The Phosphoinositide 3-Kinase

Pathway
Lewis C. Cantley

Lipid terfosforilasi diproduksi pada membran seluler selama peristiwa pensinyalan dan berkontribusi
pada perekrutan dan aktivasi berbagai komponen pensinyalan. Peran phosphoinositide 3-kinase
(PI3K), yang mengkatalisasi produksi phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate, dalam jalur
kelangsungan hidup sel; pengaturan ekspresi gen dan metabolisme sel; dan pengaturan ulang
sitoskeletal disorot. Jalur PI3K terlibat dalam penyakit manusia termasuk diabetes dan kanker, dan
memahami seluk-beluk jalur ini dapat memberikan jalan baru untuk intervensi terapi.

Fosforilasi akut lipid fosfatidlinositol pada posisi D-3 dari cincin inositol sebagai respons
terhadap stimulasi sel oleh faktor pertumbuhan dan hormon menggerakkan serangkaian peristiwa
terkoordinasi yang mengarah pada pertumbuhan sel, entri siklus sel, migrasi sel, dan kelangsungan
hidup sel. Bagaimana fosforilasi lipid mengoordinasikan perilaku kompleks seperti itu? Berbagai
protein pemberi sinyal, termasuk protein serin treonin kinase, protein tirosin kinase, dan faktor
penukar yang mengatur heterotrimerik guanosin trifosfat (GTP) ± protein pengikat (protein G),
memiliki domain yang secara spesifik mengikat D-3 fosfoinositida terfosforilasi.Protein ini terletak di
sitosol sel yang tidak distimulasi tetapi, sebagai respons terhadap fosforilasi lipid, terakumulasi pada
membran plasma karena kemampuannya untuk berasosiasi dengan fosfoinositida yang baru
terbentuk. Pada membran, protein ini menjadi teraktivasi dan memulai berbagai respons lokal,
termasuk polimerisasi aktin, perakitan kompleks pensinyalan, dan lapisan dasar protein kinase.
Hiperaktivasi jalur ini berkontribusi pada kanker manusia dan cacat pada jalur berkontribusi pada
diabetes tipe II; dengan demikian, studi lebih lanjut dari pensinyalan fosfoinositida cenderung
mengungkapkan target baru untuk obat untuk memerangi penyakit ini.

Meskipun beberapa bentuk phosphoinositide 3-kinases (PI3Ks) ada pada eukariota yang
lebih tinggi, enzim kelas Ia terutama bertanggung jawab untuk produksi D-3 phosphoinositide dalam
menanggapi faktor pertumbuhan (1). Enzim Kelas Ia adalah heterodimer subunit pengatur dan
katalitik [lihat PI3K Pathway (http://stke.sciencemag.org/cm/CMP_6557) (2)]. Subunit pengatur
mempertahankan subunit katalitik p110 dalam keadaan aktivitas rendah dalam sel diam dan
memediasi aktivasinya dengan interaksi langsung dengan residu fosfotyrosin dari reseptor faktor
pertumbuhan yang diaktifkan atau protein adaptor.

Ikatan langsung p110 dengan protein Ras teraktivasi (juga diinduksi oleh stimulasi faktor
pertumbuhan) lebih lanjut merangsang aktivitas PI3K. PI3K teraktivasi mengubah membran plasma
lipid phosphatidylinositol-4,5bisphosphate [PI (4,5) P2] menjadi phosphatidyl inositol-3,4,5-
trisphosphate [PI (3,4,5) P3].

Signaling protein dengan domain pleckstrin-homology (PH) terakumulasi di lokasi aktivasi

PI3K dengan secara langsung mengikat ke PI (3,4,5) P3. Yang menarik adalah protein serin-treonin
kinase Akt [juga disebut protein kinase B (PKB)] dan kinase 1 yang bergantung pada fosfoinositida
(PDK1). Asosiasi dengan PI (3,4,5) P3 pada membran membawa protein ini menjadi dekat dan
memfasilitasi fosforilasi Akt oleh PDK1 (3).Fosforilasi ini menstimulasi aktivitas katalitik Akt,
menghasilkan fosforilasi sejumlah protein lain yang memengaruhi pertumbuhan sel, pemasukan
siklus sel, dan kelangsungan hidup sel. Sebagian besar target protein Akt yang diketahui menjadi
terhambat oleh peristiwa fosforilasi. Misalnya, fosforilasi faktor transkripsi terkait Forkhead 1 (FKHR-
L1) oleh Akt menciptakan situs pengikatan untuk 14-3-3 keluarga protein (4). Kompleks FKHR-L1 dan
14-3-3 dipertahankan dalam sitosol, menghalangi transkripsi gen yang biasanya dirangsang oleh
FKHR-L1. Demikian pula, fosforilasi Akt dari protein yang menginduksi apoptosis, Bad menciptakan
situs pengikatan untuk 14-3-3 protein dan mencegah Bad dari ikatan dengan anggota keluarga Bcl-2
Bcl-2 dan Bcl-XL, sehingga melepaskannya untuk respon kelangsungan hidup sel ( 4). Jalur dari
reseptor insulin tipe protein-tirosin kinase ke PI3K ke Akt dan FKHR-L1 dilestarikan dari
Caenhorhabditis elegans ke mamalia (5). Regulasi bertahan hidup melalui fosforilasi BAD tampaknya
telah berkembang lebih baru.

Target ketiga Akt adalah glikogen sintase kinase 3 (GSK3). Protein kinase ini aktif secara konstitutif
dalam sel-sel yang tidak distimulasi dan memfosforilasi banyak protein (termasuk glikogen sintase, c-
Myc, dan cyclin D) untuk menjaga mereka dalam keadaan tidak aktif atau mendorong degradasi
mereka. Fosforilasi GSK3 (baik isoform alfa dan beta) oleh Akt mematikan aktivitas katalitik enzim
ini, menghasilkan aktivasi jalur yang biasanya ditekan oleh GSK3.

PDK1 memfosforilasi dan mengaktifkan protein kinase lainnya, termasuk p70 S6-kinase, sitokin-
independent survival kinase (CISK), dan protein kinase Cz (PKCz). p70 S6kinase berkontribusi
terhadap pertumbuhan sel dengan mengaktifkan terjemahan pesan-pesan spesifik, CISK, seperti Akt
relatifnya, memediasi kelangsungan hidup sel (6), dan PKCz terlibat dalam banyak respons seluler.

Protein yang mengandung domain PH lain yang diaktifkan oleh PI (3,4,5) P termasuk guanosine
disphosphate (GDP) -GTP exchange factor untuk Rac dan untuk adenosine diphosphate (ADP) -
ribosylating factor 6 (ARF6) dan protein tyrosine kinases dari tirosin kinase (Btk) dan keluarga Tec.
Aktivasi Rac (dan mungkin juga ARF6) oleh produksi lokal PI (3,4,5) P3 memainkan peran utama
dalam remodeling sitoskeleton aktin untuk motilitas terarah dalam menanggapi agen kemotaksis.
Anggota keluarga Tec mengatur kejadian akut (perubahan konsentrasi kalsium sitosol) dan kejadian
jangka panjang (perubahan ekspresi gen).

Pengakhiran pensinyalan PI3K dengan degradasi PI (3,4,5) P3 dapat dimediasi oleh setidaknya dua
jenis fosfatase yang berbeda. The Src-homology 2 (SH2)-mengandung fosfatase (SHIP1 dan SHIP2)
mendeposforilasi 5 posisi cincin inositol untuk menghasilkan PI (3,4) P2. Meskipun defosforilasi ini
merusak beberapa pensinyalan hilir PI3K, PI (3,4) P juga dapat memediasi respons yang tergantung
pada PI3K dan dapat memediasi peristiwa yang tidak bergantung pada yang dirangsang oleh PI
(3,4,5) P2. Kehilangan SHIP2 menyebabkan peningkatan dramatis dalam sensitivitas insulin,
menunjukkan bahwa fosfatase ini secara kritis mengatur pensinyalan PI3K di bagian hilir insulin (7).
Sebaliknya, PTEN fosfatase mendeposforilasi 3 posisi PI (3,4,5) P3 untuk menghasilkan PI (4,5) P2
Hilangnya protein atau fungsi PTEN telah ditemukan dalam sebagian besar kanker manusia lanjut,
yang menunjukkan bahwa tidak terkendali pensinyalan melalui PI3K berkontribusi terhadap kanker
metastasis (8).

Singkatnya, produk lipid dari PI3K memberikan jangkar untuk mengumpulkan protein pensinyalan di
lokasi tertentu dalam membran sebagai respons terhadap stimulasi sel. Protein pensinyalan ini
mengoordinasikan peristiwa kompleks yang mengarah pada perubahan metabolisme sel,
pertumbuhan sel, pergerakan sel, dan kelangsungan hidup sel. Studi lebih lanjut dari jalur ini
cenderung mengarah pada target obat baru untuk penyakit seperti diabetes dan kanker.
 Gambar. 1. Jalur pensinyalan hilir phosphoinositide 3-kinase (PI3K) memengaruhi
pertumbuhan sel, kelangsungan hidup sel, dan pergerakan sel. Aktivasi protein reseptor faktor
pertumbuhan tirosin kinase menghasilkan autofosforilasi pada residu tirosin dan transfosforilasi
protein adaptor, seperti GAB-1 pada tirosin. PI3K juga dapat distimulasi oleh adhesi sel yang
tergantung pada integrin dan oleh reseptor berpasangan protein G (tidak ditunjukkan). PI3K dibawa
ke membran dan diaktifkan dengan secara langsung mengikat residu fosfotyrosin dari reseptor atau
adaptor faktor pertumbuhan. Produk lipid dari PI3K, phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate (PIP),
merekrut subset protein pemberi sinyal dengan domain homologi (PH) pleckstrin ke membran,
tempat mereka diaktifkan. Protein ini termasuk protein serin-treonin kinase (Akt dan PDK1), protein
tirosin kinase (keluarga Tec), faktor penukar untuk protein pengikat GTP (Grp1 dan faktor pertukaran
Rac), dan protein adaptor (GAB-1). Pada akhirnya, protein-protein ini mengawali serangkaian
peristiwa kompleks yang mengontrol sintesis protein, polimerisasi aktin, kelangsungan hidup sel, dan
pemasukan siklus sel. Lihat teks dan (2) untuk detailnya.