Anda di halaman 1dari 7

DAFTAR ISI

JUDUL............................................................................................................ ............ i
PERNYATAAN ORISINALITAS............................................................................ ii
LEMBAR PENGESAHAN ....................................................................................... iii
KATA PENGANTAR ................................................................................................ iv
PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI TUGAS AKHIR ....................... vi
ABSTRAK .................................................................................................................. vii
ABSTRACT ................................................................................................................. viii
DAFTAR ISI .............................................................................................................. ix
DAFTAR GAMBAR ................................................................................................. xiii
DAFTAR TABEL ..................................................................................................... xvi
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................................. xvii

1 PENDAHULUAN ................................................................................................. 1
1.1 Latar Belakang .............................................................................................. 1
1.2. Tujuan Penelitian .......................................................................................... 2

2 TINJAUAN PUSTAKA ...................................................................................... 3


2.1. Glukosamin/Glukosamin HCl ....................................................................... 3
2.1.1. Fisikokimia Glukosamin ................................................................... 3
2.1.2. Farmakologi dan Farmakokinetika Glukosamin ............................... 3
2.1.3. Biokimia Glukosamin ....................................................................... 5
2.1.4. Produksi Glukosamin ........................................................................ 5
2.2. Kulit .............................................................................................................. 6
2.2.1. Anatomi Kulit ................................................................................... 6
2.2.2. Fungsi Kulit....................................................................................... 8
2.2.3. Kulit sebagai Media Penetrasi Obat .................................................. 10
2.3. Penghantaran Obat Secara Transdermal ...................................................... 11
2.3.1. Mekanisme Penghantaran Obat secara Transdermal ........................ 11
2.3.2. Keuntungan dan Keterbatasan Penghantaran Obat secara
Transdermal ...................................................................................... 12
2.4. Pemilihan Obat untuk Sediaan Transdermal ................................................ 12
2.4.1. Dosis Obat ......................................................................................... 12
2.4.2. Waktu Paruh Obat ............................................................................. 13
2.4.3. Toksisitas Obat terhadap Kulit .......................................................... 13
2.4.4. Ukuran Molekul Obat ....................................................................... 13
2.5. Gel ................................................................................................................ 13
2.6. Skin Penetration Enhancer ........................................................................... 14
2.6.1. Etanol ................................................................................................ 16
2.6.2. Propilen glikol ................................................................................... 17
2.6.3. Gliserin .............................................................................................. 18
2.7. Bahan Tambahan dalam Formulasi ............................................................... 18
2.7.1. HPMC .............................................................................................. 18
2.7.2. Propilen glikol ................................................................................... 19

ix
2.7.3. Dinatrium EDTA .............................................................................. 20
2.7.4. Metil paraben .................................................................................... 21
2.7.5. Propil paraben ................................................................................... 22
2.7.6. Natrium hidroksida............................................................................ 22
2.8. Uji Penetrasi Perkutan Secara In Vitro Menggunakan Sel Difusi Franz ..... 23
2.8.1. Sel Difusi untuk Evaluasi Sediaan Topikal dan Transdermal ........... 23
2.8.2. Sel Difusi Franz ............................................................................... 23
2.8.3. Pendekatan Aplikasi pada Membran Kulit ....................................... 25
2.8.4. Perhitungan Jumlah Obat yang Terpenetrasi .................................... 26
2.9. Ketersediaan Hayati (Bioavailabilitas) ........................................................ 27
2.9.1. Pendahuluan ...................................................................................... 27
2.9.2 Ketersediaan Hayati Absolut dan Relatif .......................................... 27
2.9.3. Parameter Ketersediaan Hayati dalam Darah ................................... 28
2.9.4. Analisis Statistik Ketersediaan Hayati dalam Darah ........................ 28
2.10. Analisis Obat dalam Cairan Biologi ............................................................. 29
2.11. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) .................................................. 30
2.11.1. Eluen (Fase Gerak) ........................................................................... 30
2.11.2. Pompa................................................................................................ 31
2.11.3. Kolom................................................................................................ 31
2.11.4. Detektor ............................................................................................. 32
2.12. Metode KCKT Detektor Fluoresensi ............................................................ 32
2.12.1. Detektor Fluoresensi ......................................................................... 33
2.12.2. Derivatisasi Sampel ........................................................................... 33
2.12.3. Pereaksi Penderivat Ortoftaldehid (OPA) ........................................ 34
2.13. Metode KCKT Detektor Spektroskopi Massa (KC-SM) ............................. 34
2.14. Validasi Metode Bioanalisis……………………………………….. ........... 35
2.14.1. Parameter Validasi…………………………………………. ........... 36
2.14.2. Tingkat Validasi……………………………………………. ........... 38

3 METODOLOGI PENELITIAN ......................................................................... 39


3.1. Bahan dan Alat .............................................................................................. 39
3.1.1. Bahan................................................................................................. 39
3.1.2. Alat .................................................................................................... 39
3.2. Cara Kerja ..................................................................................................... 40
3.2.1. Pembuatan Sediaan Gel Glukosamin ................................................ 40
3.2.2. Evaluasi Pendahuluan Sediaan Gel Glukosamin .............................. 41
3.2.3. Persiapan Awal Analisis Glukosamin Menggunakan KCKT
Detektor Fluoresensi ......................................................................... 41
3.2.4. Pembuatan Kurva Kalibrasi Glukosamin dalam Metanol
dan Dapar Borat pH 9,3 untuk Penetapan Kadar .............................. 43
3.2.5 Evaluasi Penetapan Kadar Gel Glukosamin ..................................... 43
3.2.6. Pembuatan Kurva Kalibrasi Glukosamin dalam Pelarut
Dapar Fosfat pH 7,4 dan Dapar Borat pH 9,3 .................................. 43
3.2.7. Uji Penetrasi Perkutan Sediaan Gel Glukosamin secara In Vitro ..... 44
3.2.8. Pengembangan Metode Analisis Glukosamin dalam Darah
Menggunakan KC-SM-SM .............................................................. 46
3.2.9. Uji Ketersediaan Hayati In Vivo Pendahuluan Sediaan Gel
Glukosamin ....................................................................................... 48

x
4 HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................................... 50
4.1. Pembuatan Sediaan Gel Glukosamin ............................................................ 50
4.2. Evaluasi Pendahuluan Sediaan Gel Glukosamin .......................................... 53
4.3. Persiapan Awal Analisis Glukosamin Menggunakan KCKT Detektor
Fluoresensi .................................................................................................... 55
4.4. Pembuatan Kurva Kalibrasi Glukosamin dalam Metanol dan Dapar
Borat pH 9,3 untuk Penetapan Kadar ........................................................... 58
4.5. Evaluasi Penetapan Kadar Gel Glukosamin ................................................. 58
4.6. Pembuatan Kurva Kalibrasi Glukosamin dalam Pelarut Dapar Fosfat pH
7,4 dan Dapar Borat pH 9,3 untuk Analisis Uji Penetrasi ............................ 60
4.7. Uji Penetrasi Perkutan Sediaan Gel Glukosamin secara In Vitro ................. 61
4.8. Pengembangan Metode Analisis Glukosamin dalam Darah
Menggunakan KC-SM-SM .......................................................................... 69
4.9. Uji Ketersediaan Hayati In Vivo Pendahuluan Sediaan Gel Glukosamin ..... 73

5 KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................................... 80


5.1. Kesimpulan ................................................................................................... 80
5.2. Saran .............................................................................................................. 81

DAFTAR PUSTAKA ................................................................................................. 82


LAMPIRAN................................................................................................... ............. 108

xi
DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1. Struktur kimia glukosamin dalam bentuk garam klorida ..................... 3
Gambar 2.2. Bagan produksi glukosamin HCl dari kerangka luar Crustasea.. ......... 6
Gambar 2.3. Struktur kulit......................................................................................... 8
Gambar 2.4. Tiga rute penetrasi obat melalui kulit .................................................. 10
Gambar 2.5. Mekanisme kerja senyawa peningkat penetrasi .................................. 15
Gambar 2.6. Struktur kimia etanol ........................................................................... 16
Gambar 2.7. Struktur kimia propilen glikol ............................................................. 17
Gambar 2.8. Struktur kimia gliserin ......................................................................... 18
Gambar 2.9. Struktur kimia monomer HPMC ......................................................... 18
Gambar 2.10. Struktur kimia propilen glikol ............................................................. 19
Gambar 2.11. Struktur kimia dinatrium EDTA .......................................................... 20
Gambar 2.12. Struktur kimia metil paraben ............................................................... 21
Gambar 2.13. Struktur kimia propil paraben .............................................................. 22
Gambar 2.14. Skema alat sel difusi Franz .................................................................. 24
Gambar 2.15. Pola penetrasi kumulatif sampel mengikuti teknik aplikasi dosis
obat berlebih dan dosis obat terbatas .................................................... 25
Gambar 2.16. Instrumentasi KCKT ........................................................................... 30
Gambar 3.1. Foto alat ................................................................................................ 88
Gambar 3.2. Bagan pembuatan sediaan gel glukosamin ........................................... 89
Gambar 3.3. Foto rangkaian alat KCKT ................................................................... 89
Gambar 3.4. Bagan preparasi sampel gel glukosamin untuk evaluasi penetapan
kadar ..................................................................................................... 90
Gambar 3.5. Foto sel difusi Franz yang sedang beroperasi ....................................... 90
Gambar 3.6. Bagan preparasi sampel glukosamin dalam kompartemen reseptor
pada uji penetrasi perkutan menggunakan sel Franz ............................ 91
Gambar 3.7. Foto rangkaian alat KC-SM-SM ......................................................... 91
Gambar 4.1. Reaksi degradasi glukosamin menjadi senyawa furfural .................... 51
Gambar 4.2. Foto enam formula sediaan gel glukosamin dalam
wadah pot ............................................................................................. 92
Gambar 4.3. Reaksi pembentukan senyawa berfluoresensi derivat glukosamin
–OPA/2-ME.......................................................................................... 56
Gambar 4.4. Spektrum serapan fluoresensi glukosamin setelah diderivatisasi
dengan pereaksi OPA/2-ME ................................................................ 92
Gambar 4.5. Kurva kalibrasi glukosamin dalam pelarut metanol dan dapar borat
pH 9,3 .................................................................................................. 58
Gambar 4.6. Kromatogram derivat glukosamin pada evaluasi penetapan kadar
sediaan gel formula I ........................................... ................................ 93
Gambar 4.7. Kurva kalibrasi glukosamin dalam pelarut dapar fosfat pH 7,4 dan
dapar borat pH 9,3 ................................................................................ 60

xii
Gambar 4.8. Kromatogram derivat glukosamin dari sampel uji penetrasi
perkutan menggunakan sel difusi Franz sediaan gel formula II pada
menit ke-30....................................................................... .................... 93
Gambar 4.9. Profil penetrasi glukosamin formula gel enhancer etanol .................... 64
Gambar 4.10. Profil penetrasi glukosamin formula gel enhancer propilen glikol ..... 64
Gambar 4.11. Profil penetrasi glukosamin formula gel enhancer gliserin ................ 65
Gambar 4.12. Hasil penetapan bilangan massa permuatan (m/z) ion induk dan
turunan glukosamin dengan pemindaian autotune spektroskopi
massa....................................................... ............................................. 94
Gambar 4.13. Hasil penetapan bilangan massa permuatan (m/z) ion induk dan
turunan baku dalam asam amino heksanoat dengan pemindaian
autotune spektroskopi massa ................................................................ 95
Gambar 4.14. Bagan preparasi sampel glukosamin dalam plasma darah pada uji
ketersediaan hayati in vivo pendahuluan .............................................. 96
Gambar 4.15. Kurva kalibrasi glukosamin untuk uji ketersediaan hayati dalam
plasma darah ............................................ ............................................ 73
Gambar 4.16. Kromatogram KC-SM-SM sampel plasma waktu puncak jam ke-5
formulasi gel glukosamin pada uji ketersediaan hayati ........................ 97
Gambar 4.17. Profil Konsentrasi vs Waktu Uji Ketersediaan Hayati In Vivo
Pendahuluan Formula Gel Glukosamin 1% dalam Plasma Darah ....... 78

xiii
DAFTAR TABEL

Tabel 3.1. Formula Sediaan Gel Glukosamin ................................................... 40


Tabel 4.1. Hasil Uji Pendahuluan Formula Gel Glukosamin 1% ..................... 54
Tabel 4.2. Data Kurva Kalibrasi Glukosamin dalam Pelarut Metanol dan Dapar
Borat pH 9,3……………………………….......................….......... 98
Tabel 4.3. Hasil Evaluasi Penetapan Kadar dan Perolehan Kembali
Formula Gel Glukosamin 1% ........................................................ . 59
Tabel 4.4. Data Kurva Kalibrasi Glukosamin dalam Pelarut Dapar Fosfat
pH 7,4 dan Dapar Borat pH 9,3 … ................................................ 98
Tabel 4.5. Hasil Uji Penetrasi Formulasi Gel Glukosamin Menggunakan Sel
Franz Berdasarkan Jumlah Kumulatif selama 180 menit.............. 99
Tabel 4.6. Hasil Uji Penetrasi Formulasi Gel Glukosamin Menggunakan Sel
Franz Berdasarkan Persentase Jumlah Kumulatif ........................ 102
Tabel 4.7. Hasil Uji Penetrasi Formulasi Gel Glukosamin Menggunakan Sel
Franz Berdasarkan Fluks selama 180 menit .................................. 103
Tabel 4.8. Ikhtisar Hasil Uji Penetrasi Formulasi Gel Glukosamin 1%
Menggunakan Sel Franz................................................................... 68
Tabel 4.9. Data Kurva Kalibrasi Glukosamin dalam Plasma untuk Uji Akurasi
dan Presisi Validasi Metode Analisis Glukosamin dalam Plasma
Menggunakan KC-SM-SM .......................................................... 103
Tabel 4.10. Data Hasil Uji Akurasi dan Presisi Validasi Metode Analisis
Glukosamin dalam Plasma menggunakan KC-SM-SM ................ 104
Tabel 4.11. Data Kurva Kalibrasi Glukosamin dalam Plasma untuk Analisis
Sampel Uji Ketersediaan Hayati Menggunakan KC-SM-SM........ 105
Tabel 4.12. Data Pemeriksaan Kesehatan Subyek Uji Ketersediaan Hayati
Formulasi Gel Glukosamin ............................................................ 106
Tabel 4.13. Hasil Uji Ketersediaan Hayati In Vivo Pendahuluan Formula Gel
Glukosamin 1%........ ..................................................................... 76

xiv
DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Contoh Perhitungan Penetapan Kadar dan Perolehan


Kembali Glukosamin dalam Sediaan Gel .......................................... 108
Lampiran 2. Contoh Perhitungan Jumlah Kumulatif Glukosamin yang
Terpenetrasi hingga Menit ke-15(dari Sediaan Gel Formula II) ........ 109
Lampiran 3. Contoh Perhitungan Jumlah Kumulatif Glukosamin yang
Terpenetrasi hingga Menit ke-30 (dari Sediaan Gel Formula II) ....... 110
Lampiran 4. Contoh Perhitungan Persentase Jumlah Kumulatif Glukosamin
yang Terpenetrasi hingga Menit ke-30
(dari Sediaan Gel Formula I) ............................................................. 111
Lampiran 5. Contoh Perhitungan Fluks atau Laju Penetrasi Glukosamin
Rata-rata Selama 180 Menit ........................................................ ...... 112
Lampiran 6. Contoh Perhitungan Fluks atau Laju Penetrasi Glukosamin
dari Slope Persamaan Regresi.................................... ........................ 113
Lampiran 7. Contoh Perhitungan Waktu Laten Penetrasi Glukosamin
(Sediaan Gel Formula I)................................................................ ..... 114
Lampiran 8. Cara Perhitungan Luas Area Dibawah Kurva dari Jam ke-0
hingga jam ke-10............................................................................ ... 115
Lampiran 9. Sertifikat Analisis Glukosamin HCl ............................................. .... 116
Lampiran 10.Sertifikat Analisis Etanol ............................................................. ..... 117
Lampiran 11.Sertifikat Analisis Propilen Glikol ............................................... .... 119
Lampiran 12.Sertifikat Analisis Gliserin ......................................................... ...... 120
Lampiran 13.Sertifikat Analisis Tikus Rattus norvegicus ................................ ..... 121

xv