Anda di halaman 1dari 27

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang


Reaksi Gelap merupakan langkah selanjutnya setelah reaksi terang. Reaksi
ini terjadi di stroma pada kloroplas. Disebut reaksi gelap karena tidak
memerlukan cahaya. Meskipun demikian reaksinya terjadi waktu siang hari
karena memerlukan ATP dan NADPH dari reaksi terang. Reaksi gelap dapat
saja terjadi di tempat yang gelap asal cukup diberi NADPH dan ATP.
Enzim yang berperan dalam proses fotosintesis. Nikotiramida adenin
dinukleotida fosfat (NADP+) dapat juga bertindak sebagai pereaksi Hill,
dengan menerima electron dari air pada pereaksi yang berlangsung di merman
tilkoid yang disolasi atau dikloroplas yang rusak. Selain itu juga, NADP+
dapat mengangkut electron ke beberapa senyawa tumbuhan dan diperkirakan
bahwa perannya yang lazim di kloroplas adalah mereduksi CO2.

1.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang di atas maka rumusan masalah dalam makalah


ini adalah sebagai berikut.

1. Bagaimana Siklus Calvin ?


2. Bagaimana Mekanisme CO2 II : MetabolismeAsam Crassulacean ?
3. Bagaimana Mekanisme CO2 III : Siklus C4 Karbon ?

1.3 Tujuan

Tujuan yang ingin dicapai dalam makalah ini adalah sebagai berikut.

1. Untuk mengetahui Siklus Calvin


2. Untuk mengetahui Mekanisme CO2 II : MetabolismeAsam Crassulacean
3. Untuk mengetahui Mekanisme CO2 III : Siklus C4 Karbon

1
BAB II
PEMBAHASAN

2.1 SIKLUS CALVIN

Siklus Calvin berlangsung dalam tiga tahap (Gambar 2.1) :

1. Karboksilasi akseptor CO2 ribulosa-1,5-bifosfat, membentuk dua molekul


3-fosfogliserat, zat antara stabil pertama dari siklus Calvin
2. Pengurangan 3-fosfogliserat , membentuk gyceraldehyde-3-fosfat,
karbohidrat
3. Regenerasi akseptor CO2 ribulosa-1,5-bifosfat dari gliseraldehida-3-fosfat

Karbon dalam CO2 adalah bentuk teroksidasi yang ditemukan di alam


(+4). Karbon dari zat antara stabil pertama, 3fosfogliserat, lebih berkurang (+3),
dan selanjutnya berkurang dalam produk gliseraldehida-3-fosfat (+1). Secara
keseluruhan, reaksi awal siklus Calvin melengkapi pengurangan karbon atmosfer
dan, dengan demikian, memfasilitasi penggabungannya menjadi senyawa organik.

Gambar 2.1 Siklus Calvin berlangsung dalam tiga tahap: (1) karboksilasi, di mana
CO2 secara kovalen terkait dengan kerangka karbon; (2) reduksi, di mana
karbohidrat dibentuk dengan mengorbankan ATP yang diturunkan secara
fotokimia dan mengurangi ekivalen dalam bentuk NADPH; dan (3) regenerasi, di
mana akseptor CO2 ribulosa, 1,5-bifosfat terbentuk kembali.

2
Dua sifat reaksi karboksilasi sangat penting:

1. Perubahan negatif dalam energi bebas yang terkait dengan karboksilasi


ribulosa-1,5-bifosfat adalah besar; dengan demikian reaksi ke depan sangat
disukai.
2. Afinitas rubisco untuk CO2 cukup tinggi untuk memastikan karboksilasi
cepat pada konsentrasi rendah CO2 yang ditemukan dalam sel fotosintesis.

2.1.1 Siklus Calvin Meregenerasi Komponen Biokimia Sendiri

Reaksi siklus Calvin meregenerasi zat antara biokimia yang diperlukan


untuk mempertahankan operasi siklus. Tetapi yang lebih penting, laju operasi
siklus Calvin dapat ditingkatkan dengan peningkatan konsentrasi zat antara;
artinya, siklusnya adalah autokatalitik. Sebagai akibatnya, siklus Calvin memiliki
fitur yang diinginkan secara metabolik yaitu menghasilkan lebih banyak substrat
daripada yang dikonsumsi, selama triose fosfat tidak dialihkan di tempat lain:

5 RuBP4– + 5 CO2 + 9 H2O + 16 ATP4– + 10 NADPH → 6 RuBP4 - + 14 Pi + 6


H + + 16 ADP3– + 10 NADP + Pentingnya sifat autokatalitik ini ditunjukkan oleh
percobaan di mana daun yang sebelumnya gelap atau kloroplas yang terisolasi
diterangi.

Dalam percobaan tersebut, fiksasi CO2 dimulai hanya setelah jeda, yang
disebut periode induksi, dan laju fotosintesis meningkat seiring waktu dalam
beberapa menit pertama setelah timbulnya iluminasi. Peningkatan laju fotosintesis
selama periode induksi sebagian disebabkan oleh aktivasi enzim oleh cahaya
(dibahas kemudian), dan sebagian karena peningkatan konsentrasi zat antara
siklus Calvin.

2.1.2 Stoikiometri Siklus Calvin Menunjukkan Bahwa Hanya Seperenam


dari Tri Phosphat Digunakan untuk Sukrosa atau Pati

Sintesis karbohidrat (pati, sukrosa) menyediakan bak untuk memastikan


aliran atom karbon yang cukup melalui siklus Calvin dalam kondisi penyerapan
CO2 terus-menerus. Fitur penting dari siklus ini adalah stoikiometri

3
keseluruhannya. Pada awal iluminasi, sebagian besar triose fosfat ditarik kembali
ke dalam siklus untuk memfasilitasi penumpukan konsentrasi metabolit yang
memadai. Ketika fotosintesis mencapai keadaan stabil, lima perenam triosa fosfat
berkontribusi untuk regenerasi ribulosa-1,5-bifosfat, dan seperenam diekspor ke
sitosol untuk sintesis sukrosa atau metabolit lain yang dikonversi menjadi pati
dalam kloroplas.

Input energi, yang disediakan oleh ATP dan NADPH, diperlukan untuk
menjaga siklus berfungsi dalam fiksasi CO2. Untuk mensintesis setara dengan 1
molekul heksosa, 6 molekul CO2 ditetapkan dengan mengorbankan 18 ATP dan
12 NADPH. Dengan kata lain, siklus Calvin mengkonsumsi dua molekul NADPH
dan tiga molekul ATP untuk setiap molekul CO2 yang dimasukkan ke dalam
karbohidrat.

Siklus Calvin tidak terjadi di semua sel autotrophic. Beberapa bakteri


anaerob menggunakan jalur lain untuk pertumbuhan autotropik:

1. Sintesis asam organik yang dimediasi ferredoksin dari asetil- dan suksinil-
Kooperatif melalui pembalikan siklus asam sitrat (siklus asam karboksilat
reduktif dari bakteri sulfur hijau)Penghasil glikoksilat
2. siklus (jalur hidroksipropionat dari bakteri nonsulfur hijau)
3. Rute linier (asetil-CoApathway) dari bakteri asetogenik, metanogenik

Jadi, meskipun siklus Calvin secara kuantitatif merupakan jalur terpenting dari
fiksasi CO2 autotrofik.

2.1.3 Peraturan Siklus Kalvin

Efisiensi energi yang tinggi dari siklus Calvin menunjukkan bahwa


beberapa bentuk regulasi memastikan bahwa semua zat antara dalam siklus hadir
pada konsentrasi yang memadai dan bahwa siklus dimatikan saat tidak diperlukan
dalam gelap. Secara umum, variasi konsentrasi atau aktivitas spesifik enzim
memodulasi laju katalitik, sehingga menyesuaikan tingkat metabolit dalam siklus.

4
Perubahan dalam ekspresi gen dan biosintesis protein mengatur
konsentrasi enzim. Modifikasi protein posttranslasional berkontribusi pada
regulasi aktivitas enzim. Pada tingkat genetik, jumlah setiap enzim yang ada
dalam stroma kloroplas diatur oleh mekanisme yang mengontrol ekspresi genom
nuklir dan kloroplas (Maier et al. 1995; Purton 1995).

Pengaturan jangka pendek dari siklus Calvin dicapai oleh beberapa


mekanisme yang mengoptimalkan konsentrasi zat antara. Mekanisme ini
meminimalkan reaksi yang beroperasi di arah yang berlawanan, yang akan
membuang sumber daya (Wolosiuk et al. 1993). Dua mekanisme umum dapat
mengubah sifat kinetik enzim:

1) Transformasi ikatan kovalen seperti pengurangan disulfida dan


karbamilasi gugus amino, yang menghasilkan enzim yang dimodifikasi
secara kimia.
2) Modifikasi interaksi nonkovalen, seperti pengikatan metabolit atau
perubahan komposisi lingkungan seluler (misalnya, pH). Selain itu,
pengikatan enzim pada membran tilakoid meningkatkan efisiensi siklus
Calvin, sehingga mencapai tingkat organisasi yang lebih tinggi yang
mendukung penyaluran dan perlindungan substrat.

Aktivasi Enzim Bergantung Cahaya Mengatur Siklus Calvin Lima enzim


teregulasi cahaya beroperasi dalam siklus Calvin: 1. Rubisco 2. NADP:
gliseraldehida-3-fosfat dehidrogenase 3. Fruktosa-1,6-bisphosphatase 4.
Sedoheptulose-1,7- bisphosphatase 5. Ribulose-5-phosphate kinase

Empat enzim terakhir mengandung satu atau lebih kelompok disulfida (—


S — S—). Cahaya mengontrol aktivitas empat enzim ini melalui sistem
ferredoxin-thioredoxin, mekanisme reduksi-oksidasi berbasis tiol kovalen yang
diidentifikasi oleh Bob Buchanan dan rekannya (Buchanan 1980; Wolosiuk et al.
1993; Besse dan Buchanan 1997; Schürmann dan Jacquot 2000) .

Dalam gelap residu ini ada dalam keadaan teroksidasi (—S — S—), yang
membuat enzim tidak aktif atau subaktif. Dalam terang kelompok —S — S—

5
direduksi menjadi keadaan sulfhidril (—SH HS—). Perubahan redoks ini
mengarah pada aktivasi enzim (Gambar 2.2). Resolusi struktur kristal dari
masing-masing anggota sistem ferredoxin-thioredoxin dan enzim target fruktosa-
1,6bisphosphatase dan NADP: malat dehydrogenase (Dai et al. 2000 ) telah
memberikan informasi berharga tentang mekanisme yang terlibat.

Inaktivasi enzim target yang diamati pada penggelapan tampaknya terjadi


dengan pembalikan jalur reduksi (aktivasi). Yaitu, oksigen mengubah tioredoksin
dan enzim target dari keadaan tereduksi (—SH HS—) menjadi keadaan
teroksidasi (—S — S—) dan, dengan demikian, mengarah pada inaktivasi enzim.
Empat enzim terakhir yang tercantum di sini diatur langsung oleh thioredoxin;
yang pertama, rubisco, diatur secara tidak langsung oleh enzim aksesori
thioredoxin, rubisco activase.

2.1.4 Aktivitas Rubisco Meningkat dalam Cahaya

Aktivitas rubisco juga diatur oleh cahaya, tetapi enzim itu sendiri tidak
merespons thioredoxin. George Lorimer dan rekannya menemukan bahwa rubisco
diaktifkan ketika aktivator CO2 (molekul berbeda dari substrat CO2 yang menjadi
terfiksasi) bereaksi lambat dengan gugus lisin ε-NH2 yang tidak bermuatan dalam
situs aktif enzim. Turunan karbamat yang dihasilkan (situs anionik baru)

6
kemudian dengan cepat mengikat Mg2 + untuk menghasilkan kompleks yang
diaktifkan

Gambar 2.3 Salah satu cara di mana rubisco diaktifkan melibatkan pembentukan
kompleks karbamat-Mg2 + pada gugus ε-amino dari lisin di dalam situs aktif
enzim. Dua proton dilepaskan. Aktivasi ditingkatkan oleh peningkatan konsentrasi
Mg2 + dan pH lebih tinggi (konsentrasi H + rendah) yang dihasilkan dari
pencahayaan. CO2 yang terlibat dalam reaksi karbamat-Mg2 + tidak sama dengan
CO2 yang terlibat dalam karboksilasi ribulosa-1,5-bifosfat.

Dua proton dilepaskan selama pembentukan kompleks terner rubisco-


CO2-Mg2 +, sehingga aktivasi dipromosikan oleh peningkatan pH dan
konsentrasi Mg2 +. Dengan demikian, perubahan stroma bergantung-cahaya pada
pH dan Mg2 + (lihat bagian selanjutnya) muncul untuk memfasilitasi aktivasi
yang diamati dari rubisco oleh cahaya.

Dalam keadaan aktif, rubisco mengikat molekul CO2 lain, yang bereaksi
dengan bentuk 2,3-enediol ribulosa1,5-bifosfat (P — O — CH2 — COH— —
COH — CHOH— CH2O — P) menghasilkan 2-karboksi -3-ketoribitol 1,5-
bisphos phate. Ketidakstabilan ekstrim dari zat antara terakhir mengarah pada
pembelahan ikatan yang menghubungkan karbon 2 dan 3 dari ribulosa-1,5-
bifosfat, dan sebagai konsekuensinya, rubisco melepaskan dua molekul 3-
fosfogliserat.

7
Rubisco juga diatur oleh gula fosfat alami, carboxyarabinitol-1-phosphate,
yang sangat mirip dengan transisi transisi enam-karbon dari reaksi karboksilasi.
Inhibitor ini hadir pada konsentrasi rendah pada daun banyak spesies dan pada
konsentrasi tinggi pada daun polong-polongan seperti kedelai dan kacang.
Carboxyarabinitol1-fosfat berikatan dengan rubisco di malam hari, dan
dihilangkan oleh aksi rubisco activase di pagi hari, ketika densitas fluks foton
meningkat. .

2.1.5 Gerakan Ion Bergantung Cahaya Mengatur Enzim Siklus Calvin

Cahaya menyebabkan perubahan ion yang dapat dibalik dalam stroma


yang memengaruhi aktivitas rubisco dan enzim kloroplas lainnya. Setelah
iluminasi, proton dipompa dari stroma ke lumen thylakoids. Eflux proton
digabungkan ke serapan Mg2 + ke dalam stroma. Fluks ion ini menurunkan
konsentrasi stroma H + (pH 7 → 8) dan meningkatkan Mg2 +. Perubahan ini
dalam komposisi ion stroma kloroplas dibalik setelah gelap.

Beberapa enzim siklus Calvin (rubisco, fructose-1,6bisphosphatase,


sedoheptulose-1,7-bisphosphatase, dan ribulose-5-phosphate kinase) lebih aktif
pada pH 8 daripada pada pH 7 dan memerlukan Mg2 + sebagai kofaktor untuk
katalisis. Karenanya fluks ion yang bergantung pada cahaya ini meningkatkan
aktivitas enzim-enzim kunci dari siklus Calvin (Heldt 1979).

2.2 Siklus Karbon Fotoksinatif C2 Oxidative

Sifat penting dari rubisco adalah kemampuannya untuk mengkatalisasi


karboksilasi dan oksigenasi RuBP. Oksigenasi adalah reaksi utama dalam proses
yang dikenal sebagai fotorespirasi. Karena fotosintesis dan fotorespirasi bekerja
dalam arah yang berlawanan secara diametral, fotorespirasi menghasilkan
hilangnya sel CO2 dari sel yang secara bersamaan memperbaiki CO2 oleh siklus
Calvin (Ogren 1984; Leegood et al. 1995).

8
a) Fotosintetik CO2 Fiksasi dan Oksigenasi Fotorespirasi Adalah Persaingan
Reaksi

Penggabungan satu molekul O2 ke dalam isomer 2,3-enediol


ribulosa-1,5-bifosfat menghasilkan zat antara yang tidak stabil yang
dengan cepat membelah menjadi 2-fosfoglikolat dan 3-fosfogliserat
(Gambar2.4). Kemampuan untuk mengkatalisasi oksigenasi ribulosa-1,5-
bifosfat adalah properti dari semua rubiscos, terlepas dari asal taksonomi.
Bahkan rubisco dari bakteri anaerob, autotrofik mengkatalisis reaksi
oksigenase ketika terpapar oksigen.

Gambar 2.4 Reaksi utama dari siklus fotorespirasi. Operasi siklus fotosintesis
oksidatif C2 melibatkan interaksi kooperatif antara tiga organel: kloroplas,
mitokondria, dan peroksisom. Dua molekul glikolat (empat karbon) yang diangkut
dari kloroplas ke dalam peroksisom diubah menjadi glisin, yang kemudian
diekspor ke mitokondria dan diubah menjadi serin (tiga karbon) dengan pelepasan
karbon dioksida (satu karbon) secara bersamaan. Serin diangkut ke peroksisom
dan diubah menjadi gliserat. Yang terakhir mengalir ke kloroplas di mana
fosforilasi to3-fosfogliserat dan dimasukkan ke dalam siklus Calvin. Nitrogen

9
anorganik (amonia) yang dilepaskan oleh mitokondria ditangkap oleh kloroplas
untuk dimasukkan ke dalam asam amino dengan menggunakan kerangka yang
sesuai (α-ketoglutarate). Tanda panah berwarna merah menandai asimilasi amonia
menjadi glutamat yang dikatalisasi oleh glutamin sintetase. Selain itu, penyerapan
oksigen dalam peroksisom mendukung siklus oksigen pendek yang digabungkan
dengan reaksi oksidatif. Aliran karbon, nitrogen, dan oksigen masing-masing
ditunjukkan dalam warna hitam, merah dan biru.
Sebagai substrat alternatif untuk rubisco, CO2 dan O2 bersaing untuk
bereaksi dengan ribulosa-1,5-bifosfat karena karboksilasi dan oksigenasi terjadi di
dalam situs aktif enzim yang sama. Menawarkan konsentrasi CO2 dan O2 yang
sama dalam tabung reaksi, rubios angiosperma memperbaiki CO2 sekitar 80 kali
lebih cepat daripada oksigenatnya. Namun, larutan dalam kesetimbangan dengan
udara pada 25 ° C memiliki rasio CO2: O2 0,0416 (lihat Topik Web 8.2 dan 8.3).
Pada konsentrasi ini, karboksilasi dalam udara melebihi oksigenasi oleh tiga
hingga satu.

Siklus karbon fotosintesis oksidatif C2 bertindak sebagai operasi


pemulung untuk memulihkan karbon tetap yang hilang selama fotorespirasi oleh
reaksi oksigenase dari rubisco (Web Topic 8.6). 2-fosfoglikolat yang terbentuk
dalam kloroplas oleh oksigenasi ribulosa-1,5-bifosfat cepat dihidrolisis menjadi
glikol oleh kloroplas fosfatase spesifik. Metabolisme glikolat selanjutnya
melibatkan kerja sama dua organel lain: peroksisom dan mitokondria (lihat Bab 1)
(Tolbert 1981).

Glikolat meninggalkan kloroplas melalui protein transporter spesifik


dalam membran amplop dan berdifusi ke peroksisom. Di sana dioksidasi menjadi
glioksilat dan hidrogen peroksida (H2O2) oleh oksidase tergantung flavin
mononukleotida: glikol oksidase. Sejumlah besar hidrogen peroksida yang
dilepaskan dalam peroksisom dihancurkan oleh aksi katalase sementara glioksilat
mengalami transaminasi (reaksi 5). Donor amino untuk transaminasi ini mungkin
glutamat, dan produknya adalah asam amino glisin. Glycine meninggalkan
peroxisome dan memasuki mitokondria. Di sana kompleks multienzim glikin
dekarboksilase mengkatalisis konversi dua molekul glisin dan satu NAD +
menjadi satu molekul masing-masing serin, NADH, NH4 + dan CO2. Kompleks

10
multienzim ini, hadir dalam konsentrasi besar dalam matriks mitokondria
tanaman, terdiri dari empat protein, bernama H-protein (polipeptida yang
mengandung lipoamide), protein-P (protein 200 kDa, homodimer, protein yang
mengandung fosfat piridoksal), T- protein (protein yang bergantung pada folat),
dan protein-L (protein yang mengandung flavin adenin nukleotida).

Amonia yang terbentuk dalam oksidasi glisin berdifusi dengan cepat dari
matriks mitokondria menjadi kloroplas, di mana glutamin sintetase
menggabungkannya dengan kerangka karbon untuk membentuk asam amino.
Serin yang baru terbentuk meninggalkan mitokondria dan memasuki peroksisom,
di mana ia diubah pertama-tama dengan transaminasi menjadi hidroksipiriruvat
dan kemudian oleh reduksi yang bergantung pada NAD terhadap gliserat (reaksi
9).

Dalam fotorespirasi, berbagai senyawa disirkulasikan melalui dua siklus.


Dalam salah satu siklus, karbon keluar dari kloroplas dalam dua molekul glikolat
dan kembali dalam satu molekul gliserat. Dalam siklus lainnya, nitrogen keluar
dari kloroplas dalam satu molekul glutamat dan kembali dalam satu molekul
amonia (bersama dengan satu molekul α-ketoglutarate).

Jadi secara keseluruhan, dua molekul fosfoglikolat (empat atom karbon),


hilang dari siklus Calvin oleh oksigenasi RuBP, diubah menjadi satu molekul 3-
fosfogliserat (tiga atom karbon) dan satu CO2. Dengan kata lain, 75% karbon
yang hilang oleh oksigenasi ribulosa-1,5-bifosfat diperoleh kembali oleh siklus
karbon fotosintesis oksidatif C2 dan dikembalikan ke siklus Calvin (Lorimer
1981).

Di sisi lain, total nitrogen organik tetap tidak berubah karena pembentukan
nitrogen anorganik (NH4 +) dalam mitokondria diseimbangkan dengan sintesis
glutamin dalam kloroplas. Demikian pula, penggunaan NADH dalam peroxisome
(oleh hydroxypyruvate reductase) diimbangi dengan pengurangan NAD + dalam
mitokondria (oleh glycine decarboxylase).

11
Gambar 2.5 Alur karbon dalam daun ditentukan oleh keseimbangan antara dua
siklus yang saling berlawanan. Sementara siklus Calvin mampu beroperasi secara
independen dengan adanya substrat yang memadai yang dihasilkan oleh transpor
elektron fotosintesis, siklus karbon fotosintesis oksidatif C2 memerlukan operasi
lanjutan dari siklus Calvin untuk meregenerasi bahan awalnya, ribulosa-1,5-
bifosfat.
Reaksi semacam itu akan memiliki sedikit konsekuensi di masa evolusi
awal jika rasio CO2 terhadap udara O2 di udara lebih tinggi daripada saat ini.
Namun, rendahnya rasio CO2: O2 yang lazim di zaman modern kondusif untuk
fotorespirasi, tanpa fungsi selain pemulihan sebagian karbon yang ada dalam 2-
fosfoglikolat.

Penjelasan lain yang mungkin adalah bahwa fotorespirasi penting,


terutama dalam kondisi intensitas cahaya tinggi dan konsentrasi CO2 antar sel
yang rendah (misalnya, ketika stomata ditutup karena tekanan air), untuk
menghilangkan kelebihan ATP dan mengurangi daya dari reaksi cahaya, sehingga
mencegah kerusakan pada aparatus fotosintesis. Zat Arabidopsismutants yang
tidak dapat tumbuh secara normal tumbuh di bawah 2% CO2, tetapi mereka mati
dengan cepat jika dipindahkan ke udara normal. Ada bukti dari pekerjaan dengan
tanaman transgenik bahwa fotorespirasi melindungi tanaman C3 dari
photooxidation dan photoinhibition (Kozaki dan Takeba 1996). Pekerjaan lebih
lanjut diperlukan untuk meningkatkan pemahaman kita tentang fungsi
fotorespirasi.

12
2.3 Mekanisme Konsentrasi Co2 I: Pompa Algal Dan Sankobakteri

Tumbuhan ini memiliki rubiscos normal, dan kurangnya fotorespirasi


merupakan konsekuensi dari mekanisme yang memusatkan CO2 di lingkungan
rubisco dan dengan demikian menekan reaksi oksigenasi. Dalam bagian ini dan
dua bagian berikut ini kita akan membahas tiga mekanisme untuk memekatkan
CO2 di lokasi karboksilasi:

1. Fiksasi karbon fotosintesis C4 (C4)

2. Metabolisme asam Crassulacean (CAM)

3. Pompa CO2 pada membran plasma

Dua bagian pertama dari mekanisme pemekatan CO2 ini ditemukan di


beberapa angiospermae dan melibatkan “tambahan” pada siklus Calvin.
Tumbuhan dengan metabolisme C4 sering ditemukan di lingkungan yang panas;
Tanaman CAM adalah khas lingkungan gurun.

Ketika sel-sel alga dan cyanobacterial ditanam di udara yang diperkaya


dengan 5% CO2 dan kemudian ditransfer ke media rendah CO2, mereka
menampilkan gejala khas fotorespirasi (penghambatan O2 fotosintesis pada
konsentrasi rendah CO2). Tetapi jika sel-sel ditanam di udara yang mengandung
0,03% CO2, mereka dengan cepat mengembangkan kemampuan untuk
memusatkan karbon anorganik (CO2 plus HCO3–) secara internal. Di bawah
kondisi CO2 rendah ini, sel-sel tidak lagi mengalami fotorespirasi.

Pada konsentrasi CO2 yang ditemukan di lingkungan air, rubisco


beroperasi jauh di bawah aktivitas spesifik maksimalnya. Organisme laut dan air
tawar mengatasi kelemahan ini dengan mengakumulasi karbon anorganik dengan
menggunakan CO2 dan pompa HCO3 - pada membran plasma. ATP yang berasal
dari reaksi cahaya memberikan energi yang diperlukan untuk penyerapan aktif
CO2 dan HCO3–. Total karbon anorganik di dalam beberapa sel cyanobacterial
dapat mencapai konsentrasi 50 mM (Ogawa dan Kaplan 1987). Penelitian terbaru
menunjukkan bahwa gen tunggal yang mengkode faktor transkripsi dapat

13
mengatur ekspresi gen yang mengkode komponen mekanisme pemekatan CO2
dalam ganggang (Xiang et al. 2001).

Protein yang berfungsi sebagai pompa CO2-HCO3 tidak ada dalam sel
yang tumbuh dalam konsentrasi tinggi CO2 tetapi diinduksi pada paparan
konsentrasi rendah CO2. Akumulasi HCO3 – dikonversi menjadi CO2 oleh enzim
carbonic anhydrase, dan CO2 memasuki siklus Calvin.

Konsekuensi metabolik dari pengayaan CO2 ini adalah penekanan


oksigenasi ribulosa bifosfat dan karenanya juga penekanan fotorespirasi. Biaya
energik dari adaptasi ini adalah tambahan ATP yang dibutuhkan untuk
memusatkan CO2.

2.2 MEKANISME KONSENTRASI CO2 II: SIKLUS C4 KARBON

Ada perbedaan anatomi daun antara tanaman yang memiliki siklus


C4carbon (disebut C4plants) dan yang berfotosintesis hanya melalui siklus
fotosintesis Calvin (tanaman C3). Di seluruh bagian daun C3 khas
mengungkapkan satu jenis sel utama yang memiliki kloroplas, mesofil.
Sebaliknya, daun C4 khas memiliki dua jenis sel yang mengandung kloroplas
berbeda: selubung mesofil dan bundel (atau Kranz, Jerman untuk sel "karangan
bunga").

Ada variasi anatomi yang cukup besar dalam pengaturan sel-sel bundel
selubung sehubungan dengan mesofil dan jaringan pembuluh darah. Namun,
dalam semua kasus, operasi siklus C4 membutuhkan upaya kerja sama dari kedua
jenis sel. Tidak ada sel mesofil dari tanaman C4 yang lebih dari dua atau tiga sel
jauhnya dari sel bundel selubung terdekat (lihat Gambar 8.9A). Selain itu,
jaringan luas plasmodesmata (lihat Gambar 1.27) menghubungkan sel-sel sel
mesofil dan bundel, sehingga menyediakan jalur untuk aliran metabolit antara tipe
sel.

14
2.2.1 Malat dan Aspartat Adalah Produk Karboksilasi dari Siklus C4

Pelabelan awal asam C4 pertama kali diamati dalam studi pelabelan


14CO2 tebu oleh HP Kortschack dan rekannya dan jagung oleh Y. Karpilov dan
rekan kerja. Ketika daun terpapar selama beberapa detik hingga 14CO2 dalam
cahaya, 70 hingga 80% label ditemukan pada asam malat C4 dan aspartat — pola
yang sangat berbeda dari yang diamati pada daun yang berfotosintesis hanya
melalui siklus Calvin.

(A)

(A) (B)

(C) (D)

(E)

15
Potongan melintang daun, menunjukkan perbedaan anatomi antara
tanaman C3 dan C4. (A) AC4 monocot, saccharum officinarum (tebu). (135 ×)
(B) AC3 monocot, Poa sp. (rumput). (240 ×) (C) AC4 dicot, Flaveria australasica
(Asteraceae). (740 ×) Sel selubung bundel berukuran besar pada daun C4 (Aand
C), dan tidak ada sel mesofil yang lebih dari dua atau tiga sel jauhnya dari sel sel
bundel terdekat. Fitur anatomi ini tidak ada pada daun C3 (B). (D) Model tiga
dimensi daun C4. (Aand B © David Webb; C milik Athena McKown; D setelah
Lüttge dan Higinbotham; E dari Craig dan Goodchild 1977.)
Dalam mengejar pengamatan awal ini, MD Hatch dan CR Slack
menjelaskan apa yang sekarang dikenal sebagai siklus karbon fotosintesis C4
( Siklus C4). Mereka menetapkan bahwa asam C4 malat dan aspartat adalah zat
antara fotosintesis stabil dan terdeteksi pertama dalam daun tebu dan bahwa atom
karbon 4 malat kemudian menjadi atom karbon 1 dari 3-fosfogliserat (Hatch dan
Slack 1966). Karboksilasi primer pada daun ini dikatalisis bukan oleh rubisco,
tetapi oleh PEP (phosphoenylpyruvate) karboksilase (Chollet et al. 1996).

Cara karbon ditransfer dari atom karbon 4 malat ke atom karbon 1 dari 3-
fosfogliserat menjadi jelas ketika keterlibatan sel sel mesofil dan bundel
dijelaskan. Enzim yang berpartisipasi terjadi pada salah satu dari dua jenis sel:
PEPcarboxylase dan piruvat-ortofosfat dikinase terbatas pada sel mesofil;
dekarboksilase dan enzim dari siklus Calvin lengkap terbatas pada sel bundel
selubung. Dengan pengetahuan ini, Hatch dan Slack mampu merumuskan model
dasar siklus.

C4 Cycle Konsentrat Sel Bundel SelSiklus dasar C4 terdiri dari empat tahap :

1. Fiksasi CO2 oleh karboksilasi fosfoenolpiruvat dalam sel mesofil untuk


membentuk asam C4 (malat dan / atau aspartat)

2. Pengangkutan asam C4 ke sel bundel selubung

3. Dekarboksilasi asam C4 dalam sel sel bundel dan pembentukan CO2, yang
kemudian direduksi menjadi karbohidrat melalui siklus Calvin

16
4. Transportasi asam C3 (piruvat atau alanin) yang dibentuk oleh langkah
dekarboksilasi kembali ke sel mesofil dan regenerasi akseptor CO2
fosfoenolpiruvat.

Gambar 2.6 Siklus karbon fotosintesis C4 dasar melibatkan empat tahap dalam
dua jenis sel yang berbeda: (1 ) Fiksasi CO2 menjadi asam empat karbon dalam
sel mesofil; (2) Transportasi asam empat karbon dari sel mesofil ke sel bundel
selubung; (3) Dekarboksilasi asam empat-karbon, dan pembentukan konsentrasi
CO2 yang tinggi dalam sel bundel selubung. CO2 yang dilepaskan ditetapkan oleh
rubisco dan dikonversi menjadi karbohidrat oleh siklus Calvin. (4) Pengangkutan
asam tiga-karbon residual kembali ke sel mesofil, di mana akseptor CO2 asli,
phosphoenolpyruvate, diregenerasi.

17
Gambar 2.7 Fotosintesis C4 jalan. Hidrolisis dua ATP mendorong siklus ke arah
panah, sehingga memompa CO2 dari atmosfer ke siklus Calvin kloroplas dari sel
sel bundel.
Ada tiga variasi jalur C4 dasar yang terjadi pada spesies yang berbeda (lihat Topik
Web 8.7). Variasi berbeda terutama dalam asam C4 (malat atau aspartat) yang
diangkut ke dalam sel bundel selubung dan dalam cara dekarboksilasi.
Konsentrasi CO2 dalam Sel Bundel Selubung Memiliki Biaya Energi Efek bersih
dari siklus C4 adalah mengubah larutan encer CO2 dalam sel mesofil menjadi
larutan CO2 pekat dalam sel bundel selubung. Studi tentang mutan yang
kekurangan karboksilase PEP dari Amaranthus edulis jelas menunjukkan bahwa
kurangnya mekanisme yang efektif untuk memekatkan CO2 dalam selubung
bundel secara nyata meningkatkan fotorespirasi di pabrik C4 (Dever et al. 1996).
Termodinamika memberi tahu kita bahwa pekerjaan harus dilakukan untuk
menetapkan dan mempertahankan gradien konsentrasi CO2 dalam selubung
bundel (untuk pembahasan terperinci tentang theododynamics, lihat Bab 2 di situs
web). Prinsip ini juga berlaku untuk pengoperasian siklus C4.

18
Dari penjumlahan reaksi yang terlibat, kita dapat menghitung biaya energi
untuk instalasi (Tabel 8.4). Perhitungan menunjukkan bahwa proses konsentrasi
CO2 mengkonsumsi dua kesetaraan AT (2 ikatan "energi tinggi") per molekul
CO2 yang diangkut. Jadi total kebutuhan energi untuk memperbaiki CO2 oleh
siklus C4 dan Calvin gabungan (masing-masing dihitung dalam Tabel 8.4 dan 8.1)
adalah lima ATPplus dua NADPH per CO2 yang diperbaiki.
Karena permintaan energi yang lebih tinggi ini, pabrik C4 melakukan
fotosintesis dalam kondisi pernapasan nonfotor (CO2 tinggi dan O2 rendah)
membutuhkan lebih banyak kuanta cahaya per CO2 daripada daun C3. Di udara
normal, kebutuhan kuantum tanaman C3 berubah dengan faktor-faktor yang
mempengaruhi keseimbangan antara fotosintesis dan fotorespirasi, seperti suhu.
Sebaliknya, karena mekanisme yang dibangun untuk menghindari fotorespirasi,
persyaratan kuantum tanaman C4 tetap relatif konstan di bawah kondisi
lingkungan yang berbeda.
2.2.2 Light Mengatur Aktivitas Enzim Kunci C4

Cahaya sangat penting untuk operasi siklus C4 karena mengatur beberapa


enzim spesifik. Misalnya, kegiatan PEP karboksilase, NADP: malat
dehidrogenase, dan piruvat-ortofosfat dikinase diatur sebagai respons terhadap

19
variasi dalam kepadatan fluks foton dengan dua proses berbeda: reduksi-oksidasi
gugus tiol dan fosforilasi-defosforilasi.
NADP: malate dehydrogenase diatur melalui sistem thioredoxin dari
kloroplas. Enzim berkurang (diaktifkan) saat iluminasi daun dan teroksidasi (tidak
aktif) saat gelap. PEPcarboxylase diaktifkan oleh mekanisme fosforilasi-
defosforilasi tergantung cahaya yang belum dikarakterisasi.
Anggota regulator ketiga jalur C4, piruvat-ortofosfat dikinase, dengan
cepat dinonaktifkan oleh fosforilasi enzim yang bergantung pada ADP yang tidak
biasa ketika densitas fluks foton turun (Burnell dan Hatch 1985). Aktivasi
dilakukan dengan pembelahan fosforolitik kelompok fosfat ini. Kedua reaksi,
fosforilasi dan defosforilasi, tampaknya dikatalisis oleh protein pengatur tunggal.
2.2.3 Dalam Iklim Panas dan Kering, Siklus C4C Mengurangi Fotorespirasi
dan Kehilangan Air
Dua fitur C4cycle dalam C4plants mengatasi efek buruk dari suhu yang
lebih tinggi pada fotosintesis yang telah dicatat sebelumnya. Pertama, afinitas
PEPcarboxylase untuk substratnya, HCO3–, cukup tinggi sehingga enzim tersebut
jenuh oleh HCO3– dalam equlibrium dengan tingkat udara CO2. Lebih lanjut,
karena substratnya adalah HCO3–, oksigen bukanlah pesaing dalam reaksi.
Aktivitas PEPcarboxylase yang tinggi ini memungkinkan tanaman C4 untuk
mengurangi aperture stomata dan dengan demikian menghemat air sambil
memperbaiki CO2 pada tingkat yang sama atau lebih besar dari tanaman C3. Fitur
menguntungkan kedua adalah penekanan fotorespirasi yang dihasilkan dari
konsentrasi CO2 dalam sel bundel selubung (Marocco et al. 1998).
Fitur-fitur ini memungkinkan C4plants untuk berfotosintesis lebih efisien
pada suhu tinggi daripada C3plants, dan mereka mungkin merupakan alasan untuk
kelimpahan relatif tanaman C4 di iklim yang lebih kering dan lebih panas.
Tergantung pada lingkungan alaminya, beberapa tanaman menunjukkan sifat-sifat
peralihan antara spesies C3 dan C4 yang ketat.

20
2.3 Mekanisme Konsentrasi Co2 III: Metabolisme Asam Crassulacean
Mekanisme ketiga untuk memekatkan CO 2 di lokasi rubisco ditemukan
dalam metabolisme asam crassulacean (CAM). Meskipun namanya, CAM tidak
terbatas pada keluarga Crassulaceae (Crassula, Kalanchoe, Sedum); itu ditemukan
di banyak keluarga angiosperma. Kaktus dan euforia adalah tanaman CAM, serta
nanas, vanila, dan agave.
Mekanisme CAM memungkinkan pabrik meningkatkan efisiensi
penggunaan air. Biasanya, pabrik CAM kehilangan 50 hingga 100 g air untuk
setiap gram CO2 yang diperoleh, dibandingkan dengan nilai masing-masing 250
hingga 300 g dan 400 hingga 500 g untuk tanaman C4 dan C3, masing-masing.
Dengan demikian, tanaman CAM memiliki keunggulan kompetitif di lingkungan
kering.
Mekanisme CAM serupa dalam banyak hal dengan siklus C4. Pada
tanaman C4, pembentukan asam C4 di mesofil dipisahkan secara spasial dari
dekarboksilasi asam C4 dan dari refixasi CO2 yang dihasilkan oleh siklus Calvin
dalam selubung bundel. Pada tanaman CAM, pembentukan asam C4 terpisah
secara temporal dan spasial. Pada malam hari, CO2 ditangkap oleh
PEPcarboxylase di sitosol, dan malat yang terbentuk dari produk oksaloasetat
disimpan dalam vakuola. Pada siang hari, malat yang disimpan diangkut ke
kloroplas dan didekarboksilasi oleh enzim NADP-malat, CO2 yang dilepaskan
ditetapkan oleh siklus Calvin, dan NADPH digunakan untuk mengubah produk
triosa fosfat dekarboksilasi menjadi pati.
2.3.1 Stomata Tanaman CAM Dibuka pada Malam Hari dan Tutup pada
Siang Hari
Tanaman CAM seperti kaktus mencapai efisiensi penggunaan air yang
tinggi dengan membuka stomata mereka selama malam yang dingin dan sepi dan
menutupnya selama hari-hari yang panas dan kering. Menutup stomata di siang
hari meminimalkan kehilangan air, tetapi karena H2O dan CO2 berbagi jalur
difusi yang sama, maka CO2 harus diambil pada malam hari.
CO2 dimasukkan melalui karboksilasi fosfoenolpiruvat menjadi
oksaloasetat, yang kemudian direduksi menjadi malat. Malat terakumulasi dan

21
disimpan dalam vakuola besar yang merupakan fitur anatomi khas, tetapi tidak
wajib, dari sel-sel daun tanaman CAM. Akumulasi sejumlah besar asam malat,
setara dengan jumlah CO2 yang berasimilasi pada malam hari, telah lama dikenal
sebagai pengasaman daun pada malam hari (Bonner dan Bonner 1948).
Dengan permulaan hari, stomata menutup, mencegah kehilangan air dan
penyerapan CO2 lebih lanjut. Sel-sel daun deacidify sebagai cadangan asam malat
vacuolar dikonsumsi. Dekarboksilasi biasanya dicapai dengan aksi enzim NADP-
malat pada malat (Drincovich et al. 2001). Karena stomata tertutup, CO2 yang
dilepaskan secara internal tidak dapat lepas dari daun dan sebaliknya difiksasi
menjadi karbohidrat oleh siklus Calvin.

Gamabar 2.9 Metabolisme asam Crassulacean (CAM). Pemisahan sementara


penyerapan CO2 dari reaksi fotosintesis: penyerapan dan fiksasi CO2 terjadi pada
malam hari, dan dekarboksilasi dan refixasi CO2 yang dilepaskan secara internal
terjadi pada siang hari. Keuntungan adaptif dari CAM adalah pengurangan
kehilangan air karena transpirasi, yang dicapai oleh pembukaan stomata pada
malam hari.
Peningkatan konsentrasi internal CO2 secara efektif menekan oksigenasi
fotorespirasi ribulosa bifosfat dan lebih menyukai karboksilasi. Asam C3 yang
dihasilkan dari dekarboksilasi diperkirakan dikonversi terlebih dahulu menjadi

22
triose fosfat dan kemudian menjadi pati atau sukrosa, sehingga meregenerasi
sumber akseptor karbon asli.

2.3.2 Beberapa Tanaman Menyesuaikan Pola Penggunaan CO2 dengan


Kondisi Lingkungan
Tanaman memiliki banyak mekanisme yang memaksimalkan pasokan air
dan CO2 selama pengembangan dan reproduksi. Tanaman C3 mengatur aperture
stomata daunnya pada siang hari, dan stomata menutup pada malam hari.
Tanaman C4 dan CAM menggunakan PEPcarboxylase untuk memperbaiki CO2,
dan mereka memisahkan enzim tersebut dari rubisco baik secara spasial (tanaman
C4) atau sementara (tanaman CAM).
Beberapa pabrik CAM menunjukkan peraturan jangka panjang dan dapat
menyesuaikan pola penyerapan CO2 mereka dengan kondisi lingkungan.
Tanaman CAM fakultatif seperti pabrik es (Mesembryanthemum crystallinum)
menjalankan metabolisme C3 dalam kondisi tanpa tekanan, dan mereka beralih ke
CAM sebagai respons terhadap panas, air, atau tekanan garam. Bentuk regulasi ini
memerlukan ekspresi banyak gen CAM sebagai respons terhadap sinyal stres
(Adams et al. 1998; Cushman 2001).
Dalam lingkungan akuatik, cyanobacteria dan ganggang hijau memiliki
banyak air tetapi menemukan konsentrasi CO2 yang rendah di sekitarnya dan
secara aktif berkonsentrasi CO2 anorganik secara intraseluler. Dalam diatom,
yang berlimpah di fitoplankton, mekanisme pemekatan CO2 beroperasi secara
bersamaan dengan jalur C4 (Reinfelder et al. 2000). Diatom adalah contoh yang
baik dari organisme fotosintesis yang memiliki kapasitas untuk menggunakan
berbagai mekanisme konsentrasi CO2 dalam menanggapi fluktuasi lingkungan.
2.3.3 Pati Disintesis dalam Kloroplas
Mikrograf elektron yang menunjukkan endapan pati yang menonjol, serta
studi lokalisasi enzim, tidak meninggalkan keraguan bahwa kloroplas adalah
tempat sintesis pati dalam daun. Pati disintesis dari triosa fosfat melalui fruktosa-
1,6-bifosfat. Intermediate glukosa-1-fosfat dikonversi menjadi ADP-glukosa

23
melalui ADP-glukosa pyrophosphorylase dalam reaksi yang membutuhkan ATP
dan menghasilkan pirofosfat (PPi, atau H2P2O72-).
Seperti dalam banyak reaksi biosintetik, pirofosfat dihidrolisis melalui
pirofosfatase anorganik spesifik menjadi dua molekul ortofosfat (Pi), sehingga
mendorong reaksi 5 menuju sintesis glukosa-ADP. Akhirnya, bagian glukosa
ADP-glukosa ditransfer ke ujung yang tidak mengurangi (karbon 4) dari glukosa
terminal dari rantai pati yang tumbuh, sehingga melengkapi urutan reaksi. Sukrosa
Disintesis dalam Sitosol Situs sintesis sukrosa telah dipelajari oleh fraksinasi sel,
di mana organel diisolasi dan dipisahkan satu sama lain. Analisis enzim
menunjukkan bahwa sukrosa disintesis dalam sitosol dari triose fosfat

Gambar 2.1 Regulasi diurnal dari CAM phosphoenolpyruvate (PEP) carboxylase.


Fosforilasi residu serin (Ser-OP) menghasilkan bentuk enzim yang aktif pada
malam hari dan relatif tidak sensitif terhadap malat. Pada siang hari, defosforilasi
serin (Ser-OH) memberikan bentuk enzim yang dihambat oleh malat.

24
Gambar 2.11 Sintesis pati dan sukrosa adalah proses bersaing yang terjadi dalam
kloroplas dan sitosol, masing-masing. Ketika konsentrasi sitosolik Pi tinggi,
kloroplas triose fosfat diekspor ke sitosol melalui Pi dengan imbalan Pi, dan
sukrosa disintesis. Ketika konsentrasi sitosolik Pi rendah, triose fosfat
dipertahankan dalam kloroplas, dan pati disintesis.
Dalam sintesis sukrosa, glukosa-1-fosfat dikonversi menjadi UDP-glukosa
melalui suatu pirofosforilase glukosa-UDP spesifik yang analog dengan
pirofosforilase ADP-glukosa dari kloroplas. Pada tahap ini, dua reaksi berturut-
turut melengkapi sintesis sukrosa (Huber dan Huber 1996). Pertama, sukrosa-
6fosfat sintase mengkatalisis reaksi UDP-glukosa dengan fruktosa-6-fosfat untuk
menghasilkan sukrosa-6-fosfat dan UDP. Kedua, sukrosa-6fosfat fosfatase
(fosfohidrolase) membelah fosfat dari sukrosa-6-fosfat, menghasilkan sukrosa.
Reaksi terakhir, yang pada dasarnya ireversibel, menarik yang pertama ke arah
sintesis sukrosa.

Seperti dalam sintesis pati, pirofosfat yang terbentuk dalam reaksi dikatalisis oleh
UDP-glukosa pirofosforilase (Tabel 8.6, reaksi 7) dihidrolisis, tetapi tidak segera
seperti dalam kloroplas. Karena tidak adanya pirofosfatase anorganik, pirofosfat
dapat digunakan oleh enzim lain, dalam reaksi transfosforilasi. Salah satu
contohnya adalah fruktosa-6-fosfat fosfotransferase, enzim yang mengkatalisasi

25
reaksi seperti yang dikatalisis oleh fosfofruktokinase (Tabel 8.6, reaksi 4a) kecuali
bahwa pirofosfat menggantikan ATPas donor fosforil. Perbandingan reaksi pada
Tabel 8.5 dan 8.6 (seperti yang diilustrasikan dalam Gambar 8.14)
mengungkapkan bahwa konversi triosa fosfat menjadi glukosa-1-fosfat di jalur
yang mengarah ke sintesis pati dan sukrosa memiliki beberapa langkah yang
sama. Namun, jalur ini menggunakan isozim (berbagai bentuk enzim yang
mengkatalisasi reaksi yang sama) yang unik untuk kloroplas atau sitosol.

Isozim menunjukkan sifat yang sangat berbeda. Sebagai contoh,


kloropastik fruktosa-1,6-bifosfatase diatur oleh sistem thioredoxin tetapi tidak
oleh fruktosa 2,6-bifosfat dan AMP. Sebaliknya, bentuk sitosol enzim diatur oleh
fruktosa-2,6-bifosfat (lihat bagian selanjutnya), peka terhadap AM. Terutama di
hadapan fruktosa-2,6-bifosfat, dan tidak terpengaruh oleh thioredoksin.

Selain dari sitosolik fruktosa-1,6-bifosfatase, sintesis sukrosa diatur pada


tingkat sukrosa fosfat sintase, enzim alosterik yang diaktifkan oleh glukosa-6-
fosfat dan dihambat oleh ortofosfat. Enzim diinaktivasi dalam gelap oleh
fosforilasi residu serin spesifik melalui protein kinase dan diaktifkan dalam
cahaya oleh defosforilasi melalui protein fosfatase. Glukosa-6-fosfat menghambat
kinase, dan Pi menghambat fosfatase.

26
BAB III
PENUTUP
3.1 Kesimpulan
Berdasarkan uraian di atas dapat di simpulkan bahwa Karbon dalam CO2
adalah bentuk teroksidasi yang ditemukan di alam (+4). Karbon dari zat
antara stabil pertama, 3fosfogliserat, lebih berkurang (+3), dan selanjutnya
berkurang dalam produk gliseraldehida-3-fosfat (+1). Secara keseluruhan,
reaksi awal siklus Calvin melengkapi pengurangan karbon atmosfer dan,
dengan demikian, memfasilitasi penggabungannya menjadi senyawa
organik.

27