*Corresponding Author:
Rahmawati
Laboratorium Mikrobiologi, Program Studi Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam,
Universitas Tanjungpura,
Jl. Prof, Dr. H. Hadari Nawawi, Pontianak
E-mail: rahmawati@fmipa.untan.ac.id
29
Sari, et al /Jlabmed Vol 3 No 1 (2019) 29-35
30
Sari, et al /Jlabmed Vol 3 No 1 (2019) 29-35
31
Sari, et al /Jlabmed Vol 3 No 1 (2019) 29-35
dengan menampilkan tabel dan foto hasil Tabel 2 Uji Biokimia Isolat Bakteri Coliform pada
pengamatan secara makroskopis dan minuman lidah buaya
Uji DPS 1 DPS 2 DPS 3
mikroskopis serta hasil uji biokimia. Biokimia
Sitrat + + +
Hasil Motilitas + + +
Isolasi dan Karakteristik Bakteri Coliform Indol - - -
Laktosa + + +
Sakrosa + + +
Glukosa + + +
Gas - + +
H2S - - -
Methyl red - - -
Voges- - - -
Proskauer
Genus Klebsiella Citrobacter Escherichia
Pembahasan
Hasil deteksi dan identifikaasi menunjukkan
bahwa bakteri positif Coliform dan diduga
Gambar 1.Hasil pewarnaan Gram Isolat Bakteri
merupakan bakteri anggota spesies
anggota Coliform dari sampel lidah buaya Escherichia coli. Isolat bakteri anggota
spesies E. coli yang diamati diduga termasuk
Berdasarkan hasil penelitian isolasi bakteri golongan non fekal karena dapat tumbuh
Coliform pada minuman lidah buaya yang pada suhu inkubasi yaitu 37 oC. Widiyanti
dijual di sepanjang jalan Budi Utomo, (2004) menyatakan bahwa bakteri golongan
Pontianak, Kalimantan Barat, diperoleh tiga fekal dapat tumbuh pada suhu 42 oC,
isolat yaitu isolat dengan kode DPS1, DPS2 sedangkan bakteri golongan non fekal tidak
dan DPS. Tiap isolat memiliki karakteristik dapat tumbuh pada suhu tersebut tetapi
morfologis dan fisiologis yang berbeda-beda dapat tumbuh pada suhu 37 oC.
(Tabel 1 dan Tabel 2).
Pemeriksaan bakteri anggota genus
Tabel 1 Karakter Morfologis Isolat Bakteri Coliform Escherichia dilakukan dengan
pada minuman lidah buaya menginokulasi pada media selektif yaitu
Karakter DPS 1 DPS 2 DPS 3 Eosin Methylene Blue Agar (EMBA). Media
ini merupakan media selektif untuk
Bentuk Bulat Bulat Bulat menumbuhkan bakteri anggota genus
Tepian Rata Rata Rata
Escherichia. Media EMBA mengandung
laktosa, bila dalam biakan terdapat bakteri
Elevasi Cembung Cembung Rata anggota genus Escherichia maka asam yang
Hijau dihasilkan dari fermentasi laktosa akan
Warna Merah muda Kuning
metalik menghasilkan warna koloni yang spesifik
untuk bakteri anggota genus Escherichia
Gram Negatif Negatif Negatif yaitu koloni yang berwarna hijau dengan
Bentuk
kilap logam sedangkan Coliform non fekal
Batang Batang Batang lain yang dapat tumbuh koloninya berwarna
Sel
Panjang cokelat menunjukkan adanya Enterobacter
3 µm 3,5 µm 3 µm aerogenes ataupun koloni yang tidak
sel
berwarna. Hasil deteksi menunjukkan bahwa
Genus Klebsiella Citrobacter Escherichia
koloni berwarna hijau metalik, hal ini berarti
bakteri tersebut diduga anggota Escherichia
(Gambar 1).
32
Sari, et al /Jlabmed Vol 3 No 1 (2019) 29-35
Hasil uji IMVIC (Indol Metil Voges- Hasil uji Simmon Citrat pada tujuh sampel
Proskauer Citrate) menunjukkan bahwa minuman lidah buaya menunjukkan hasil
seluruh sampel uji negatif pada uji indol negatif yakni tidak terjadi perubahan warna
dengan ditandai tidak terbentuknya lapisan pada media. Menurut Hadioetomo (1993),
merah pada media ketika diteteskan reagen media SC merupakan salah satu media yang
Kovac’s (Tabel 2). Menurut (Holt et al., digunakan untuk menguji kemampuan
1994), terdapat anggota genus Escherichia bakteri dalam menggunakan sitrat sebagai
yang menghasilkan hasil uji negatif pada uji satu-satunya sumber karbon yang
indol yakni anggota spesies Escherichia digunakan. Uji SC akan menunjukkan hasil
blattae. Uji indol dilakukan untuk melihat positif bila media berubah menjadi warna
kemampuan organisme yang mendegradasi biru dan sedangkan apabila media tetap
asam amino triptofan dan menghasilkan berwarna hijau maka hasil yang diperoleh
indol (Hemraj, 2013) dan isolat yang adalah negatif. Menurut Chatim &
diisolasi tidak memiliki kemampuan tersebut Surahman (2002), bakteri anggota genus
sehingga dapat dikatakan bahwa bakteri Escherichia akan tetap menghasilkan
yang tumbuh bukan bakteri anggota spesies perubahan warna karena anggota spesies
Escherichia coli namun masih anggota Escherichia tetap dapat tumbuh dengan
genus Escherichia. menggunakan sitrat dalam media sebagai
sumber karbon.
Hasil uji methyl red menunjukkan bahwa
media tidak berubah menjadi merah ketika Berdasarkan hasil uji TSIA menunjukkan
ditetesi reagen metil merah yang bahwa sampel DPS1, DPS2 dan DPS positif
menandakan bahwa hasil uji negatif mengandung bakteri anggota genus
mengandung bakteri anggota genus Escherichia karena pada media mengalami
Escherichia. Menurut Sudarsono (2008), uji perubahan warna menjadi kuning pada slant
methyl red dilakukan untuk mengetahui dan deep dengan menghasilkan gas terlihat
kemampuan bakteri mengoksidasi glukosa dari media seperti pecah atau terbelah dan
dengan memproduksi asam dengan tidak menghasilkan H2S (Bahar, 2005). Uji
konsentrasi tinggi sebagai hasil akhirnya dan TSIA yang merupakan uji untuk melihat
hasil asam yang terbentuk berubah menjadi bakteri yang dapat memfermentasi glukosa,
merah dengan ditambahkannya reagen metil laktosa, sukrosa dan reduksi sulfur.
merah. Fermentor glukosa diinokulasi pada media
TSIA akan memproduksi asam sehingga
Hasil uji Voges Proskauer menunjukkan menurunkan pH dan merubah media
hasil negatif atau tidak terjadi perubahan menjadi kuning dalam beberapa jam. Fero
apapun pada media. Uji VP yang merupakan sulfat pada media bereaksi dengan H2S
pengujian untuk mendeteksi asetoin dalam membentuk endapan hitam terlihat dalam
kultur bakteri. Pengujian ini dilakukan pada butt. Bakteri anggota genus
dengan penambahan alpha-naftol pada Escherichia akan membuat media menjadi
media VP yang telah diinokulasikan bakteri. berwarna kuning pada slant dan deep
Hasil positif akan menunjukkan perubahan dengan menghasilkan gas terlihat dari media
warna menjadi merah, sedangkan warna seperti pecah atau terbelah dan tidak
kuning-coklat menunjukkan hasil negatif menghasilkan H2S (Bahar, 2005).
(Hemraj, 2013). Penelitian yang telah
dilakukan menunjukkan hasil yang sesuai Hasil pewarnaan gram pada ketujuh sampel
sehingga menunjukkan bahwa sampel minuman lidah buaya yang diuji
diduga mengandung bakteri anggota genus memperlihatkan bahwa bakteri berbentuk
Escherichia. basil pendek dan berwarna merah muda
(Gambar 1). Hasil pewarnaan gram pada
sampel minuman lidah buaya menunjukkan
33
Sari, et al /Jlabmed Vol 3 No 1 (2019) 29-35
bahwa bakteri tersebut adalah anggota genus pencucian lidah buaya yang kurang bersih
Escherichia yang bersifat gram negatif dan sehingga bakteri yang biasa ditemui hidup di
berbentuk batang. Selain didapatkan bakteri tanah ini dapat mengkontaminasi sampel uji.
anggota genus Escherichia pada hasil uji, Hal ini sesuai dengan pernyataan Soemarno
juga didapatkan bakteri anggota genus (2000) yang menyatakan bahwa bakteri
Citrobacter dan Klebsiella. Bakteri anggota anggota genus Citrobacter biasanya
genus Citrobacter memiliki karakter tersebar luas di lingkungan, sehingga bakteri
berbentuk batang dengan diameter antara 2- ini dapat dijumpai di dalam air, tanah dan
6 µm. Bakteri jenis ini juga merupakan makanan. Begitu pula bakteri anggota genus
bakteri gram negatif yang bersifat motil, Klebsiella yang hidup sebagai saprofit pada
anaerob fakultatif dan dapat tumbuh pada lingkungan hidup, pada air, tanah, makanan,
suhu optimal 37 oC (Holt et al., 1994). sayur-sayuran dan tumbuhan.
Bakteri anggota genus Klebsiella memiliki
karakter berbentuk batang dengan diameter Ucapan Terimakasih
antara 0,3-1,0 µm. Bakteri jenis ini Ucapan terimakasih kepada pihak penjual
merupakan bakteri gram negatif yang minuman lidah buaya, serta pihak yang
bersifat non motil, anaerob fakultatif dapat terkait dalam penyelesaian penelitian ini.
tumbuh pada suhu optimal 37 oC (Holt et al.
1994). Referensi
Andrian, GB, Fatimawali & Novel, SK,
Medium Mac Conkey Agar termasuk salah 2014, ‘Analisis cemaran bakteri
satu media isolasi primer. Mac Conkey Coliform dan identifikasi
merupakan medium selektif differensial Escherichia coli pada air isi ulang
yang mengandung zat warna khusus dan dari depot di kota manado’, Jurnal
karbohidrat untuk membedakan koloni yang Ilmiah Farmasi-Unsrat, 3 (3), ISSN
memfermentasikan laktosa (bewarna merah 2302-2493
muda) dengan koloni bakteri yang tidak Bahar, E, 2005,‘Uji Bakteri Terhadap
memfermentasikan laktosa (tidak bewarna), Minuman Segar Air Tebu Yang
ukuran dan bentuk koloni bervariasi Beredar Di Pasar Raya Padang’
tergantung spesies. Kelompok lactosa Artikel Penelitian, Fakultas
fermenter seperti anggota genus Klebsiella Kedokteran Unand, Padang
menghasilkan koloni berwarna merah muda Chatim, A & Surahman, S, 2002, Penuntun
pada media isolasi primer, sedangkan Praktikum Mikrobiologi
Citrobacter menghasilkan koloni berwarna Kedokteran, Binarupa Aksara,
kuning (Gunarson et al., 1998). Jakarta
Gunarson, RS, Holm, M, Soderstrom, 1998,
Sampel uji terkontaminasi oleh bakteri ‘The prevalance of potential
anggota genus Escherichia, Klebsiella dan pathogenic bacteria in
Citrobacter dapat disebabkan oleh faktor nasopharyngeal samples from
lingkungan khususnya air. Air merupakan healthy children and adults’, Scand
media hidup utama bagi kedua jenis bakteri J Prim Health Care, 16 : 13-17
ini. Bakteri anggota genus Klebsiella dan Hadioetomo, RS, 1993, ‘Mikrobiologi Dasar
Citrobacter ini dapat bertahan hidup di Dalam Praktek Teknik dan Prosedur
media air dengan suhu maksimal 90 oC. Dasar Laboratorium’, Gramedia,
Munculnya kedua bakteri ini pada sampel Jakarta
uji dapat disebabkan oleh proses memasak Hemraj, V, 2013, ‘E review on commonly
air yang kurang matang sehingga bakteri used biocemical Tes for Bacteria’,
tersebut tetap hidup didalam sampel uji. Innofare journal of life science,
Selain itu munculnya bakteri ini pada India
sampel uji dapat terjadi karena pada proses Holt, JG., Krieg, NR, Sneath, PHA, Staley,
JT, & William, St, 1994, Bergey’s
34
Sari, et al /Jlabmed Vol 3 No 1 (2019) 29-35
35