Reaksi nihidrin

Uji nihidrin bertujuan untuk mengetahui asam α-amino bebas yang ada dalam sampel. Asam
amino yang diuji adalah glisin, tirosin, dan triptofan. Untuk uji positif reaksi nihidrin ditandai
dengan terbentuknya warna larutan menjadi ungu. Warna ungu ini dihasikan dari gugus
karbokisilat dan gugus amino dari suatu asam α-amino tereduksi oleh nihidrin menjadi amoniak.
Pada asam amino yang diuji untk glisin, tirosin, dan triptofan memberikan hasil uji positif yaitu
setelah ditambah 3 tetes larutan nihidrin lalu dipanasi selama 2 menit terbentuk warna ungu. Hal
ini dikarenakan glisin, triptofan, dan tirosin merupakan asam bebas. Pada pengenceran glisin satu
kali masih memberikan warna ungu pada uji nihidrin. Sampai pada pengenceran ke delapan, uji
nihidrin memberikan hasil negative yaitu larutan yang awalnya ungu setelah diencerkan delapan
kali berubah menjadi tidak berwarna. Hal ini menunjukkan bahwa tidak ada asam amino sehingga
tidak bisa mereduksi nihidrin menjadi warna ungu.
Pengendapan oleh reagen asam
Pada percobaan ini sampel yang digunakan adalah albumin dan putih telur. Reagen asam yang
digunakan adalah asam sulfanilat, asam pikrat, sam trikloro asetat, dan asam tannat. Pada sampel
albumin saat penambahan asam berlebih larutan tetap tidak berubah atau tidak keruh
sedangkan pada sampel putih telur larutan menjadi tampak keruh. Hal tersebut menandakan
terbentuknya endapan. Adanya endapan tersebut karena ion H3O+ dari asam masuk dalam
larutan dan mempengaruhi keeseimbangan dan muatan dari molekul protein. Perubahan
tersebut menyebabkan rusaknya struktur protein dan menyebabkan terganggunya stabilitas dari
protein sehingga mengalami koagulasi dan pengendapan. Selanjutnya ditambah dengan NaOH
yang bertujuan untuk denaturasi. Pada asam trikloro asetat terjadi denaturasi sebagian karena
masih terlihat keruh sedangkan pada sulfosalisilat, asam pikrat dan asam tannat endapan dapat
larut sempurna yang menandakan bahwa terjadi denaturasi sempurna. Denaturasi bertujuan
untuk mengembaikan struktur alami asam amino dengan cara penambahan basa karena
denaturasi disebabkan oleh asam