Ringkasan Jurnal Mikrobiologi
Ringkasan Jurnal Mikrobiologi
ISOLASI MIKROORGANISME
Disusun Oleh :
Abstract: : Lactic acid bacteria (LAB) is a group of bacteria that can convert carbohydrate (glucose) into
lactic acid. This study aimed to isolate and determine the characteristics of the LAB that play a role in the
activity of lactic acid fermentation in the seed of cacao (Theobroma cacao L.). Parameters measured were
colony morphology (shape, edge, elevation and isolate color), cell morphology (cell shape and Gram
o
staining), biochemical test (TSIA, indol, motility, MR-VP, fermentation type, growth at temperature 14 C
o
and 37 C, growth in salt 5%, 6.5%, 10%, and catalase) and antimicrobial activity test . The results showed
that three isolates of LAB were found, which were group of rod and coccus shaped Gram positive bacteria.
The three isolates have different colony morphology that is circular shape, slippery edge, raised and flat
elevation, cream and white colored. Biochemical test results showed that all three isolates included in the
family Lactobacillaceae, genus Lactobacillus (FBK 1 and FBK 3 isolates) and genus Enterococcus (FBK 2
isolate). All these isolates have ability to inhibit the growth of Escherichia coli and Staphylococcus aureus.
Keywords: Cacao seed (Theobroma cacao L.), lactic acid bacteria, fermentation, antimicrobial activity
Abstrak: Bakteri Asam Laktat (BAL) merupakan kelompok bakteri yang mampu mengubah karbohidrat
(glukosa) menjadi asam laktat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan mengetahui karakteristik
BAL yang berperan dalam aktivitas fermentasi asam laktat pada biji kakao (Theobroma cacao L.).
Parameter yang diamati adalah morfologi koloni (bentuk, tepian, elevasi dan warna isolat), morfologi sel
(bentuk sel dan pewarnaan Gram), uji biokimia (TSIA, indol, motilitas, MR-VP, tipe fermentasi, ketahanan
o o
suhu 15 C dan 37 C, ketahanan garam 5%, 6.5% dan 10%, serta katalase,) dan uji aktivitas antimikroba.
Dari hasil penelitian ini diperoleh tiga isolat BAL yang merupakan kelompok bakteri Gram positif
berbentuk basil dan kokus. Ketiga isolat secara umum memiliki morfologi koloni yang berbeda yaitu
berbentuk bundar, tepian licin, elevasi cembung dan datar, berwarna krem dan putih susu. Hasil uji biokimia
menunjukkan bahwa ketiga isolat termasuk famili Lactobacillaceae, genus Lactobacillus (isolat FBK 1 dan
FBK 3) dan genus Enterococcus (isolat FBK2). Pada uji daya hambat (aktivitas antimikroba), ketiga isolat
mampu menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.
Kata kunci: Biji kakao (Theobroma cacao L.), bakteri asam laktat, fermentasi, aktivitas antimikroba
45
BIOLEUSER, 1(2):45-53
Agustus 2017
46
BIOLEUSER, 1(2):45-53
Agustus 2017
Prosedur Penelitian o
dengan autoklaf pada suhu 121 C dengan tekanan
1. Sterilisasi alat dan bahan 15 Psi selama 15 menit. Media sebanyak 5 ml
Prosedur penelitian ini adalah preparasi alat dituang ke dalam tabung reaksi.
dan bahan yang digunakan dalam penelitian. Semua 3. Media triple sugar iron agar (TSIA)
alat dicuci hingga bersih dan dikeringkan di dalam Media TSIA ditimbang sebanyak 6,5g dan
oven. Alat dan bahan kemudian disterilkan dilarutkan dalam 100ml akuades. Media disterilkan
o o
menggunakan autoklaf dengan suhu 121 C dan dengan autoklaf pada suhu 121 C dengan tekanan
tekanan 15 Psi selama 20 menit. 15 Psi selama 15 menit. Sebanyak 5 ml media
2. Persiapan sampel dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan dibiarkan
Buah kakao yang digunakan berasal dari pada posisi miring sampai memadat.
Desa Pulo Kecamatan Peudada Kabupaten Bireun. 4. Media sulphide indole and motility (SIM) Media
Buah diambil dari satu pohon, banyaknya biji kakao SIM ditimbang sebanyak 3,0g dan
yang digunakan sebanyak 200g untuk dilakukan dilarutkan dalam 100 ml akuades. Media disterilkan
fermentasi. Biji kakao yang digunakan sebagai o
dengan autoklaf pada suhu 121 C dengan tekanan
sampel berasal dari buah masak, terlihat perubahan 15 Psi selama 15 menit. Sebanyak 5 ml media
warna kulit dari hijau menjadi kuning. Buah masak dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan dibiarkan
juga ditunjukkan oleh tangkai yang menjadi kering, pada posisi tegak.
adanya rongga antar biji dan kulit. Buah kakao yang 5. Media methylred dan vogesproskauer (MR-VP)
masak jika digoyangkan atau dikocok akan Media MR-VP ditimbang sebanyak 1,5g dan
mengeluarkan bunyi. Fermentasi biji kakao dilarutkan dalam 100 ml akuades. Media disterilkan
dilakukan dalam keadaan steril dengan o
dengan autoklaf pada suhu 121 C dengan tekanan
menggunakan botol. Sampel kakao dikupas kulit 15 Psi selama 15 menit. Sebanyak 5ml media
dan bijinya dimasukkan ke dalam botol dengan dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan dibiarkan
steril. Biji kakao difermentasi selama 7 hari secara pada posisi tegak.
o
anaerob pada suhu 37 C. Pengamatan ini dilakukan 6. Media nutrient agar (NA)
pada hari pertama sampai hari ketujuh dan Media NA ditimbang sebanyak 2,8g dilarutkan
selanjutnya dilakukan tahap pengenceran. ke dalam 100 ml akuades Media disterilkan dengan
3. Pembuatan media o
autoklaf pada suhu 121 C dengan tekanan 15 Psi
Isolasi dan karakterisasi bakteri asam laktat selama 15 menit. Media sebanyak 15ml
menggunakan beberapa media yaitu: media de man dimasukkan ke dalam dua cawan petri dan
rogosa sharpe agar (MRS agar), media de man dibiarkan sampai memadat.
rogosa sharpe broth (MRS Broth), media triple 4. Isolasi Bakteri Asam Laktat
sugar iron agar (TSIA), media sulphide indole and Isolasi bakteri asam laktat dilakukan dengan
motility (SIM), media methyl red dan voges mensuspensikan 1 ml biji kakao yang telah
proskauer (MR-VP) dan media nutrient agar (NA) difermentasi ke dalam 9 ml akuades (pengenceran
-1
1. Media de man rogosa sharpe agar (MRS Agar) 10 ). Selanjutnya diambil 1 ml sampel dari
1
Media MRS agar ditimbang sebanyak 6,2g dan pengenceran 10‾ dilarutkan dalam 9 ml akuades
dilarutkan dalam 100ml akuades. Media disterilkan -2
(pengenceran 10 ) dan seterusnya sampai
o 6
dengan autoklaf pada suhu 121 C dengan tekanan pengenceran 10‾ . Sebanyak 1 ml sampel diambil
15 Psi selama 15 menit. Media sebanyak 15ml dari setiap pengenceran dan ditumbuhkan pada
dituang ke dalam cawan petri dan dibiarkan media agar MRS dengan metode cawan sebar,
memadat. o
selanjutnya diinkubasi pada suhu 37 C selama 24
2. Media de man rogosa sharpe broth (MRS Broth) jam. Isolat yang tumbuh diinokulasi pada media
Media MRS broth ditimbang sebanyak 5,2g dan agar MRS lain dengan metode cawan gores untuk
dilarutkan dalam 100ml akuades. Media disterilkan
47
BIOLEUSER, 1(2):45-53
Agustus 2017
mendapatkan biakan murni dan diinkubasi selama dan butt media berwarna kuning, maka bakteri
o mampu memfermentasi glukosa, laktosa dan
48 jam pada suhu 37 C.
5. Karakterisasi Bakteri Asam Laktat sukrosa.
1. Pengamatan morfologi koloni bakteri asam laktat 2. Uji indol
Pengamatan morfologi koloni dilakukan Satu koloni isolat bakteri diinokulasi ke
setelah mendapatkan biakan murni. Pengamatan dalam media SIM dan diinkubasi selama 24 jam
makroskopis meliputi bentuk, warna, tepian, dan pada suhu 37ºC. Pengamatan hasil uji indol
elevasi koloni bakteri. Permukaan koloni dapat dilakukan dengan menambahkan 10-12 tetes reagen
dilihat dari samping, dan tepi koloni dapat dilihat Kovac’s. Uji positif ditandai dengan terbentuknya
dari atas cawan (Hadioetomo, 1993). lapisan berwarna merah di bagian atas biakan
2. Pengamatan morfologi sel bakteri asam laktat (Hadioetomo, 1993).
(pewarnaan Gram) 3. Uji motilitas
Kaca objek yang digunakan untuk Uji motilitas dilakukan dengan menusukkan
pewarnaan Gram disterilkan dengan alkohol 70%. satu koloni isolat bakteri ke dalam media SIM
Satu isolat bakteri diambil dan dioleskan di atas kemudian diinkubasi selama 48 jam pada suhu
o
kaca objek, kemudian difiksasi beberapa kali pada 37 C. Pertumbuhan bakteri di sekitar tusukan
api bunsen. Isolat bakteri ditetesi dua tetes kristal menunjukkan hasil uji negatif. Pertumbuhan bakteri
violet dan dibiarkan selama satu menit. Isolat yang menyebar pada media menunjukkan hasil uji
bakteri dicuci dengan akuades dan dikeringkan. positif (Lay, 1994).
Kemudian isolat ditetesi iodin, dibiarkan selama 4. Uji methyl red dan voges proskauer (MR-VP)
satu menit, kemudian dicuci dengan akuades dan Satu koloni isolat bakteri diinokulasi ke
dikeringkan. Isolat bakteri ditetesi alkohol 95% dalam media MR-VP dan diinkubasi pada suhu
secara perlahan-lahan selama 30 detik, kemudian 37ºC selama 48 jam. Pengamatan uji MR dilakukan
dicuci dengan akuades dan dikeringkan. Isolat dengan menambahkan tiga tetes reagen MR ke
ditetesi safranin secara perlahan-lahan selama 30 dalam media. Uji positif ditandai dengan perubahan
detik dan dicuci dengan akuades lalu dikeringkan. warna media menjadi merah, artinya terbentuk
Isolat bakteri yang telah diwarnai, selanjutnya asam (Hadioetomo, 1993). Uji VP
diamati dengan menggunakan mikroskop pada dilakukan dengan menambahkan tiga tetes KOH
pembesaran 100x. Pengamatan meliputi warna dan 3% dan lima tetes alfanaftol, lalu dikocok selama
bentuk sel bakteri. Bakteri Gram positif ditandai 30 detik.
dengan warna ungu karena mampu mengikat kristal 5. Uji tipe fermentasi
violet. Bakteri Gram negatif ditandai dengan Satu koloni isolat bakteri ditumbuhkan pada
terbentuknya warna merah muda karena tidak media MRS broth dalam tabung reaksi yang diberi
mampu mengikat warna kristal violet dan hanya tabung durham. Selanjutnya biakan diinkubasi
terwarnai oleh safranin. o
selama 48 jam pada suhu 37 C. Bakteri yang
6. Uji Biokimia Bakteri Asam Laktat menampung gas dalam tabung durham dinyatakan
1. Uji triple sugar iron agar (TSIA) sebagai heterofermentatif, sedangkan yang tidak
Satu koloni isolat bakteri diinokulasikan menampung gas dinyatakan homofermentatif.
pada media TSIA dengan cara ditusuk tegak lurus 6. Uji katalase
pada bagian butt dan cara zig zag pada bagian slant. Uji katalase dilakukan dengan meneteskan
Kemudian biakan diinkubasi pada suhu 37ºC dua tetes H2O2 3% pada isolat bakteri yang berumur
selama 24 jam dan diamati perubahan warna media. 24 jam di atas kaca objek. Reaksi positif katalase
Apabila pada bagian slant media berwarna merah ditandai dengan terbentuknya gelembung udara.
dan butt berwarna kuning, maka bakteri mampu Terbentuk gelembung udara menunjukkan bahwa
memfermentasi glukosa. Apabila pada bagian slant bakteri menghasilkan enzim katalase yang dapat
48
BIOLEUSER, 1(2):45-53
Agustus 2017
mengubah H2O2 menjadi H2O dan O2 (Hadioetomo, meliputi isolat bakteri asam laktat yang telah
1993). diidentifikasi berdasarkan morfologi koloni,
7. Uji ketahanan suhu morfologi sel, sifat fisiologis bakteri dari hasil uji
Satu koloni isolat bakteri diinokulasi ke biokimia, serta sebagai antimikroba.
dalam media MRS broth dan diinkubasi pada suhu
o o
14 C dan 37 C. Pertumbuhan bakteri ditandai Hasil dan Pembahasan
dengan adanya kekeruhan pada media. 1. Hasil Isolasi Bakteri Asam Laktat dari
8. Uji ketahanan garam Fermentasi Biji Kakao
Satu koloni isolat bakteri diinokulasi ke Tingkat pengenceran tertinggi dilakukan dalam
-6
dalam media MRS broth dengan konsentrasi NaCl penelitian ini adalah 10 . Koloni yang terpilih
5%, 6.5% dan 10%. Kemudian biakan diinkubasi berasal dari kultur bakteri dengan tingkatan
o -4 -6
pada suhu 37 C selama 7 hari. Pertumbuhan bakteri pengenceran 10 sampai 10 karena
ditandai dengan adanya kekeruhan pada media. mempermudah dalam mengidentifikasi morfologi
7. Uji Antimikroba koloni. Isolasi bakteri asam laktat dilakukan dengan
Uji antimikroba menggunakan metode metode pengenceran dan ditumbuhkan pada media
difusi kertas cakram. Bakteri uji yang digunakan MRS agar menggunakan metode cawan sebar pada
o
adalah bakteri E.coli dan S.aureus. Antimikroba suhu 37 C. Bakteri yang diisolasi dari fermentasi
yang digunakan adalah bakteri asam laktat dari biji kakao pada media agar MRS menunjukkan
fermentasi biji kakao. Kontrol positif terhadap pertumbuhan di setiap pengenceran (Gambar 1).
bakteri E.coli dan S.aureus menggunakan antibiotik Media agar MRS merupakan medium selektif bagi
ciprofloxacin. pertumbuhan bakteri asam laktat. Sebanyak tiga
Bakteri uji disuspensikan ke dalam dua ml isolat FBK 1, FBK 2 dan FBK 3 didapatkan dari
larutan NaCl fisiologis 0,9% sehingga diperoleh fermentasi biji kakao (FBK = Fementasi Biji
kekeruhan yang sama dengan standar kekeruhan Kakao; 1, 2, 3 = sistematika penomoran).
larutan McFarland 0,5. Sebanyak 25 µl b akteri
E.coli dan S.aureus ditumbuhkan pada media
nutrien agar (NA) dengan metode cawan sebar.
Kertas cakram yang berukuran 6mm direndam
dalam larutan suspensi bakteri asam laktat selama
25 menit. Kertas cakram yang telah berisi bakteri
asam laktat dan ciprofloxacin diletakkan di
permukaan media uji, kemudian diinkubasi pada
o
suhu 37 C selama 24 jam (Volk dan Wheeler,
1993).
Pengamatan terbentuknya zona bening
dilakukan setelah 24 jam inkubasi. Diameter zona Gambar 1. Hasil isolasi bakteri asam laktat pada
bening diukur secara vertikal dan horizontal -4
pengenceran 10 di media agar MRS
menggunakan jangka sorong dalam satuan
milimeter (mm). Daerah bening merupakan 2. Karakterisasi Morfologi Bakteri Asam Laktat
petunjuk kepekaan bakteri terhadap bahan uji atau Ketiga isolat berhasil tumbuh dengan baik
antibiotik yang dinyatakan dengan lebar diameter pada media agar MRS. Morfologi yang diamati
zona bening (Vandepitte, 2005). pada penelitian ini adalah morfologi koloni dan
8. Analisis Data morfologi sel. Morfologi koloni diamati secara
Data disajikan secara deskriptif dan makroskopik meliputi bentuk, tepian, elevasi dan
ditampilkan dalam bentuk tabel dan gambar, warna. Morfologi sel diamati secara mikroskopik
49
BIOLEUSER, 1(2):45-53
Agustus 2017
meliputi bentuk sel dan pewarnaan Gram. Berdasarkan Tabel 1, hasil menunjukkan
Karakterisasi dapat dilakukan berdasarkan sifat bahwa isolat bakteri memiliki bentuk batang dan
morfologi koloni, morfologi sel dan biokimia bulat. Bentuk sel yang mendominasi yaitu bentuk
(Purwoko, 2007). Hasil pemurnian bakteri asam batang (66,6%) dan bulat (33,3%). Sesuai dengan
laktat dapat dilihat pada Gambar 2. hasil penelitian Surono (2004) bahwa ditemukan
beberapa isolat bakteri asam laktat yang diisolasi dari
fermentasi susu berbentuk batang dan bulat. Hasil
pewarnaan Gram ketiga isolat menunjukkan warna
FBK 1
ungu pada sel bakteri. Hal ini menandakan bahwa
isolat bakteri asam laktat yang diperoleh dari hasil
fermentasi biji kakao bersifat Gram positif (100%).
Cullimore (2000) menyatakan bahwa bakteri asam
laktat merupakan bakteri Gram positif. Sunatmo
(2007); Madigan et al. (2011); dan Hadioetomo
(1993) menyatakan bahwa perbedaan reaksi
Gambar 2. Hasil pemurnian bakteri asam laktat pewarnaan Gram berdasarkan komposisi dinding sel
bakteri. Dinding sel bakteri Gram positif mengandung
Berdasarkan Tabel 1, menunjukkan bahwa 90% peptidoglikan dan selebihnya adalah asam
FBK 1, FBK 2 dan FBK 3 yang diisolasi dari tekoat. Sel bakteri Gram positif terlihat berwarna
fermentasi biji kakao memiliki morfologi koloni ungu karena dapat membentuk ikatan komplek
yang berbeda. Terdapat tiga koloni isolat berbentuk dengan pewarna utama (kristal violet) yaitu ungu
bundar (100%), tepian licin (100%) dengan elevasi (Gambar 3). Dinding sel bakteri Gram negatif terdiri
cembung (66,6%), datar (33,3%), berwarna putih dari 5-20% peptidoglikan, selebihnya adalah
susu (33,3%) dan krem (66,6%). Koloni bakteri polisakarida. Pemberian larutan alkohol 95% pada sel
yang memiliki warna krem dan putih susu diduga dapat meningkatkan porositas dinding sel dengan
bahwa tidak mempunyai pigmen. Sesuai dengan melarutkan lipid pada membran luar, sehingga
hasil penelitian Delfahedah et al. (2013) bahwa komplek ungu akan terlepas dan sel menjadi tidak
ditemukan beberapa isolat bakteri asam laktat yang berwarna. Selanjutnya sel akan berwarna merah
diisolasi dari buah sirsak yaitu dengan bentuk karena terwarnai oleh warna pembanding yaitu
koloni bulat dan bundar, tepian licin, elevasi safranin.
cembung dan warna putih susu dan krem.
50
BIOLEUSER, 1(2):45-53
Agustus 2017
Keterangan:
+ : Terjadi reaksi menghasilkan hasil positif
- : Tidak terjadi reaksi menghasilkan hasil negatif
Isolat FBK 1 merupakan isolat yang
r/y : Slant merah/butt kuning memiliki kemampuan penghambatan tinggi
y/y : Slant kuning/butt kuning terhadap pertumbuhan bakteri patogen E. Coli
Ho : Homofermentatif dengan diameter 17mm dan S. aureus dengan
diameter 15mm (Gambar 4). Kontrol positif
ciprofloxacin menunjukkan aktivitas hambat yang
51
BIOLEUSER, 1(2):45-53
Agustus 2017
paling besar terhadap bakteri uji dibandingkan diameter zona hambat 9 sampai 14mm. Menurut
dengan isolat bakteri asam laktat yaitu dengan luas Kusmarwati dan Ninoek (2008), aktivitas daya
zona hambat 34mm terhadap E.coli dan 32mm hambat bakteri dinyatakan berdasarkan zona bening
terhadap S. aureus. yang dihasilkan di sekitar kertas cakram. Diameter
zona hambat pertumbuhan bakteri diukur dalam
satuan mm.
FBK 1 Menurut Pelczar and Chan (2008), semakin
besar zona bening yang terbentuk, maka semakin
FBK 3 besar aktivitas penghambatan isolat bakteri asam
laktat terhadap bakteri patogen. Aktivitas bakteri
Ciprofloxacin
asam laktat dalam menghambat bakteri Gram
negatif E. coli lebih peka bila dibandingkan
FBK 2
terhadap bakteri Gram positif S. aureus. Hal ini
disebabkan oleh adanya perbedaan struktur dinding
sel kedua jenis bakteri tersebut.
(a)
Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian, dapat
FBK 1 disimpulkan bahwa:
Ciprofloxacin
1. Bakteri Asam Laktat (BAL) yang didapatkan
sebanyak tiga isolat (FBK 1, FBK 2 dan FBK
3).
2. FBK 1 dan FBK 3 termasuk kelompok bakteri
genus Lactobacillus, sedangkan FBK 2
FBK 3 termasuk kelompok bakteri genus
Enterococcus.
(b)
3. Diameter zona hambat untuk isolat FBK 1,
FBK 2 dan FBK 3 termasuk kategori aktivitas
Gambar 4. Hasil uji antimikroba pada media kuat, sedangkan antibiotik ciprofloxacin
nutrient agar (NA) dengan (a) bakteri termasuk kategori aktivitas paling kuat.
indikator S. aureus dan (b) bakteri
indikator E. coli. Ucapan terima kasih
Menurut Morales et al. (2003), aktivitas Ucapan terima kasih juga kepada Jurusan
zona hambat dikelompokkan menjadi empat Biologi Unsyiah yang telah mengijinkan tim untuk
kategori yaitu: aktivitas lemah (<5mm), sedang (5– melakukan kegiatan penelitian serta semua pihak
10mm), kuat (>10–20mm), sangat kuat (>20– yang telah membantu kesuksesan penelitian ini.
30mm). Penelitian Syukur (2011) menemukan 11
isolat bakteri asam laktat hasil isolasi dari
fermentasi biji kakao dengan diameter zona hambat Daftar Pustaka
yang paling tinggi terhadap lima bakteri patogen,
yaitu 11 sampai 12mm. Hasil penelitian yang telah Cullimore, R.D. 2000. Principal Atlas For
dilakukan Fatimawali (2004) menemukan isolat Bacterial Identification. Lewis Publisher,
bakteri asam laktat dengan diameter zona hambat United States of America.
yang bervariasi 8 sampai 12mm terhadap bakteri S. Delfahedah, Y., Syukur, S., dan Jamsari. 2013.
aureus, sedangkan terhadap E. coli dengan Isolasi Karakterisasi dan Identifikasi DNA
52
BIOLEUSER, 1(2):45-53
Agustus 2017
Bakteri Asam Laktat (BAL) yang R. S., Imas, T., Tjitrosomo, S.S., dan
Berpotensi Sebagai Antimikroba dari Angka, S. L. UI Press, Jakarta.
Fermentasi Kakao Varietas Hibrid Purwoko, T. 2007. Fisiologi Mikroba. Bumi
(Trinitario). Jurnal Kimia Unand. 2(4): Aksara, Jakarta.
Halaman. Rahayu, S.R. 2003. Lactid Acid Bacteria in
Fatimawali., Deby, A. M. dan Weny I. W. 2004. Uji Fermented Food of Indonesia Origin.
Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Agritech, Majalah Ilmu dan Teknologi
Mayana (Coleus Pertanian 23(2): 75-84.
atropurpureus)Staphylococcus Rahayu, S.R. 2004. Makanan Fermentasi dan
aureus,Escherichia Coli dan Pseudomonas Probiotik. Pusat Studi Pangan dan Gizi.
aeruginosaSecara In-Vitro. Jurnal kimia. Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
1(9): Halaman. Salminen and Von. 1998. The Lactic Acid Bacteria.
Ferry, E.S., Onny S.S., dan Balonggu, S. 2013. Microbes of Diversity. J. Food Technol. 1:
Respons Pertumbuhan Bibit Kakao 60 – 65.
Terhadap Vermikompos dan Pupuk P. Siregar, A.A. 2013. Kemampuan Antimikroba Susu
Jurnal Online Agroekoteknologi. 1(4) Kambing Fermentasi Akibat Perlakuan
Hadioetomo, R. S. 1993. Mikrobiologi Dasar Suhu dan Lama Pasteurisasi Yang
Dalam Praktek Teknik dan Prosedur Berbeda.Skripsi. Fakultas
Dasar Laboratorium. Gramedia, Jakarta. PertanianUniversitas Syiah Kuala, Banda
Kusmarwati, A., dan Ninoek, I. 2008. Daya Aceh.
Hambat Ekstrak Bahan Aktif Biji Picung Sunatmo, T.I. 2007. Eksperimen Mikrobiologi
(Pangium Edule Reinw.) Terhadap Dalam Laboratorium. Penerbit
Pertumbuhan Bakteri Penghasil Histamin. ArdyAgency, Bogor.
Jurnal Pascapanen dan Bioteknologi Surono, I.S. 2004. Probiotik, Susu Fermentasi dan
Kelautan dan Perikanan .3(1):2. Kesehatan. Tri Cipta Karya, Jakarta.
Lay, B.W. 1994. Analisis Mikroba di Syukur, S., Urnemi, Endang, P., Sanusi, I. D.
Laboratorium.Raja Grafindo Persada, Jamsari. 2011. Potensi Bakteri Asam
Jakarta. Laktat Dalam Menghasilkan Bakteriosin
Madigan, M.T., Martinko, J.M., Stahl, D.A., and Sebagai Antimikroba Dan Pengukuran
Clark, D. 2011. Biology Berat Molekulnya Dengan Sds-Page Dari
ofMicroorganismsThirteenth Edition. Isolat Fermentasi Kakao. Jurnal Kimia.
PearsonEducation International. USA. 4(2): Halaman.
Morales, G., Sierra, P., Mancilla, Paredes, A., Volk, W. A., dan Wheeler. M. F. 1993.
Loyola, L.A., Gallardo, O., and Borquez, J. Mikrobiologi Dasar. Terjemahan dari Basic
2003. Secondary metabolites from four Biology oleh Adisoemarto. Erlangga,
medicinal plants from Northern Chile, Jakarta.
antimicrobial activity, and biotoxicity Volk, W. A., dan Wheeler, M. F. 1988.
against Artemia salina. J. Chile Chem. Mikrobiologi Dasar. Erlangga, Jakarta.
48(2). Vandepitte. 2005. Prosedur Laboratorium Dasar
untuk Bakteriologi Klinis. Edisi2. Buku
Pelczar, M. J. dan Chan, E.C.S. 1988. Dasar-dasar kedokteran EGC, Jakarta.
Mikrobiologi 2, Alih bahasa: Hadioetomo,
53