Challenges in the early diagnosis of dengue: A practical approach

ABSTRAK

Pendahuluan: Penyakit yang ditularkan oleh nyamuk seperti demam berdarah, chikungunya, dan malaria
secara klinis tidak dapat dibedakan dan diagnosis semata-mata tergantung pada temuan laboratorium.
Di daerah endemik, diagnosis dini demam berdarah memerlukan deteksi dari ketiga penanda (NS1,
imunoglobulin (Ig) M dan G secara bersamaan untuk membedakan infeksi primer dan sekunder. Tujuan:
Untuk menilai nilai semua penanda demam berdarah dengan tes imunokromatografi cepat (TIK) ) dalam
diagnosis awal Bahan dan Metode: Sebanyak 120 sampel darah yang dikumpulkan dari pasien dengan
demam diuji untuk penanda demam berdarah dengan TIK cepat. Hasil: Dari 120 sampel yang diuji, 41
(34%) positif untuk satu atau lebih tiga penanda. Dari 41 sampel, NS1 hanya positif di 10 (24%), IgM
hanya di dua (5%), IgG hanya di 10 (24%), NS1 dan IgM di dua (5%), NS1 dan IgG dalam satu (2%), IgM
dan IgG dalam delapan (20%), dan triple positive (NS1, IgM, dan IgG) dalam delapan (20%). Dari 41
kasus, NS1 sendiri terdeteksi pada dua pasien (5%). ) yang datang pada 1-2 hari sakit Kesimpulan:
Deteksi cepat TIK NS1, IgM, dan IgG jauh lebih berharga dalam keadaan darurat sebagai tes skrining
untuk diagnosis dan manajemen dini. harus dikonfirmasi dengan enzyme-linked immunosorbent assay
(ELISA). Namun, tes "standar emas" dalam diagnosis demam berdarah adalah isolasi virus atau metode
molekuler.

INTRODUCTION

Dalam 2 tahun terakhir, Tamil Nadu telah menyaksikan peningkatan berbagai penyakit yang ditularkan
oleh nyamuk seperti demam berdarah, chikungunya, dan malaria. Semua penyakit ini pernah dianggap
sporadis, sekarang berubah menjadi epidemi. Mereka tidak bisa dibedakan secara klinis dan diagnosis
semata-mata berdasarkan temuan laboratorium. Penyakit virus ini seperti demam berdarah dan
chikungunya sembuh sendiri dan pengobatannya hanya bergejala. Karena vaksin tidak tersedia,
pencegahan utamanya adalah dengan pengendalian vektor di daerah endemis. Selanjutnya, nyamuk
juga kebal terhadap insektisida.

Dari ketiganya, demam berdarah menciptakan ancaman yang lebih serius bagi manusia. Ini menginfeksi
50-100 juta orang di seluruh dunia setiap tahun. [1] Studi berbasis populasi menunjukkan bahwa infeksi
tanpa gejala adalah hasil utama dari paparan virus dengue. Demam berdarah / demam berdarah dengue
(DF / DHF) disebabkan oleh infeksi dengan empat serotipe virus dengue DEN-1, DEN-2, DEN-3, dan DEN-
4; yang terkait erat satu sama lain secara antigenik. Hal ini menghasilkan reaktivitas silang yang luas
dalam tes serologis, tetapi infeksi dengan satu serotipe tidak memberikan imunitas crossprotektif
terhadap yang lain; dengan demikian, orang yang tinggal di daerah endemis dapat terinfeksi dengan
masing-masing dari empat serotipe demam berdarah selama masa hidup mereka. [2]

Lebih lanjut, infeksi selanjutnya dengan serotipe lain dapat meningkatkan risiko pengembangan DBD /
sindrom syok dengue (DSS) karena ko-sirkulasi berbagai serotipe DEN. [3] Hingga saat ini, diagnosis
utamanya adalah dengue immunoglobulin (Ig) M capture enzymelinked immunosorbent assay (ELISA)
bahkan di rumah sakit perawatan tersier dan laboratorium rujukan Program Pengawasan Penyakit
Menular (IDSP). IgM hanya muncul setelah 3-5 hari sakit pada infeksi primer dan bertahan selama 2-3
bulan, sedangkan pada infeksi sekunder tidak selalu positif.

Ada beberapa kendala praktis untuk menjalankan tes ELISA dengan beberapa sampel aktif dan aktif
bahkan selama epidemi. Ini menghasilkan diagnosis yang tertunda, kesalahan diagnosis, dan pelaporan
yang kurang. Dengan mengingat semua ini, penelitian ini dilakukan di rumah sakit multispesialis swasta
menggunakan uji imunokromatografi cepat komersial (TIK) yang mendeteksi demam berdarah NS1, IgM,
dan IgG secara bersamaan untuk diagnosis dini.

MATERIALS AND METHODS

Sebanyak 120 sampel darah dikumpulkan dari pasien dengan demam dan mengakhiri rumah sakit
multispesialis swasta dari Oktober 2011 hingga Februari 2012. Informed consent dan persetujuan
Institutional Ethical Committee diperoleh. Sera dipisahkan dan diuji untuk demam berdarah oleh TIK
sesuai instruksi pabrik. (Bioline, Dengue Duo diproduksi oleh SD Standard Diagnostics, Inc., Korea) yang
mendeteksi NS1, IgM, dan IgG. Bersamaan dengan ini, jumlah darah-total (TC) dan jumlah yang berbeda
(DC), laju sedimentasi eritrosit (ESR), hemoglobin (Hb), jumlah trombosit, parameter ginjal dan hati,
ultra sonogram, dada sinar-X, dan tes untuk menyingkirkan penyebab lain demam dilakukan di mana
pun diperlukan. Analisis statistik dilakukan dengan menggunakan uji chi-square dan Student-paired t-
test

RESULTS

Dari 120 sampel serum yang diuji, 41 (34%) positif untuk satu atau lebih dari tiga penanda (NS1, IgM,
dan IgG). Dari 41 sampel, NS1 hanya positif di 10 (24%), IgM hanya di dua (5%), IgG hanya di 10 (24%),
NS1 dan IgM di dua (5%), NS1 dan IgG dalam satu ( 2%), IgM dan IgG dalam delapan (20%), dan triple
positive (NS1, IgM, dan IgG) dalam delapan (20%). NS1 sendiri atau dalam kombinasi dengan IgM, IgG,
atau keduanya terdeteksi pada 21 kasus (51%) [Tabel 1].

Dari 19 kasus anak (<14 tahun), 11 (58%) positif, dari 101 orang dewasa (> 14 tahun), 30 (30%) positif
untuk satu atau lebih penanda. Ada perbedaan yang signifikan dalam kejadian demam berdarah antara
populasi anak dan dewasa (P <0,05). Dari 11 kasus anak ini, delapan (73%) positif untuk IgG [Tabel 1].

Dari 41 kasus, 14 (34%) memiliki infeksi primer dan 27 (66%) memiliki infeksi sekunder. Perbedaan
dalam kejadian infeksi dengue primer dan sekunder secara statistik signifikan (P <0,001). Di antara 41
kasus ini, NS1 sendiri terdeteksi pada dua pasien (5%) yang datang dalam 1-2 hari sakit dan IgM pada
delapan pasien (20%) yang datang pada 3-5 hari sakit. Perbedaan dalam proporsi deteksi infeksi primer
dengue berbeda antara NS1 dan IgM (P <0,01) [Tabel 2].

Trombositopenia (jumlah trombosit <1 lakh / μl) tercatat dalam 32 kasus (78%) dan leukopenia (jumlah
sel darah putih (WBC) <4.000 / mm3) dalam sembilan kasus (22%) yang positif untuk satu atau lebih dari
penanda demam berdarah. Ada perbedaan yang signifikan dalam jumlah trombosit antara kasus dengue
positif dan negatif (P <0,001). Ada perbedaan yang signifikan dalam jumlah WBC antara kasus dengue
positif dan negatif (P <0,01) [Tabel 3]. Tren musiman dicatat selama musim paska musim, yaitu Oktober-
Februari.

DISCUSSION

Diagnosis tahap akut dengue oleh IgM capture ELISA saja sangat sulit, yang merupakan satu-satunya tes
yang tersedia bahkan di pusat perawatan tersier. Deteksi simultan NS1, IgM, dan IgG sangat penting
untuk membedakan dengue primer dan sekunder tergantung pada waktu pengumpulan spesimen.
Ketiga penanda oleh ELISA ini memakan waktu dan lebih mahal. Lebih jauh lagi, ini membutuhkan
peralatan, keahlian, dan ahli mikrobiologi yang mahal. Ini tidak layak dalam layanan kesehatan primer,
oleh karena itu ICT yang cepat mendeteksi ketiga penanda ini adalah alternatif yang efisien. Dalam
penelitian ini, NS1 saja positif 10 (24%). Ini diamati sebagai 23% oleh Da a et al., Shrivastava et al., 16%,
dan Kulkarni et al., 30%. [5-7] Ini menyiratkan bahwa semua kasus ini akan salah didiagnosis jika NS1
tidak termasuk dalam panel uji.

NS1 sendiri atau dalam kombinasi dengan IgM, IgG, atau keduanya terdeteksi pada 21 kasus (51%).
Protein nonstruktural adalah NS1, NS2a, NS2b, NS3, NS4a, NS4b, dan NS5. [8] NS1 adalah glikoprotein
yang dikonservasi sangat penting untuk replikasi virus. [9] Libraty et al., Menunjukkan bahwa tingginya
kadar NS1 dalam plasma berkorelasi dengan tingkat viremia pada pasien dengan DBD dibandingkan
pada pasien dalam waktu 72 jam setelah onset penyakit. [10] Tingkat sirkulasi tinggi dari virus dengue
protein nonstruktural NS1 pada awal penyakit dengue berkorelasi dengan perkembangan DBD. [10] Ini
menunjukkan NS1 kuantitatif dapat digunakan sebagai indikator prognostik juga. Pasien positif NS1
menular untuk nyamuk. Lebih lanjut, strain virus dan status imun inang juga telah disarankan sebagai
faktor risiko untuk DBD / DSS.

Triple positif (NS1, IgM, dan IgG) menyiratkan, mereka berada pada tahap akhir infeksi primer atau
sekunder. Tetapi dalam penelitian ini, ini diamati dalam delapan (20%) kasus dan terdeteksi dalam 7 hari
yang mengindikasikan infeksi sekunder.

Dalam penelitian ini, 11 kasus anak-anak (<14 tahun) (58%) positif untuk satu atau lebih penanda
demam berdarah. Ini menunjukkan bahwa demam berdarah lebih sering terjadi pada anak-anak seperti
yang diamati dalam penelitian sebelumnya. [3,11]

Selama fase akut penyakit, kehadiran IgM dengue menunjukkan infeksi primer dan deteksi bersamaan
IgM dengue dan IgG menunjukkan infeksi sekunder. Tidak adanya IgG dengue dalam sampel yang
dikumpulkan antara hari 0 dan 8 memungkinkan untuk mendefinisikan kasus sebagai infeksi primer. Dari
41 kasus, 14 (34%) memiliki infeksi primer dan 27 (66%) memiliki infeksi sekunder. Perbedaan antara
infeksi dengue primer dan sekunder sangat penting untuk mengurangi morbiditas dan mortalitas akibat
DBD / DSS, terutama pada anak-anak dan orang tua. Oleh karena itu, perbedaan ini berguna dalam
tujuan prognostik dan epidemiologis. [12,13] Studi melaporkan bahwa NS1 dapat dideteksi untuk
periode yang lebih pendek pada infeksi sekunder karena IgG dapat berfungsi untuk menutupi NS1 dari
deteksi atau pembersihan cepat NS1 dalam bentuk kompleks imun. [14] Dari 41 kasus, NS1 saja
terdeteksi pada dua pasien (5%) yang datang pada 1-2 hari sakit. Da a et al., Juga melaporkan bahwa
NS1 dapat dideteksi sejak hari pertama demam baik pada infeksi primer maupun sekunder. [5]
Trombositopenia (jumlah trombosit <1 lakh / ml) tercatat dalam 32 kasus (78%) di antara pasien positif.
Ini didukung oleh Kulkarni et al., Yang mengamati ini sebesar 69%. [7] Demam dan leukopenia, ditambah
satu atau lebih dari daftar gejala pada klasifikasi Organisasi Kesehatan Dunia (WHO) 2009 dapat
digunakan untuk diagnosis klinis kemungkinan demam berdarah. Leukopenia (jumlah WBC <4.000 /
mm3) diamati pada 9 kasus (22%) pasien positif dalam penelitian ini.

Tren musiman pasca hujan (Oktober-Februari) diamati dalam penelitian ini. Ini sesuai dengan penelitian
oleh Bharaj et al. [15] Dalam penelitian ini, hasil tes cepat berkorelasi dengan parameter laboratorium
klinis dan lainnya, tetapi mereka tidak dievaluasi terhadap ELISA dan metode molekuler.

Studi ini menyoroti diagnosis dini yang cepat dan perawatan yang tepat mencegah penularan. Langkah-
langkah anti-nyamuk yang efektif harus diambil selama musim pasca-musim hujan. Jika vaksin efektif
juga dikembangkan, semua pendekatan terpadu ini akan mengurangi kejadian demam berdarah

CONCLUSION

Deteksi IgM spesifik saja berguna pada sebagian besar infeksi akut. Tetapi deteksi simultan NS1, IgM,
dan IgG sangat penting untuk diagnosis demam berdarah, jika tidak maka akan terlewatkan. TIK yang
cepat mendeteksi ketiga penanda jauh lebih berharga dalam keadaan darurat sebagai tes skrining untuk
diagnosis dan manajemen dini. Tes cepat harus dikonfirmasi oleh ELISA. Dengue IgG dapat digunakan
untuk pengawasan seroepidemiologis. Serologi positif palsu dapat terjadi dalam pendeteksian antibodi
dengue oleh ELISA karena reaksi silang dengan arbovirus lainnya. Oleh karena itu tes "standar emas"
dalam diagnosis demam berdarah adalah isolasi virus atau metode molekuler.

PENGAKUAN

Semua orang yang telah membuat kontribusi besar untuk persiapan naskah, tetapi yang bukan penulis
disebutkan di bagian Pengakuan dan telah setuju secara tertulis untuk disebutkan namanya. Belum ada
kontributor yang diverifikasi.