Jtptunimus GDL Sitihaniah 6975 3 Babii PDF
Jtptunimus GDL Sitihaniah 6975 3 Babii PDF
TINJAUAN PUSTAKA
A. Demam Tifoid
6
antigen flagela disebut antigen H atau antigen kapsula pada spesies yang
mempunyai fagela. Dibentuknya antibodi berbeda sebagai respon terhadap
antigen merupakan petunjuk diagnostik untuk penyakit infeksi[18].
3. Patogenesis
Salmonella sp. adalah bakteri batang lurus, gram negatif, tidak
berspora, bergerak dengan flagel peritrik, berukuran 2-4 µm x 0.5-0,8
µm[18]. Salmonella sp. tumbuh cepat dalam media yang sederhana[20],
hampir tidak pernah memfermentasi laktosa dan sukrosa, membentuk
asam dan kadang gas dari glukosa dan manosa, biasanya memporoduksi
hidrogen sulfide. Pada biakan agar koloninya besar bergaris tengah 2-
8milimeter, bulat agak cembung, jernih, smooth, pada media BAP tidak
menyebabkan hemolisis pada media Mac Concey koloni Salmonella sp[2].
7
Pola penyebaran penyakit ini adalah melalui saluran cerna (mulut,
esofagus, lambung, usus 12 jari, usus halus, usus besar). Salmonella typhi ,
Salmonella paratyphi A, Salmonella paratyphi B, dan Salmonella
paratyphi C masuk ke tubuh manusia bersama bahan makanan atau
minuman yang tercemar[4].
Saat kuman masuk ke saluran pencernaan manusia, sebagian kuman
mati oleh asam lambung dan sebagian kuman masuk ke usus halus. Dari
usus halus kuman beraksi sehingga bisa menginfeksi usus halus. Setelah
berhasil melampaui usus halus, kuman masuk ke kelenjar getah bening, ke
pembuluh darah, dan ke seluruh tubuh (terutama pada organ hati, empedu,
dan lain-lain). Sehingga feses dan urin penderita bisa mengandung kuman
Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A,salmonella paratyphi B dan
Salmonella paratyphi C yang siap menginfeksi manusia lain melalui
makanan atau minuman yang tercemari. Pada penderita yang tergolong
carrier kuman Salmonella bisa ada terus menerus di feses dan urin sampai
bertahun-tahun[22].
Setelah memasuki dinding usus halus, Salmonella typhi, Salmonella
paratyphi A, salmonella paratyphi B dan Salmonella paratyphi C mulai
melakukan penyerangan melalui system limfa ke limfa yang menyebabkan
pembengkakan pada urat dan setelah satu periode perkembangbiakan
bakteri tersebut kemudian menyerang aliran darah. Aliran darah yang
membawa bakteri juga akan menyerang liver, kantong empedu, limfa,
ginjal, dan sumsum tulang dimana bakteri ini kemudian berkembangbiak
dan menyebabkan infeksi organ-organ ini. Melalui organ-organ yang telah
terinfeksi inilah mereka terus menyerang aliran darah yang menyebabkan
bakteremia sekunder. Bakteremia sekunder ini bertanggung jawab sebagai
penyebab terjadinya demam dan penyakit klinis[2].
4. Diagnosis laboratorik
a. Diagnosis Laboratorium
8
Diagnosis Laboratorium dalam menegakkan diagnosa demam
tifoid sangat penting dilakukan karena dapat membantu dalam
menentukan hasil pemeriksaan. Sampai saat ini masih dilakukan
berbagai penelitian yang menggunakan berbagai metode diagnostik
untuk mendapatkan metode terbaik dalam usaha penatalaksanaan
penderita demam tifoid secara menyeluruh. Biakan darah positif
memastikan demam tifoid, tetapi biakan darah negatif tidak
menyingkirkan demam tifoid. Biakan tinja positif menyokong
diagnosis demam tifoid. Peningkatan titer uji Widal memastikan
diagnosis demam tifoid pada pasien dengan gambaran klinis yang
khas. Dalam pemeriksaan laboraturium dimulai dari pengambilan
sampel, cara pengumpulan dan penanganan sampel untuk
pemeriksaan selanjutnya dilakukan uji serologi untuk mendeteksi
antibodi terhadap antigen[18].
b. Metode Pemeriksaan Demam Tifoid
1) Kultur Gal
Diagnosis pasti penyakit demam tifoid yaitu dengan
melekukan isolasi bakteri Salmonella typhi, Salmonella paratyphi
A, Salmonella paratyphi B dan Salmonella paratyphi C dari
spesimen yang berasal dari darah, feses, dan urin penderita
demam tifoid.
Pengambilan spesimen darah sebaiknya dilakukan pada
minggu pertama timbulnya penyakit, karena kemungkinan untuk
positif mencapai 80-90%, khususnya pada pasien yang belum
mendapat terapi antibiotik. Pada minggu ke-3 kemungkinan untuk
positif menjadi 20-25% and minggu ke-4 hanya 10-15%[10].
2) Widal
Penentuan kadar aglutinasi antibodi terhadap antigen O dan H
dalam darah Pemeriksaan Widal memberikan hasil negatif sampai
30% dari sampel biakan positif penyakit tifus, sehingga hasil tes
Widal negatif bukan berarti dapat dipastikan tidak terjadi infeksi.
9
Pemeriksaan tunggal penyakit tifus dengan tes Widal kurang
baik karena akan memberikan hasil positif bila terjadi infeksi
berulang karena bakteri Salmonella, imunisasi penyakit tifus
sebelumnya ,Infeksi lainnya seperti malaria dan lain-lain[10].
3) TubexRTF
Pemeriksaan Anti Salmonella typhi IgM dengan reagen
TubexRTF sebagai solusi pemeriksaan yang sensitif, spesifik,
praktis untuk mendeteksi penyebab demam akibat infeksi bakteri
Salmonella typhi Pemeriksaan Anti Salmonella typhi IgM dengan
reagen TubexRTF dilakukan untuk mendeteksi antibody terhadap
antigen lipopolisakarida O9 yang sangat spesifik terhadap bakteri
Salmonella typhi[10].
4) Metode Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA)
Uji Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) dipakai
untuk melacak antibodi IgG, IgM dan IgA terhadap antigen LPS
O9, antibodi IgG terhadap antigen flagella d (Hd) dan antibodi
terhadap antigen Vi Salmonella typhi. Uji ELISA yang sering
dipakai untuk mendeteksi adanya antigen S. typhi dalam spesimen
klinis adalah double antibody sandwich ELISA. Sensitivitas uji
ini sebesar 95% pada sampel darah, 73% pada sampel feses dan
40% pada sampel sumsum tulang[10].
5) Pemeriksaan IgM dipstik tes
Uji serologis dengan pemeriksaan IgM dikembangkan di
Belanda dimana dapat mendeteksi antibodi IgM spesifik terhadap
antigen lipopolisakarida (LPS) Salmonella typhi dengan
menggunakan membran nitroselulosa yang mengandung antigen
Salmonella typhi sebagai pita pendeteksi dan antibodi IgM anti-
human immobilized sebagai reagen kontrol. Metode ini
mempunyai sensitifitas sebesar 63% bila dibandingkan dengan
kultur darah (13.7%) dan uji Widal (35.6%)[15].
10
B. Tes widal
1. Pengertian
Widal test merupakan tes serologi suatu uji serum darah dengan
aglutinasi untuk mendiagnosa demam tifoid. Prinsip pemeriksaan
menggunakan tes widal adalah reaksi aglutinasi yang terjadi pada serum
penderita setelah dicampur dengan suspense antigen Salmonella.
Pemeriksaan yang positif ialah bila terjadi reaksi aglutinasi antara antigen
dan antibodi (aglutinin) pada serum penderit[23-24]. Pemberian antibiotika
yang dilakukan sebelumnya kemudian diperiksa Widal hal ini
menghalangi respon antibodi[25].
Pada pemeriksaan uji Widal terdapat beberapa antigen yang dipakai
sebagai parameter penilaian hasil uji Widal, Antigen tersebut adalah
a. Antigen O
Antigen O merupakan somatik yang terletak di lapisan luar tubuh
kuman. Struktur kimianya terdiri dari lipopolisakarida. Antigen ini
tahan terhadap pemanasan 100°C selama 2–5 jam pada alkohol dan
asam yang diencerkan. Dengan serum yang mengandung anti O,
antigen ini mengadakan aglutinasi dengan lambat membentuk
gumpalan berpasir [1].
b. Antigen H
Antigen H merupakan antigen yang terletak di flagela, fimbriae atau
fili Salmonella typhi dan berstruktur kimia protein. Salmonella typhi
mempunyai antigen H phase-1 tunggal yang juga dimiliki beberapa
Salmonella lain. Antigen ini tidak aktif pada pemanasan di atas suhu
60°C dan pada pemberian alkohol atau asam[1].
c. Antigen Vi
Antigen Vi ini terdapat pada kapsul K yang terletak pada bagian
paling pinggir dari kuman. Strain yang baru diisolasi dengan anti sera
11
yang mengandung agglutinin anti O dan antigen Vi dirusak oleh
pemanasan selama satu jam pada 60ºC dan oleh asam fenol. Biakan
yang mempunyai antigen Vi cenderung lebih virulen[26]. Dari ketiga
macam antigen tersebut di atas di dalam tubuh penderita akan
menimbulkan pembentukan 3 macam antibodi yang lazim disebut
aglutinin[26].
Dari ketiga anglutinin ( O, H, vi ) hanya anglutinin O dan H
yang ditentukan titernya untuk diangnosis, semakin tinggi titer
anglutininnya semakin besar pula kemungkinan untuk diagnosis
demam tifoid. Pada infeksi yang aktif titer anglutinin akan
meningkat pada pemeriksaan ulang yang dilakukan selang waktu
paling sedikit lima hari[24, 27].
Tes Widal merupakan serologi baku dan rutin digunakan[1].
Hasil positif Widal akan memperkuat dugaan terinfeksi Salmonella
typhi pada penderita[1]. Saat ini walaupun telah digunakan secara
luas, namun belum ada kesepakatan akan nilai standar aglutinasi
(cut-off point)[28]. Beberapa keterbatasan uji Widal adalah:
1) Positif Palsu
Merupakan sebuah pengukuran untuk mengetahui probabilitas
seorang pasien benar-benar mengidap suatu penyakit[29]. Nilai
Positif palsu dihitung dengan membandingkan hasil benar
positif dengan seluruh hasil tes positif menurut uji skrining
(True Positif dan Palse Positif) dalam persen. Semakin tinggi
kemampuan tes skrining memperkirakan seseorang menderita
penyakit akan membantu petugas kesehatan memberikan
penanganan yang tepat dan segera[30].
2) Negatif Palsu
Menggambarkan probabilitas seorang pasien benar-benar tidak
mengidap suatu penyakit[29]. Nilai negatif palsu dihitung dengan
membandingkan hasil benar negatif dengan seluruh hasil tes
negatif menurut uji skrining (True negatif dan palse negatif)
12
dalam per sen. Semakin tinggi kemampuan tes skrining
memperkirakan seseorang tidak menderita suatu penyakit akan
sangat membantu petugas kesehatan menghindarkan
penanganan atau pengobatan yang tidak perlu sehingga terhindar
dari efek samping pengobatan[30].
2. Interprestasi hasil
Besar titer antibodi untuk diagnosis demam tifoid di lndonesia
belum terdapat kesesuaian. Dari hasil beberapa penelitian menunjukkan
bahwa kegunaan uji Widal untuk diagnosis demam tifoid bergantung
prosedur yang digunakan di masing masing rumah sakit atau
laboratorium. Menurut penelitian wardhani uji Widal dianggap positif
bila titer antibodi 1/160, baik untuk aglutinin O maupun H. Semakin
tinggi titernya semakin besar kemungkinan orang menderita demam
tifoid[31].
Kriteria hasil uji Widal dinilai positif apabila memenuhi ketentuan
Titer aglutinin O dan H sebesar atau sama dengan titer aglutinin yang
ditetapkan sebagai titer diagnostik berdasarkan batas atas nilai rujukan
titer aglutinin yang telah ditentukan. Setiap daerah memiliki standar
anglutinin Widal yang berbeda beda. Nilai standar agglutinin Widal
untuk beberapa wilayah endemis di Indonesia adalah di Yogyakarta titer
O dan H > 1/160, Surabaya titer O dan H > 1/160, Manado titer O dan H
> 1/80, Jakarta titer O dan H > 1/80, Makasar titer O dan H 1/320[32].
Cara kerja reaksi Widal untuk mendeteksi titer Salmonella yang
digunakan untuk penetapan titer antibodi dalam serum sebagai berikut[32]:
a. Pengenceran 1 : 160, dibuat dengan cara memipet serum 10 μL
ditambah dengan 1 tetes (40 μL) reagen Salmonella. Apabila terjadi
aglutinasi dihitung titer antibodinya. Perhitungan per titer antibodi
adalah 10 x 1/1600 = 1/160
b. Pengenceran 1 : 320, dibuat dengan cara memipet serum 10 μL
ditambah dengan 1 tetes (40 μL) reagen Salmonella. Apabila terjadi
13
aglutinasi dihitung titer antibodinya. Perhitungan per titer antibodi
adalah 5 x 1/1600 = 1/320
c. Pengenceran 1 : 640, dibuat dengan cara memipet serum 10 μL
ditambah dengan 1 tetes (40 μL) reagen Salmonella. Apabila terjadi
aglutinasi dihitung titer antibodinya. Perhitungan per titer antibodi
adalah 2,5 x 1/1600 = 1/640
Titer antigen O dan H 1/160 menunjukkan hasil positif karena
terdapat anglutinasi yang ditandai dengan adanya granula seperti pasir.
Pada titer 1/160 perlunya dilakukan pemeriksaan ulang setelah 5 hari dari
pemeriksaan, guna melihat kenaikan titer. pada infeksi yang aktif titer uji
Widal akan meningkat pada pemeriksaan ulang yang dilakukan selang
waktu paling sedikit 5 hari. Titer 1/320 menunjukkan bahwa sampel
daarah penderita yang digunakan mengalami infeksi sedang atau ringan.
Titer 1/640 menunjukkan bahwa sampel penderita mengalami fase kronis
atau berat dan perlunya dilakukan penanganan yang lebih lanjut.
Semakin tinggi serum yang digunakan dan terdapat granula menunjukkan
tingkat infeksi kuman Salmonella typhi[31-32].
3. Kegunaan
Kegunaan uji Widal untuk menentukan titer aglutinin yang
meningkat dalam serum penderita demam tifoid. Penentuan titer Widal
dilihat dari kenaikan titer antibodi dalam darah terhadap antigen O dan
antigen H dua kali dari titer sebelumnya yaitu 1/160. Pemeriksaan
laboratorium untuk menegakkan diagnosis demam tifoid yang sampai
saat ini dilakukan adalah dengan metode konvensional, yaitu uji serologi
tes Widal karena bersifat mudah dan cepat diketahui hasilnya[10].
4. Kelemahan
Kelemahan yang penting dari penggunaan uji Widal sebagai sarana
penunjang diagnosis demam tifoid yaitu spesifisitas yang agak rendah
dan kesukaran untuk menginterpretasikan hasil, sebab adanya faktor yang
14
mempengaruhi kenaikan titer. Selain itu antibodi terhadap antigen H
bahkan mungkin dijumpai dengan titer yang lebih tinggi, yang
disebabkan adanya reaktifitas silang yang luas sehingga sukar untuk
diinterpretasikan[25].
Faktor faktor yang mempengaruhi hasil pemeriksaan Widal
a. Faktor faktor yang berhubungan dengan penderita[24] :
1) Keadaan umum gizi penderita
Gizi buruk dapat menghambat pembentukan antibodi.
2) Waktu pemeriksaan selama perjalanan penyakit
Aglutinin baru dijumpai dalam darah setelah penderita
mengalami sakit selama satu minggu dan mencapai puncaknya
pada minggu kelima atau keenam sakit.
3) Pengobatan dini dengan antibiotik
Pemberian antibiotik dengan obat antimikroba dapat
menghambat pembentukan antibodi.
4) Penyakit-penyakit tertentu
Pada beberapa penyakit yang menyertai demam tifoid tidak
terjadi pembentukan antibodi, misalnya pada penderita
leukemia dan karsinoma lanjut.
5) Pemakaian obat imunosupresif atau kortikosteroid dapat
menghambat pembentukan antibodi.
6) Infeksi klinis atau subklinis oleh Salmonella sebelumnya
Keadaan ini dapat menyebabkan uji Widal positif, walaupun
titer aglutininnya rendah. Di daerah endemik demam tifoid
dapat dijumpai aglutinin pada orang-orang yang sehat.
7) Vaksin
Pada orang yang divaksin demam tifoid titer anglutinin O dan
H akan meningkat.
b. Faktor-faktor teknis
1) Aglutinasi silang
15
Karena beberapa spesies Salmonella dapat mengandung
antigen O dan H yang sama, maka reaksi aglutinasi pada satu
spesies dapat juga menimbulkan reaksi aglutinasi pada spesies
lain. Oleh karena itu spesies Salmonella penyebab infeksi tidak
dapat ditentukan dengan uji widal
2) Konsentrasi suspensi antigen
Konsentrasi suspensi antigen yang digunakan pada uji widal
akan mempengaruhi hasilnya.
3) Strain Salmonella yang digunakan untuk suspensi antigen
Daya aglutinasi suspensi antigen dari strain salmonella
setempat lebih baik daripada suspensi antigen dari strain lain.
2. Prinsip pemeriksaan
Metode pemeriksaan yang digunakan adalah Inhibition Magnetic
Binding Immunoassay. Antibodi IgM terhadap antigen 09 LPS dideteksi
melalui kemampuannya untuk menghambat interaksi antara kedua tipe
partikel reagen yaitu indikator mikrosfer lateks yang disensitisasi dengan
antibodi monoklonal anti 09 (reagen berwarna biru) dan mikrosfer
magnetik yang disensitisasi dengan LPS Salmonella typhi (reagen
berwarna coklat). Setelah sedimentasi partikel dengan kekuatan
magnetik, konsentrasi partikel indikator yang tersisa dalam cairan
menunjukkan daya inhibisi. Tingkat inhibisi yang dihasilkan adalah
16
setara dengan konsentrasi antibodi IgM Salmonella typhi dalam sampel.
Hasil dibaca secara visual dengan membandingkan warna akhir reaksi
terhadap skala warna[33].
3. Kegunaan
IgM Salmonella typhi ini dapat mendeteksi antibodi IgM spesifik
terhadap antigen lipopolisakarida (LPS) Salmonella typhi dengan
menggunakan membran nitroselulosa yang mengandung antigen
Salmonella typhi sebagai pita pendeteksi dan antibodi IgM anti-human
immobilized sebagai reagen kontrol. Metode ini mempunyai sensitivitas
sebesar 63% bila dibandingkan dengan kultur darah (13.7%) dan uji
Widal (35.6%)[15].
D. Uji Diagnostik
Uji diagnostik merupakan suatu uji penelitian yang bertujuan yaitu
untuk menegakkan diagnosis atau menyingkirkan penyakit, untuk skrining,
pengobatan pasien dan untuk studi epidemiologi. Uji diagnostik baru harus
memberi manfaat yang lebih dibanding uji yang sudah ada, meliputi beberapa
hal yaitu :
1. Nilai diagnostik tidak jauh berbeda dengan uji diagnostik standar
2. Memberi kenyamanan bagi pasien (tidak invasif)
3. Lebih mudah atau sederhana
4. Lebih murah atau dapat mendiagnosis pada fase lebih dini
Struktur uji diagnostik memiliki variabel prediktor yaitu hasil uji
diagnostik dan variabel hasil akhir atau outcome yaitu sakit tidaknya seorang
pasien yang ditentukan oleh pemeriksaan dengan baku emas[34].
Baku emas atau gold standard adalah standar untuk pembuktian ada
atau tidaknya penyakit pada pasien, dan merupakan sarana diagnostik terbaik
yang ada. Baku emas yang ideal selalu memberikan hasil positif pada semua
subjek dengan penyakit dan hasil negatif pada semua subjek sehat. Dalam
praktek hanya sedikit baku emas yang ideal, sehingga kita sering memakai uji
17
diagnostik terbaik yang ada sebagai baku emas. Kata terbaik memiliki makna
bahwa uji diagnostik tersebut mempunyai sensitivitas dan spesifisitas yang
tinggi[34].
Tabel 2.1 Uji Diagnostik
Penentuan Baku Emas
Positif Negatif
Hasil Uji Positif Positif Benar Positif semu Nilai Ramal Positif
Negatif Negatif semu Negatif Benar Nilai Ramal Negatif
Sensitifitas Spesifisitas
18
dihitung dengan membagi hasil pemeriksaan benar negatif (true negatif)
dengan jumlah hasil pemeriksaan benar negatif dan positif palsu. Semakin
tinggi nilai spesifisitas sebuah tes skrining maka semakin baik kemampuan
mendeteksi seseorang tidak menderita penyakit tertentu[30]. Tujuan
Pengukuran Spesifisitas untuk menghitung banyaknya orang yang tidak
mengidap suatu penyakit dengan hasil tes negatif[29].
Penilaian dari hasil uji tersebut dengan menghitung sensitifitas dan
spesifisitas untuk menggetahui dari beberapa kelemahan seperti, tidak semua
hasil dari pemeriksaan dapat dinyatakan dengan tegas atau tidak terkenanya
penyakit. Untuk mengatasi kelemahan ini dilakukan perhitungan nilai
kecermatan dengan tujuan untuk menaksir banyaknya orang yang benar-benar
menderita dari semua hasil tes yang positif. Dari hasil tersebut dihitung nilai
sensitivitas, spesifisitas, positif palsu dan negatif palsu yang ditentukan
dengan rumus sebagai berikut[35]
Tabel 2.2 Rumus Penilaian Uji Diagnostik
Keterangan Rumus
Sensitifitas a : (a + c)
Spesifisitas d : (b + d)
Nilai Positif Palsu a : (a + b)
Nilai Negatif Palsu d : (c + d)
Nilai kecermatan positif adalah proporsi jumlah yang sakit terhadap semua
hasil tes yang positif, yang dihitung dengan rumus :
a
y
(ab)
Nilai kecermatan negatif adalah proporsi jumlah yang tidak sakit terhadap
hasil tes negatif, yang dihitung dengan rumus :
z d
(c d )
19
Nilai positif palsu adalah jumlah hasil tes positif palsu dibagi dengan
jumlah seluruh hasil tes positif, yang dihitung dengan rumus :
b
(a b)
Nilai negatif palsu adalah jumlah hasil tes negatif palsu dibagi dengan
jumlah seluruh hasil tes negatif, yang dihitung dengan rumus :
c
(c d )
E. Kerangka Teori
Berdasarkan tinjauan pustaka yang telah dipaparkan maka dapat
disusun kerangka teori sebagai berikut :
IgM salmonella
Widal
typhi
Demam tifoid
Antigen
Antigen O,H dan vi
lipopolisakarida
Salmonella typhi
Masa inkubasi 8-
14 hari
20