Teori Dasar Kromatografi

Kromatografi

Fase diam fase gerak

↓ ↓
Stationary phase mobile phase

Pemisahan
↓
Perbedaan laju migrasi
Polaritas senyawa
 Hukum Distribusi Kromatografi
↓
perbedaan distribusi komponen di dalam FG & FD
↓
koefisien distribusi / partisi (K)
↓
K = CS /CM

CS : kons. Molar komponen dlm FD

CM: kons. Molar komponen dlm FG
 Secara ideal : CS & CM
↓
kurva linier
CS Macam-macam bentuk
kesetimbangan CS & CM

CS D
B
A
0
CM C

CM
Kurva A : ideal → tidak saling campur
→ kromatografi Linier
B/C : ada asosiasi & desosiasi
D : ada reaksi isoterm adsorpsi
↓
Kromatografi → cenderung kurva A → konsentrasi relatif rendah
 Elusi dalam kolom kromatografi
Sp Solvent Elusi : proses terbawanya
E komponen dlm suatu camp,
B+E shg ada pemisahan
komponen yg dibawa oleh FG
kolom

E
A+E dari ujung atas kolom →
E bawah
D tR : waktu yg diperlukan oleh
komponen untuk bermigrasi
sepanjang kolom
Vr : volume FG yg
signal

dibutuhkan untuk membawa

komponen dari titik awal
tR kolom → akhir kolom
 F : laju alir FG yang menyatakan jumlah vol FG per satuan waktu
↓
F = VR / tR
tR = VR / F

Dalam kolom yang ideal

↓
Komp. yang tidak teretensi
↓
t=0
↓
Komp. di atas memerlukan waktu untuk bermigrasi →
tM : waktu FG melewati kolom
VM : fraksi volum kolom yang dilalui komponen
→
t R’ = t R – t M
V R’ = V R – V M
terkoreksi
Untuk menerangkan proses pemisahan dlm kromatografi ada 2 macam
teori :

1. Teori Lempeng (Plate Theory)

↓
Martin & Synge (1941)
↓
Efisiensi kolom
↓
Apabila jumlah kesetimbangan makin besar
→ efisiensi >> → menambah jumlah lempeng (N)
→ tebal lempeng teoritik → H
N & H → menyatakan efisiensi
↓
Secara matematis : N = L / H
Kelemahan teori :
tidak mampu mengidentifikasi variabel-variabel yang mempengaruhi pelebaran pita
kromatogram
2. Teori Kinetik ( Kinetics Theory)

Dapat mengatasi kelemahan teori Plate.

→ teori laju / rate theory

↓
Partikel komponen bermigrasi diantara FG & FD
↓
Migrasi sangat tidak teratur
↓
Energi thermal
↓
Gerakan partikelnya random
↓

Ditribusi simetrik Gauss

 H.E.T.P

H = 16 L x (Wb / tR)2

N = 16 x (tR / Wb)2 = (4tR/W)2

Simetrik Gauss → t (waktu) lama →puncak lebar

 Menurut Van Deemter
↓

Ada 3 proses secara stimultan yg mempengaruhi variabilitas laju

migrasi komponen diantara FG & FD :

1. Difusi Eddy (Eddy diffusion)

2. Difusi longitudinal (longitudinal diffusion)
3. Proses transfer massa
↓
Pada tebal lempeng teoritik (H) → merupakan fungsi linier
variabilitas laju migrasi komponen
↓
Persamaan Van Deemter
H = A + B /µ + C.µ

A = koefisien Difusi Eddy

B = koefisien Difusi longitudinal
C = (CS + CM) = koefisien total
 Difussi longitudinal
↓
Pelebaran pita
↓
Molekul komponen dlm FG → bermigrasi dari konsentrasi tinggi ke
konsentrasi rendah
↓
Kontribusi variabilitas laju migrasi yg menurun secara hiperbolik
terhadap kenaikan kecepatan linier FG (µ)
↓
Pada tebal lempeng teoritik

2ΨDM B
HLD = =
µ µ
DM = koefisien difusi komponen FG
Ψ = kualitas packing FD
↓
0,6
 Pelebaran pita Transfer Massa
↓
Konstribusi H akan naik apabila kec. Linier FG naik
↓
Makin cepat kec. FG akan makin singkat proses transfer massa
→ pemisahan rendah

• Pelebaran pita diffuse Eddy

↓
Akibat tidak homogen pori dalam packing kolom
↓
Ada yang jalannya pendek dan ada yang panjang
 B
Composite curve

C standar
H. Opt
C mobile
H

H min

Proses migrasi

H = A + B / µ + C.µ → Persamaan Van Deemter

 tA

Sinyal analitik

tM

0
t (waktu)
W
Kromatografi camp. 2 komp, yang mengalami retensi &
tidak
konsentrasi

A B
Jarak migrasi

Profil konsentrasi komp. A & B dalam kolom pada

jarak migrasi yang berbeda
 VARIABEL TERMODINAMIKA PADA PEMISAHAN

Mempengaruhi kualitas kolom

1. Waktu Retensi
tR
V= xµ Laju migrasi komponen
tM

2. Faktor-faktor kapasitas kolom (k’)

Ratio jumlah molekul komponen dalam FD
terhadap jumlah molekul komponen dalam FG
Lanjutan…

nS [ CS x V S ]
k’ = = Pengalaman : k’ < 1
nM [ CM x VM ] ↓
Tidak memisah
VS
k’ = xk
VM Disarankan : k’ semakin besar
↓
( tR – tM) tR’ Pemisahan ↑
k’ = = ↓
tM tM k’ > 10
↓
Tidak ekonomis
3. Faktor selektivitas (α)
↓
Ratio koef. Distribusi 2 komponen yang akan dipisahkan
↓
Menggambarkan kemampuan pemisahan suatu kolom
↓
α = KB / KA
KB / KA = koef. Distribusi komp. B / A
Dimana : KB = koef. Distribusi komponen B yg teretensi
kuat dalam kolom
KA = koef. Distribusi komponen A yg teretensi
lemah dalam kolom
Ada hubungan dengan k’
↓
α = KB’ / KA’
↓
(tR)B - tM
α=
(tR)A - tM
4. Resolusi Kolom (Rs)
ΔZ 2 ΔZ
RS= =
0,5WA + 0,5WB ( WA + WB )

2 [ (tR)B – (tR)A ]
RS=
WA + WB

ΔZ = jarak puncak A & puncak B

WA = lebar dasar kromatogram A
WB = lebar dasar kromatogram B
Disarankan RS ≥ 1,5
↓
Hubungan dengan faktor-faktor lain
VN ( α – 1) k’B
RS = x x
4 α ( 1 + k’B )