LIVE OR LET DIE: THE CELL’S RESPONSE TO p53

Dibandingkan dengan jaringan normal banyak, sel-sel kanker sangat peka terhadap sinyal
apoptosis, dan
bertahan hanya karena mereka telah diakuisisi lesi - seperti kehilangan p53 - yang
mencegah atau menghambat
sel kematian. Kita sekarang mulai memahami mekanisme kompleks yang mengatur apakah
atau tidak sel mati dalam menanggapi p53 - wawasan yang pada akhirnya akan
memberikan kontribusi untuk pembangunan
strategi terapi untuk memperbaiki respon p53 apoptosis pada kanker.

Dihadapkan dengan mimpi buruk klinis dari kanker invasif

bahwa thwarts semua serangan terapi, sepertinya sulit untuk
membayangkan bahwa banyak sel tumor sendiri tertatih-tatih
di ambang penghancuran diri, bertahan hidup hanya dengan kebajikan
mutasi yang memungkinkan mereka untuk menghindari kematian banyak
sinyal yang mereka subjected.Yet, kami meningkatkan
pemahaman tentang evolusi molekuler kanker
sel telah mengungkapkan bahwa banyak perubahan yang membuat
sel ganas dan berbahaya, seperti onkogen-driven
proliferasi deregulasi dan invasi, sulit-kabel ke
sinyal yang mencegah pertumbuhan sel - dalam banyak kasus, dengan sinyal
apoptosis
1
Tampaknya bahwa kehidupan sel yang paling banyak.
mendapatkan karakteristik berpotensi ganas dengan cepat
dihentikan, hanya menyisakan sel-sel kanker langka baru jadi di
yang cacat pada respon apoptosis memungkinkan untuk bertahan hidup
dan ganas perkembangan lebih lanjut. Hasil akhirnya adalah bahwa
hampir semua sel kanker sangat peka terhadap apoptosis,
dan perbaikan lesi yang mencegah pelaksanaan respon apoptosis mungkin
menyebabkan kematian
khususnya di sel tumor, hemat sel normal yang
tidak membawa seperti burden.Components apoptosis tinggi
jalur sel-kematian yang diubah selama tumor
Oleh karena itu sasaran pengembangan yang sangat baik untuk obat
desain, dengan harapan bahwa terapi tersebut akan
menunjukkan toksisitas jauh lebih rendah di jaringan normal dibandingkan
dengan genotoksik agen konvensional yang saat ini
dalam penggunaan klinis. Ini pelebaran jendela terapeutik
harus memungkinkan untuk pengembangan lebih efektif,
lebih baik ditoleransi dan pilihan pengobatan yang lebih aman.
Dalam rangka mengejar jalur apoptosis untuk tumor
terapi, itu jelas penting untuk memahami bagaimana
sel-sel tumor menjadi resisten terhadap apoptosis.Tumourassociated gangguan
dalam komponen kedua
yang mitokondria dan kematian-reseptor-mediated
jalur apoptosis telah diidentifikasi
2
, Diperdebatkan.
Namun, lesi anti-apoptosis yang paling umum
yang terdeteksi pada kanker adalah inaktivasi dari
p53 jalur-supresor tumor. Jadi, bagaimana p53
berkontribusi pada kematian sel aktivasi, apa yang menentukan apakah induksi p53
akan memicu apoptosis dan bagaimana mungkin pengetahuan ini digunakan untuk
mengembangkan
terapi kanker?
p53 fungsi
Penindas tumor p53 milik keluarga kecil
protein terkait yang mencakup dua anggota lainnya -
p63 dan p73 (lihat artikel review oleh al.on et Melino
halaman 605 dari masalah ini). Meskipun secara struktural dan fungsional yang
terkait, p63 dan p73 memiliki peran yang jelas dalam normal
pengembangan
3
, Sedangkan p53 tampaknya telah berkembang di
organisme tingkat tinggi untuk mencegah perkembangan tumor.p53
diaktifkan sebagai respons terhadap sinyal stres beberapa keganasan terkait,
sehingga penghambatan
pertumbuhan sel tumor
4
(Gambar 1). Beberapa tanggapan dapat
diprovokasi oleh p53, termasuk penangkapan sel-siklus, penuaan,
diferensiasi dan apoptosis, dengan opsi yang dipilih
yang tergantung pada banyak faktor yang baik intrinsik dan ekstrinsik ke sel (lihat di
bawah). Dalam beberapa
keadaan, p53 juga berkontribusi terhadap perbaikan
kerusakan genotoksik, berpotensi memungkinkan untuk melepaskan
sel direhabilitasi kembali ke kolam berkembang biak.
Dalam kebanyakan kasus, bagaimanapun, induksi p53 mengarah ke
penghambatan ireversibel pertumbuhan sel, yang paling tegas oleh
mengaktifkan apoptosis.

Gambar 1 | Jawaban p53. p53 menengahi respon terhadap

stres berbagai sinyal, banyak yang ditemui selama
pembangunan dan perkembangan tumor ganas. Secara umum,
sinyal-sinyal ini menyebabkan p53 oleh menstabilkan protein p53,yang
mengarah ke peningkatan kadar p53 selular. Beberapa selular
tanggapan untuk aktivasi p53 telah dijelaskan, dan
pilihan respon tergantung pada faktor-faktor seperti jenis sel, sel
onkogenik lingkungan dan perubahan lainnya yang berkelanjutan
oleh sel. Secara umum, bagaimanapun, efek aktivasi p53 adalah
menghambat pertumbuhan sel, baik melalui penangkapansel-siklus atau induksi
apoptosis, sehingga mencegah perkembangan tumor.
Mekanisme kerugian p53 pada kanker

Mutasi dari p53. p53 berfungsi dalam kanker bisa hilang oleh
berbagai mekanisme, termasuk lesi yang mencegah
aktivasi p53, mutasi dalam gen TP53
(yang mengkode p53) sendiri atau mutasi dari hilir
mediator fungsi p53 (Gambar 2). Analisis banyak
tumor telah menunjukkan bahwa TP53 bermutasi sekitar setengah

dari semua kanker, mengakibatkan hilangnya fungsi apoptosis.

Dari data yang tersedia, akan terlihat bahwa hanya 5% dari
TP53mutations ditemukan dalam domain peraturan
(Terminus amino, asam amino 1-99; terminal karboksil, asam amino 301-393), sedangkan
95% dari mutasi terjadi di wilayah pusat TP53, yang
bertanggung jawab untuk urutan DNA spesifik mengikat (amino
asam 100-300) (Gambar 3). Namun, sebagian besar informasi ini diperoleh dari analisis
urutan yang mencakup
hanya ekson 5-8 dalam gen TP53, dan pemeriksaan
dari seluruh p53 pengkodean urutan mulai mengungkapkan
peningkatan jumlah mutasi p53 di amino
dan karboksil Termini protein. Ada kemungkinan bahwa
kejadian mutasi berlaku untuk p53 pada kanker sebenarnya jauh lebih tinggi dari perkiraan
saat ini
~ 50% - studi baru-baru ini memang, bahwa sorot
pentingnya mutasi di luar inti pusat
5,6
menunjukkan bahwa kami mencari mutasi penting
dalam lokus TP53 pada tumor masih jauh dari selesai.
Tumor mutasi terkait di TP53 didominasi mutasi titik (93,6%) yang mengakibatkan tunggal
asam amino substitusi - spektrum mutasi yang
sangat berbeda dari yang terlihat dalam gen-supresor tumor lainnya, di mana besar
penghapusan atau frameshift
mutasi cenderung mengakibatkan hilangnya protein lengkap
ekspresi. Selanjutnya, kodon TP53 tertentu menunjukkan
tiba-tiba mutasi frekuensi tinggi, dengan 28% dari
mempengaruhi mutasi hanya enam residu - 175, 245, 248,
249, 273 dan 282 - dari p53 (TABEL 1). Hasil
inaktivasi mutasi TP53 oleh satu-asam amino-
substitusi adalah bahwa banyak sel-sel tumor mempertahankan kemampuan
untuk mengekspresikan mutan protein p53. Protein ini
sering lebih stabil dari p53 wild type, dan hadir di
tingkat yang sangat tinggi dalam penjelasan cell.One tumor untuk
pemilihan mutasi tersebut adalah bahwa mutan p53
protein dapat bertindak sebagai inhibitor dari DOMINAN-NEGATIF
wild type p53, yang berfungsi sebagai sebuah tetramer
7,8
The.
pengamatan bahwa banyak tumor bahwa pelabuhan TP53
mutasi titik juga menunjukkan hilangnya heterozigositas -
efektif menghilangkan alel wild type
9
- Menunjukkan
bahwa efisiensi inhibisi dominan-negatif
mungkin tidak lengkap, dan hampir pasti tergantung pada
sifat mutation.However titik awal, parsial
inaktivasi fungsi p53 wild type oleh p53 mutan
mungkin memungkinkan untuk beberapa keunggulan selektif selama tumor
kemajuan, dan tikus yang heterozigot untuk titik TP53 dominan-negatif mutan tumor
dikembangkan
tanpa kehilangan alel wild type TP53
10
.
Selain inaktivasi dominan-negatif
dari p53 wild type, ada bukti bahwa beberapa
tumor terkait protein p53 mutan mendapatkan baru
mengubah fungsi yang berkontribusi terhadap tumor
pengembangan
11
Meskipun tidak semua mutan p53 show.
kegiatan ini - misalnya, ekspresi
potently mengubah A135V TP53 alel mutan di
p53-null tikus itu tidak berpengaruh pada perkembangan tumor
12
mutan p53-lain dapat menghambat apoptosis secara independen dari p53 (Ref.
13). Mekanisme yang mendasari
mendapatkan fungsi dari beberapa mutan p53 tidak jelas, tetapi
mungkin mencerminkan kemampuan mutan ini untuk berinteraksi
dengan dan menghambat kegiatan keluarga-p53 lainnya
Gambar 2 | Kehilangan aktivitas p53 pada kanker. Pada selnormal,
sinyal stres mengakibatkan penghambatan MDM2 - salah satu
regulator utama stabilitas dan aktivitas p53 - memungkinkan
aktivasi fungsi penekan tumor dari p53. The
kemampuan untuk menginduksi respon p53 hilang di hampirsemua kanker
sel: oleh cacat pada jalur yang mencegah downregulation
dari p53 oleh MDM2 (misalnya, dengan hilangnya ARF atauCHK2); oleh
inaktivasi mutasi p53 itu sendiri, atau oleh gangguan dari
sel-pertumbuhan-penghambatan jalur yang menengahi p53
respon (misalnya, dengan hilangnya komponen
kaskade apoptosis, seperti caspase-9 atau apoptosis protease

anggota, p63 dan p73 (ref 14-17). Interaksi ini -

yang tidak terlihat antara p53 wild type dan p63/p73
- diatur lebih lanjut oleh polimorfisme umum
TP53 pada kodon 72, yang mempengaruhi apakah
protein p53 mutan dapat mengikat dan menonaktifkan p73 (Ref.18).
Apakah p53 mutan juga memiliki keuntungan benar fungsi yang
tidak tergantung pada efek dominan-negatif pada p53-
anggota keluarga masih belum jelas.
Mutasi dari regulator atau sasaran p53. Tumor yang
mempertahankan p53 wild type sering pelabuhan cacat baik di
jalur yang memungkinkan untuk stabilisasi p53 di
respon terhadap stres, atau dalam efektor dari apoptosis
kegiatan p53 (Ref. 19; Gambar 2.). Dua terkait protein -
MDM2 dan MDMX (MDM4) - memiliki peran penting dalam
mengatur aktivitas p53 untuk memungkinkan pertumbuhan normaldan
pengembangan
20-22
MDM2, yang berpartisipasi dalam.
loop autoregulatory dengan p53 (BOX 1), telah terbukti
berfungsi sebagai ligase aUBIQUITIN yang p53 target untuk degradasi. Aktivasi dan
stabilisasi p53 umumnya terkait dengan penghambatan fungsi ini
MDM2, dan cacat pada jalur yang mengekang MDM2
Kegiatan yang umum pada tumor yang mempertahankan wild type
p53. Menariknya, stres berbeda menggunakan sinyal yang berbeda
jalur untuk memungkinkan p53 melarikan diri degradasi protein MDM2-mediated
23
, Dan cacat pada salah satu dari mereka mungkin tidak
cukup untuk mencegah induksi p53 melalui
lain. Ini redundansi dalam kemampuan untuk mengaktifkan p53
berpotensi menjelaskan pengamatan agak kontra-intuitif yang TP53mutations sering
ditemukan pada tumor
pada tahap yang agak terlambat dalam pembangunan ganas, panjang
setelah akuisisi banyak perubahan yang sangat onkogenik menginduksi respon p53 pada
model eksperimental.Pemeriksaan dekat karsinogenik
kemajuan dalam kanker usus besar, misalnya, telah menunjukkan
bahwa hilangnya ARF (juga dikenal sebagai p14ARF pada manusia) -
sebuah protein kecil yang menghambat MDM2 dan memediasi
induksi p53 dalam menanggapi hilangnya APC (coli poliposis adenomatosa) dan deregulasi
perkembangbiakan ofWNTdriven - terjadi pada tahap awal tumor
pembangunan, bersamaan dengan hilangnya APC
24
.
Walaupun ini tampaknya cukup untuk memungkinkan awal
langkah-langkah dalam perkembangan tumor untuk mengambil tempat, menekankan
bahwa
terjadi kemudian dalam perkembangan ganas, seperti yang
menemani invasi dan metastasis, mungkin sinyal p53
aktivasi dengan cara pathways.At ARF-independent
langkah ini, oleh karena itu, kelangsungan hidup tumor tergantung pada
akuisisi lesi alternatif yang menginaktivasi p53,
termasuk mutasi TP53 itu sendiri. Yang mendasari
Keuntungan sistem dua-hit tidak jelas: mengapa tidak
hanya bermutasi TP53 dalam langkah-langkah awal premaligna
pembangunan? Jawabannya mungkin terletak di menggiurkan,
tapi kurang dipahami, pengamatan bahwa kehilangan p53 bisa
menghambat tahap awal perkembangan tumor, dan
tikus yang kekurangan p53 mengembangkan papillomas jauh lebih sedikit di
respon terhadap paparan karsinogen
25
Saran sesat yang p53 mungkin baik meningkatkan dan menghambat ganas.
progresi konsisten dengan sinyal dual pertumbuhan
dan kematian, seperti yang diusulkan oleh Gerard Evan
26
, Yang telah
menjadi berlaku umum untuk onkogen proliferasi. Konsep pleiotropy mungkin antagonis
berlaku untuk p53, seperti halnya untuk onkogen seperti MYC
27
,
dengan KAWAT pertumbuhan-penekan dan (yang belum
untuk ditemukan) pertumbuhan atau kelangsungan hidup-mempromosikan kegiatan
p53. Memang, fungsi kelangsungan hidup tingkat rendah
p53 telah digambarkan
28
yang dapat mencerminkan induksi
gen anti-apoptosis seperti TNF-terkait apoptosis-inducing ligand (TRAIL) reseptor umpan
(TRUNDD)
29
atau pertumbuhan epidermal heparin mengikat
factor (HB-EGF)
30
Selain itu, induksi p53-dimediasi CDKN1A (yang mengkode WAF1, juga dikenal sebagai.
p21 dan CIP1) juga dapat menghambat apoptosis
31
, Dan ini
fungsi p53 mungkin benar-benar melindungi sel-sel dari kematian
selama tahap awal perkembangan tumor.
Meskipun peran mungkin samar-samar dari p53 di
tumorigenesis awal, tampak jelas bahwa, pada presentasi,
kanker yang paling telah kehilangan fungsi p53 oleh satu mekanisme

Ringkasan
p53 • adalah protein tumor-supresor yang menginduksi kematian sel apoptosis dalam
menanggapi
perkembangan stress.Malignant onkogenik tergantung pada hilangnya fungsi p53, baik
melalui mutasi pada gen TP53 (yang mengkode p53) sendiri atau oleh cacat pada
isyarat jalur yang hulu atau hilir p53.
• Mutasi di TP53 terjadi pada sekitar setengah dari seluruh kanker manusia, hampir selalu
menghasilkan
ekspresi protein p53 mutan yang telah mengakuisisi mengubah aktivitas.
p53-induced apoptosis • tergantung pada kemampuan p53 untuk mengaktifkan ekspresi
gen,
meskipun kegiatan transcriptionally independen dari p53 juga dapat berkontribusi terhadap
apoptosis respon.
• Para apoptosis dan kegiatan menangkap sel-siklus p53 dapat dipisahkan, dan apoptosis
kofaktor yang memainkan peran tertentu dalam membiarkan p53-kematian disebabkan
sedang diidentifikasi.
• Peraturan fungsi apoptosis p53 dikaitkan dengan aktivasi selektif
apoptosis target genes.Cofactors yang secara khusus memberikan kontribusi p53-mediated
aktivasi gen target apoptosis termasuk JMY, ASPP dan keluarga p53-lain
anggota p63 dan p73.
Fosforilasi • dari p53 mengatur kemampuannya untuk mengaktifkan ekspresi apoptosis
target gen, dan modifikasi pasca-translasi lainnya seperti asetilasi mungkin juga
berperan.
• Pada tumor yang mempertahankan p53 wild type, respon apoptosis mungkin terhalang
oleh
cacat pada kofaktor apoptosis. Ini, oleh karena itu, merupakan target tambahan untuk
desain terapi yang bertujuan mengaktifkan kembali p53-mediated apoptosis dalam
sel kanker.

atau lainnya, dan bahwa ini kehilangan p53 diperlukan untukmemungkinkan

lanjutan pertumbuhan dan kelangsungan hidup sel tumor.
Tumor terapi yang didasarkan pada pengaktifan p53
DIFERENSIAL DISPLAY Oleh karena itu merupakan tujuan yang
menarik, dan mungkin dapat dicapai

dengan cara mengaktifkan kembali p53 mutan, memperkenalkan eksogen

tipe liar atau mengaktifkan p53 p53 endogen pada mereka
tumor yang mempertahankan p53 wild type. Selanjutnya, mengumpulkan bukti bahwa
aktivitas apoptosis p53 adalah
diatur secara terpisah dari fungsi-fungsi lainnya menunjukkan
bahwa mungkin untuk selektif menginduksi p53-
mediated apoptosis untuk terapi kanker.
Apoptosis kegiatan p53
p53 merupakan faktor transkripsi yang langsung mengaktifkan
ekspresi gen yang mengandung situs p53-mengikat
dalam peraturan legiun regions.A mereka gen p53-responsif telah diidentifikasi dengan
berbagai cara,
termasuk DIFFERENSIAL DISPLAY, SAGE dan microarray
32-35
Dalam.
bioinformatic pencarian dari genom manusia yang ada
urutan, lebih dari 4.000 situs p53-mengikat diduga adalah
diidentifikasi
36
Apakah semua ini akan terbukti bona.
gen target fide dari p53 tidak diketahui, dan, untuk beberapa
sejauh, kriteria yang kami akan gunakan untuk memverifikasi
keaslian dari suatu gen p53-target langsung itu sendiri
secure.We kurang menjadi sekarang menyadari, misalnya, bahwa
identifikasi situs p53-mengikat dalam promotor
urutan mungkin tidak mencerminkan respon p53 dalam
utuh kromatin atau, sebaliknya, yang tanggap p53
mungkin dimediasi oleh urutan selain yang ditetapkan
p53-mengikat situs
37
Namun, sekarang ada sejumlah besar gen yang meyakinkan diatur oleh.
p53 dalam kondisi fisiologis yang relevan, beberapa
yang tercatat di 2.Although TABEL jauh dari lengkap, contoh-contoh ini menggambarkan
bahwa banyak dari gen
yang disebabkan oleh p53 dapat dibagi menjadi kelompok-kelompok yang
mungkin menengahi fungsi p53 tertentu, seperti penghambatan pertumbuhan sel, perbaikan
DNA, aktivasi apoptosis
atau peraturan dari angiogenesis
38
.
Bahkan dip paling santai ke literatur tentang
p53 gen target mengungkapkan keanggotaan agak besar
'Klub apoptosis', menunjukkan p53 yang dapat menyebabkan
ekspresi beragam efektor kematian. p53-
diinduksi gen yang mungkin berkontribusi pada inductio

Kotak 1 | Menampilkan beberapa kontrol diri

Meskipun banyak gen p53 target memiliki fungsi hilir jelas dalam mediasi respon terhadap
aktivasi p53, ada
sekarang beberapa contoh produk gen p53-inducible yang dapat umpan balik untuk
mengendalikan atau memodulasi aktivitas p53.The
pertama - dan yang paling terkenal - adalah kemampuan untuk menginduksi ekspresi p53
ofMDM2, protein yang baik secara langsung menghambat
aktivitas transkripsi p53 itu dengan mengikat transactivation domain, dan berfungsi sebagai
ligase ubiquitin untuk menargetkan p53
untuk loop umpan balik degradation.This memberikan kontribusi dengan ketentuan negatif
dari aktivitas p53 selama pertumbuhan normal dan
pembangunan, dan membantu untuk menonaktifkan p53 pada akhir respon stres. Layered
ke loop peraturan ini adalah kemampuan
dari p53 untuk menginduksi ekspresi protein yang mengatur MDM2.These termasuk WISP1
dan PTEN, yang dapat
memodulasi fosforilasi MDM2 oleh Akt mengendalikan, dan cyclin G, yang dapat merekrut
phosphatase 2A untuk
dephosphorylate MDM2.As fosforilasi ofMDM2 dapat baik meningkatkan dan menghambat
degradasi p53, maka
sulit pada saat ini untuk memprediksi pengaruh cyclin G pada aktivitas p53.
peraturan p53-dimediasi fosforilasi p53 sedang mengembangkan sebagai mekanisme lain
untuk pengendalian diri. p53 menginduksi
ofWIP1 ekspresi, yang merupakan fosfatase yang menghambat fosforilasi p53 pada Ser46,
sehingga mencegah induksi
kegiatan response.This apoptosis diimbangi oleh aktivasi p53-dimediasi DINP1, yang
berkontribusi terhadap
fosforilasi di situs ini. Akhirnya, autoregulasi aktivitas apoptosis p53 juga hasil dari
transkripsional aktivasi ΔNp73 - versi amino-tersembuhkan dipotong dari p73 - yang dapat
menghambat p53-mediated
apoptosis oleh bersaing untuk promotor situs pengikatan
113
(Lihat artikel review et al Melino pada halaman 605 dari masalah ini.).
Apakah varian ΔN dari p73, atau setara p63 isoform, juga dapat mempengaruhi persyaratan
untuk full-length p63
atau p73 dalam membiarkan aktivitas apoptosis p53 adalah pertanyaan lain yang menarik
yang masih harus dijawab.
dari kedua reseptor-kematian dan mitokondria apoptosis
jalur telah dijelaskan (TABEL 2 dan Gambar 4.),
studi meskipun sejauh ini menunjukkan bahwa peran utama
dari p53 dalam induksi apoptosis kaskade
yang berhubungan dengan rilis mitokondria faktor
seperti c cytochome dan SMAC
39
Selain.
gen yang menginduksi apoptosis drive, p53 juga dapatmengaktifkan ekspresi gen yang men
ghambat sinyal bertahan hidup. Ada kemungkinan bahwa tidak semua gen target
yang diinduksi di semua jaringan atau sebagai respons terhadapsemua sinyal,
seperti yang ditunjukkan untuk Bax dan FAS
40
Namun, mengingat.
jumlah gen target apoptosis, nampaknya,
di kebanyakan sel, respon apoptosis mencerminkan
kumulatif tindakan sinyal banyak p53-induced.
Kemampuan untuk terlibat berbagai jalur apoptosis melalui
beberapa rute mungkin akan sangat penting bagi
kegiatan tumor supresor dari p53, sebagai selektif

tekanan untuk kehilangan fungsi gen pro-apoptosis adalah

sangat tinggi selama perkembangan tumor.
Selain aktivasi target apoptosis
gen, p53 dapat menekan ekspresi gen dan bertindak independen dari regulasi
transkripsi - fungsi yang juga telah terlibat dalam induksi
studi penuh response.Detailed apoptosis mutan p53 tumourderived menunjukkan
bahwa fungsi-penekanan tumor p53 yang terbaik berkorelasi dengan
kemampuannya untuk
menginduksi apoptosis, dan bahwa kemampuan p53 untuk menindas
ekspresi gen terkait erat dengan fungsi ini
41,42
.
Korelasi penekanan transkripsi dan
apoptosis juga terlihat di p53-MDM2 trimerik-BPR
(Retinoblastoma) kompleks yang menyimpan kemampuan untuk
menekan ekspresi gen dan menginduksi apoptosis, meskipun
menjadi cacat untuk transactivation target p53
gen, seperti CDKN1A (Ref. 43). Beberapa gen
telah diidentifikasi sebagai target vivo dalam represi p53,
banyak yang memiliki fungsi anti-apoptosis. Identifikasi protein transkripsi represor
SIN3A sebagai protein berinteraksi dari p53 memberikan penjelasan molekuler untuk
bagaimana bisa menekan gen p53
ekspresi
44
, Meskipun bagaimana memilih gen p53 target
untuk penindasan masih belum jelas. Hal ini juga menarik untuk
dicatat bahwa SIN3A mengikat dan menstabilkan p53 melalui
kaya prolin wilayah p53, daerah yang diperlukan untuk
Fungsi apoptosis
45
, Lagi-lagi menggambarkan hubungan erat antara represi transkripsi dan
apoptosis fungsi p53.
The transcriptionally independen kegiatan p53
(Ref 46-49) telah lebih sulit untuk menentukan, dan
selanjutnya apalagi dipahami dengan baik, dengan beberapa
perdebatan terus untuk kepentingan mereka - atau bahkan
keberadaan - dalam respon fisiologis untuk p53.
Banyak sinisme sekitar kegiatan transcriptionally independen sulit dipahami p53
telah
dilahirkan oleh studi elegan menunjukkan bahwa substitusi p53 wild type untuk
protein p53 dengan titik
mutan dalam domain aktivasi transkripsi efektif melumpuhkan aktivitas apoptosis
p53 (ref 50,51).
Hasil ini sangat mendukung kontribusi
transkripsi peraturan untuk aktivasi sel
kematian, tetapi tidak benar-benar menghalangi suatu iuran
peran untuk fungsi p53 lain yang juga mungkin dikompromikan dalam mutan atau -
jika saldo - mungkin
tidak, saja, akan cukup untuk mencapai ambang yang
diperlukan untuk mengaktifkan respon apoptosis.
Transcriptionally independen fungsi p53 mungkin
termasuk bolak reseptor kematian ke permukaan sel
52
atau aktivasi caspase-8 (Ref. 53). Identifikasi terbaru p53 dalam mitokondria dari
beberapa sel memiliki
memberikan petunjuk lain menarik mengenai sifat
transcriptionally independen aktivitas p53 (Ref. 54).
Pilihan respon terhadap p53
p53-independen sinyal apoptosis. Meskipun bisa p53
menjadi penggerak kuat dari kematian sel, induksi p53 tidak
tidak harus memulai respon apoptosis penuh, dan
saran bahwa sel-sel tumor menunjukkan kecenderungan yang lebih besar
mati dalam menanggapi p53 dari rekan-rekan normal mereka
telah memicu banyak kegembiraan dalam penggunaan p53 sebagai
Google Terjemahan untuk:PenelusuranVideoEmailTeleponObrolan
tumor-terapi khusus. Beberapa jenis sel normal melakukan
menunjukkan respon induksi apoptosis berikut p53,
dan kematian thymocytes dan epitel usus di
Menanggapi p53 diperkirakan menjadi kontributor yang signifikan terhadap efek samping
dari kemoterapi banyak
perawatan
55
Namun, jenis sel lainnya, termasuk beberapa.
sel epitel dan fibroblas, lebih cenderung untuk p53-
apoptosis dimediasi berikut transformasi onkogenik, dan mengelusidasi apa yang
menentukan sensitivitas
sel untuk p53-kematian yang disebabkan telah menjadi prioritas tinggi.
Sampai batas tertentu, respons terhadap p53 mencerminkan paparan sel untuk rangsangan
kematian yang dapat bekerja sama dengan p53
melewati ambang apoptosis, namun tidak
tergantung pada atau langsung bagian dari jalur p53. Hal ini
jelas bahwa, meskipun sel-sel normal banyak diperkuat
dari respon kematian, proliferasi abnormal,
kehilangan lingkungan selular normal dan stres yang
menyertai perkembangan ganas semua meningkatkan
apoptosis sensitivitas sel kanker dengan baik kematian meningkat isyarat atau menghambat
sinyal survival
1
The.
konsekuensi merangsang sinyal yang sama p53-mediated apoptosis karena mungkin cukup
berbeda dalam normal
sel-sel yang menikmati lingkungan yang bebas stres yang lengkap dengan sinyal bertahan
hidup untuk melawan kematian p53
program, dan kanker sel-sel yang mengalami rentetan penghinaan apoptosis
tambahan. Konsep bahwa
apoptosis adalah respon kumulatif banyak sinyal,
termasuk p53, menunjukkan bahwa kehilangan salah satu mungkin
meningkatkan kelangsungan hidup dengan mengurangi beban apoptosis untuk
bawah ambang batas yang diperlukan untuk eksekusi
kematian. Akibatnya, oleh karena itu, kehilangan sebuah komponen dari suatu
apoptosis jalur yang bekerja sama dengan p53 mungkin
menghambat respon apoptosis untuk p53 tanpa harus
berpartisipasi langsung dalam jalur p53.
Peraturan aktivitas apoptosis p53. Dalam skenario yang dijelaskan di atas, hasil akhir dari
p53
induksi ditentukan oleh bekerja sama atau ameliorating
sinyal, tanpa perlu membangkitkan perbedaan dalam
kegiatan itself.Although p53 jelas bahwa sinyal p53-independen yang penting dalam
modulasi sel
Menanggapi p53, tampak jelas bahwa ini 'p53-bisu'
model terlalu sederhana untuk sepenuhnya menjelaskan apoptosis
fungsi p53. Saat ini sudah ada mengumpulkan bukti

bagi keberadaan 'p53-smart'mechanisms, di mana

p53 memiliki peran langsung dalam menentukan respon
jalur diaktifkan
56
.
Saran awal yang p53 dapat secara mandiri
penangkapan mengatur siklus sel dan apoptosis berasal dari
penelitian tumor yang berasal dari mutan titik TP53, yang
mempertahankan kemampuan untuk mengaktifkan G1 penangkapan tetapi gagal
untuk menekan transformasi sel oleh onkogen, seperti
dengan Human Papillomavirus (HPV) protein E7
57,58
Ini kemudian menjadi jelas bahwa penekanan transformasi dalam tes adalah refleksi
dari kemampuan p53.
untuk menginduksi apoptosis, dan bahwa tumor yang diturunkan
mutan sedang dipelajari menunjukkan hilangnya selektif fungsi apoptosis yang
berkorelasi dengan cacat selektif dalam
kemampuan untuk mengaktifkan ekspresi dari beberapa gen apoptosis target p53
59,60
Ada kemungkinan bahwa hasil ini.
mencerminkan afinitas yang berbeda dari p53 untuk situs yang mengikat dalam
berbeda promotor, sehingga p53 mutan dengan sedikit perubahan konformasi masih
mengikat ke situs tinggi afinitas
di promotor gen sel-siklus-penangkapan, tetapi
tidak mampu berinteraksi dengan rendah-afinitas pengikatan
situs-situs yang hadir dalam promotor dari apoptosis
gen target. Diferensial ini afinitas pengikatan bisa
juga menjelaskan pengamatan bahwa rendahnya tingkat hasil penangkapan p53
protein dalam sel-siklus, sedangkan tingkat yang lebih tinggi
ekspresi p53 menginduksi apoptosis
48
, Yang melakukan masking terhadap
seiring sel-siklus-penangkapan respon. Studi baru-baru ini
memeriksa pengikatan p53 untuk promotor dalam
konteks kromatin in vivo telah didukung sebagian
model ini
61,62
dengan mengkonfirmasi kehadiran tinggi dan
afinitas rendah mengikat p53-situs dalam penangkapan sel-siklus dan
promoters.However apoptosis, tidak semua diketahui gen target proapoptotic diatur
oleh afinitas rendah
p53-mengikat situs, dan afinitas pengikatan p53 untuk
promotor PUMA, yang mengatur gen sangat proapoptotic, mirip dengan CDKN1A
dan
MDM2 promotor. Oleh karena itu tidak jelas apakah
afinitas pengikatan p53 untuk promotor berbeda adalah cukup untuk menjelaskan
fungsi apoptosis tingkat tinggi
p53 protein atau cacat apoptosis selektif di beberapa
tumor yang diturunkan p53 mutan, dan penjelasan lain
untuk pengamatan ini sekarang muncul.
Beberapa studi telah menggejala protein p53-mengikat penting dalam modulasi
pemilihan target
gen (Gambar 5). Dalam rangka untuk berfungsi secara efisien sebagai motor
penggerak ekspresi gen, p53 bentuk kompleks dengan
lain transkripsi regulator, termasuk acetyltransferases seperti p300/CBP. Interaksi ini
memungkinkan untuk
dengan asetilasi histon yang mengelilingi situs p53-mengikat, membuka yang
kromatin dan sekitarnya
memungkinkan akses mesin transkripsi basal
63
.
p53 juga ditargetkan untuk asetilasi oleh mengikat
protein
64,65
, Meskipun konsekuensi dan pentingnya
modifikasi ini tetap samar-samar
66
Meskipun.
beberapa faktor transkripsi p53 terkait tampaknya
untuk berkontribusi secara umum dengan kemampuan untuk menginduksi p53
ekspresi gen, beberapa faktor telah ditunjukkan
untuk memiliki peran yang spesifik dan selektif dalam memungkinkan
ekspresi gen target apoptosis. JMY, untuk
Misalnya, bekerja sama dengan P300 untuk meningkatkan kemampuan
p53 untuk menginduksi ekspresi gen seperti Bax
Figure 5 | Model for the regulation of the choice of

response to p53. The choice of response to p53 activation

is determined, in part, by differential regulation of p53

activity in normal and tumour cells. In this model, activation

of p53 in normal cells leads to the selective expression of

cell-cycle-arrest target genes (such as CDKN1A, which

encodes WAF1), resulting in a reversible or permanent

inhibition of cell proliferation. In tumour cells,

phosphorylation of p53 at Ser46 (through activation of

kinases, expression of co-activators such as p53DINP1 or

repression of phosphatases such as WIP1) and/or

functional interaction with apoptotic cofactors (such as

ASPP, JMY and p63/p73) allows for the activation of

apoptotic target genes. These cofactors can bind p53

(directly or indirectly) as shown for ASPP and JMY or — as

shown for p63 and p73 — assist p53 DNA binding by

directly interacting with p53-responsive promoters.

Although not proven, it is possible that phosphorylation

alters the conformation of p53 to either enhance the

interaction with apoptotic cofactors, or allow binding

tanpa secara signifikan mempengaruhi induksi
CDKN1A (Ref. 67). Efek bersih dari hal ini adalah bahwa JMY
ekspresi mungkin diperlukan untuk induksi
apoptosis, tapi tidak sel-siklus penangkapan.
Peraturan respon apoptosis juga bisa
dimediasi oleh protein p53-mengikat yang secara langsungmempengaruhi
p53 kemampuan untuk berinteraksi dengan DNA. The ASPP
keluarga protein baru-baru ini telah ditunjukkan
untuk berinteraksidengan p53 dan - dalam kasus full-length ASPP1
dan ASPP2-meningkatkan interaksi dengan promotor gen targetapoptosis seperti Bax
68
.
Sebaliknya, penghambatan ekspresi ditunjukkan ASPP
untuk memblokir selektif respon apoptosis untuk p53.A
kontribusi serupa dengan aktivasi target-gen apoptosis oleh p53baru-baru
ini diungkapkan oleh tak terduga
pengamatan bahwa induksi kematian sel oleh p53
membutuhkan adanya paling tidak satu dari p53 lain-
anggota keluarga, p63 atau p73 (Ref. 69). Persyaratan ini
berkorelasi dengan ketidakmampuan p53 untuk mengikatpromotor
target apoptosis pada sel p63/p73 double-null, dengan
bukti bahwa p53-anggota keluarga lain mungkin
diperlukan pada situs-situs untuk memungkinkan p53 mengikat

Ingat, bagaimanapun, bahwa p53 wild type tidak mengikat

p63 atau p73, menunjukkan kontribusi tidak langsung dari p63
atau p73 untuk memungkinkan p53 mengikat pada promotor tertentu.
Selain protein seperti ASPP, JMY dan
p63/p73 yang telah ditunjukkan mempengaruhi kemampuan
p53 untuk mengaktifkan ekspresi gen, beberapa faktor lain
yang berkontribusi terhadap induksi apoptosis oleh p53
melalui mekanisme yang kurang didefinisikan dengan baik telah
described.One satunya adalah deregulasi E2F
keluarga faktor transkripsi - peristiwa itu, seperti
inaktivasi p53, terjadi di hampir semua manusia
kanker
70
Beberapa jalur apoptosis diinduksi oleh.
deregulasi E2F1, termasuk sinyal p53-independent
yang akan peka sel sampai mati p53-mediated
70
,
aktivasi transkripsional ARF untuk menstabilkan p53 (Ref. 4)
dan aktivasi transkripsional p73 (ref 71,72). Dalam
Selain itu, E2F1 dapat berinteraksi dengan p53 dan dapat langsung
menambah aktivitas apoptosis p53 (Ref. 73).
Meskipun dasar untuk peningkatan p53's
fungsi apoptosis oleh E2F1 mengikat tidak jelas, ini
kegiatan dapat diatur oleh cyclin A, yang bersaing
dengan p53 untuk mengikat E2F1.
Faktor nuklir transkripsi faktor kB (NF-
kB) juga dapat mempengaruhi p53-induced apoptosis
respon, baik positif dan negatively.NF-kB menunjukkan
kuat anti-apoptosis aktivitas di banyak sistem, terutama dalam penghambatan kematian sel
dalam menanggapi
kematian-reseptor aktivasi oleh ligan seperti faktor tumournecrosis (TNF)
74
Peran. Dari NF-kB dalam memodulasi p53-induced apoptosis Namun, kurang jelas.
Walaupun NF-kB dapat menghambat fungsi p53 oleh bersaing untuk co-aktivator seperti
P300 (ref 75,76), lainnya
penelitian telah menunjukkan persyaratan untuk NF-kB di p53-
dimediasi sel kematian
77
Produk PEUTZ-JEGHER gen.
LKB1 juga telah terbukti memiliki peran dalam mediasi
p53-dependent apoptosis, dan hilangnya LKB1 pada sel epitel usus tampaknya untuk
memberikan perlindungan
p53-induced terhadap kematian sel, sehingga meningkatkan
tumor pembangunan
78
Studi-studi lain telah menunjukkan.
bahwa terminal karboksil ekstrim p53 memiliki peran dalam
induksi apoptosis dengan berinteraksi dengan DNA
helicases, seperti XPD, XPB, BLMand WRN1 (Ref. 79).
Meskipun tidak diketahui bagaimana protein berbeda
berkontribusi terhadap kematian p53-mediated, nampaknya
setidaknya beberapa dari mereka langsung akan menimpa pada
apoptosis kegiatan p53.
Mengatur regulator
Identifikasi kofaktor yang secara khusus
diperlukan untuk p53 untuk menimbulkan gen target apoptosis menunjukkan bahwa terdapat
beberapa mekanisme di mana
respon apoptosis dapat regulated.Most sederhana,
ketersediaan kofaktor dapat diatur pada
tingkat stabilitas ekspresi atau protein, sehingga sel-sel
yang tidak mengungkapkan protein seperti ASPP, JMY atau
p63/p73 pada tingkat yang cukup untuk melarikan diri dari induksi respon apoptosis setelah
aktivasi p53.
Namun, lebih kompleks tingkat kontrol, termasuk
pasca-translasi modifikasi yang mungkin mengatur
interaksi antara berbagai komponen ini
sistem, juga sedang diidentifikasi.
p53 secara ekstensif fosforilasi, dan modifikasi
di beberapa residu telah secara khusus dikaitkan dengan
p53 kemampuan untuk menginduksi apoptosis response.Of suatu kepentingan tertentu
adalah fosforilasi p53 pada serin (Ser)
46, yang diperlukan untuk p53 untuk menimbulkan ekspresi
apoptosis target gen seperti p53AIP1, tetapi tidak mediator
penangkapan sel-siklus seperti CDKN1A (ref 80,81) (Gambar 5).
Peraturan Ser46 fosforilasi sehingga mungkin
kinase penting dalam modulasi pilihan respon terhadap aktivasi p53, dan beberapa
sekarang telah terlibat sebagai
bertanggung jawab untuk modifikasi ini. Protein homeodomain-berinteraksi kinase 2 (HIPK2)
dapat menengahi Ser46 fosforilasi dalam menanggapi ultraviolet
(UV) iradiasi
82,83
, Meskipun tampaknya bahwa ini saja
tidak cukup untuk menginduksi apoptosis
83
Ini juga telah menyarankan bahwa protein p38 kinase mitogen-diaktifkan.
(MAPK) dapat memediasi fosforilasi Ser46 di
tanggapan terhadap iradiasi UV
81,84
Menariknya, tidak.
HIPK2 juga p38MAPK terlibat dalam fosforilasi Ser46 dalam menanggapi radiasi pengion,
yang
membutuhkan baik telangiectasia ataksia bermutasi (ATM)
85
dan
gen p53-inducible p53DINP1 (Ref. 86). ATM tidak
langsung phosphorylate p53 pada Ser46, tetapi cenderung
menyebabkan suatu kinase yang mungkin co-diaktifkan oleh p53DINP1
untuk memfasilitasi Ser46 lapisan phosphorylation.A lebih lanjut
kompleksitas dengan ketentuan fosforilasi Ser46 adalah
disediakan oleh identifikasi ofWIP1 sebagai sebuah fosfatase
yang melemahkan UV-cahaya-fosforilasi diinduksi dari p53
pada Ser46 oleh menonaktifkan p38MAPK, sehingga melucuti
respon apoptosis
84
Kebanyakan menggugah rasa ingin tahu, WIP1 adalah a.
target transkripsional p53 (Ref. 87), sehingga mendirikan
umpan balik di mana p53 dapat menginduksi ekspresi
protein yang dapat melumpuhkan kemampuan untuk menginduksi apoptosis (BOX 1). Jadi,
tampak jelas bahwa fosforilasi p53
dapat berkontribusi pada aktivasi apoptosis, meskipun
mekanisme yang mendasari penelitian ini adalah tidak
known.Although ada kemungkinan bahwa fosforilasi halus mengubah konformasi p53 untuk
memungkinkan mengikat
promotor elemen dalam target gen apoptosis, juga
menggoda untuk berspekulasi fosforilasi yang mengatur
p53 interaksi dengan beberapa kofaktor apoptosis,
seperti ASPP.
Selain fosforilasi, modifikasi kovalen lain dari p53 juga mungkin penting dalam mengatur
p53 kegiatan dan menentukan pilihan respon.
p53 dikenakan beberapa yang berbeda pasca-translasi
modifikasi, termasuk sumoylation dan asetilasi,
dan - meskipun beberapa laporan yang saling bertentangan - tampaknya
Kemungkinan bahwa asetilasi karboksi-terminal p53 dapat mengatur aktivitas transkripsi
dalam kondisi tertentu
66
.
Oleh karena itu, kepentingan tertentu yang asetilasi
p73 baru-baru ini telah ditunjukkan untuk selektif meningkatkan
aktivasi gen target apoptosis
88
, Menunjukkan bahwa
p53 juga bisa diatur dengan cara yang sama.
Subselular lokalisasi p53. Pada sel utuh, kegiatan
dari p53, termasuk modifikasi pasca-translasi dan
kemampuan untuk berinteraksi dengan protein lain, dapat lebih lanjut
dikendalikan oleh peraturan lokalisasi subselular dari
komponen jalur p53-respon. p53 adalah
aktif diangkut ke dalam dan keluar dari inti
89,90
, Dan

penting untuk memungkinkan perkembangan tumor, dan mutasi

dalam komponen hilir jalur apoptosis diaktifkan oleh p53 dapat menggantikan
kehilangan p53 di
tumor pembangunan
109-111
Namun, identifikasi.
dari kofaktor apoptosis yang diperlukan khusus untuk
p53-mediated kematian menunjukkan bahwa protein tersebut mungkin
juga menjadi target untuk inaktivasi pada kanker manusia. Rugi atau
penghambatan faktor seperti ASPP, atau kemampuan untuk phosphorylate p53
pada Ser46, akan menyebabkan cacat mendalam
dalam kemampuan p53 untuk membunuh sel tumor berkembang.
Memang, petunjuk pertama dari mekanisme tersebut telah
ditemukan pada kanker payudara, ~ 11% dari yang memiliki amplifikasi dari
fosfatase WIP1, yang mencegah fosforilasi dan aktivasi fungsi apoptosis
p53 (Ref. 108). Menariknya, sebagian besar tumor ini
ditahan p53 wild type. Demikian pula, manusia banyak kanker
menunjukkan aktivitas yang disempurnakan-phosphatidylinositol 3
kinase (PI3K) / Akt kaskade sinyal, dengan hilangnya PTEN
atau, pada kanker aerodigestive-saluran atas, melalui amplifikasi PIK3CA, subunit
katalitik dari PI3K
112
.
Meskipun sinyal Akt berkelanjutan telah pleiotropic
efek pada pengaturan kematian sel, salah satu konsekuensi adalah
penghambatan selektif p53-induced kematian sel.
Tumor terkait ekspresi amino-tersembuhkan
isoform dihapus dari p73 mungkin juga langsung menimpa pada
aktivitas apoptosis p53 (BOX 1).
Keluarga semakin kofaktor yang diperlukan
untuk p53 untuk menginduksi apoptosis adalah menyediakan beberapa target baru
yang menguntungkan bagi pengembangan terapi untuk
mengembalikan fungsi apoptosis p53, dan beberapa bukti untuk validasi mereka di
arena ini mungkin
segera tersedia. Bisa jadi bahwa dengan penargetan p53's
teman dan rekan kami akan memastikan p53 yang melakukan
hal yang benar dalam membuat sel tumor baru lahir memilih
kematian atas aib.
identifikasi kofaktor yang secara khusus memberikan kontribusi p53-induced
apoptosis memungkinkan kita untuk berpikir
lebih tepatnya tentang mengapa sel-sel tumor mati sebagai respons
untuk p53. Ada kemungkinan bahwa perubahan kanker terkait -
seperti aktivasi onkogen - langsung meningkatkan
ekspresi atau kegiatan faktor yang diperlukan untuk
p53-induced kematian. Sebagai contoh, diregulasi E2F1
(Ditemukan di hampir semua kanker) dapat mengaktifkan ekspresi
dari p73 (ref 71,72,106), yang baru-baru ini terbukti memiliki
peran langsung dalam memungkinkan apoptosis p53-mediated
69
.
Relocalization dari p53 ke NB, sebuah acara yang berhubungan
dengan kemampuan untuk menginduksi ekspresi target apoptosis
gen, terjadi dalam menanggapi aktivasi onkogen - di
Khususnya, induksi RAS activity.Herein terletak sebuah
komplikasi untuk model, bagaimanapun, karena aktivasi
dari p53 oleh RAS dalam situasi seperti ini dikaitkan
dengan induksi penuaan dini daripada
apoptosis
91,94
Tentu saja, RAS juga memiliki kemampuan untuk mengaktifkan survival signaling
melalui induksi Akt.
107
,
menggarisbawahi fakta bahwa respon akhir sel
untuk salah satu rangsangan merupakan hasil integrasi dari
kompleks dan jalinan jaringan sinyal. Sangat
baru-baru ini, RAS onkogenik juga ditunjukkan untuk menekan
ofWIP1 ekspresi, mengangkat fosforilasi
p53 di Ser46 dan meningkatkan sinyal apoptosis
108
.
Menggabungkan p53-mengaktifkan fungsi onkogen
dengan kegiatan p53-independen mereka apoptosis menyebabkan
gambaran yang lebih jelas tentang mengapa sel tumor begitu kuat
prima untuk kematian.
Sebagai kegiatan sel-siklus-penangkapan apoptosis dan p53
dapat mandiri diatur, variasi yang lebih halus
pada tema p53 mengaktifkan kembali untuk terapi tumor
menjadi cara khusus untuk mengaktifkan kematian-mendorong
fungsi p53. Studi-studi awal p53 mutan menunjukkan kuat bahwa hilangnya aktivitas
apoptosis p53.