HALAMAN JUDUL

BUKU PETUNJUK PRAKTIKUM

ANALISIS OBAT, MAKANAN DAN KOSMETIKA

Penyusun:
Edisi 2

LABORATORIUM TEKNOLOGI FARMASI

PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS KESEHATAN
UNIVERSITAS HAMZANWADI
2018

i
 KATA PENGANTAR
Petunjuk praktikum analisis obat, makanan dan kosmetik ini disusun untuk membantu

mahasiswa dalam pelaksaan praktikum. Mahasiswa diharapkan dapat membaca dan memahami

materi praktikum sebelum pelaksanaan praktikum sehingga dapat melaksanakan praktikum

dengan tertib dan lancar.

Petunjuk ini akan menyajikan aspek-aspek yang harus diperhatikan dalam pemahaman

konsep praktikum, pembuatan sediaan hingga evaluasinya. Diharapkan dengan selesainya

pelaksanaan praktikum ini mahasiswa sudah mempunyai gambaran metode dalam industri

farmasi.

Terimakasih kepada semua pihak yang berkontribuksi dalam penyusunan buku ini. Kritik

dan saran dari semua pihak dan pakar terkait sangat diharapkan.

Selong, Agustus 2018

Tim Penyusun

ii
 DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ....................................................................................................................... i

KATA PENGANTAR .................................................................................................................... ii

DAFTAR ISI .................................................................................................................................. iii

TATA TERTIB PRAKTIKUM ..................................................................................................... iv

Praktikum 1. Uji kadar vitamin B1 ................................................................................................. 3

Praktikum 2. Uji kadar Hidroquinon .............................................................................................. 5

Praktikum 3. Penetapan kadar pemanis buatan (Na-Siklamat) pada minuman serbuk instan ........ 7

Praktikum 4. Uji kandungan bahan kimia obat pada sediaan jamu .............................................. 10

Praktikum 5. Uji kadar Paracetamol ............................................................................................. 11

Praktikum 6. Penetapan Kadar Asam Mefenamat Menggunakan Metode Titrasi Alkalimetri .... 13

DAFTAR PUSTAKA ................................................................................................................... 14

iii
 TATA TERTIB PRAKTIKUM

1. Praktikan diwajib datang 10 menit sebelum praktikum dimulai.

2. Praktikan diwajibkan menggunakan jas praktikum, masker, sepatu tertutup.

3. Tidak diperbolehkan menggunakan aksesoris.

4. Praktikan wajib mengikuti pretes sebelum praktikum dilaksanakan.

5. Praktikan membuat dan membawa laporan sementara.

6. Apabila tidak mengikuti pretest dan praktikum, praktikan harus memberikan surat izin,

keterangan yang sah dan diberikan kepada dosen/asisten yang bersangkutan.

iv
 Praktikum 1
Uji kadar vitamin B1
A. Tujuan: menetapkan kadar vitamin B1 dalam Tablet dengan metode Spektrofotometri UV

B. Bahan:

Vitamin B1, brom thymol blue, aquadest, kloroform, etanol 95%, dapar amonia, HCl 0,1

N.

C. Alat:

Spektrofotometer, labu takar, pipet tetes, erlenmeyer

D. Prosedur Kerja

1. Pembuatan Larutan Stok Vitamin B1 500µg/ml

Ditimbang 25 mg vitamin B1, dilarutkan dengan aquadest dalam labu takar 50 mL

sampai tanda.

2. Pembuatan larutan Brom Thymol Biru 0,05%

Ditimbang 50 mg vitamin, dilarutkan dengan etanol 95% dalam labu takar 100 ml

sampa tanda, disonifikasi dengan sonikator. Apabila masih ada partikel yang belum

terlarut, disaring dengan kertas saring.

3. Pemilihan panjang gelombang serapan maksimum

Dipipet 4 ml dari larutan induk, dimasukkan dalam labu takar 25 ml. Ditambahkan 2

ml dapar amonia, ditambah 3,3 ml Bromo Thymol Blue 0,05 %. Ditambah aquadest

sampa tanda dan tentukan panjang gelombang maksimum dengan scanning pada

daerah 400-800 nm.

4. Pembuatan kurva baku

Dipipet larutan induk sebanyak 2; 2,5; 3; 3,5; 4 ml, masing-masing dimasukkan

dalam labu takar 25 ml. Ditambahkan 1,2 ml dapar amonia, ditambahkan 2,7 ml BTB

3
 4

0,05% kemudian diencerkan dengan aquadest sampa tanda dan baca absirbansinya

pada panjang gelombang maksimum hasil scanning. Didapatkan kurva baku.

5. Penyiapan sampel

Ditimbang 10 tablet satu-persatu, kemudian digerus sampai halus dan menimbang

1500 mg serbuk tablet. Dilarutkan dengan NaOH 0,1 N 20 ml dalam erlenmeyer.

Disari dengan kloroform 3 kali sebanyak 10 ml. Diambil sari kloroform, diuapkan

sampai kering. Larutkan dengan HCL 0,1 N dalam labu takat 50 ml sampai tanda.

6. Pengukuran kadar sampel

Dipipet 5 ml larutan sampel, dimasukkan ke dalam labu takar 25 ml, ditambahkan 1,5

ml dapar amonia dan 3 ml BTB 0,05%. Ditambahkan aquadest hingga tanda, diukur

absorbansi pada panjang gelombang hasil scanning. Diplotkan pada kurva baku

4
 5

Praktikum 2
Uji kadar Hidroquinon
A. Tujuan: mahasiswa dapat mengekstraksi dan menguji kadar hidrokortison pada sediaan

kosmetik

B. Bahan:

- Melanox

- Etanol 96%

- Aquadest

- Es batu

- Plat KLT

- N-heksan

- Aseton

- Kertas saring

C. Alat:

- Glassware

- Baskom

- Waterbath

- Corong pisah

- Chamber

D. Prosedur kerja

1. Preparasi sampel

2 gram sampel ditambahkan 15 mL etanol 96% (v/v) kemudian dimasukkan kedalam

gelas beaker 25 mL. Dicampur sampai homogen diatas waterbath dengan suhu 60 oC

5
 6

selama 10 menit dan didinginkan dalam baskom yang berisi es sampai terjadi

pemisahan. Kemudian disaring dan filtratnya digunakan untuk KLT.

2. Persiapan Solusi Referensi

Disiapkan dengan melarutkan 0,05 g hydroquinone disejumlah kecil etanol 96% (V /

V) dalam volumetrik 25 ml labu dan akhirnya memperbesar volume hingga tanda.

Catatan: Solusi standar harus baru disiapkan karena stabil selama kurang dari satu hari

pada suhu kamar.

3. Prosedur TLC

Plat TLC (20 × 20 cm) dari ketebalan 0,25 mm adalah disiapkan dengan menggunakan

gel silika (90 g) dan air (180 ml) [16]. Piring-piring itu dikeringkan dan diaktifkan

dengan pemanasan dalam oven pada 105˚C selama satu jam. Sistem pelarut; n-Hexane

/ Aseton, 3: 2 digunakan [19]. Dua puluh liter mikro dari setiap sampel dan larutan

standar diendapkan piring dan mereka dikembangkan pada suhu kamar dalam ruang

pemisah vertikal hingga ketinggian kira-kira 16 cm dari permulaan. Itu ruang adalah

sebelumnya jenuh dengan itu sesuai seluler tahap (kejenuhan waktu 1 jam). Setelah

pengeringan, visualisasi adalah dilakukan didua cara:

a) Dalam sinar UV pendek (254 nm);

b) Penyemprotan dengan 0,2% ethanol dichlorofluorescein; kromatogram ditafsirkan

dalam sinar UV panjang gelombang (366 nm).

6
 Praktikum 3
Penetapan kadar pemanis buatan (Na-Siklamat) pada minuman serbuk instan
A. Tujuan: mahasiswa mampu mengekstraksi dan menguji kadar pemanis pada minuman

instan

B. Bahan:

- NaNO2 10%

- H2SO4 10%

- NaOH 0,1 N

- BaCl2

- HCl pekat

- NaCl jenuh

- Eter

- Kertas saring

C. Alat:

- Glassware

- Buret

D. Prosedur kerja

1. Prosedur Pembuatan Larutan

a) Pembuatan NaNO2 10%

Timbang 10,0 g natrium nitrit masukkan ke dalam labu ukur 100,00 ml. Tambah

aquades hingga tanda tera, aduk sampai homogen.

b) Pembuatan H2SO4 10%

Sebanyak 10,3 ml asam sulfat pekat masukkan ke dalam labu ukur 100,0 ml.

Tambah aquades hingga tanda tera, aduk hingga homogen.

7
 8

c) Pembuatan NaOH 0,1 N

Larutkan NaOH dalam air bebas CO2 hingga tiap 1000,00 ml larutan mengandung

4,0 g NaOH.

d) Pembakuan NaOH 0,1 N

Timbang 500,0 mg kalium biftalat yang sebelumnya sudah diserbukkan dan

dikeringkan pada suhu 120o C selama 2 jam, tambahkan 7,5 ml air bebas CO2,

kocok sampai larut. Tambahkan 2 tetes fenolftalein dan titrasi dengan NaOH

hingga terjadi warna merah muda mantap.

2. Uji Kualitatif (bagi 5)

a) Sebanyak 100,0 ml larutan sampel ditambah 2,0 g BaCl2 lalu diamkan.

b) Setelah terjadi endapan kemudian disaring.

c) Larutan hasil saringan ditambah 10,0 ml HCl pekat dan 10,0 ml NaNO2 10%.

d) Larutan dipanaskan di atas penangas air. Adanya endapan warna putih

menunjukkan adanya siklamat (Anonim, 2002).

3. Uji Kuantitatif (bagi 5)

Prosedur Ekstraksi

1) Timbang saksama 8,0 g minuman sampel masukkan kedalam gelas piala dan

tambahkan 50 ml aquades.

2) Tambahkan 10,0 ml H2SO4 10%, masukkan kedalam corong pemisah.

3) Tambahkan 25,0 ml eter kemudian dikocok hingga terbentuk dua lapisan yaitu

lapisan eter di atas dan sampel di bawah (tiap kali habis mengocok hendaknya

tutup/kran corong pemisah dibuka hati-hati untuk mengeluarkan uap).

8
 9

4) Pisahkan lapisan eter (lapisan atas) dari fraksi sampel dan dicuci 2 kali, setiap kali

dengan 10,0 ml air.

5) Tambahkan 20,0 ml NaCl jenuh untuk menghindari emulsifikasi.

6) Air cucian dikumpulkan bersama fraksi cairan sampel kemudian ekstraksi

diulang kembali 2 kali, setiap kali dengan 25,0 ml eter dan dikocok hingga

terbentuk dua lapisan.

7) Ekstrak eter hasil tiap kali ekstraksi dikumpulkan dan masukkan ke dalam gelas

piala, kemudian diuapkan hingga fraksi eternya habis.

9
 10

Praktikum 4
Uji kandungan bahan kimia obat pada sediaan jamu
A. Tujuan: Mahasiswa mampu menganalisis bahan kimia obat pada sediaan jamu

10
 11

Praktikum 5
Uji kadar Paracetamol
A. Tujuan: memahami dan mengetahui penetapan panjang gelombang maksimum, kurva

baku dan kadar parasetamol secara spektrofotometri ultraviolet

B. Bahan:

Parasetamol, metanol, aquadest.

C. Alat:

Spektrofotometer, labu takar, pipet tetes.

D. Prosedur kerja

1. Pembuatan Larutan Standar

Timbang seksama bahan obat paracetamol lebih kurang 100 mg yang telah

dikeringkan pada suhu 105 0C selama 1 jam. Larutkan dengan 15 ml metanol

dalam labu takar dan encerkan dengan aquades sampai 500 ml (larutan stok 200

ppm).

2. Penentuan Spektrum Absorbsi (Panjang Gelombang Maksimum)

Pipet 5 ml larutan stok dan encerkan dengan aquades sampai 100 ml dalam labu

takar diperoleh larutan 10 ppm. Masukkan larutan standar kedalam kuvet (sel

sampel) dan kuvet lain berisi pelarut tanpa bahan obat (sel blangko). Selanjutnya,

ukur absorbansi sel sampai relatif terhadap sel blangko menggunakan

spektrofotometer didaerah radiasi ultraviolet dengan mencatat pembacaan setiap

interval 10nm, dimulai dari 220 nm sampai 350 nm. Pada sekitar absorbansi

optimal dilakukan pengukuran pada interval 5 nm, dan pada daerah puncak

maksimum atau minimum lakukan pengukuran pada interval 2 nm. Buatlah garis

spektrum pada kertas grafik dengan memplot harga absorbansi (sebagai ordinat)

11
 12

terhadap panjang gelombang dan tentukan panjang gelombang maksimum

paracetamol.

3. Pembuatan kurva baku

Disiapkan 4 konsentrasi 4, 6, 8 dan 10 ppm. Tentukan absorbansinya pada

panjang gelombang maksimum.

4. Penentuan kadar parasetamol

Timbang 10 mg sampel. Larutkan dalam 15 ml metanol dalam labu takar 100 ml.

Kemudian dipipet 8 ml kedalam labu takar 100 ml. Setelah itu diencerkan dengan

aquadest sampai tanda. Pipet 1 ml ke dalam kuvet, kemudian diukur absorbansi

larutan pada panjang gelombang maksimum.

12
 13

Praktikum 6
Penetapan Kadar Asam Mefenamat Menggunakan Metode Titrasi Alkalimetri
A. Tujuan: menetapkan kadar asam mefenamat menggunakan metode titrasi alkalimetri
B. Bahan:
Asam mefenamat, NaOH 0,1 N, asam oksalat, aquadest bebas CO2.
C. Alat:
Erlenmeyer, statif, buret.
D. Prosedur kerja
1. Pembuatan Larutan NaOH
NaOH sebanyak 4 gram ditimbang dengan timbangan analitis. NaOH yang sudah
ditimbang kemudian dilarutkan dalam 1 L air bebas CO2 dalam gelas kimia.
2. Pembuatan Larutan Baku Asam Oksalat
Asam Oksalat sebanyak 0,315 gram ditimbang dengan timbangan analitis. Asam
oksalat yang sudah ditimbang kemudian dilarutkan dalam labu ukur 50 mL.
3. Pembakuan NaOH
Larutan baku asam oksalat dimasukkan ke labu Erlenmeyer sebanyak 10 mL dengan
menggunakan pipet ukur. Larutan baku Asam oksalat dititrasi oleh larutan NaOH
dalam buret dengan menggunakan indicator fenolftalein. Titrasi dilakukan sebanyak
tiga kali.
4. Preparasi sampel
Etanol dimasukkan dalam labu Erlenmeyer sebanyak 50 mL dinetralkan dengan
menggunakan NaOH hingga berwarna merah muda dengan penambahan indicator
Fenolftalein. Sampel ditimbang sebesar 100,3 mg lalu dimasukkan ke dalam etanol
yang sudah netral. Dilakukan lagi dalam dua labu Erlenmeyer lain dengan sampel
sebanyak 100,2 mg dan 100,1 mg.
5. Analisis Sampel
Sampel yang telah selesai di preparasi dititrasi oleh NaOH dalam buret dengan
menggunakan indicator Fenolftalein. Sampel dititrasi hingga larutan berwarna merah
muda. Volume NaOH yang dibutuhkan dicatat untuk perhitungan kadar sampel.

13
 14

DAFTAR PUSTAKA
Handayani, Tutut., Agustina, Anita. 2015. Penetapan Kadar Pemanis Buatan (Na-Siklamat)
pada Minuman Serbuk Instan dengan Metode Alkalimetri. Klaten: Jurnal Farmasi Sains
dan Praktis.
Karinda, Monalisa., Fatimawali., Citraningtyas, Gayatri. 2013. Perbandingan Hasil Penetapan
Kadar Vitamin C mangga Dodol dengan Menggunakan Metode Spektrofotometri UV-Vis
dan Iodometri. Pharmacon: Jurnal Ilmiah Farmasi.

Ranny, Yulia E., Fardian, Nur., Maulina, Fury. 2017. Uji Kualitatif dan Kuantitatif Kandungan
Pemanis Buatan Siklamat Pada Selai Roti Di Kota Lhokseumawe Tahun 2016. Aceh:
Universitas Malukussaleh.

Siddique, Salma., Parveen, Zahida., Ali, Zeeshan., Zaheer, Muhammad. 2012. Qualitative and
Quantitative Esmetimation of Hydroquinone in Skin Whitening Cosmetics. Pakistan:
Journal of Cosmetics, Dermatological Science and Application.

14