Jurnal Penelitian Tanaman Obat Vol. 5 (15), hlm.

3453-3456, 4 Agustus, 2011 Tersedia

online di http://www.academicjournals.org/JMPR ISSN 1996-0875 © 2011 Jurnal
Akademik Karya

Penelitian Panjang Penuh

Kertas

Aktivitas antimikroba dari ekstrak minyak atsiri Ocimum

basilicum L. meninggalkan berbagai bakteri patogen
Amir Mohammad Daneshian Moghaddam1*, Jalal Shayegh2, Peyman Mikaili3 dan Jalil
Dolghari Sharaf2

1Departemen Crops Field, Fakultas Pertanian, Universitas Islam Azad Cabang Shabestar, Universitas Islam Azad, Shabestar, Iran.

2Departemen Kedokteran Hewan, Fakultas Pertanian, Universitas Islam Azad, Cabang Shabestar, Universitas Islam Azad, Shabestar,

Iran. 3Departemen Farmakologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Urmia Ilmu Kedokteran, Urmia, Iran.

Diterima 17 Mei 2011

Karena dalam beberapa tahun terakhir penggunaan bahan herbal telah meningkat, tampaknya perlu mempelajari
efek antibakteri dari mereka. Ramuan kemangi, yang mudah dibudidayakan di seluruh dunia, mungkin
merupakan kandidat yang berpotensi baik untuk digunakan sebagai tanaman dengan aktivitas antibakteri. Minyak
esensial disuling menggunakan alat tipe Clevenger dan diekstraksi dari daun tanaman. Sifat-sifat antibakteri
minyak atsiri kemangi dipelajari pada bakteri gram negatif standar termasuk Escherichia coli, Pseudomonas
aeruginosa, dan yang positif-gram termasuk Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, kemudian difusi
cakram agar, konsentrasi penghambatan minimum (MIC) dan konsentrasi bakterisida minimum. (MBC)
terdeteksi. Hasil tes difusi agar disk menunjukkan zona penghambatan sebagai berikut: S. aureus 29.20-30.56
mm, B. cereus 10.66-16.11 mm, E. coli 17.48-23.58 mm dan untuk P. aeruginosa zona hambatan maksimum
terlihat. Hasil penelitian ini menunjukkan adanya efek bakteriostatik dari minyak esensial basil pada semua
bakteri uji. MIC untuk bakteri gram positif adalah sebagai: B. cereus mulai 36-18 μg / mL, S. aureus 18 μg / mL,
dan untuk bakteri Gram-negatif dari E. coli dan P. aeruginosa adalah 18-9 μg / mL.

Kata kunci: kemangi (Ocimum basilicumMinyak atsiri), bakteri gram positif dan gram negatif, antibakteri, konsentrasi
penghambatan minimum (MIC), konsentrasi bakterisida minimum (MBC).

PENDAHULUA
N

Basil (Ocimum basilicum L.), anggota Lamiaceaesesil axillary whorls. Calyx adalah bilabiate, dan corolla 4-
keluargaadalah ramuan tahunan yang tumbuh di beberapalobed. Bibir bawahnya sederhana; 4 benang sari terletak di
daerah di dunia. Bunga labiate putih, mawar, dan kadang-atasnya. Di antara lebih dari 65 spesies genus Ocimum,
kadang violet berwarna bunga 6-blossomed, pedicled, hampirkemangi adalah tanaman minyak atsiri utama yang
dibudidayakan secara komersial di banyak negara (Sajjadi, tradisional (Sajjadi, 2006). Namun, baru-baru ini potensi
2006). Basil memiliki bau khas dan rasa yang tajam. Tanaman penggunaan O. basilicum minyak esensial, terutama sebagai
itu mungkin berasal dari India, Afghanistan, Pakistan, India agen antimikroba dan antioksidan juga telah diselidiki (Lee et
Utara, dan Iran, dan sekarang dibudidayakan di seluruh dunia. al., 2005; Wannissorn et al., 2005). O.basilicum minyak
Secara tradisional, basil telah banyak digunakan esensial dipamerkan beragam dan bervariasi dari senyawa
kimia, tergantung pada variasi chemotypes, daun dan bunga
warna, aroma dan asal tanaman (Da-Silva et al., 2003) .suatu
konstituen utama meliputi chavicol metil ether atau estragole,
* Penulis yang sesuai. E-mail: daneshian.am@gmail.com Telp: + linalool dan eugenol (Hussain et al., 2008; Omidbaigi et al.,
984712225311-14. Faks: +984113280055.
2003).
digunakan dalam makanan sebagai zat penyedap, dan dalam
Studi dalam literatur menunjukkan linalool sebagai agen
industri wewangian dan medis (Telci et al., 2006). Daun dan
aktif utama yang bertanggung jawab untuk aktivitas antibakteri
puncak berbunga tanaman dianggap sebagai karminatif,
(Ravid et al., 1997) dan penelitian lain menunjukkan tanaman
galaktogogik, lambung dan antispasmodik dalam pengobatan
ini
3454 J. Med. Menanam. Res.
Tabel 1. Perbandingan zona hambatan (mm) dari minyak esensial yang berbeda (EO) dalam tahap pengumpulan yang berbeda (FC: Pemotongan
pertama; SC: Pemotongan kedua) pada mikroorganisme.
Tahap pemotongan tanaman (minyak atsiri daun)
Mikroorganisme
Tetrasiklin FCSC Staphylococcus aurous 23,93 29,20 30,5620,53 Bacillus cereus 16,06 14,73 Escherichia coli R 21,60 23,58
Pseudomonas euriginosa 12,64 Max Max
cocok untuk digunakan sebagai antibakteri terhadap mikroba produk yang merusak dan meracuni makanan yang
merusak mikroba (seperti mikroba). al., 1998; Politeo et al., 2007).
BAHAN DAN METODE
Pengumpulan dan pretreatment bahan tanaman
Bagian udaradibudidayakan O. basilicum yang pada awal tahap pembungaan dikumpulkan dua kali selama musim panas (23 Juli dan 1 Agustus
2007), pada jarak 10 cm dari batang dari bumi. Tumbuhan berbudaya di tanah tanpa pupuk. Spesimen dikeringkan dalam bayangan dingin dan
dalam suhu ruang lab.
Isolasi minyak atsiri
50 g bahan tanaman dan 250 ml air telah ditempatkan di alat tipe Clevenger. Minyak esensial diisolasi dengan distilasi air selama 3 jam (Bernath,
1990). Minyak esensial yang diperoleh disimpan di bawah argon dalam botol tertutup, pada suhu -20 ° C sebelum digunakan.
Uji mikroorganisme
Dalam penelitian ini, kami meneliti sifat antibakteri dari minyak esensial daun kemangi saja, pada bakteri Gram-positif dan negatif, yang dibeli
dari Penelitian dan Standar Industri Iran. Penelitianin-vitro antimikrobadilakukan pada empat strain bakteri, yang Gram-negatif termasuk
Escherichia coli (PTCC 1535), Pseudomonas aeruginosa (PTCC 1310), dan untuk Gram-positif kami menggunakan Bacillus cereus (PTCC
1015),PTCC 1015), Staphylococcus aureus (PTCC 1112). Semua strain ditanam pada kaldu nutrisi (Merck).
Penentuan aktivitas antimikrobaaktivitas
Penentuanantimikroba dilakukan sesuai dengan standar yang direkomendasikan oleh CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute), yaitu,
pada awalnya metode difusi disk dilakukan untuk semua isolat, dan kemudian metode sensitivitas MIC dilakukan untuk kultur. dengan hasil
positif pada minyak atsiri (Ravid et al., 1997; Mazzanti et al., 1998).
Metode difusi
disk Metode difusi disk digunakan untuk menentukan aktivitas antimikroba dengan metode difusi disk. Biakan
mikroorganisme segar yang ditanam selama 24 jam digunakan dan diencerkan 10-1 dengan larutan garam
fisiologis steril (0,85% NaCl). 100 μlsuspensi mikroorganisme uji yang mengandung 1,5 × 10 8 CFU / ml bakteri
diinokulasi pada permukaanMuller Hinton Agar
pelat(Merck). Tiga cakram steril dengan diameter 6 mm ditempatkan pada setiap lempeng agar yang mengandung
mikroorganisme. Kemudian 30 μlekstrak dijatuhkan ke cakram dalam kondisi steril dan diinkubasi pada + 37 ±
0,1oC selama 24 jam. Setelah inkubasi, diameter zona hambatan diukur dalam milimeter pada semua pelat. Semua
percobaan diulang tiga kali. Tetrasiklin (30 μg / disc) (SIGMA) disc digunakan sebagai kontrol positif. Cakram
dimetilsulfoksida murni (DMSO) digunakan sebagai kontrol negatif.
Uji Microdilution
Nilai konsentrasi penghambatan minimal (MIC) juga dipelajari untuk mikroorganisme yang ditentukan sebagai sensitif terhadap ekstrak dalam uji
difusi disk. Inokula mikroorganisme disiapkan dari 12 jam biakan kaldu dan suspensi disesuaikan dengan 0,5 McFarland standard turbidity
(Dastouri et al., 2008).O. basilicum Minyak esensialdaun dilarutkan dalam 10% dimetilsulfoksida (DMSO) pertama kali diencerkan dengan
konsentrasi tertinggi (600 ug / ml) untuk diuji, dan kemudian seri dua kali lipat pengenceran dibuat dalam berbagai konsentrasi 9,37-600 μg / ml
dalam 10 ml tabung reaksi steril yang mengandung kaldu Mueller-Hinton. Nilai MIC dari O. basilicum minyak esensialterhadap strain bakteri
ditentukan berdasarkan metode pengenceran sumur mikro dengan beberapa modifikasi. Piring 96 sumur disiapkan dengan mengalirkan ke dalam
masing-masing sumur 95 μl kaldu nutrisi dan suspensi mikroorganisme yang mengandung 1,5 × 10 8 CFU / ml bakteri. 100 μl dari O. basilicum
essential oil awalnya disiapkan pada konsentrasi 600 μg / ml ditambahkan ke dalam sumur pertama. Kemudian 100 μl dari pengenceran seri
mereka dipindahkan ke empat sumur berturut-turut. Sumur terakhir yang mengandung 195 μl kaldu Mueller-Hinton tanpa senyawa dan 5 μl
inokulum pada setiap strip digunakan sebagai kontrol negatif. Volume akhir di setiap sumur adalah 200 μl. Isi setiap sumur dicampur pada plat-
shaker pada 300 rpm selama 20 detik dan kemudian diinkubasi pada suhu yang sesuai selama 24 jam. Pertumbuhan mikroba ditentukan dengan
pengukuran absorbansi pada 600 nm menggunakan ELX 800 universal micro plate reader (Biotech Instrument Inc., USA) dan hasilnya
dibandingkan dan dikonfirmasi dengan menyepel 5 μl sampel dari sumur jernih pada media agar nutrien. Ekstrak diuji dalam penelitian ini
disaring dua kali terhadap masing-masing organisme dan untuk dua minyak esensial dan juga untuk dua tahap pengumpulan. MIC didefinisikan
sebagai konsentrasi terendah senyawa untuk menghambat pertumbuhan mikroorganisme (Adiguzel et al., 2005).
HASIL
Sifat antibakteri dari beberapa minyak atsiri dipelajari dalam 24 jam. Hasilnya menunjukkan bahwa minyak atsiri
dari dua tahap pengumpulan (pemotongan pertama dan kedua) memiliki aktivitas antibakteri (Tabel 1).
Perbandingan zona penghambatan karena minyak esensial dan cakram kontrol (Tetracycline),
Moghaddam et al. 3455
Tabel 2. Hasil MIC minyak esensial yang berbeda (EO) dalam tahap pengumpulan yang berbeda (FC: pemotongan pertama; SC: pemotongan
kedua) pada mikroorganisme (ND: tidak ditentukan).
Tahap pemotongan
Staphylococcus aureus Bacillus cereus Escherichia coli Pseudomonas aeruginosa
MIC μg / ml
MBC
MIC
MBC
MIC
MBC μg / ml
μg / ml
μg / ml
μg / ml
μg / ml EO dari Leaf FC 18 * 18 * 9 ND 9 ND EO dari Leaf SC 18 * 36 * 18 ND 18ND
Minyak atsiridari kedua tahap pengumpulan menunjukkan hasil yang lebih baik untuk galur Gram-negatif
Escherichia coli dan P. aeruginosa. Di antara kuman Gram-positif, penelitian mengungkapkan hasil yang lebih baik
terhadap Staphylococcus aureus.
Hasil MIC dari minyak esensial yang berbeda telah ditabulasi dalam Tabel 2. Efek MIC terbaik terkait dengan
bakteri negatif Gram (dalam konsentrasi 9 μg / ml) untuk E. coli dan P. aeruginosa, minyak atsiri yang diekstraksi
dari daun dari panen pertama. Konsentrasi MBC untuk bakteri yang terakhir tidak dapat dihitung. Itu karena
konsentrasi ekstrak yang terlalu rendah yang aktif melawan bakteri daripada pengaturan uji kami dibandingkan
dengan pengenceran lainnya.
DISKUSI
Banyak perbedaan dalam makalah literatur termasuk perbedaan metodologi mengevaluasi sifat antimikroba, dan
juga perbedaan dalam kandungan herbal dan komposisi dari wilayah geografis yang berbeda, membuatnya sulit dan
bahkan tidak mungkin membandingkan studi tentang kegiatan antimikroba dari O. basilicum. Hasil penelitian kami
menunjukkan aktivitas minyak atsiri O. basilicum yang lebih baik pada kuman Gram-negatif daripada yang Gram-
positif.
Ini tidak setuju dengan hasil penelitian yang dilakukan oleh Prasad et al. (1986) di mana ekstrak minyak O.
basilicum dikumpulkan dari berbagai wilayah geografis, memiliki efektivitas tinggi pada Gram-positif dibandingkan
dengan yang Gram-negatif. Meskipun dalam penelitian yang sama, ekstrak minyak O. basilicum memiliki
kemanjuran tinggi pada Salmonella strain(Prasad et al., 1986; Opalchenovaa dan Obreshkova, 2003). Namun dalam
penelitian lain, Sinha dan Gulati (1990) telah melaporkan efektivitas O. basilicum pada E. coli, Salmonella typhi,
Salmonella paratyphi, Shigella boydi, Proteus vulgaris, dan S. aureus. Hasil penelitian kami mengungkapkan bahwa
perbedaan dalam senyawa tanaman dan metode ekstraksi dapat mempengaruhi aktivitas antimikroba. Beberapa
penelitian juga mengkonfirmasi saran kami. Karena minyak atsiri berbeda (dari dua tahap pemotongan), dapat
diprediksi bahwa sifat antimikroba mereka akan berbeda. Hal ini disebabkan oleh perbedaan fisiologis dari berbagai
 tahap pertumbuhannya; karenanya ini mempengaruhi
MIC μg / ml
MBC μg / ml

komposisidan kandungan ekstraksi minyak atsiri akhir. Selain itu, faktor lingkungan, termasukhari panjang,
intensitas cahaya dan suhu sekitar mempengaruhi jumlah dan kualitas kandungan minyak atsiri dan
akhirnya akan mempengaruhi sifat obat tanaman. Telah ditunjukkan bahwa dalam keluarga Lamiaceae,
panjang hari meningkatkan kandungan ekstraksi mereka, dan durasi cahaya siang meningkatkan kualitas
bahan aktif mereka.
Minyak esensial yang digunakan dalam penelitian ini terkait dengan tanaman, yang dipotong dalam dua tahap,
termasuk 23 Juli untuk pemotongan pertama dan 1 Agustus untuk pemotongan kedua. Karena panjang hari dan
intensitas cahaya dan juga suhu bulanan rata-rata dari tahap pemotongan pertama lebih dari periode pemotongan
kedua, persentase ekstrak dan kualitas bahan aktif lebih baik daripada tahap kedua. Hasilnya mengungkapkan
bahwa, aktivitas antimikroba dari minyak atsiri dari pemotongan pertama lebih signifikan daripada yang kedua. Di
sisi lain, jumlah bahan aktif ekstraksi hanya-daun lebih banyak daripada bagian seluruh tanaman, yang bertanggung
jawab atas efisiensi ekstrak yang lebih tinggi dalam menghambat pertumbuhan bakteri.
DAFTAR PUSTAKA
Adiguzel A, Gulluce M, Sengul M, Ogutcu H (2005). Efek Antimikroba Ocimum basilicum (LabiataeEkstrak). Turk. J. Biol., 29: 155-160. Bernath J
(1990). Pendekatan ekofisiologis dalam optimalisasi
tanaman obat, agro-sistem. Herba Hung., 29: 7-15. Da-Silva F, Santos RHS, Diniz ER, Barbosa LCA, Casali VWD, De-Lima RR (2003). Kandungan dan
komposisi minyak atsiri kemangi pada dua jam berbeda dalam sehari dan dua musim. Braz. J. Med. Tumbuhan, 6 (1): 33-38. Dastouri MR, Fakhimzadeh
K, Shayeg J, Dolgari SJ, Valilou MR, Maheri SN (2008). Evaluasi aktivitas antibakteri madu Iran melalui metode MIC pada beberapa bakteri patogen kulit
dan usus. J. Anim. Dokter hewan. Advan., 7 (4): 409-412. Hussain AI, Anwar F, Sherazi STH, Przybylski R (2008). Komposisi kimiawi, aktivitas
antioksidan dan antimikroba darikemangi (Ocimum basilicumminyak atsiri) tergantung pada variasi musiman, Food Chem., 108: 986-995. Lee SJ, Umano
K, Shibamoto T, Lee KG (2005). Identifikasi
komponen volatil dalam basil (Ocimum basilicum L.) dan daun thyme (Thymus vulgaris L.) dan sifat antioksidannya. Makanan Chem., 91: 131-137.
Mazzanti G, Battinelli L, Salvatore G (1998). Sifat antimikroba dari minyak esensial yang kaya linalool dari Hyssopus officinalis L. var decumbens
3456 J. Med. Menanam. Res.

(Lamiaceae). Flavour Fragr. J., 13: 289-294. Omidbaigi R, Hassani A, Sefidkon F (2003). Kandungan minyak atsiri dan komposisi basil manis (Ocimum
basilicum) pada berbagai sistem irigasi. J. Essent. Pabrik Bantalan Minyak, 6: 104-108. Opalchenovaa G, Obreshkova D (2003). Studi banding tentang aktivitas basil dan
minyak atsiri dari Ocimum basilicum L. terhadap isolat klinis multidrug resisten dari genera Staphylococcus, Enterococcus dan Pseudomonas dengan menggunakan
metode uji yang berbeda. J. Microbiol. Metode, 54: 105-110. Politeo O, Jukic M, Milos M (2007). Komposisi kimia dan kapasitas antioksidan dari aglikon volatil bebas
dari basil (Ocimum basilicum L.) dibandingkan dengan minyak atsirinya. Food Chem., 101: 379- 385. Prasad G, Kumar A, Singh AK, Bhattacharya AK, Singh K,
Sharma VD (1986). Aktivitas antimikroba dari minyak atsiri dari beberapa Ocimum spesiesdan minyak cengkeh. Fitoterapia, 57: 429-432.
Ravid U, Putievsky E, Katzir I, Lewinsohn E (1997). Komposisi lansiool enantiomerik dalam minyak esensial Ocimum spesiesdan dalam minyak kemangi komersial.
Flavour Fragr. J., 12: 293-296. Sajjadi SE (2006). Analisis minyak atsiri dari dua basil yang dibudidayakan
(Ocimum basilicum L.) dari Iran. Daru, 14 (3): 128-130. Sinha GK, Gulati BC (1990). Antibakteri dan antijamur mempelajari beberapa minyak esensial dan
beberapa konstituennya. Parfum India., 34: 126- 129. Telci I, Bayram E, Yilmaz G, Avci B (2006). Variabilitas dalam komposisi minyak atsiriTurki (basilOcimum
basilicum L.). Biokem. Syst. Ecol., 34: 489-497. Wannissorn B, Jarikasem S, T Siriwangchai, Thubthimthed S (2005). Sifat antibakteri minyak atsiri dari tanaman obat
Thailand. Fitoterapia, 76: 233-236.