PEMBAHASAN TUGAS TEKNOLOGI BIOPROSES

2.1

Vcellobiose = 5 ml VES = 1 ml
𝜇𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑔
Co cellobiose = 100 𝑚𝑙 FES0 = 0,1 𝑚𝑙 𝑝𝑟𝑜𝑡𝑒𝑖𝑛
V lar buffer = 44 ml

konsentrasi Glukosa
Time
mmol/ml
1 0,05
5 0,23
10 0,38
15 0,52
30 1,03
Ditanya :

a. Berapa aktivitas dari -glucosidase dinyatakan dalam unit/ml larutan enzim dan
unit/mgprotein? Unit didefinisikan sebagai aktivitas enzim yang dapat menghasilkan
1mol produk tiap menit?
b. Initial laju reaksi

Solution :

Aktivitas enzim dapat dicari dengan slope grafik fungsi antara konsentrasi produk
terhadap waktu. (Harvey W.Blanch,”Biochemical Engineering”,p.7)

1,2

1 y = 0,033x + 0,0391
Konsentrasi (mM)

0,8

0,6

0,4

0,2

0
0 5 10 15 20 25 30 35
t (menit)
 a. Total volume = 44 + 5 +1 = 50 ml
Dari grafik didapat persamaan y = 0,033x + 0,0391
Didapatkan slope = activity = 0,033 mol/ml.min = 0,033.10-3 mmol/ml.menit
Activitas dari -glucosidase
0,033 x 50 = 1.65 mol/ml.min
1,65 𝜇𝑚𝑜𝑙/𝑚𝑖𝑛
= 𝑚𝑔
0,1 𝑚𝑙 × 0,1 𝑚𝑙
𝑢𝑛𝑖𝑡𝑠
= 165 𝑚𝑔 𝑝𝑟𝑜𝑡𝑒𝑖𝑛

Atau
1,65 𝜇𝑚𝑜𝑙/𝑚𝑖𝑛
=
1 𝑚𝑙 𝑜𝑓 𝑒𝑛𝑧𝑦𝑚𝑒
𝑢𝑛𝑖𝑡
= 1,65
𝑚𝑙 𝑜𝑓 𝑒𝑛𝑧𝑦𝑚𝑒

b. Initial rate reaction = activity = 0,033 mol/ml.min = 0,033.10-3 mmol/ml.min.

2.2

Urutan beikut menggambarkan reaksi dua substrat yang berbeda dikatalisis oleh satu enzim :

k1
E + S1 ES1
k2
k3
E + S2 ES1S2
k4

k5
ES1S2 P+E
a. Dengan menggunakan asumsiMichaelis-Menten sehingga diperoleh :

𝑑𝑃
𝑟𝑃 = = 𝑘5 𝐶𝐸𝑆1 𝑆2 …………………………………………………….(1)
𝑑𝑡

𝑘1 𝐶𝐸 𝐶𝑆1 = 𝑘2 𝐶𝐸𝑆1 ………………………………………………………(2)

𝑘3 𝐶𝐸𝑆1 𝐶𝑆2 = 𝑘4 𝐶𝐸𝑆1 𝑆2 …………………………………………………..(3)

𝐶𝐸0 = 𝐶𝐸𝑆1 + 𝐶𝐸𝑆1 𝑆2 𝐶𝐸 …………………………………………………….(4)

𝑘 𝑘 𝑘
𝐶𝐸𝑆1 𝑆2 = 𝑘3 𝐶𝐸𝑆1 𝐶𝑆2 = 𝑘3 𝑘1 𝐶𝐸 𝐶𝑆1 𝐶𝑆2 …………………………………..(5)
4 4 2
 𝑘
𝐶𝐸𝑆1 = 𝑘1 𝐶𝐸 𝐶𝑆1 ........................................................................................(6)
2

𝐶𝐸 = 𝐶𝐸0 − 𝐶𝐸𝑆1 − 𝐶𝐸𝑆1 𝑆2

Pers. (5) & (6) ke pers.(4)

𝑘 𝑘 𝑘
𝐶 𝐸 = 𝐶𝐸0 − 𝑘1 𝐶𝐸 𝐶𝑆1 − 𝑘3 𝑘1 𝐶𝐸 𝐶𝑆1 𝐶𝑆2 ………………………………….(7)
2 4 2

𝑘1 𝑘3 𝑘1
𝐶𝐸 (1 + 𝐶𝑆1 + 𝐶 𝐶 ) = 𝐶𝐸0
𝑘2 𝑘4 𝑘2 𝑆1 𝑆2

𝐶𝐸0
𝐶𝐸 = 𝑘1 𝑘 𝑘 ………………………………………………(8)
(1+ 𝐶𝑆1 + 3 1 𝐶𝑆1 𝐶𝑆2 )
𝑘2 𝑘4 𝑘2

Dari pers.(1)
𝑑𝑃
𝑟= = 𝑘5 𝐶𝐸𝑆1 𝑆2
𝑑𝑡

Dengan mensubstitusi pers.(5) ke pers.(1)

𝑘 𝑘
𝑟 = 𝑘5 𝑘3 𝑘1 𝐶𝐸 𝐶𝑆1 𝐶𝑆2 ………………………………(9)
4 2
Dengan mensubstitusi pers.(8) ke pers. (9)
𝑘3 𝑘1 𝐶𝐸0
𝑟 = 𝑘5 𝐶 𝐶
𝑘4 𝑘2 (1 + 𝑘1 𝐶 + 𝑘3 𝑘1 𝐶 𝐶 ) 𝑆1 𝑆2
𝑘2 𝑆1 𝑘4 𝑘2 𝑆1 𝑆2

𝑘5 𝑘3 𝑘1𝐶𝐸0 𝐶𝑆1 𝐶𝑆2

= 𝑘 𝑘 𝑘 …………………………………………..(10)
𝑘4 𝑘2(1+ 1𝐶𝑆1 + 3 1𝐶𝑆1 𝐶𝑆2 )
𝑘2 𝑘4 𝑘2

𝑘5 𝑘3 𝑘1
𝐶 𝐶 𝐶
𝑘4 𝑘2 𝐸0 𝑆1 𝑆2
=
𝑘3 𝑘1 𝑘4 𝑘2 𝑘4
( + 𝐶 + 𝐶𝑆1 𝐶𝑆2 )
𝑘4 𝑘2 𝑘3 𝑘1 𝑘3 𝑆1
𝑘5 𝐶𝐸0 𝐶𝑆1 𝐶𝑆2
= … … … (11)
𝑘 𝑘 𝑘
( 4 2 + 1 𝐶𝑆1 + 𝐶𝑆1 𝐶𝑆2 )
𝑘2 𝑘1 𝑘3

𝑘 𝑘
Jika rmax= 𝑘5 𝐶𝐸0 dan Km= 𝑘4 𝑘2 , maka persamaan (11) menjadi
3 1

𝑟𝑚𝑎𝑥 𝐶𝑆1 𝐶𝑆2

𝑟=
𝑘
𝐾𝑀 + 𝑘4 𝐶𝑆1 + 𝐶𝑆1 𝐶𝑆2
3

b. Jika CS1>>> CS2, maka persamaan (11) menjadi

𝑑𝑃 𝑟𝑚𝑎𝑥 𝐶𝑆1 𝐶𝑆2 𝑘
𝑟= = 𝑘 , Karena CS1, CS2<<<𝑘4 𝐶𝑆1
𝑑𝑡 𝐾𝑀 + 4 𝐶𝑆1 3
𝑘3
2.5 (Diexcel)

2.9.

A substrate is converted to a product by the catalytic action of an enzyme. Assume that the
Michaelis –Menten kinetic parameters for this enzyme reaction are:

KM = 0,03 mol/L

rmax = 13 mol/L.min

a. What should be the size of a steady – state CSTR to convert 95 percent of incoming substrate (Cso
= 10 mol/L) with a flow rate of 10 L/hr?

b. What should be the size of the reactor if you employ a plug-flow reactor instead of the CSTR in
part (a)?

Diketahui :

KM = 0,03 mol/L CSO = 10 mol/L

X = 0,95 rmax = 13 mol/L.min

νO = 10 L/ h = 0,167 L/min

FO = CSO . νO = 10 mol/L . (0,167 L/min)

= 1,67 mol/min

Asumsi Mengikuti kinetik Michaelis – Menten :

CSTR (Continuous Stirred – Tank Reactor)

FO = FO (1 − X ) + (−rS ).V + 0
FO X + (− rS ).V = 0
𝐹0 .𝑋
𝑉=
𝑟𝑠
rmax .CS
pers. Michaelis Menten : rS =
K M + CS
Persamaan Michaelis Menten di substitusi ke pers. Volume :

FO . X ( K M + C S ) FO . X ( K M + C SO (1 − X )
V= =
rmax .C S rmax .C SO (1 − X )

(1,67mol / min)(0,95)[(0,03mol / ltr ) + (10mol / ltr )(1 − 0,95)]

V=
(13mol / min .ltr )(10mol / ltr )(1 − 0,95)
(1,586mol / min)(0,53mol / ltr )
V = = 0,129ltr
6,5mol 2 / min ltr 2

PLUG FLOW REACTOR (PFR)

Input = output + reaction + accumulation

Fs = ( Fs + dFs ) + (−rs )dV

dFs = d[FO(1 – X)]
FO.dX = (-rs).dV
Xf
V dX
F0
= 0 − rs
Persamaan Michaelis Menten (MM) :

rmax .C S
rS =
K M + CS
Persamaan (MM) di subs ke pers volume :

F0 ( K M + C S )
dx = V
rmax .C S

F0 [ K M + C SO (1 − X )]
dx = V
rmax .C SO (1 − X )
 F0 .K M X 1 FO X
rmax .C SO 0 (1 − X ) rmax 0
dx + dx = V

F0 K M F
[− ln(1 − X )] + O X = V
rmax .C SO rmax
(1,67mol / min)(0,03mol / ltr ) (1,67mol / min)(0,95)
[− ln(1 − 0,95)] + =V
(13mol / ltr min)(10mol / ltr ) (13mol / min ltr )

0,0501mol 2 / min ltr 1,67mol / min

− 2 2
(−2,99) + =V
130mol / min ltr 13mol / min ltr

Volume PFR : V = 0,123 liter = 123 ml

2.10
Parameter Kinetika :
KM = 10 g/L
rmax = 7 g/L min.
Flow rate 0,5 L/menit. Konsentrasi substrat yang masuk 50 g/L dan konsentrasi enzim sama
setiap waktu. Jika 2 CSTR (seri) 1 Liter beroperasi steady state, tentukan konsentrasi
substrat yang meninggalkan reaktor kedua.
Gambar rangkaian reaktor CSTR

Cso

Reaktor I Cs1 Reaktor II Cs2

Perhitungan pada Reaktor I

F 1 rmax C s
=D= =
V  (Cso − Cs )( K M + Cs )

1 F 0,5 L / menit
= = = 0,5 / menit
 V 1L
Dari neraca massa untuk CSTR diperoleh persamaan :

1 rmax CS1
=
 (C S0 )(
− CS1 K M + CS1 )
rmax CS1
CS1 = − K M +
CS0 − CS1
7 x 2 x CS1 10 x CS1
CS1 = −10 + = −10 +
50 − CS1 50 − CS1
14 x CS1
CS1 − = −10
50 − CS1

(
CS1 50 − CS1 − 14CS1 ) = −10
50 − CS1
didapatkan persamaan : CS21 − 26CS1 − 500 = 0
Maka dengan menggunakan kaidah akar persamaan kuadrat, CS dapat dicari :

− b  b 2 − 4ac − (−26)  (−26) 2 − 4.1.( −500)

CS = =
2a 2.1
Sehingga konsentrasi substrat dari Reaktor I didapat, CS1 = 38,87 g/L

Perhitungan pada Reaktor II

Pada reaktor II umpan yang masuk adalah Cs1 (aliran keluar reaktor 1
rmax CS
CS = − K M +
CS0 − CS
V 1
= = = 2 menit
F 0,5

Sehingga,
7 x 2 x CS
CS 2 = −10 +
38,87 − CS 2
14 CS 2
CS 2 − = −10
38,87 − CS 2
( )
CS2 38,87 − CS2 − 14CS2
= −10
38,87 − CS2
CS21 − 14,87CS 2 − 388,7 = 0
CS 2 = 28,51
Konsentrasi substrat keluar Reaktor II sebesar 28,51 g/L
Apakah sistim dua reaktor lebih efisien daripada satu reaktor yang volumenya sama dengan jumlah
dari dua reaktor ?

Jika, V = 2 L, maka :

1 F 0,5 L / menit
= = = 0,25 / menit
 V 2L
r C 7 xC S x 4
CS = − K M + max S = −10
(CS0 − CS ) (50 − CS )
28xCS
CS − = −10
(50 − CS )
CS (50 − CS ) − 28CS
= −10
50 − CS
CS2 − 12CS − 500 = 0
CS = 29,15
Konsentrasi substrat keluar reaktor sebesar 29,15 g/L.

Dari perhitungan maka akan lebih efisien jika digunakan 2 reaktor dengan volume 1 L karena jumlah
substrat yang keluar dari reaktor seri lebih kecil dibanding reaktor tunggal.