Anda di halaman 1dari 8

Proliferasi :

Tahapan Pengembangan Limfosit B


- Selama pematangannya, sel-sel dari garis keturunan limfosit B melewati tahap-tahap
yang dapat dibedakan, masing-masing ditandai oleh penanda permukaan sel yang
berbeda dan pola spesifik ekspresi gen Ig (Gambar 8-14). Tahapan utama dan
peristiwa di masing-masing dijelaskan berikutnya.

Tahapan Pro-B dan Pra-B Pengembangan Sel B


- Sel bone marrow paling awal yang berkomitmen pada garis sel B disebut sel pro-B.
Sel-sel Pro-B tidak menghasilkan Ig, tetapi dapat dibedakan dari sel-sel imatur
lainnya dengan ekspresi molekul permukaan yang dibatasi garis turunan B seperti
CD19 dan CD10. Rag protein pertama kali diekspresikan pada tahap ini, dan
rekombinasi pertama gen Ig terjadi di lokus rantai berat. Rekombinasi ini menyatukan
satu segmen gen D dan satu J, dengan penghapusan DNA intervensi (Gbr. 8-15A).
- Segmen D yang 5′ dari segmen D yang disusun ulang dan segmen J yang 3 segment
dari segmen J yang disusun ulang tidak dipengaruhi oleh rekombinasi ini (mis., D1
dan J2 ke J6 pada Gambar 8-15A). Setelah peristiwa rekombinasi D-J, salah satu dari
banyak gen 5′ V bergabung dengan unit DJ, sehingga menimbulkan ekson VDJ yang
disusun ulang. Pada tahap ini, semua segmen V dan D antara gen V dan D yang
disusun ulang juga dihapus. Rekombinasi V-ke-DJ di lokus rantai Ig H hanya terjadi
pada prekursor limfosit B yang berkomitmen dan merupakan peristiwa penting dalam
ekspresi Ig karena hanya gen V yang disusun ulang kemudian ditranskripsi.
- Enzim TdT, yang mengkatalisis penambahan nukleotida J fungsional Nontemplated,
diekspresikan paling melimpah selama tahap pro-B ketika rekombinasi VDJ terjadi di
lokus Ig H dan kadar TdT berkurang sebelum gen rantai ringan rekombinasi V-J
selesai. Oleh karena itu, keragaman fungsional yang dikaitkan dengan penambahan
nukleotida N lebih menonjol pada penyusunan ulang gen rantai berat daripada pada
gen rantai ringan.
- Ekson rantai C wilayah berat tetap dipisahkan dari kompleks VDJ oleh DNA yang
mengandung segmen J distal dan intron J-C. Gen rantai berat Ig yang disusun ulang
ditranskripsi untuk menghasilkan transkrip primer yang mencakup kompleks VDJ
jarak-belakang dan ekson Cμ. RNA nuklir Cμ dibelah hilir dari salah satu dari dua
situs polyadenylation konsensus, dan beberapa nukleotida adenin, yang disebut ekor
poli-A, ditambahkan ke ujung 3.. RNA nuklir ini mengalami splicing, suatu peristiwa
pemrosesan RNA di mana intron dikeluarkan dan ekson bergabung bersama. Dalam
kasus μ RNA, intron antara ekson pemimpin dan ekson VDJ, antara ekson VDJ dan
ekson pertama lokus Cμ, dan antara masing-masing daerah ekson C constant konstan
berikutnya dihapus, sehingga menimbulkan suatu mRNA disambung untuk rantai
berat μ. Jika mRNA berasal dari lokus Ig di mana penataan ulang menjadi produktif,
terjemahan rantai berat μ yang diatur ulang mRNA mengarah ke sintesis protein μ.

- Agar penataan ulang menjadi produktif (dalam bingkai bacaan yang benar), basis
harus ditambahkan atau dihapus pada persimpangan dalam kelipatan tiga. Ini
memastikan bahwa gen Ig yang disusun ulang akan dapat mengkodekan protein Ig
dengan benar. Kira-kira setengah dari semua sel pro-B membuat pengaturan ulang
yang produktif di lokus Ig H pada setidaknya satu kromosom dan dengan demikian
dapat melanjutkan untuk mensintesis protein rantai berat μ. Hanya sel yang membuat
pengaturan ulang yang produktif yang bertahan dan berbeda lebih jauh.

- Setelah penataan Ig μ yang produktif dibuat, sel tidak lagi disebut sel pro-B dan
telah berdiferensiasi menjadi tahap pra-B. Sel-sel Pra-B mengembangkan sel-sel
garis turunan B yang mengekspresikan protein Ig μ tetapi masih belum menemukan
lokus rantai ringan. Sel pra-B mengekspresikan rantai berat μ pada permukaan sel,
terkait dengan protein lain, sebagai reseptor sel pra-B, yang memiliki beberapa peran
penting dalam pematangan sel B.

Reseptor Sel Pre-B


- Kompleks μ, rantai ringan pengganti, dan protein pemindah-sinyal yang disebut Igα
dan Igβ membentuk reseptor antigen pra-garis keturunan B, yang dikenal sebagai
reseptor sel pra-B (pra-BCR). Rantai berat μ berhubungan dengan protein λ5 dan V
pra-B, juga disebut rantai ringan pengganti karena secara struktural homolog dengan
rantai ringan κ dan λ tetapi tidak berubah-ubah (yaitu, mereka identik di semua sel
pra-B) dan disintesis hanya dalam sel pro-B dan pra-B (Gbr. 8-16A).
- Igα dan Igβ juga membentuk bagian dari reseptor sel B dalam sel B matang. Sinyal
dari pra-BCR mendorong transisi pro-B ke pra-B dan bertanggung jawab untuk
ekspansi proliferasi sel sel garis B yang terbesar di bone marrow. Tidak diketahui apa
yang diakui pra-BCR; pandangan konsensus saat ini adalah bahwa reseptor ini
berfungsi dalam ligan-independen dan diaktifkan oleh proses perakitan (mis., reseptor
yang dirakit penuh dalam mode "on"). Pentingnya pra-BCR diilustrasikan oleh
penelitian terhadap tikus KO dan kasus defisiensi reseptor ini yang jarang terjadi pada
manusia. Sebagai contoh, pada tikus, sistem gen yang mengkode rantai μ atau salah
satu rantai cahaya pengganti menghasilkan jumlah sel B matang yang berkurang
karena perkembangan terhambat pada tahap pro-B.

- Ekspresi pra-BCR adalah pos pemeriksaan pertama dalam pematangan sel B.


Sejumlah molekul pensinyalan yang terkait dengan pra-BCR dan BCR diperlukan
agar sel-sel berhasil menegosiasikan pos pemeriksaan yang dimediasi pra-BCR di
pro-B ke transisi sel pra-B. Sebuah kinase yang disebut Bruton's tirosine kinase (Btk)
diaktifkan di hilir pra-BCR dan diperlukan untuk pengiriman sinyal dari reseptor ini
yang memediasi kelangsungan hidup, proliferasi, dan pematangan pada dan di luar
tahap sel pra-B. Pada manusia, mutasi pada gen BTK mengakibatkan penyakit yang
disebut X-linked agammaglobulinemia (XLA), yang ditandai dengan kegagalan
pematangan sel B (lihat Bab 20). Pada tikus, mutasi pada btk menghasilkan cacat sel
B yang kurang parah pada strain tikus yang disebut Xid (untuk imunodefisiensi
terkait-X). Cacat kurang parah daripada di XLA karena sel-sel murine pra-B
mengekspresikan kinase mirip Btk kedua yang disebut Tec yang mengkompensasi
Btk yang rusak.

- Pra-BCR mengatur penataan lebih lanjut gen Ig dengan dua cara. Pertama, jika
protein μ diproduksi dari lokus rantai berat rekombinasi pada satu kromosom dan
membentuk pra-BCR, reseptor ini memberi sinyal untuk secara ireversibel
menghambat penataan ulang lokus rantai berat Ig pada kromosom lainnya. Jika
penataan ulang pertama adalah tidak produktif, alel rantai berat pada kromosom lain
dapat menyelesaikan penataan ulang VDJ di lokus Ig H. Dengan demikian, dalam
klon sel B mana pun, satu alel rantai berat secara produktif disusun ulang dan
diekspresikan, dan yang lainnya disimpan dalam konfigurasi germline atau
nonproduktif di belakang. Sebagai hasilnya, sel B individu dapat mengekspresikan
protein rantai berat Ig yang dikodekan oleh hanya satu dari dua alel yang diwariskan.
Fenomena ini disebut pengecualian allelic, dan memastikan bahwa setiap sel B akan
mengekspresikan reseptor tunggal, sehingga mempertahankan spesifisitas klonal. Jika
kedua alel menjalani penyusunan ulang gen Ig H nonproduktif, sel yang sedang
berkembang tidak dapat menghasilkan rantai berat Ig, tidak dapat menghasilkan
sinyal survival yang bergantung pada pra-BCR, dan dengan demikian mengalami
kematian sel yang terprogram. Pengecualian alelik rantai berat Ig melibatkan
perubahan dalam struktur chroinin di lokus rantai berat yang membatasi aksesibilitas
ke rekombinase V (D) J.
- Cara kedua pra-BCR mengatur produksi reseptor antigen adalah dengan menstimulasi
penataan ulang gen rantai cahaya. Namun, ekspresi rantai μ tidak mutlak diperlukan
untuk rekombinasi gen rantai cahaya, seperti yang ditunjukkan oleh temuan bahwa
tikus KO yang kekurangan gen μ melakukan inisiasi penataan gen rantai cahaya di
beberapa sel B yang sedang berkembang (yang, tentu saja, tidak dapat
mengekspresikan antigen fungsional reseptor dan berlanjut hingga jatuh tempo). Pra-
BCR juga berkontribusi pada tidak aktifnya ekspresi gen rantai cahaya pengganti saat
sel pra-B matang.

Immature Sel B
- Setelah tahap sel pra-B, setiap sel B yang berkembang pada awalnya menyusun ulang
gen rantai cahaya κ, dan jika penataan ulang dalam bingkai, itu akan menghasilkan
protein rantai cahaya κ, yang terkait dengan rantai μ yang sebelumnya disintesis untuk
menghasilkan sel lengkap Protein IgM. Jika lokus κ tidak ditata ulang secara
produktif, sel dapat mengatur ulang lokus λ dan kembali menghasilkan molekul IgM
lengkap. (Induksi penataan ulang gen rantai cahaya λ terjadi terutama ketika reseptor
sel B yang mengekspresikan Ig κ adalah reaktif sendiri, seperti yang akan dibahas
nanti). Sel B yang mengekspresikan IgM disebut sel B yang belum matang.
Rekombinasi DNA dalam lokus rantai cahaya κ terjadi dengan cara yang sama seperti
pada lokus rantai berat Ig (lihat Gambar 8-15B). Tidak ada segmen D di lokus rantai
cahaya, dan karenanya rekombinasi hanya melibatkan penyatuan satu segmen V ke
satu segmen J, membentuk ekson VJ. Ekson VJ ini tetap terpisah dari daerah C oleh
intron, dan pemisahan ini dipertahankan dalam transkrip RNA primer. Penyambungan
hasil transkrip primer dalam menghilangkan intron antara VJ dan C ekson dan
menghasilkan mRNA yang diterjemahkan untuk menghasilkan protein κ atau λ.
Dalam lokus λ, splicing RNA alternatif dapat mengarah pada penggunaan salah satu
dari empat ekson Cλ fungsional, tetapi tidak ada perbedaan fungsional yang diketahui
antara jenis-jenis rantai cahaya λ yang dihasilkan. Produksi protein κ mencegah
penataan ulang λ, dan, seperti yang dinyatakan sebelumnya, penataan ulang λ hanya
terjadi jika penataan ulang κ tidak produktif atau jika rantai cahaya κ yang disusun
ulang secara reaktif terhapus. Sebagai hasilnya, klon sel B individu dapat
mengekspresikan hanya satu dari dua jenis rantai cahaya; Fenomena ini disebut
pengecualian isotipe rantai ringan. Seperti dalam lokus rantai berat, ekspresi κ atau λ
secara alel dikecualikan dan dimulai dari hanya satu dari dua kromosom orangtua
pada waktu tertentu. Juga, untuk rantai berat, jika kedua alel dari rantai κ dan λ tidak
berfungsi dalam sel B yang sedang berkembang, sel tersebut gagal menerima sinyal
survival yang biasanya dihasilkan oleh BCR dan mati.
- Molekul IgM rakitan diekspresikan pada permukaan sel dalam hubungan dengan Igα
dan Igβ, di mana mereka berfungsi sebagai reseptor spesifik untuk antigen. Dalam sel
yang tidak sangat reaktif terhadap diri sendiri, BCR memberikan sinyal tonik
independen ligan yang menjaga sel B hidup dan juga memediasi penutupan ekspresi
gen Rag, sehingga mencegah penyusunan kembali gen Ig lebih lanjut. Sel B yang
belum matang tidak berproliferasi dan berdiferensiasi sebagai respons terhadap
antigen. Faktanya, jika mereka mengenali antigen di sumsum tulang dengan aviditas
tinggi, yang dapat terjadi jika sel B mengekspresikan reseptor untuk antigen diri
multivalen yang ada di sumsum tulang, sel B dapat menjalani pengeditan reseptor
atau kematian sel, seperti yang dijelaskan kemudian. . Proses ini penting untuk
pemilihan negatif sel B yang sangat reaktif sendiri. Sel B yang belum matang yang
tidak sangat reaktif sendiri meninggalkan sumsum tulang dan menyelesaikan
maturasinya di limpa sebelum bermigrasi ke organ limfoid perifer lainnya.

Subset of Mature B cell


- Himpunan bagian sel B yang berbeda berkembang dari nenek moyang yang berbeda
(Gbr. 8-17). HSC yang diturunkan dari hati janin adalah prekursor sel B-1 B, yang
dijelaskan kemudian. HSC yang diturunkan dari sumsum tulang memunculkan
sebagian besar sel B, yang kadang-kadang disebut sel B-2 B. Sel-sel ini dengan cepat
melewati dua tahap transisi dan dapat berkomitmen untuk berkembang menjadi sel B
zona marginal, juga dijelaskan kemudian, atau menjadi sel B folikel. Afinitas reseptor
sel B untuk antigen sendiri berkontribusi terhadap apakah sel B-2 B yang matang
akan berdiferensiasi menjadi folikel atau sel zona B marginal. Keputusan nasib sel ini
merupakan peristiwa seleksi positif pada limfosit B yang terkait dengan komitmen
garis keturunan.

Sel B folikel
- Sebagian besar sel B matang milik subset sel B folikel dan menghasilkan IgD selain
IgM. Masing-masing sel B ini bersama-sama mengekspresikan rantai berat μ dan δ
menggunakan ekson VDJ yang sama untuk menghasilkan domain V dan berhubungan
dengan rantai cahaya κ atau λ yang sama untuk menghasilkan dua reseptor membran
dengan kekhususan antigen yang sama. Ekspresi simultan dalam sel B tunggal dari
ekson VDJ yang disusun ulang yang sama pada dua transkrip, satu termasuk ekson Cμ
dan ekson Cδ lainnya, dicapai dengan penyambungan RNA alternatif (Gbr. 8-18).
- Transkrip RNA primer panjang diproduksi berisi unit VDJ yang disusun ulang serta
gen Cμ dan Cδ. Jika transkrip primer dibelah dan dipolimerisasi setelah ekson μ,
intron disambung sedemikian sehingga ekson VDJ berdekatan dengan ekson Cμ; ini
menghasilkan generasi mRNA. Namun, jika kompleks VDJ tidak terkait dengan
ekson Cμ tetapi disambungkan ke ekson Cδ, δ mRNA diproduksi. Hasil terjemahan
selanjutnya dalam sintesis protein rantai berat μ atau complete lengkap. Jadi,
polyadenylation selektif dan splicing alternatif memungkinkan sel B untuk secara
bersamaan menghasilkan mRNA matang dan protein dari dua tipe rantai berat yang
berbeda. Mekanisme yang tepat yang mengatur pilihan poligenisilasi atau tempat
akseptor splice dimana VDJ yang disusun kembali dihubungkan dengan Cμ atau Cδ
kurang dipahami, seperti halnya sinyal yang menentukan kapan dan mengapa sel B
mengekspresikan IgM dan IgD daripada IgM saja. . Koekspresi IgM dan IgD disertai
dengan kemampuan untuk resirkulasi dan perolehan kompetensi fungsional, dan
inilah mengapa sel IgM + IgD + B juga disebut sel B dewasa. Korelasi antara ekspresi
IgD dan akuisisi kompetensi fungsional ini telah mengarah pada saran bahwa IgD
adalah reseptor aktivasi penting dari sel B dewasa. Namun, tidak ada bukti untuk
perbedaan fungsional antara IgM membran dan IgD membran. Selain itu, KO gen Ig δ
pada tikus tidak memiliki dampak yang signifikan pada maturasi atau respons sel B
yang diinduksi antigen. Sel-sel B folikel juga sering disebut sel-sel B resirkulasi
karena mereka bermigrasi dari satu organ limfoid ke yang berikutnya, yang berada di
relung khusus yang dikenal sebagai folikel sel B (lihat Bab 2). Dalam ceruk-ceruk ini,
sel-sel B ini dipertahankan, sebagian, oleh sinyal kelangsungan hidup yang
disampaikan oleh sitokin dari keluarga nekrosis tumor factor (TNF) keluarga yang
disebut BAFF atau BlyS (lihat Bab 11).

- Sel B yang matang dan naif responsif terhadap antigen, dan kecuali jika sel tersebut
bertemu antigen yang mereka kenali dengan afinitas tinggi dan merespons, mereka
mati dalam beberapa bulan. Pada Bab 11, kita akan membahas bagaimana sel-sel ini
merespons antigen dan bagaimana pola ekspresi gen Ig berubah selama diferensiasi
sel B yang diinduksi oleh antigen.

B-1 dan Sel B Zona Marginal


- Subset limfosit B, yang disebut sel B-1 B, berbeda dari mayoritas limfosit B dan
berkembang dengan cara yang unik. Sel-sel ini berkembang dari HSC yang
diturunkan dari hati janin dan paling baik didefinisikan pada tikus. Sebagian besar sel
B-1 murine mengekspresikan molekul CD5 (Ly-1). Pada orang dewasa, sejumlah
besar sel B-1 ditemukan sebagai populasi yang memperbaharui diri di peritoneum dan
situs mukosa. Sel B-1 berkembang lebih awal selama ontogeni daripada sel B
konvensional, mengekspresikan repertoar gen V yang relatif terbatas, dan
menunjukkan keragaman fungsi yang jauh lebih sedikit daripada sel B konvensional
(karena TdT tidak diekspresikan dalam hati janin). Sel B-1 serta sel B zona marginal
secara spontan mengeluarkan antibodi IgM yang sering bereaksi dengan mikroba
polisakarida dan lipid. Antibodi ini kadang-kadang disebut antibodi alami karena
mereka ada pada individu tanpa imunisasi terbuka, walaupun ada kemungkinan
bahwa flora mikroba di usus adalah sumber antigen yang merangsang produksi
mereka. Sel B-1 berkontribusi pada produksi antibodi yang cepat terhadap mikroba di
jaringan tertentu, seperti peritoneum. Di situs mukosa, sebanyak setengah sel yang
mensekresi IgA dalam lamina propria dapat berasal dari sel B-1. Sel B-1 B
dianalogikan dengan sel T in di mana keduanya memiliki repertoar reseptor antigen
dengan keanekaragaman yang terbatas, dan keduanya diduga merespons antigen
mikroba yang biasa ditemui di awal respons imun.
- Penanda utama yang digunakan untuk menggambarkan sel B-1 murine adalah CD5.
Pada manusia, sel-sel mirip B-1 telah dideskripsikan tetapi sel-sel ini tidak
mengekspresikan CD5. Pada manusia, CD5 ditemukan pada sel B transisi dan
beberapa populasi sel B yang diaktifkan.
- Sel B zona marginal terletak terutama di sekitar sinus marginal di limpa dan mirip
dengan sel B-1 dalam hal keragaman terbatas dan kemampuan mereka untuk
menanggapi antigen polisakarida dan untuk menghasilkan antibodi alami. Sel B zona
marginal ada pada tikus dan manusia dan mengekspresikan IgM dan koreseptor
CD21. Pada tikus, sel B zona marginal hanya ada di limpa, sedangkan pada manusia,
mereka dapat ditemukan di limpa serta di kelenjar getah bening. Sel B zona marginal
merespon sangat cepat terhadap mikroba yang ditularkan melalui darah dan berbeda
menjadi sel plasma mensekresi IgM yang berumur pendek. Meskipun mereka
umumnya memediasi respon imun humoral independen sel T untuk patogen yang
bersirkulasi, sel zona B marginal juga tampaknya mampu memediasi beberapa respon
imun yang bergantung pada sel T.

Selection of the Mature B Cell Repertoire

- Repertoar sel B matang dipilih secara positif dari kumpulan sel B imatur. Seperti yang
akan kita lihat nanti, seleksi positif didefinisikan dengan baik dalam limfosit T dan
bertanggung jawab untuk mencocokkan TCR pada sel T CD8 + dan CD4 + yang baru
dihasilkan dengan kemampuan mereka untuk mengenali molekul MHC kelas I dan
MHC kelas II secara mandiri. Tidak ada batasan yang sebanding untuk pengenalan
antigen sel B. Namun demikian, seleksi positif tampaknya menjadi fenomena umum
terutama diarahkan untuk identifikasi limfosit yang telah menyelesaikan program
penataan gen reseptor antigen mereka dengan sukses. Dipercaya bahwa hanya sel-sel
B yang mengekspresikan molekul Ig membran fungsional yang menerima sinyal
menetap BCR konstitutif, juga dikenal sebagai sinyal BCR “tonik”. Sinyal BCR tonik
memediasi penutupan ekspresi gen Rag dalam sel B yang belum matang dan
mengaktifkan jalur kelangsungan hidup sel di semua sel B. Antigen sendiri dapat
mempengaruhi kekuatan sinyal BCR dan dengan demikian pilihan berikutnya dari
garis sel B perifer selama pematangan sel B.

- Sel B yang belum matang yang mengenali antigen diri dengan aviditas tinggi dapat
diinduksi untuk mengubah spesifisitasnya dengan proses yang disebut reseptor
editing. Dalam proses ini, pengenalan antigen mengarah pada reaktivasi gen Rag,
peristiwa rekombinasi V-J rantai cahaya tambahan, dan produksi rantai cahaya Ig
baru, yang memungkinkan sel untuk mengekspresikan reseptor sel B yang berbeda
yang tidak reaktif sendiri. Pengeditan reseptor umumnya ditargetkan pada gen rantai
cahaya κ reaktif diri. Ekson VJk yang menyandikan domain variabel rantai cahaya
autoreaktif dihapus dan digantikan oleh ekson VJk baru atau oleh gen rantai cahaya λ
yang baru disusun ulang. Ekson VJk baru dapat dihasilkan oleh penataan ulang gen
Vk hulu dari gen Vk asli yang menghasilkan rantai cahaya autoreaktif ke segmen Jk
di hilir dari segmen Jk yang awalnya disusun ulang.

- Jika pengeditan reseptor gagal, sel-sel B yang belum matang yang mengekspresikan
reseptor afinitas tinggi untuk antigen diri dan menemukan antigen-antigen ini di
sumsum tulang atau limpa dapat mati dengan apoptosis. Proses ini juga disebut
seleksi negatif. Antigen yang memediasi seleksi negatif — biasanya antigen mandiri
yang melimpah atau polivalen (mis. Terikat pada membran) —memberikan sinyal
kuat ke limfosit B imatur yang mengekspresikan IgM yang mengekspresikan reseptor
khusus untuk antigen mandiri ini. Pengeditan dan penghapusan reseptor bertanggung
jawab untuk menjaga toleransi sel B terhadap antigen diri yang ada di sumsum tulang
(lihat Bab 14).

- Setelah transisi dilakukan ke tahap sel B matang IgD + IgM +, pengenalan antigen
mengarah pada proliferasi dan diferensiasi, bukan pada pengeditan reseptor atau
apoptosis. Akibatnya, sel B matang yang mengenali antigen dengan afinitas tinggi
dalam jaringan limfoid perifer diaktifkan, dan proses ini mengarah pada respons imun
humoral. Sel B folikel membuat sebagian besar respon antibodi bergantung sel T
helper terhadap antigen protein (lihat Bab 11).