PENENTUAN SPEKTROFOTOMETRI OBAT FUROSEMIDE DALAM

FORMULASI BERBEDA MENGGUNAKAN BASIS SCHIFF

Furosemide memiliki ciri bubuk kristal berwarna putih hingga agak kuning, tidak
berbau, hampir tidak berasa, sedikit larut dalam air, kloroform dan eter; larut dalam aseton,
metanol, dimetil formamida dan dalam larutan alkali hidroksida. Metode penentuannya
melalui pembentukan pangkalan Schiff sangat sederhana, akurat, dapat direproduksi dan
tidak memerlukan instrumen canggih, hanya spektrofotometer sederhana yang dapat
melakukan penentuan secara efektif.

Secara umum, prosedur umumnya berupa dalam gelas 100 mL, alikuot larutan Fu
standar yang mengandung (Fu) dipindahkan, 4 mL pelarut ditambahkan, kemudian 5 mL
larutan aldehida aromatik (1x10^-2 M) ditambahkan dalam pelarut yang sama, H2SO4 etanol
0,5% (v/v) ditambahkan dan diselesaikan sampai 15 mL dengan pelarut yang sama, panaskan
dalam bak air mendidih selama 13 - 35 menit untuk pembentukan basis Schiff yang sesuai.
Dinginkan, transfer volume residu secara kuantitatif ke labu ukur 5 mL, selesaikan dengan
tanda dengan pelarut yang sama dan ukur absorbansi pada λmax yang sesuai.

Untuk sediaan tablet, gerus tablet yang mengandung 40 mg furosemide, dilarutkan

secara ultrasonik dalam metanol. Solusinya diencerkan hingga 200 mL dengan metanol,
kemudian disaring; alikuot 5 mL diencerkan menjadi 100 mL, sehingga 1 mL larutan ini
setara dengan 10μg / mL Fu. Prosedur sebelumnya diterapkan persis seperti yang disebutkan
dalam prosedur umum. Sedang dalam sediaan ampul, sampel dengan klaim mengandung 20
mg Fu, berada dalam bentuk yang larut dalam air garam natrium. Untuk itu, sekitar 1 mL HCl
1M tetesan ditambahkan sampai pengendapan lengkap dari basis bebas, kemudian larutan
disaring dan endapan dicuci dengan air suling (3 kali), kemudian endapan dikeringkan dalam
oven pengering di 80 ° C selama 15 menit. Setelah didinginkan, pindahkan endapan ke labu
volumetrik 200 mL dengan metanol dan lengkap hingga tanda. Alikuot 10 mL diencerkan
menjadi 100 dengan metanol. 1 mL setara dengan 10μg / mL Fu. Kemudian lanjutkan persis
seperti yang disebutkan dalam prosedur umum.

Dalam metode ini, warna yang terbentuk dikaitkan dengan pembentukan basa Schiff
yang terbentuk dari kondensasi kelompok aldehida dari aldehida yang dipelajari dengan asam
anthranilic 5-Sulfanoyl anthranilic.

Penentuan Fu dengan pembentukan metode basa Schiff dioptimalkan dengan

penyelidikan faktor-faktor yang mempengaruhi pembentukan senyawa berwarna. Faktor-
faktor ini adalah efek keasaman, efek dari jenis aldehida aromatik, optimalisasi waktu
pemanasan di bak air, efek suhu, efek waktu pada pengembangan warna dan stabilitas basa
Schiff yang terbentuk, penentuan λmax dari produk berwarna, efek konsentrasi Fu dan
kepatuhan terhadap hukum Beer dan efek spesies yang mengganggu.

Terlepas dari ketersediaan berbagai metode untuk penentuan furosemide yang

memiliki akurasi dan reproduktifitas yang lebih tinggi, namun pekerjaan ini telah
dikhususkan untuk menentukan obat Fu dalam formulasi farmasi yang berbeda,
menggunakan perbandingan dengan metode yang dilaporkan sebelumnya.

METODE SPEKTROFOTOMETRI TERVALIDASI UNTUK PENENTUAN

AMLODIPINE BESYLATE DALAM FORMULASI OBAT MENGGUNAKAN 2,3-
DIKLORO 5,6-DICYANO 1,4-BENZOQUINONE DAN ASAM ASKORBAT

Makalah ini menjelaskan dua metode sensitif, cepat, sederhana dan ekonomis untuk
penentuan amlodipine besylate dalam bentuk murni dan dosis. Metode pertama didasarkan
pada reaksi kompleksasi transfer muatan amlodipine dengan DDQ. Prosedur kedua
menggunakan reaksi kelompok obat primer / NH2 dengan asam askorbat dalam medium N,
N-dimethylformamide. Metode yang diusulkan telah divalidasi secara statistik.

Dengan metode DDQ, alikuot dari basis amlodipine 0,05% sesuai dengan 1/125 mg
ml 1 ditransfer ke serangkaian 5 ml volumetrik yang ditanyakan. 1,0 ml larutan DDQ 0,05%
ditambahkan dalam setiap lapisan dan diencerkan ke volume dengan asetonitril. Produk
berwarna segera terbentuk dan tetap stabil dari 3 hingga 25 menit. Oleh karena itu, absorbansi
diukur dalam periode stabilitas pada 580 nm terhadap blanko reagen yang disiapkan
bersamaan.

Dalam metode DDQ, satu-satunya variabel yang efektif adalah konsentrasi DDQ
karena reaksi menjadi stabil dalam 3 menit dan tetap tidak terpengaruh selama 20 menit lebih
lanjut. Untuk mempelajari efek konsentrasi DDQ, volume yang bervariasi dari pereaksi
0,05% dicampur dengan 0,5 ml obat dalam labu standar 5 ml dan diencerkan ke volume
dengan asetonitril. Absorbansi diukur setelah 3 menit pencampuran pada 580 nm terhadap
reagen kosong. Ditemukan bahwa 0,5 ml reagen memberikan absorbansi tertinggi, sedangkan
diatasanya absorbansi tetap konstan. Untuk itu selanjutnya digunakan 1,0 mL.

Dengan metode serapan asam, ke dalam serangkaian tabung mendidih, alikuot larutan
amlodipine besylate 0,1% dalam DMF (10/140 mg ml 1) dipipet. Ke setiap tabung, 2,5 ml
larutan asam askorbat 0,2% ditambahkan. Volume total dalam setiap tabung dipertahankan
hingga 5 ml dengan menambahkan DMF. Isi dicampur dengan baik dan ditempatkan di bak
air dipertahankan pada 1009/1 8C selama 25 menit. Solusi didinginkan hingga suhu kamar.
Campuran reaksi dan pencucian yang sesuai dipindahkan dan dikumpulkan dalam
serangkaian 10 ml labu ukur. Lalu diencerkan ke volume dengan DMF. Absorbansi diukur
dalam periode stabilitas 4 jam pada 530 nm terhadap reagen kosong yang diperlakukan
serupa.

Untuk mengoptimalkan waktu pemanasan untuk metode asam askorbat, 1,0 ml 0,1%
amlodipine besylate dicampur dengan 2,5 ml asam askorbat 0,2% dan dipanaskan pada 100
+/- 1C. Absorbansi diukur pada 530 nm terhadap reagen kosong sebagai fungsi waktu
pemanasan. Hasil menunjukkan bahwa absorbansi tetap konstan antara 22 dan 32 menit
pemanasan.

Dalam setiap kasus, koefisien korelasi ditemukan 0,9999, menunjukkan linearitas

yang baik dari grafik kalibrasi dan intersep semuanya mendekati nol. Varians dihitung
menggunakan persamaan dan ditemukan menjadi 4,44 x 10^-6 untuk DDQ dan 4,50 x 10^-5
untuk metode asam askorbat. Nilai-nilai kecil varians yang diperoleh untuk kedua metode
menunjukkan hamburan diabaikan dari titik data eksperimental dari garis paling cocok.
Keakuratan dan ketepatan metode yang diusulkan dievaluasi dengan analisis berulang pada
tiga tingkat konsentrasi yang berbeda. Hasil menunjukkan standar deviasi, standar deviasi
relatif dan kesalahan analitik standar dapat dianggap sangat memuaskan.

Di bawah kondisi eksperimental yang dijelaskan, linearitas dan sensitivitas adalah

yang terbaik dengan prosedur pembentukan kompleks transfer muatan. Kedua metode
spektrofotometri yang diusulkan adalah sederhana, sensitif dan dapat direproduksi. Selain itu,
prosedur ini mungkin sangat cocok untuk analisis rutin amlodipine besylate dalam bentuk
beberapa sediaan.

METODE SPEKTROFOTOMETRI UNTUK PENENTUAN AMLODIPINE

BESYLATE DENGAN NINHYDRIN DALAM FORMULASI OBAT

Spektrofotometri sebagai metode analisis kuantitatif masih termasuk teknik analitis

yang paling sering digunakan dalam analisis farmasi. Ini memberikan keuntungan ekonomi
yang praktis dan signifikan dibandingkan metode lain.

Prosedur uji kadar amlodipine besylate dalam sediaan farmasi berupa dua puluh tablet
ditimbang dan dibubuhi dengan akurat. Sebagian setara dengan 50 mg amlodipine besylate
diaduk dengan 20 ml DMF, didiamkan selama 10 menit, residu disaring pada Whatman no.
42 kertas saring dan dicuci dengan DMF. Filtrat dan pencucian diencerkan dengan volume
dalam 50 ml volumetrik dan dikenakan prosedur penentuan.

Ninhidrin telah dikenal sebagai pereaksi untuk deteksi asam amino dan amina.
Karenanya, sejumlah teori telah diajukan untuk menjelaskan mekanisme reaksinya.
Disarankan bahwa reaksi ninhidrin dengan amina, asam amino dan asam imino semuanya
dilanjutkan dengan mekanisme yang sama untuk memberikan diketohydrindylidene –
diketohydrindamine atau Ruhemann yang berwarna ungu. Senyawa ini selanjutnya akan
bereaksi dengan gugus amino untuk menghasilkan produk yang diserap secara maksimal
pada 595 nm.

Kondisi optimal untuk penentuan amlodipine besylate dibuat melalui sejumlah

percobaan seperti :

1. Efek waktu pemanasan

2. Efek konsentrasi ninhidrin
 Analisis regresi plot hukum Beer pada 595 nm menghasilkan persamaan regresi, A =
0,001 + 1,149 × 10−2C (di mana C = konsentrasi dalam g ml − 1). Nilai koefisien korelasi
yang tinggi (r = 0,9999) dan nilai intersep kecil memvalidasi linearitas kurva kalibrasi dan
kepatuhan terhadap hukum Beer.

Untuk menyelidiki penerapan metode spektrofotometri ini untuk menentukan

amlodipine besylate sendiri atau dalam sediaan farmasi, pengaruh keberadaan beberapa
eksipien umum seperti pati, talk, laktosa dan magnesium stearat dipelajari. Ditemukan bahwa
eksipien umum tidak ikut campur dalam penentuan.

Dapat disimpulkan bahwa metode yang diusulkan sensitif, sederhana, cepat dan
selektif untuk penentuan amlodipine besylate dalam formulasi komersial dan massal dengan
akurasi dan presisi yang baik. Waktu analisis singkat dan biaya rendah adalah keuntungan
utama dari metode yang dikembangkan untuk analisis rutin.

PENENTUAN SPEKTROFLUORIMETRI AMLODIPINE DALAM PLASMA

MANUSIA TANPA DERIVATISASI

Prosedur persiapan sampel dilakukan dengan menyimpan sampel plasma pada suhu -
20 oC dan dibiarkan mencair pada suhu kamar sebelum diproses. Jumlah yang tepat dari
larutan standar AD dipernis menjadi 0,2 mL dari setiap konsentrasi plasma manusia bebas-
obat dan campuran. Kemudian, 1,0 mL larutan buffer (1M natrium karbonat [Na2CO3] / 4M
natrium bikarbonat [NaHCO3], v / v) dan 3 mL pelarut ekstraksi (eter: heksana 1: 1 v / v)
ditambahkan, dan solusinya adalah vortex sekitar 10 menit. Campuran disentrifugasi selama
10 menit pada 4000 × g. Supernatan dipindahkan ke tabung penguapan dan diuapkan sampai
kering dalam penangas air yang dikendalikan secara termostatis yang dipertahankan pada
suhu 30 oC di bawah aliran nitrogen selama 20 menit. Residunya dilarutkan dalam 3 mL
etanol dan dipindahkan ke sel kuarsa untuk dianalisis. Solusi kosong dibuat dengan cara yang
sama menggunakan plasma manusia bebas obat.

Untuk mengurangi zat mengganggu endogen, pengendapan protein dilakukan. Dalam

metode ini, larutan buffer (Na2CO3 / NaHCO3) digunakan sebagai endapan, dan rasio
larutan buffer terhadap plasma diperiksa. Hasil penelitian menunjukkan bahwa presipitasi
protein terbaik dicapai pada rasio 1: 4. Eter: heksana (1: 1 v / v) digunakan sebagai solusi
untuk ekstraksi setelah pemulihan residu, dan solusi menunjukkan kinerja yang baik.

Pelarut adalah parameter penting untuk mengembangkan metode analitis

menggunakan fluoresensi karena sinyal dapat mengalami modifikasi sesuai dengan pelarut
yang digunakan. Mengubah polaritas pelarut dapat mengubah spektrum penyerapan dan
emisi AD. Pelarut yang dievaluasi adalah etanol, metanol, asetonitril, eter dan air dan
intensitas fluoresensi maksimum diperoleh dalam etanol.
 Kami mengembangkan dan berhasil memvalidasi metode spektrofluorimetri untuk
analisis kuantitatif AD dalam plasma manusia. Dari data yang diperoleh, dapat disimpulkan
metode yang diusulkan termasuk cepat, sederhana, akurat, dan dapat direproduksi untuk
analisis kuantitatif AD dalam plasma manusia. Metode yang diusulkan nyaman untuk
penentuan rutin AD di plasma dan laboratorium kontrol kualitas yang membutuhkan metode
ekonomi dan cepat.

PENENTUAN SIMETRI FLUORIMETRIK SIMULTAN

DARILAMIPODIPINEBESILAT DAN INTERVALDAPATDALAMBABLETNYA

Amlodipine, penghambat saluran kalsium dihidropiridin, dan valsartan, penghambat

reseptor angiotensin II, diformulasikan bersama dalam kombinasi dosis tunggal untuk
pengobatan hipertensi. Kombinasi ini digunakan oleh pasien yang tekanan darahnya tidak
cukup terkontrol pada kedua komponen monoterapi. AML dan VAL telah diformulasikan
dalam kombinasi dosis tetap di mana sekitar 80-90% pasien yang menerima kombinasi ini
mencapai respons, didefinisikan sebagai tekanan darah diastolik rata-rata duduk <90mm Hg
atau setidaknya pengurangan 10g Hg dari awal.

Prosedur umumnya berupa larutan stok AML (200μgmL-1) dan larutan stok VAL
(160μgmL-1) dibuat dalam metanol. Solusi kerja AML (40μgmL − 1) dan solusi kerja VAL
(8µgmL − 1) disiapkan dalam metanol dengan pengenceran volume yang sesuai dari larutan
stok yang sesuai. Stok dan solusi kerja stabil selama setidaknya dua minggu ketika disimpan
dalam suhu 4◦C. Larutan asam asetat 0,1 M berair disiapkan dan digunakan dalam penelitian
ini.

Solusi standar untuk grafik kalibrasi disusun dengan pengenceran volume yang akurat
dari solusi kerja AML dan VAL untuk mencapai rentang konsentrasi yang disebutkan dalam
Tabel1. Pengenceran dilakukan dengan menggunakan air suling untuk solusi-solusi LAM dan
0.1 Asam asetat untuk larutan-larutan VAL. Larutan-larutan gas tersebut disiapkan dengan
cara yang sama, tetapi obat-obatan tersebut dihilangkan. Intensitas fluoresensi untuk solusi
standar AML dan VAL diukur pada eksitasi tertentu dan panjang gelombang emisi yang
ditentukan.

Meninjau literatur mengungkapkan bahwa tidak ada laporan untuk penggunaan

metode berbasis fluoresensi untuk pengujian campuran ini. Metode yang diusulkan
menggabungkan keunggulan kecepatan dan kesederhanaan dari metode spektrometri
sederhana bersama dengan manfaat analitis penting lainnya, seperti sensitivitas dan
selektivitas. Metode yang diusulkan tidak memerlukan perawatan rumit atau pengaturan
eksperimental yang canggih yang biasanya terkait dengan metode analisis HPLC. Selain itu,
kesederhanaan diilustrasikan oleh persyaratan minimum bahan kimia dan pelarut karena
metanol adalah satu-satunya pelarut organik yang digunakan dalam prosedur, dan
pengukuran terakhir dari kedua obat itu dalam media air. Ini menunjukkan bahwa metode
yang diusulkan adalah hemat biaya dan ramah lingkungan. Keandalan dijamin dengan
menguji berbagai parameter validasi metode dan aplikasi yang berhasil untuk tablet
kombinasi obat tanpa pemisahan sebelumnya atau gangguan eksipien.
1. Faktor-faktor yang perlu diperhatikan dalam pengoptimalan penentuan furosemide
dengan basis Schiff adalah…
Efek keasaman, efek dari jenis aldehida aromatik, optimalisasi waktu pemanasan
di bak air, efek suhu, efek waktu pada pengembangan warna dan stabilitas basa
Schiff yang terbentuk, penentuan λmax dari produk berwarna, efek konsentrasi Fu
dan kepatuhan terhadap hukum Beer dan efek spesies yang mengganggu.

2. Pelarut buffer yang digunakan untuk pengendapan protein agar tidak ada zat pengganggu
endogen dalampenentuan amlodipine dalam plasma dengan spektrofluorimetri adalah…
Na2CO3 / NaHCO3