JUMLAH TOTAL LEUKOSIT

Total leukocyte count (TLC) mengacu pada jumlah sel darah putih dalam 1 μl darah (atau
dalam 1 liter darah jika hasilnya dinyatakan dalam satuan SI). Ada dua metode untuk
estimasi TLC :

 Metode manual atau mikroskopis

 Metode otomatis (lihat Bab 32 "otomasi dalam Hematologi)

Jumlah leukosit diferensial harus selalu dilakukan bersamaan dengan TLC untuk
mendapatkan jumlah sel absolut.
Tujuan melakukan TLC adalah untuk mendeteksi peningkatan atau penurunan jumlah sel
darah putih, yaitu leukopenia atau leukopenia. TLC dilakukan dalam penyelidikan infeksi,
demam, gangguan hematologi, keganasan, dan untuk tindak lanjut kemoterapi atau
radioterapi.
METODE MANUAL
Prinsip
Sampel darah utuh dicampur dengan pengencer, yang lisis kembali sel dan noda inti sel
darah putih. Sel darah putih dihitung di ruang penghitung hemocytometer di bawah
mikroskop dan hasilnya dinyatakan sebagai jumlah total leukosit per μl darah atau per liter
darah.
Peralatan
1. Hemocytometer atau ruang penghitungan dengan kaca penutup: hemocytometer
yang direkomendasikan adalah satu dengan perbaikan keputusan Neubauer dan
permukaan metalisasi. Ada dua daerah yang diperintah di permukaan bilik
(gambar.20.1). Setiap daerah yang diperintah berukuran 3 mm x 3 mm dan terdiri
dari 9 kotak besar dengan masing-masing kotak besar berukuran 1 mm x 1 mm.
Ketika kaca penutup tebal khusus diletakkan di atas area yang diperintah, volume
yang ditempati oleh darah yang diencerkan di setiap kotak besar adalah 0,1 ml. Di
ruang neubauer yang diperbaiki, alun-alun besar dibagi menjadi 25 kotak, masing-
masing dibagi lagi menjadi 16 kotak kecil.

Gambar.20.1: Neubauer menghitung ruang: (A) Permukaan tampilan, (B) Side view
 Sekelompok 16 kotak kecil dipisahkan oleh garis tiga yang diatur dengan ketat
(gambar 20.2 dan 20.3). Permukaan metalisasi membuat keputusan latar belakang
dan sel mudah terlihat. 4 kotak sudut besar digunakan untuk menghitung leukosit,
sedangkan alun-alun besar digunakan untuk menghitung platelet dan sel darah
merah.
Hanya kaca penutup khusus, yang ditujukan untuk penggunaan dengan
hemocytometer, harus digunakan. Harus tebal dan datar secara optik. Ketika kaca
penutup khusus diletakkan di permukaan bilik, ruang volumetrik dengan kedalaman
dan volume konstan di seluruh area keseluruhannya terbentuk. Slip penutup biasa
tidak boleh digunakan karena tidak memberikan kedalaman konstan ke ruang dasar
karena membungkuk.

Gambar.20.2: Neubauer menghitung ruang yang menunjukkan daerah untuk

menghitung wbcs (W) dan sel darah merah dan trombosit (R)

Gambar.20.3:

Bila kaca penutup khusus ditempatkan di atas meja yang dikehendaki dan ditekan,
cincin Newton (refraksi warna atau cincin berwarna pelangi) muncul di antara kedua
permukaan kaca; formasi mereka menunjukkan penempatan kaca penutup yang
benar.
2. Pipet dikalibrasi untuk pengiriman 20 μl (0,02 ml, 20 cmm): WBC pipet bohlam
(gambar.20.4), yang memiliki bola lampu untuk pengenceran dan pencampuran
(pipet Thoma) tidak lagi direkomendasikan. Ini karena darah dan cairan pengencer
tidak bisa tercampur cukup baik di dalam bohlam pipet. pipet bola juga sulit untuk
mengkalibrasi, mahal, dan pengisian menghitung ruang sulit. Tip pipet sering disorot
dengan manis dan volume darah yang tidak perlu perlu digunakan.

Gambar.20.3:
 Gambar.20.4:
3.