Anda di halaman 1dari 40

UJI EFEKTIVITAS EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK

(Annona muricata L.) TERHADAP PERTUMBUHAN


Trichophyton rubrum SECARA IN VITRO

EFFECTIVENESS TEST OF ETANOL OF SOURSOP LEAF


EXTRACT (Annona muricata L.) ON THE GROWTH OF
Trichophyton rubrum IN VITRO

PROPOSAL PENELITIAN
Diajukan sebagai syarat untuk mengikuti ujian proposal penelitian pada
Program Studi Akademik Pendidikan Dokter

Oleh

TEDI MULYANA

115170068

FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS SWADAYA GUNUNG JATI

CIREBON

i
2018

ii
iii
PERNYATAAN KEASLIAN PENELITIAN

Yang bertanda tangan di bawah ini,

Nama : Tedi Mulyana

NPM : 115170068

Alamat : RT/RW 019/004 Desa Langut Kec. Lohbener Kab. Indramayu

Dengan ini menyatakan bahwa :

1. Karya tulis saya ini adalah penelitian lanjutan yang diajukan untuk
mendapatkan gelar akademik sarjana FK Unswagati.
2. Karya tulis ini adalah murni gagasan, rumusan, dan penelitian saya sendiri,
tanpa bantuan pihak lain, kecuali arahan Komisi Proposal dan Pembimbing.
3. Dalam karya tulis ini tidak terdapat karya atau pendapat yang telah ditulis atau
dipublikasikan orang lain kecuali secara tertulis dengan jelas dicantumkan
sebagai acuan dalam naskah dengan disebutkan nama pengarang dan
dicantumkan dalam Daftar Pustaka.
4. Pernyataan ini saya buat dengan sesungguhnya dan apabila di kemudian hari
terdapat penyimpangan dan ketidakbenaran dalam pernyataan ini, maka saya
bersedia menerima sanksi akademik berupa pencabutan gelar yang telah
diperoleh karena karya ini, serta sanksi lainnya sesuai dengan norma yang
berlaku di Unswagati.

Cirebon, Oktober 2018


Yang membuat menyatakan,

Tedi Mulyana

NPM. 115170068

iv
KATA PENGANTAR

Puji syukur saya panjatkan kehadirat Allah SWT, karena atas berkat dan
rahmat-Nya saya dapat menyelesaikan tugas proposal ini. Penulisan proposal ini
dilakukan untuk memenuhis salah satu syarat untuk kelulusan blok Academic
Writing di Fakultas Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati Cirebon. Saya
menyadari sangatlah sulit bagi saya untuk menyelesaikan proposal ini tanpa
bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak. Bersama ini saya sampaikan terima
kasih yang sebesar-besarnya serta penghargaan yang setinggi-tingginya kepada:

1. Dr. H. Mukarto Siswoyo, M.Si selaku Rektor Universitas Swadaya


Gunung Jati Cirebon atas kesempatan yang telah diberikan untuk menimba
ilmu di Universitas Swadaya Gunung Jati.
2. Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati Cirebon,
Catur Setiya Sulistiana, dr., MMedEd yang telah memberikan sarana dan
prasarana kepada kami sehingga saya dapat menyelesaikan tugas ini
dengan baik dan lancar.
3. Dadan Ramadhan A, S.Si., M.Biomed selaku dosen pembimbing pertama
yang telah menyediakan waktu, tenaga dan pikiran untuk membimbing
saya dalam penyusunan proposal penelitian ini.
4. Mohamad Luthfi, dr.,Sp.PD selaku dosen pembimbing kedua yang telah
menyediakan waktu, tenaga dan pikiran untuk membimbing saya dalam
penyusunan proposal penelitian ini.
5. Orang tua tercinta yang senantiasa memberikan dukungan moral maupun
material. Terimakasih atas semua doa-doanya, perhatian, kasih sayang
yang senantiasa diberikan kepada saya.
6. Para sahabat yang selalu memberi dukungan dalam menyelesaikan
proposal ini.
7. Legacy 2015 yang selalu memberi dukungan dalam menyelesaikan
proposal penelitian ini.

v
8. Serta pihak lain yang tidak mungkin disebutkan satu-persatu atas
bantuannya secara langsung sehingga proposal penelitian ini dapat
terselesaikan dengan baik.

Akhir kata, saya berharap Allah SWT berkenan membalas kebaikan semua
pihak yang telah membantu. Semoga proposal ini dapat bermanfaat bagi kita
semua.

Cirebon, Oktober 2018

Penulis

vi
DAFTAR ISI

COVER DALAM
....................................................................................................................................
i

LEMBAR PENGESAHAN PROPOSAL PENELITIAN


....................................................................................................................................
ii

PERNYATAAN KEASLIAN PENELITIAN


....................................................................................................................................
iii

KATA PENGANTAR
....................................................................................................................................
iv

DAFTAR ISI
....................................................................................................................................
vi

DAFTAR TABEL
....................................................................................................................................
x

DAFTAR GAMBAR
....................................................................................................................................
xi

DAFTAR SINGKATAN
....................................................................................................................................
xii

BAB I
....................................................................................................................................
1

PENDAHULUAN
....................................................................................................................................
1

1.1 Latar Belakang


1

vii
1.2 Rumusan Masalah
2

1.3 Tujuan Penelitian


2

1.3.1 Tujuan Umum


.............................................................................................................................
2

1.3.2 Tujuan Khusus


.............................................................................................................................
3

1.4 Manfaat Penelitian


3

1.4.1 Manfaat untuk Ilmu Pengetahuan


.............................................................................................................................
3

1.4.2 Manfaat untuk Pelayanan Kesehatan


.............................................................................................................................
3

1.4.3 Manfaat untuk Masyarakat


.............................................................................................................................
3

1.5 Orisinalitas Penelitian yang Terkait


4

BAB II
....................................................................................................................................
5

LANDASAN TEORI
....................................................................................................................................
5

2.1 Landasan Teori


5

2.1.1 Dermatofitosis

viii
.............................................................................................................................
5

2.1.2 Jamur Penyebab Dermatofitosis


.............................................................................................................................
5

2.1.3 Epidemiologi
.............................................................................................................................
5

2.2 Trichophyton rubrum


5
2.2.1 Taksonomi..................................................................................................5

2.2.2 Morfologi Trichophyton rubrum ...............................................................6

2.2.3 Habitat........................................................................................................6

2.2.4 Pathogenesis Trichophyton rubrum Dalam Dermatofitosis.......................7

2.3 Daun sirsak (Annona muricata L.)


7
2.3.1 Taksonomi.................................................................................................8

2.3.2 Morfologi...................................................................................................8

2.3.3 Kandungan Daun Sirsak (Annona muricata L.)........................................9

2.4 Mikonazol
9

2.4.1 Definisi
9

2.4.2 Aktivitas Anti Jamur


9

2.4.3 Efek Samping


10

2.4.4 Sediaan
10
2.5 Kerangka Teori.....................................................................................................11

ix
2.6 Kerangka Konsep.................................................................................................11

2.7 Hipotesis...............................................................................................................12

BAB III
....................................................................................................................................
13

METODE PENELITIAN
....................................................................................................................................
13

3.1 Ruang Lingkup Penelitian


13

3.2 Tempat dan Waktu Penelitian


13

3.3 Jenis dan Rancangan Penelitian dan Rancangan Penelitian


15

3.4 Populasi dan Sampel


13

3.4.1 Populasi
.............................................................................................................................
13

3.4.2 Sampel
.............................................................................................................................
14

3.4.2.1 Kriteria Inklusi


......................................................................................................................
14

3.4.3.2 Kriteria Eksklusi


......................................................................................................................
14

3.4.4 Cara Sampling


.............................................................................................................................
14

3.4.5 Perhitungan Besar Sampel

x
.............................................................................................................................
14

3.5 Variabel Penelitian


15

3.5.1 Variabel Independen


.............................................................................................................................
15

3.5.2 Variabel Dependen


.............................................................................................................................
15

3.6 Definisi Operasional


15

3.7 Cara Pengumpulan Data


16

3.7.1 Alat dan Bahan


18

3.7.2 Sterilisasi Alat


16

3.7.3 Pembuatan Media Sabouraud Dextrose Agar


16

3.7.4 Pembuatan Suspensi MC Farland 0,5


16

3.7.5 Persiapan Suspensi Jamur


17

3.7.6 Pembuatan Sampel


17

3.7.7 Pengenceran Ekstrak


18

3.7.8 Pengujian Anti Fungi


19

xi
3.8 Alur Penelitian
20

3.9 Analisis Data


20

3.10 Etika Penelitian


21

3.11 Tabel Hasil Penelitian


21

3.12 Jadwal Penelitian


22
DAFTAR PUSTAKA...............................................................................................23

xii
DAFTAR TABEL
Tabel 1.1 Orisinalitas Penelitian
....................................................................................................................................
4
Tabel 3.1 Definisi Oprasional
....................................................................................................................................
15
Tabel 3.2 Tabel Hasil Penelitian
....................................................................................................................................
21
Tabel 3.2 Jadwal Penelitian
....................................................................................................................................
22

xiii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Trichophyton rubrum
....................................................................................................................................
6
Gambar 2.2 Daun Sirsak (Annona muricata L.)
....................................................................................................................................
7

xiv
DAFTAR SINGKATAN

DMSO : Dimetil Sulfoksida


FK : Fakultas Kedokteran
SDA : Sabouraud Dextrose Agar
UNSWAGATI : Universitas Swadaya Gunung Jati

xv
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Trichophyton rubrum merupakan jamur dermatofita. Dermatofita
dibedakan menjadi tiga menurut habitat primer, yaitu antropofilik, zoofilik,
dan geofilik. Trichophyton rubrum termasuk dalam kategori jamur
antropofilik dan yang tersering menyebabkan penyakit kronis. Invasi jamur
Trichophyton rubrum dapat menimbulkan kelainan pada kulit, rambut, dan
kuku. Jamur Trichophyton rubrum termasuk golongan jamur antropofilik
yaitu jamur yang terutama menghinggapi manusia.(1)
Infeksi jamur Trichophyton rubrum pada kulit merupakan penyakit
yang banyak ditemukan di Indonesia, karena Indonesia termasuk negara
tropis beriklim panas dan lembab.(1) Salah satu infeksi jamur Trichophyton
rubrum yang sering terjadi adalah dermatofitosis. Dermatofitosis merupakan
penyakit pada jaringan tubuh yang mengandung zat tanduk, misalnya stratum
korneum pada epidermis, rambut, dan kuku, yang disebabkan oleh jamur

xvi
dermatofita dari famili Arthrodermataceae dengan lebih dari 40 spesies yang
dibagi dalam tiga genus yaitu Epidermophyton, Microsporum, dan
Trichophyton.(2)
Dermatofitosis memiliki insiden yang paling tinggi di antara
kelompok dermatomikosis superfisialis. Data Rumah Sakit Dr. Soetomo
tahun 2008 menunjukkan distribusi usia terbanyak, terjadi pada rentang usia
produktif. Urutan prevalensi kejadian dermatofitosis adalah tinea korporis
(57%), tinea unguinum (20%), tinea kruris (10%), tinea pedis dan tinea
barbae (6%), dan sebanyak 1% tipe lainnya.(3)
Penelitian yang dilakukan Bramono pada tahun 2008 di Cirebon Barat
menyebutkan bahwa spesies jamur terbanyak penyebab dermatofitosis ialah
Trichophyton rubrum dengan persentase sekitar 75%.(1) Tricophyton rubrum
sering menginfeksi bagian-bagian tubuh seperti dagu, janggut, bagian tubuh
yang tidak berambut, bokong, genitalia, area pubis, perineal, dan kuku pada
jari tangan maupun jari kaki.(4)
Perubahan epidemiologi infeksi oleh jamur Trichophyton rubrum
salah satunya disebabkan oleh menurunnya sensitifitas Trichophyton rubrum
terhadap agen antifungi. Oleh karena itu, diperlukan strategi lain dalam
pengobatan infeksi Trichophyton rubrum seperti penggunaan obat berbahan
alam yang efektif untuk menghambat infeksi Trichophyton rubrum.(5)
Salah satu tumbuhan yang telah lama dimanfaatkan sebagai obat
tradisional oleh masyarakat adalah tanaman sirsak (Annona muricata L.).
Kandungan yang terdapat pada daun sirsak yaitu mengandung alkaloid,
polifenol, terpena, dan flavonoid. flavonoid memiliki senyawa fenol yang
bersifat fungistatik atau anti jamur. (6)
Pada sebuah penelitian sebelumnya pada tahun 2015, menyatakan
bahwa aktivitas antimikosis ekstrak etanol daun sirsak pada konsentrasi 15%,
30%, dan 60% terhadap Candida albicans semua ekstrak etanol daun sirsak
menunjukkan aktivitas antimikosis dengan potensi variatif tergantung
konsentrasi.(7) Penelitian tahun 2016 menyatakan bahwa daun sirsak urutan
ketiga sebanyak 50 buah dari pucuk yang diekstraksi dengan metode maserasi

xvii
menggunakan pelarut etanol 96%. Hasil penelitian menunjukkan rata-rata
diameter zona hambat ekstrak terhadap pertumbuhan jamur Candida albicans
sebesar 12,5 mm.(5)
Penelitian tentang uji daya hambat ekstrak daun sirsak terhadap
Pertumbuhan Trichophyton rubrum belum diteliti lebih jauh. Hal ini menjadi
latar belakang perlunya dilakukan penelitian mengenai hal tersebut.
1.2 Rumusan Masalah
Bagaimana daya hambat ekstrak daun sirsak (Annona muricata L.) terhadap
pertumbuhan Trichophyton rubrum?
1.3 Tujuan
1.3.1 Tujuan Umum
Mengetahui daya hambat ekstrak daun sirsak (Annona muricata L.)
terhadap pertumbuhan Trichophyton rubrum.

1.3.2 Tujuan Khusus


1. Mengetahui zona hambat ekstrak daun sirsak (Annonna muricata
L.) terhadap pertumbuhan jamur Trichophyton rubrum.
2. Mengetahui konsentrasi ekstrak daun sirsak (Annonna muricata L.)
yang paling baik untuk menghambat pertumbuhan jamur
Trichophyton rubrum.
1.4 Manfaat Penelitian
1.4.1 Manfaat untuk ilmu pengetahuan
Hasil penelitian ini dapat menambahkan ilmu dan wawasan
dibidang kedokteran mengenai ekstrak daun sirsak mempunyai
daya hambat terhadap pertumbuhan jamur Trichophyton rubrum.
1.4.2 Manfaat untuk masyarakat
Menambah pengetahuan kepada masyarakat tentang manfaat dari
ekstrak daun sirsak.
1.4.3 Manfaat untuk pelayanan kesehatan

xviii
Hasil penelitian ini diharapkan dapat dilanjutkan dengan cara
invivo.

1.3 Orisinalitas Penelitian


No Penelitian (Tahun) Judul Metode Hasil
1 Masloman, Agista Pratiwi Anindita, Eksperimen Hasil penelitian
P (2016) Uji daya hambat ekstrak menunjukkan rata-
daun sirsak (Annona muricata L.) rata diameter zona
terhadap pertumbuhan Jamur hambat ekstrak
Candida albicans.(8) daun sirsak
(Annona murcata
L.) terhadap
pertumbuhan jamur
Candida albicans
sebesar 12,5 mm.

2 Maria Florensia, (2015) Aktivitas Eksperimen Daun sirsak


anti jamur infusa daun sirsak memiliki aktivitas
terhadap Candida albicans.(7) antijamur terhadap
Candida albicans
in vitro, terutama
infusa daun sirsak
100% berat/volum
memiliki aktivitas

xix
antijamur sama
dengan
ketokonazol 0,5 mg
/ mL.
3 Dina Mulyanti, dkk (2015) Uji Eksperimen Hasil uji aktivitas
aktivitas antibakteri ekstrak etanol antibakteri ekstrak
daun sirsak (Annona Muricata L.) etanol daun sirsak
pada bakteri propionibacterium menunjukkan
acne, staphylococcus aureus, dan aktivitas antibakteri
staphylococcus epidermidis.(6) yang lemah-sedang
terhadap
penghambatan
pertumbuhan
ketiga bakteri
tersebut, dengan
diameter zona
hambat 10-20,3
mm pada rentang
konsentrasi ekstrak
0,1-10%.

BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Dermatofitosis
2.1.1 Definisi Dermatofitosis
Dermatofitosis adalah penyakit yang disebabkan oleh kolonisasi
jamur dermatofit yang menyerang jaringan berkeratin seperti stratum
korneum kulit, rambut, dan kuku pada manusia. Dermatofit adalah
sekelompok jamur yang memiliki kemampuan membentuk molekul
yang berikatan dengan keratin dan menggunakannya sebagai sumber
nutrisi untuk membentuk kolonisasi.(9)
2.1.2 Jamur Penyebab Dermatofitosis
Terdapat tiga genus penyebab dermatofitosis, yaitu
Trichophyton, Microsporum, dan Epidermophyton, yang
dikelompokkan dalam kelas Deuteromycetes.(7) Pada penelitian yang
dilakukan di Surabaya pada tahun 2006–2007 ditemukan spesies

xx
terbanyak yang berhasil dikultur adalah M. audiouinii (14,6%), T.
rubrum (12,2%), T. mentagrophytes (7,3%).(7)
2.1.3 Epidemiologi
Usia, jenis kelamin, dan ras merupakan faktor epidemiologi
yang penting, di mana prevalensi infeksi dermatofit pada laki-laki
lima kali lebih banyak dari wanita. Jamur penyebab tinea kapitis
ditemukan pada sisir, topi, sarung bantal, mainan anak-anak atau
bahkan kursi di gedung teater.(6)
Perpindahan manusia dapat dengan cepat mempengaruhi
penyebaran endemik dari jamur. Pemakaian bahan-bahan material
yang sifatnya oklusif, adanya trauma, dan pemanasan dapat
meningkatkan temperatur dan kelembaban kulit meningkatkan
kejadian infeksi tinea.(10)
2.2 Trichophyton rubrum
2.2.1 Taksonomi (11)
Kingdom : Fungi
Filum : Ascomycota
Kelas : Euascomycetes
Ordo : Onygenales
Famili : Arthrodermataceae
Genus : Trichophyton
Spesies : Trichophyton rubrum

Gambar 2.1 Mikroskopis Tricophyton rubrum (5)

xxi
2.2.2 Morfologi Trichophyton rubrum
Secara mikroskopis, jamur Trichophyton rubrum membentuk
banyak mikrokonidia kecil, berdinding tipis, dan berbentuk lonjong.
Mikrokonidia terletak pada konidiofora yang pendek yang tersusun
satu persatu pada sisi hifa (en thyrse) atau berkelompok (en grappe).
Makrokonidia berbentuk seperti pensil dan terdiri atas beberapa sel.(12)
Beberapa strain dari Trichophyton rubrum secara mikroskopis
dapat dibedakan berupa tipe halus dan tipe granuler. Tipe halus
dicirikan mikrokonidia clavate yang tipis dalam jumlah kecil hingga
sedang dan tidak memiliki makrokonidia. Sedangkan tipe granuler
dicirikan adanya jumlah sedang hingga banyak mikrokonidia
berbentuk clavate dan piriformis dan jumlah sedang hingga banyak
pada makrokonidia yang berbentuk seperti cerutu dan berdinding tipis.
(11)

2.2.3 Habitat
Trichophyton rubrum merupakan jamur dermatofita.
Dermatofita dibedakan menjadi tiga menurut habitat primer, yaitu
antropofilik, zoofilik, dan geofilik. Trichophyton rubrum termasuk
dalam kategori jamur antropofilik dan yang tersering menyebabkan
penyakit kronis.(7)
2.2.4 Patogenesis Trichophyton rubrum dalam Dermatofitosis
Invasi jamur Trichophyton rubrum dapat menimbulkan kelainan
pada kulit, rambut, dan kuku. Jamur Trichophyton rubrum termasuk
golongan jamur antropofilik yaitu jamur yang terutama menghinggapi
manusia.(12)
Trichophyton rubrum dapat hidup dan berkembang pada lapisan
epidermis dengan enzim keratinase, protease dan katalase. Selain itu,
jamur patogen ini juga memproduksi enzim hidrolitik, yaitu fosfatase,
super oksid dismutase, asam lemak jenuh dan lipase. Trichophyton
rubrum setelah menginvasi sel keratin, menerobos ke dalam epidermis

xxii
dan selanjutnya akan menimbulkan reaksi peradangan atau inflamasi.
(12)

Reaksi peradangan tersebut timbul akibat Trichophyton rubrum


serta bahan yang dihasilkan berada di daerah kutan, yaitu dari lapisan
kulit yang meliputi stratum korneum hingga stratum basale. (14)
2.3 Daun Sirsak ( Annona muricata L .)

Gambar 2.2 Daun Sirsak (Annona Muricata L.)(13)

2.3.1 Taksonomi (13)


Kingdom : Plantae
Subkingdom : Tracheobionta
Super Divisi : Spermatophyta
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Sub Kelas : Magnoliidae
Ordo : Magnoliales
Famili : Annonaceae
Genus : Annona
Spesies : Annona muricata L
2.3.2 Morfologi
Daun sirsak berbentuk bulat panjang dengan ujung lancip
dan pendek. Daun tuanya berwarna hijau tua dan mudanya
berwarna hijau kekuningan. Daun sirsak tebal dan sedikit kaku
dengan urat daun menyirip atau tegak pada urat daun utama.(13)

xxiii
Daun sirsak (Annona muricata L.) termasuk tanaman yang
dapat tumbuh dan berubah sepanjang tahun apabila air tanah
mencukupi selama pertumbuhannya. Menurut beberapa literature,
tanaman sirsak berasal dari Amerika Tengah. Di Indonesia,
tanaman sirsak menyebar dan tumbuh baik mulai dari dataran
rendah beriklim kering sampai daerah basah dengan ketinggian
1.000 meter dari permukaan laut. Penyebaran hampir merata
dibuktikan dengan adanya nama-nama daerah yang berbeda-beda
untuk tanaman sirsak. Tanaman ini memiliki batang utama yang
kecil dan pendek. daunnya berbentuk bulat telur agak tebal dan
pada permukaan bagian atas yang halus berwarna hijau tua
sedangkan pada bagian bawah daun warnanya lebih muda.(13)
2.3.3 Kandungan Daun Sirsak (Annona muricata L.)
Kandungan yang terdapat pada daun sirsak yaitu
mengandung alkaloid, polifenol, terpen, tannin, saponin dan
flavonoid. Flavanoid memiliki senyawa fenol yang bersifat
fungistatik atau anti jamur.(5) Senyawa yang bekerja sebagai
antijamur adalah tanin, saponin dan flavonoid. Mekanisme kerja
tanin menciutkan dan mengendapkan protein dari larutan dengan
membentuk senyawa yang tidak larut, tanin berperan dalam sistem
pertahanan tubuh dan mempunyai aktivitas antioksidan. Saponin
bersifat surfaktan yang berbetuk polar sehingga akan memecahkan
lemak pada membran sel yang pada akhirnya menyebabkan
gangguan permeabilitas membran sel. Hal tersebut mengakibatkan
proses difusi bahan atau zat-zat yang diperlukan oleh jamur dapat
terganggu, akibatnya sel jamur dapat membengkak dan bahkan
pecah. Mekanisme kerja flavonoid yaitu mengganggu proses difusi
makanan ke dalam sel sehingga pertumbuhan jamur terhenti atau
jamur tersebut mati.(5)
2.4 Mikonazol 2%
2.4.1 Definisi

xxiv
Mikonazol merupakan turunan imidazol sintetik yang
relatif stabil, mempunyai sprektrum anti jamur yang lebar terhadap
jamur dermatofit. Obat ini berbentuk kristal putih, tidak berwarna
dan tidak berbau, sebagian kecil larut dalam air tapi lebih larut
dalam pelarut organik.(14)
2.4.2 Aktivitas Antijamur
Mikonazol menghambat aktivitas jamur Trichophyton,
Epidermaphyton, Microsporum, Candida albican, dan Malassezia
furfur. Mikonazole invitro efektif terhdap beberapa bakteri gram
positif.(31) Mekanisme kerja obat ini belum diketahui sepenuhnya.
Mikonazole masuk kedalam sel jamur dan menyebabkan kerusakan
dinding sel sehingga permeabilitas terhadap berbagai zat intrasel
meningkat. Mungkin pula terjadi gangguan sintesis asam nukleat
atau penimbunan peroksida dalam sel jamur yang akan
menyebabkan kerusakan. Obat yang sudah menembus ke dalam
lapisan tanduk kulit akan menetap disana sampai 4 hari.(14)
Obat ini terutama digunakan sebagai pengobatan topikal
untuk mikosis kulit. Mikonazol nitrat dapat digunakan sebagai
agen antijamur sistemik bila amfoterisin B atau ketokonazol atau
kontra indikasi.(1,14) Mikonazol topikal di indikasikan untuk
dermatofitosis, tinea versicolor, dan candidiasis mukokutan.(15)
2.4.3 Efek Samping
Efek samping berupa iritasi, rasa terbakar, dermatitis
kontak dan maserasi memerlukan penghentian terapi. Sejumlah
kecil Mikonazol diserap melalui mukosa vagina tapi belum ada
laporan tentang efek samping pada bayi yang ibunya mendapat
Miconazole intravaginal pada waktu hamil, tetapi penggunaanya
pada kehamilan trimester pertama sebaiknya dihindari.(14)
2.4.4 Sediaan
Obat ini tersedia dalam bentuk krim 2% dan bedak tabur
yang dipakai 2x sehari selama 2 - 4 minggu. Krim 2 % untuk

xxv
penggunaan intravaginal diberikan 1x sehari pada malam hari
selama 7 hari. Gel 2 % tersedia untuk kandidiasis oral. Miconazole
tidak boleh dibubuhkan pada mata.(14)

2.1 Kerangka Teori

Daun Sirsak

Ekstrak etanol daun sirsak

Tanin Flavonoid Saphonin

merusak permeabilitas Bersifat surfaktan yang


menciutkan dan mengendapkan membran sel mikroba berbentuk polar sehingga
protein dari mikroba dengan sehingga difusi makanan akan memecahkan lemak
membentuk senyawa yang tidak terganggu pada membran sel mikroba
larut mikroba

xxvi
Menghambat pertumbuhan
Trichophyton rubrum

2.6 Kerangka Konsep

daun sirsak Menghambat Pertumbuhan


Ekstrak etanol Tanin, saphonin,
(Annona Trichophyton rubrum
daun sirsak dan flavonoid
muricata L.)

2.7 Hipotesis
Ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata L.) dapat menghambat
pertumbuhan Trichophyton rubrum.

xxvii
BAB III

METODE PENELITIAN

3.1 Ruang Lingkup Penelitian


Ruang lingkup penelitian ini mencakup bidang ilmu Farmakologi dan
Mikrobiologi.
3.2 Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas
Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati Cirebon pada bulan
Desember 2018 sampai Januari 2019.
3.3 Jenis Penelitian dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini adalah penelitian eksperimental laboratorium secara
In Vitro dengan rancangan penelitian Post-test Only Control Group
Design yang menggunakan jamur sebagai subjek penelitian. Penelitian ini
menggunakan 6 kelompok perlakuan. Kelompok perlakuan terdiri dari 4
kelompok perlakuan P(1), P(2), P(3), dan P(4) yaitu pemberian ekstrak
daun sirsak (Annona muricata L.) dengan konsentrasi bertingkat 200 ppm,
400 ppm, 600 ppm dan 800 ppm, Terdiri 2 kelompok kontrol yaitu
kontrol negatif (K(-)) dan kontrol positif (K(+)), kontrol negatif yaitu

xxviii
pemberian Dimethyl sulfoxide (DMSO) 10%, sedangkan kontrol positif
yaitu pemberian obat Mikonazol 2%. Kelompok perlakuan langsung
diberikan intervensi (perlakuan) kemudian secara bersama-sama dilakukan
post test. Dari hasil perlakuan akan terlihat perbedaan antara kelompok
perlakuan dengan kelompok kontrol. Ini menandakan bahwa terjadi
pengaruh dengan adanya perlakuan terhadap kelompok intervensi.
3.4 Populasi dan Sampel
3.4.1 Populasi
Populasi yang digunakan adalah jamur Trichophyton rubrum.

3.4.2 Sampel
Sampel penelitian ini adalah jamur Trichophyton rubrum dari
laboratorium mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Swadaya
Gunung Jati.
3.4.2.1 Kriteria Inklusi
Jamur Trichophyton rubrum dari laboratorium mikrobiologi
Fakultas Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati Cirebon.
3.4.2.2 Kriteria Eksklusi
Jamur Trichophyton rubrum yang terkontaminasi mikroorganisme
lain.
3.4.2.3 Cara Sampling
Cara sampling yang digunakan adalah pengambilan sampel
secara acak sederhana (Simpel Random Sampling). Teknik
pengambilan sampel secara acak sederhana ini menggunakan tabel
bilangan atau angka acak (random number).
3.4.2.4 Perhitungan Besar Sampel
Kelompok sampel dibagi menjadi 6 kelompok. Jumlah
pengulangan ditentukan dengan rumus Federer.(16) Bila dihitung
sebagai berikut:

xxix
(n-1) (t-1) ≥ 15
(n-1) (6-1) ≥ 15
5n-5 ≥ 15
5n ≥ 20
n≥4
n = Jumlah sampel
t = Jumlah kelompok
Jadi jumlah minimal sampel atau pengulangan tiap kelompok
adalah 4.

3.5 Variabel Penelitian


3.5.1 Variabel Independen
Ekstrak daun sirsak (Annona murcata L.) dengan konsentrasi 200 ppm,
400 ppm, 600 ppm, dan 800 ppm.
3.5.2 Variabel Dependen
Variabel dependen dalam penelitian ini adalah jamur Trichophyton
rubrum.
3.6 Definisi Operasional
Tabel 3.1. Definisi Operasional

No Nama variabel Definisi Alat ukur Satuan Skala


operasional ukur
1. Variabel bebas: Ekstrak daun Gelas ukur ppm Nominal
Ekstrak daun sirsak (Annona
sirsak ( Annona murcata L.) yang
murcata L .) telah dilakukan
ekstraksi dengan
cara maserasi
2. Variabel terikat: Biakan jamur Penggaris Milimeter Rasio
Jamur Trichophyton
Trichophyton rubrum dalam
rubrum media SDA lalu

xxx
diukur daya
hambat dengan
metode sumuran.

3.7 Cara Pengumpulan Data


3.7.1 Persiapan Alat dan Bahan
Alat
Alat yang dipakai pada penelitian ini yaitu : Tabung reaksi, rak
tabung reaksi, cawan petri, gelas ukur, pipet ukur, cakram, autoklaf,
oven (lemari pengering), inkubator, pipet steril, lampu spiritus, korek
api, ose, kertas tempelan, lidi kapas steril, penggaris, labu erlenmeyer,
mikropipet.
Bahan
Jamur yang digunakan dalam penelitian ini adalah jamur
Tricophyton rubrum yang diperoleh dari Laboratorium Mikrobiologi
Fakultas Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati dengan media
SDA (Sabouraud Dextrosa Agar). Bahan lainnya yang digunakan
penelitian ini yaitu Mikonazol 2%, media agar SDA, DMSO 10%,
Etanol 96%, Alkohol 70%, kertas pembungkus, kertas saring dan
aquadest.
3.7.2 Sterilisasi Alat
Sterilisasi dilakukan dengan menggunakan autoklaf yang
diatur dengan suhu 121°C dengan tekanan 1 atm selama 15-20 menit.
Jarum ose disterilisasi dengan api bunsen.
3.7.3 Pembuatan Media Sabouraud Dextrose Agar

xxxi
Bahan pembuatan agar terdiri dari: 40 gr Dextrosa, 10 gr
pepton, 20 gr agar dan 1000 cc aquadest. Semua bahan selanjutnya
dicampur menjadi satu dan dipanaskan hingga larut, kemudian
diangkat, selanjutnya disterilkan pada temperatur 110 ºC pada tekanan
1 atm selama 15-20 menit dalam autoclave. Untuk isolasi jamur
ditambahkan 250 mg chloramphenikol dalam media SDA pada suhu ±
50ºC.(17)
3.7.4 Pembuatan Suspensi McFarland 0,5
Sebanyak 0,5 ml larutan barium klorida 0,048 M (BaCl2 H2O
1,175%) dicampurkan dengan 9,5 ml larutan asam sulfat 0,18 M
(H2SO4 1% b/v) dalam labu takar dan dihomogenkan. Suspensi ini
digunakan sebagai larutan standar pembanding kekeruhan suspensi
jamur uji.(18)
3.7.5 Persiapan suspensi Jamur
a. Biakan Trichophyton rubrum diambil dengan menggunakan oshe
steril kemudian dimasukkan ke dalam larutan NaCl 0,9%, dikocok
dan diaduk sampai mencapai kekeruhan yang ekuivalen dengan 0,5
standar Mc Farland (konsentrasi jamur 1,5x108 CFU/mL).
b. Suspensi Trichophyton rubrum yang telah dikocok dan diaduk
segera diinokulasikan pada lempeng agar padat. Suspensi dikocok
dan diaduk sesaat sebelum tindakan inokulasi tiap cawan petri
untuk mencegah pengendapan pada suspensi.
c. Cawan petri yang telah diinokulasi oleh suspensi kemudian
diinkubasi dengan suhu kamar selama 4 hari. (19)
3.7.6 Pembuatan Sampel
Sebanyak 500 gram daun sirsak yang diambil dicuci
menggunakan air mengalir kemudian ditiriskan lalu dikeringkan
dengan cara diangin-anginkan selama tujuh hari. Daun sirsak yang
telah kering lalu diblender hingga berbentuk serbuk halus. Serbuk
tersebut ditimbang sampai seberat 100 gram. Proses maserasi sirsak
dilakukan dengan mencampur serbuk sirsak yang telah ditimbang

xxxii
dengan pelarut etanol 96% sebanyak 1 liter sampai serbuk terendam
lima hari sambil diaduk setiap harinya selama kurang lebih 15 menit
agar supaya daun sirsak dan etanol 96% homogen. Larutan tersebut
kemudian disaring dengan corong bucher kemudian diuapkan dari sisa
pelarutnya dengan evaporator pada suhu 40 oC. Setelah itu, larutan
diuapkan kembali menggunakan oven dengan suhu 40 oC untuk
mendapatkan ekstrak murni. Ekstrak murni daun sirsak yang didapat
berwarna hijau kehitaman dan kental. Setelah itu dituang ke dalam
botol steril kaca tertutup dan disimpan di lemari pendingin.(20)

3.7.7 Pengenceran Ekstrak


Penelitian ini menggunakan 6 kelompok perlakuan yang
terdiri dari 1 kelompok kontrol positif (miconazole 2%), 1 kelompok
kontrol negatif (DMSO 10%), 4 kelompok perlakuan (ekstrak daun
sirsak 200 ppm, 400 ppm, 600 ppm, dan 800 ppm), 5 kelompok
kontrol perlakuan (DMSO 10% dengan konsentrasi 0,8 mL, 0,6 mL,
0,4 mL, dan 0,2 mL). Pengenceran bertujuan untuk menghasilkan
beberapa konsentrasi yang akan digunakan dari konsentrasi ekstrak
daun sirsak (Annona murcata L.) yang mempunyai aktivitas antijamur
terhadap pertumbuhan jamur Trichophyton rubrum. Pengenceran
dibuat dalam konsentrasi 200 ppm, 400 ppm, 600 ppm, dan 800 ppm
yaitu sebagai berikut:
Berikut rumus pengenceran:

N1·V1 = N2·V2
Keterangan:
N1 = Normalitas sebelum pengenceran
V1 = Volume sebelum pengenceran
N2 = Normalitas setelah pengenceran
V2 = Volume setelah pengenceran

xxxiii
a. Perlakuan 1 konsentrasi ekstrak 200 ppm adalah 0,2 mL ekstrak
daun sirsak (Annona muricata L.) dicampur 0,8 mL DMSO 10%
sampai volume 1 mL.
b. Perlakuan 1 konsentrasi ekstrak 400 ppm adalah 0,4 mL ekstrak
daun sirsak (Annona muricata L.) dicampur 0,6 mL DMSO 10%
sampai volume 1 mL.
c. Perlakuan 2 konsentrasi ekstrak 600 ppm adalah 0,6 mL ekstrak
daun sirsak (Annona muricata L.) dicampur 0,4 mL DMSO 10%
sampai volume 1 mL.
d. Perlakuan 3 konsentrasi ekstrak 800 ppm adalah 0,8 mL ekstrak
daun sirsak (Annona muricata L.) dicampur 0,2 mL DMSO 10%
sampai volume 1 mL.
e. Kontrol negatif 1 ml DMSO 10%
f. Konsentrasi kontrol positif 1 mL adalah mikonazol 2%(19)
3.7.8 Pengujian Antifungi
Pengujian aktivitas antifungi dilakukan dengan metode difusi
agar dengan menggunakan sumuran diameter 6 mm. Metode sumuran
yaitu membuat lubang pada agar padat yang telah diinokulasi dengan
jamur. Jumlah dan letak lubang disesuaikan dengan tujuan penelitian,
kemudian lubang diinjeksikan dengan ekstrak yang akan diuji. Setelah
dilakukan inkubasi, pertumbuhan jamur diamati untuk melihat ada
tidaknya daerah hambatan di sekeliling lubang. Suspensi mikroba
sebanyak 0,2 ml dimasukkan ke dalam cawan petri. Kemudian
ditambahkan media nutrient agar (45 0C) sebanyak 20 ml, digoyang-
goyangkan dan dibiarkan memadat. Dengan bantuan perforator steril,
dibuat sumuran sebanyak 6 lubang. Selanjutnya, setiap sumuran diisi
dengan 1 ml ekstrak konsentrasi 200 ppm, 400 ppm, 600 ppm, 800
ppm, etanol 96% (kontrol negatif) dan larutan miconazol 2% (kontrol
positif). Pra-inkubasi dilakukan selama 30 menit pada suhu kamar,
selanjutnya diinkubasi pada suhu 37 0C selama 24 jam. Diameter
hambat pertumbuhan mikroba uji diukur. Diameter hambat adalah

xxxiv
suatu daerah di sekitar sumuran, dimana sama sekali tidak ditemukan
pertumbuhan jamur. Pengujian ini dilakukan dengan 4 kali
pengulangan.(17)
Diameter zona hambat dikategorikan berdasarkan kekuatan
daya antijamur.(19) Kriteria diameter yang diukur antara lain:
1) Diameter zona bening atau zona hambat > 20 mm atau lebih
berarti mempunyai daya hambat yang sangat kuat.
2) Diameter zona bening atau zona hambat 11-20 mm berarti
mempunyai daya hambat kuat.
3) Diameter zona bening atau zona hambat 5-10 mm berarti
mempunyai daya hambat sedang.
4) Diameter zona bening atau zona hambat 0-4 mm berarti
mempunyai daya hambat lemah.
3.8 Alur Penelitian

Jamur Trichophyton rubrum

Peremajaan jamur Trichophyton rubrum dengan media SDA dengan


standar Mc Farland dibuat sumuran

K(-) K(+) P2 P3 P4
Mikonazol P1
DMSO 10% 2% Ekstrak daun Ekstrak daun Ekstrak daun
Ekstrak daun
sirsak 400 sirsak 600 sirsak 800
sirsak 200 ppm
ppm ppm ppm

Diinkubasi dengan suhu 37°C selama 3 x 24jam

Penentuan daya hambat jamur Trichophyton rubrum

Analisis Data

xxxv
3.9 Analisis Data
Data hasil penelitian yang diperoleh, diolah datanya secara statistik
dengan menggunakan program komputer. Data diuji dengan uji normalitas
untuk melihat variasi data normal atau tidak. Uji normalitas yang digunakan
yaitu Shapiro – Wilk karena sampel yang digunakan kurang dari 50. Hasil
data yang didapatkan tidak normal maka ditransformasi data dilakukan
dengan menggunakan fungsi log, akar, kuadrat dan metode yang lainnya.
Transformasi berhasil menggunakan uji non-parametrik dengan Uji Kruskal-
Wallis dengan Uji Post hoc Mann- Whitney.(16)
3.10 Etika Penelitian
Penelitian ini menggunakan jamur Trichophyton rubrum sebagai
bahan uji coba. Penulis akan mengajukan ethical clearance kepada Komite
Etika Penelitian Fakultas Kedokteran Universitas Swadaya Gunung Jati
Cirebon.
3.11 Tabel Hasil Penelitian
Tabel 3.2 Hasil Penelitian

K1 K2 K3 K4 K5 K6
DMSO Mikonazo Ekstrak Ekstrak Ekstrak Ekstrak
10% l 2% daun sirsak daun sirsak daun sirsak daun sirsak
200 ppm 400 ppm 600 ppm 800 ppm
Perlakuan 1 Mm Mm mm mm mm mm
Perlakuan 2 Mm Mm mm mm mm mm
Perlakuan 3 Mm Mm mm mm mm mm
Perlakuan 4 Mm Mm mm mm mm mm

xxxvi
3.12 Jadwal Penelitian
Tabel 3.3 Jadwal Penelitian

Bulan

No Kegiatan Agus Sept Okt Nov Des Jan Feb Mar Apr
2018 2018 2018 2018 2018
2018 2018 2018 2018

1. Penyusunan
Proposal

2. Ujian Proposal

3. Persiapan Perijinan

4. Persiapan
Penelitian

5. Pelaksanaan
Penelitian

6. Analisis Data

7. Penyusunan Karya
Tulis Ilmiah

8. Pengesahan Karya
Tulis Ilmiah

9. Sidang Karya Tulis


Ilmiah

xxxvii
DAFTAR PUSTAKA
1. Djuanda A. penyakit Kulit Dan Kelamin.; 2007. Edisi kelima.
Jakarta:FKUI.
2. Indrawati I, Fakhrudin Sd. Isolasi Dan Identifikasi Jamur Patogen Pada
Air Sumur Dan Air Sungai di Pemukiman Warga Desa Karangwangi,
Cianjur, Jawa Barat. J Biodjati. 2016;1 (1):2
3. Rosita C, Kurniati. Etiopatogenesis Dermatofitosis (Etiopathogenesis of
Dermatophytoses ). 2008; 20 (3):2
4. Adiguna MS. Epidemiologi Dermatomikosis di Indonesia. Dalam: Budimulya
U, Kuswadji, Bramono K, Menaldi SL, Dwihastuti P, Widati S, editor.
Dermatomikosis Superfisialis. Edisi ketiga. Jakarta: Balai Penerbit FKUI;
2010. h. 1–6
5. Dewi SS, Aryadi T. Efektifitas Virgin Coconut Oil (Vco) Terhadap
Kandidiasis Secara Invitro. Prosiding Seminar Nasional UNIMUS. 2010;
623-640. 21
6. Rohadi D. Aktivitas Antimikosis Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona
muricata L.). Pharmaciana. 2016; 6 (1):102
7. Mulyanti, D., Rismawati, E., Maulana, I.T., Febriani, D. dan Dewi YN.
Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Anonna muricata
L.) pada Bakteri Propionibacterium acnes, Staphylococcus aureus , dan
Staphylococcus epidermis. Pros Seminar Nasional Peneliti dan PKM
Kesehatan. 2015;1(1):325-330.
8. Albicans C, Florensia M, Soeselo DA, Yolanda H. Antifungal Activity Of
Soursop Leaf Infusion Against. 2015;14(3);3

xxxviii
9. Damayanti A, Fitriana EA. Jurnal Bahan Alam Terbarukan. 2015. 4
(2);61-67
10. Roberts GD, Rippon JW. Medical Mycology: The Pathogenic Fungi and
the Pathogenic Actinomycetes. Mayo Clin Proc. 1988. 60 (26);531-537
11. Fitzpatrick TB. Color Atlas And Synopsis of Clinical Dermatology.; 2001.
Edisi 4. New York
12. Brooks GF, Carroll KC, Butel J, Morse SA, Mietzner T. Mikrobiologi
Kedokteran. 2013. Jakarta;EGC. Edisi 25
13. Gandahusada S, Illahude HD, Pribadi W. Parasitologi kedokteran. 2004.
Jakarta;EGC. Edisi 3
14. Wulandari F. Pemanfaatan Daun Sirsak Sebagai Obat Anti Kanker. J Nas
Ecopedon JNEP. 2016. 3 (1):2
15. Katzung BG, Masters SB, J.Trevor A. Farmakologi Dasar dan klinik.
2002. Jakarta;EGC. Edisi III, 693-694
16. Nenoff P, Krüger C, Schaller J, Ginter-Hanselmayer G, Schulte-Beerbühl
R, Tietz H-J. Mycology - an update Part 2: Dermatomycoses: Clinical
picture and diagnostics. JDDG J der Dtsch Dermatologischen
Gesellschaft. 2014. 90(10):702
17. Notoadmodjo. Metodologi Penelitian Kesehatan. 2010. Jakarta:RINEKA
CIPTA (55)
18. Naldi Y, Aisah IS. Perbandingan Efektivitas Lengkuas Merah ( Alpinia
purpurata K Schum ) dan Lengkuas Putih (Alpinia galanga) Terhadap
Pertumbuhan Jamur Candida albicans Secara In Vitro. 2015. 1 (3): 2-3
19. Fauzi M. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Cengkodok
(Melastoma malabathricum L.) Terhadap Shigella flexneri Secara in vitro
program studi pendidikan dokter. 2015. Bogor;ITB. 1-19.
20. Aulya, A. Isolasi Jamur Candida albicans dan Trichophyton rubrum serta
Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak dan Fraksi Beberapa Spon Laut Terhadap
Isolat. 2012.
21. Masloman AP, Anindita PS. Uji Daya Hambat Ekstrak Daun Sirsak (
Annona muricata L.) terhadap Pertumbuhan Jamur Candida albicans.

xxxix
PHARMACON Jurnal Ilmu Farmakologi – UNSRAT Vol 5 No 4 Novemb
2016 ISSN 2302 - 2493. 2016;5(4):61-68.

xl