirasi berbasis
mitokondria dan berbasis kloroplas fotosintesis efektif dan independen kontribusi masing-masing
untuk pertukaran gas bisa juga dinilai secara independen. (Satu argumen dikemukakan bahwa
fotosintesis dapat memasok seluruh kebutuhan energy daun secara langsung dan mitokondria
akibatnya ‘‘ ditutup ’dalam cahaya!). Kita sekarang tahu bahwa mengukur pertukaran gas adalah
proses yang jauh lebih tidak pasti, sebagian rumit oleh metabolisme oksidatif dan evolusi akibat CO2
yang terkait langsung dengan metabolisme fotosintesis (Gambar 8.14). Dipanggil fotorespirasi (PR),
proses ini melibatkan reoksidasi produk yang baru saja berasimilasi dalam fotosintesis. Jalur
fotorespirasi melibatkan kegiatan setidaknya tiga organel seluler yang berbeda (kloroplas,
peroksisom, dan mitokondria) dan, karena CO2 berevolusi, menghasilkan kerugian bersih karbon
dari sel. Penyerapan CO2 yang diukur dalam cahaya disebut fotosintesis jelas atau bersih (AP),
karena itu merupakan pengambilan CO2 fotosintetik dikurangi CO2 berevolusi dari respirasi
mitokondria plus fotorespirasi (Persamaan 8.2).

Fotosintesis benar atau kotor (GP) dengan demikian dihitung dengan menambahkan jumlah
mitokondria-respired CO2 plus fotorespired-CO2 untuk yang diambil dalam cahaya (Persamaan 8.3).
Eksperimen awal berdasarkan diskriminasi antara isotop karbon menyarankan keduanya bersifat
kualitatif dan perbedaan kuantitatif antara proses respirasi (mis., evolusi CO2) seperti yang terjadi
dalam kegelapan dan dalam cahaya. Atas dasar ini, evolusi CO2 dalam cahaya disebut fotorespirasi.
Awalnya, konsepnya itu cahaya akan mengubah tingkat pernapasan, untuk mengatakan paling tidak,
kontroversial. Namun, bukti biokimia dan molekuler telah menetapkan fotorespirasi dengan kuat
sebagai proses penting yang berkontribusi pada pertukaran gas sifat daun C3.

8.7.1 RUBISCO MENGATALKAN THE FIXASI KEDUA CO2 DAN O2

Sementara legitimasi fotorespirasi sedang terjadi didirikan pada tahun 1960-an, perhatian beberapa
peneliti tertarik pada sintesis dan metabolisme senyawa dua karbon, glikolat. Itu secara bertahap
muncul bahwa metabolisme glikolat terkait untuk fotorespirasi dan bahwa enzim yang terlibat
terletak di peroksisom dan mitokondria serta kloroplas. Kunci untuk evolusi CO2 fotorespirasi dan
metabolisme glikolat adalah sifat bifungsional. Rubisco juga mengkatalisasi reaksi oksigenase,
karenanya nama ribulosa-1,5-bifosfat karboksilase-oksigenase. Dengan penambahan molekul
oksigen, RuBP diubah menjadi satu molekul 3-PGA dan satu molekul fosfoglikolat (Gambar 8.15).
Fosfoglikolat selanjutnya dimetabolisme dalam serangkaian reaksi dalam peroksisom dan
mitokondria yang menghasilkan pelepasan molekul CO2 dan pemulihan sisa karbon oleh siklus PCR
(Gambar 8.16). Siklus glikolat C2, juga dikenal sebagai siklus oksidasi karbon fotosintesis (PCO),
dimulai dengan oksidasi RuBP menjadi 3-PGA dan P-glikolat. 3-PGA tersedia untuk metabolisme
lebih lanjut oleh Siklus PCR, tetapi P-glikolat cepat terdefosforilasi menjadi glikolat dalam kloroplas.
Glikolat adalah diekspor dari kloroplas dan berdifusi menjadi peroksisom. Diambil oleh peroksisom,
glikolat adalah dioksidasi menjadi glioksilat dan hidrogen peroksida. Peroksida diuraikan oleh
katalase dan glioksilat mengalami reaksi transaminasi untuk membentuk amino asam glisin. Glisin
kemudian ditransfer ke mitokondria di mana dua molekul glisin (4 karbon) berada dikonversi
menjadi satu molekul serin (3 karbon) ditambah satu CO2 Glycine merupakan sumber langsung
fotorespired CO2 Serin kemudian meninggalkan mitokondria, kembali ke peroksisom di mana gugus
amino diberikan dalam reaksi transaminasi dan produknya, hidroksiprovat, direduksi menjadi
gliserat. Akhirnya, gliserat adalah dikembalikan ke kloroplas tempat fosforilasi ke 3-PGA. Pelepasan
karbon sebagai CO2 selama konversi glisin menjadi serin disertai dengan pelepasan dari jumlah
setara nitrogen dalam bentuk amonia. Selama fotorespirasi aktif, laju pelepasan amonia mungkin
jauh lebih besar dari tingkat asimilasi nitrogen. Nitrogen ini tidak hilang, Namun, karena amonia
cepat diasosiasikan kembali dalam kloroplas, menggunakan enzim glutamat sintase siklus (Bab 11).
Jalur glikolat C2 melibatkan interaksi kompleks antara fotosintesis, fotorespirasi, dan berbagai aspek
metabolisme nitrogen dalam setidaknya tiga organel seluler yang berbeda. Banyak yang mendukung
bukti berasal dari studi pelabelan yang menggunakan keduanya 14CO2 atau perantara tertentu, atau
18O2, di mana Nasib label tersebut diikuti melalui berbagai dugaan transformasi kimia. Seperti
halnya siklus PCR, semuanya enzim yang diperlukan untuk melakukan siklus glikolat C2 telah
ditunjukkan. Namun demikian, distribusi zat antara antara tiga organel tidak didirikan secara
meyakinkan. Sebagian besar disimpulkan dari lokasi enzim. Semua organel subseluler yang terlibat
telah diisolasi dan terbukti mengandung enzim yang sesuai.

8.7.2 MENGAPA PHOTORESPIRATION?

Di udara normal (21% O2), laju fotorespirasi dalam daun bunga matahari adalah sekitar 17 persen
dari fotosintesis kotor. Namun, setiap CO2 fotorespired membutuhkan input dari dua molekul O2
(Gambar 8.16). Itu Oleh karena itu, tingkat oksigenasi sebenarnya sekitar 34 persen dan
perbandingan karboksilasi dengan oksigenasi sekitar 3 hingga 1 (1,00 / 0,34). Nilai eksperimental ini
setuju dengan nilai yang sama dihitung untuk beberapa spesies berdasarkan dikenal karakteristik
Rubisco murni. Rasio Namun, karboksilasi menjadi oksigenasi tergantung pada tingkat relatif O2 dan
CO2 karena kedua gas bersaing untuk mengikat di situs aktif di Rubisco. Ketika konsentrasi O2
menurun, tingkat karboksilasi relative meningkat hingga, pada nol O2, fotorespirasi juga nol. Di sisi
lain, peningkatan level relative O2 (atau penurunan CO2) menggeser keseimbangan yang
mendukung oksigenasi. Peningkatan suhu juga akan menguntungkan oksigenasi, karena ketika suhu
meningkatkan kelarutan gas dalam air menurun, tetapi kelarutan O2 adalah kurang terpengaruh
dibandingkan CO2. Dengan demikian O2 akan menghambat fotosintesis, diukur dengan reduksi CO2
bersih, pada tanaman itu fotorespire. Penghambatan fotosintesis oleh O2 pertama kali diakui oleh
Otto Warburg pada 1920-an, tetapi 50 tahun harus berlalu sebelum sifat bifunctional dari Rubisco
menawarkan penjelasan memuaskan pertama untuk ini fenomena. Ada juga biaya energi yang
terkait dengan fotorespirasi dan jalur glikolat. Tidak hanya itu jumlah ATP dan NAD (P) H yang
dikeluarkan dalam jalur glikolat setelah oksigenasi (5 ATP + 3 NADPH) lebih besar dari yang
dikeluarkan untuk reduksi satu CO2 dalam siklus PCR (3 ATP + 2 NADPH), tetapi ada juga kerugian
karbon. Di permukaan, lalu, fotorespirasi nampaknya mahal dan tidak efisien

proses sehubungan dengan akuisisi energi dan karbon. Adalah logis untuk bertanya, seperti banyak
orang, mengapa harus Manjakan diri Anda dalam proses yang tampaknya boros? Pertanyaan ini
tidak mudah dijawab, meskipun beberapa ide telah diajukan. Seseorang memilikinya Fungsi
oksigenase dari Rubisco tidak bisa dihindari. Rubisco berevolusi pada saat atmosfer berisi besar
jumlah CO2 tetapi sedikit oksigen. Dalam kondisi ini, ketidakmampuan untuk membedakan antara
kedua gas akan memiliki sedikit arti bagi kelangsungan hidup organisme. Baik CO2 dan O2 bereaksi
dengan enzim pada situs aktif yang sama, dan oksigenasi memerlukan aktivasi oleh CO2 seperti
halnya karboksilasi. Diyakini oksigen itu mulai menumpuk di atmosfer terutama karena aktivitas
fotosintesis, tetapi pada saat atmosfer konten O2 telah meningkat menjadi proporsi yang signifikan,
sifat enzim bifungsional telah terbentuk tanpa bantuan. Dalam arti tertentu, tanaman C3 adalah
arsitek masalah mereka sendiri — menghasilkan oksigen yang berfungsi sebagai penghambat karbon
yang kompetitif pengurangan. Dengan pandangan ini, maka, fungsi oksigenase adalah ‘‘ hangover
’evolusioner yang tidak memiliki peran berguna. Namun, ini adalah pandangan yang disederhanakan
dari fotorespirasi karena mutan fotorespirasi Arabidopsis terbukti mematikan dalam kondisi
pertumbuhan tertentu, menunjukkan sifat penting dari fotorespirasi jalur di pabrik C3. Jelas, setiap
inefisiensi yang dihasilkan dari fotorespirasi pada tanaman C3 tampaknya tidak parah. Tidak ada
bukti bahwa tekanan seleksi telah menyebabkan evolusi bentuk Rubisco dengan yang lebih rendah
afinitas untuk O2.
Sementara sebagian besar setuju bahwa oksigenasi adalah konsekuensi evolusi yang tak
terhindarkan, banyak yang berpendapat itu tanaman telah memanfaatkan evolusi yang nyata ini
defisiensi dengan mengubahnya menjadi urutan metabolisme yang berguna, jika tidak esensial. Jalur
glikolat, untuk Misalnya, tidak diragukan lagi melayani fungsi pemulung. Untuk setiap dua putaran
siklus, dua molekul fosfoglikol dibentuk oleh oksigenasi. Dari keempat ini atom karbon, satu hilang
sebagai CO2 dan tiga dikembalikan ke kloroplas. Jalur glikolat sehingga pulih 75 persen dari karbon
yang kalau tidak akan hilang glikolat. Peran penyelamatan saja mungkin cukup pembenaran untuk
siklus glikolat kompleks. Ada juga kemungkinan bahwa beberapa perantara, serin dan glisin,
misalnya, digunakan dalam jalur biosintesis lain, meskipun kemungkinan ini masih ada untuk
beberapa perdebatan. Baru-baru ini, dukungan eksperimental yang kuat telah disediakan untuk tesis
bahwa fotorespirasi dapat juga berfungsi sebagai semacam katup pengaman dalam situasi yang
membutuhkan pembuangan energi eksitasi berlebih. Sebagai contoh, penurunan yang signifikan
dalam kapasitas fotosintesis daun diiradiasi tanpa adanya CO2 dan O2 telah dilaporkan. Cedera
dicegah, Namun, jika O2 cukup tersedia untuk memungkinkan fotorespirasi terjadi. Ternyata O2
dikonsumsi oleh fotorespirasi sudah cukup untuk melindungi tanaman dari kerusakan fotooksidatif
dengan mengizinkan terus pengoperasian sistem transpor elektron. Ini bisa menjadi nilai ekologis
yang cukup besar dalam kondisi pasokan cahaya tinggi dan terbatas CO2, misalnya, ketika stomata
ditutup karena stres kelembaban (Bab 14). Memang, mutan fotorespirasi Arabidopsis lebih sensitif
terhadap penghambatan foto daripada mereka rekan wildtype. Klaim yang sering diajukan dalam
literatur adalah itu produktivitas tanaman mungkin ditingkatkan secara signifikan oleh menghambat
atau menghilangkan fotorespirasi secara genetis. Sebagai hasilnya, upaya besar telah dikeluarkan
dalam mencari bahan kimia yang menghambat jalur glikolat atau pembiakan selektif untuk strain
fotorespirasi rendah. Yang lain telah mensurvei sejumlah besar spesies dalam upaya untuk
menemukan Rubisco dengan afinitas yang jauh lebih rendah untuk oksigen. Semua upaya ini tidak
berhasil, mungkin karena premis dasar bahwa fotorespirasi merugikan tanaman dan kontraproduktif
salah. Jelas, keberhasilan dalam meningkatkan fotosintesis dan meningkatkan produktivitas terletak
pada arah lain. Misalnya, mekanisme untuk memekatkan CO2 di sel-sel fotosintetik bisa menjadi
salah satu cara untuk menekan kehilangan fotorespirasi dan meningkatkan efisiensi keseluruhan
asimilasi karbon. Persis seperti itulah dicapai oleh pabrik C4 dan CAM dan akan dibahas lebih lanjut
dalam Bab 15.