PROSEDUR KERJA

PENETAPAN KADAR KAFEIN DALAM TEH MENGGUNAKAN

SPEKTROFOTOMETER UV-VIS

Tujuan : Untuk mengetahui kadar kafein dalam teh

Metode : Ekstraksi-spektrofotometri UV
Prinsip : Penetapan kadar kafein secara spektrofotometri, setelah diekstraksi dari
cuplikan
Spesifikasi : Spektrofotometer Uv Visibel laruran berwarna
Jenis sampel : Bubuk teh merk 2tang
Alat :
- Pipet volum 5.0 ml, 10.0 ml
- Kuvet
- Pipet tetes
- Vacump pump
- Labu ukur
- Corong glass
- Pipet ukur 10 ml, 5 ml, 1 ml
- Gelas ukur 25 ml
- Corong pisah
- Alumunium foil
- Statif + klem
- Buret 50.0 ml
- Beaker glass 100 ml
- Neraca analitis
- Hot plate
- Kertas saring whattman
- Kaca arloji
- Spektrofotometer UV- Visibel, panjang gelombang λ 266-280 nm.
Bahan :
- Bubuk teh merk 2tang
- CaCO3
- Kafein
- Kloroform
- Aquadest
Penentuan kurva kalibrasi :
 Dipipet masing-masing 2,4,6,8, dan 10 ml
 Dimasukkan ke dalam labu ukur 10 ml
 Diencerkan dengan aquades hingga garis tanda batas
 Dihomogenkan
 Diukur dengan spektrofotometer UV-Visibel pada panjang gelombang tertentu
Cara kerja :
 a. Pemisahan Kafein secara Ekstraksi dari Bubuk Teh
- Sebanyak 1 gram bubuk dimasukkan ke dalam beaker glass
- Ditambahkan 150 ml air panas ke dalamnya
- Diseduh selama 2 menit sambil diaduk
- Larutan teh panas disaring melalui corong dengan kertas saring kedalam
erlenmeyer
- 1,5 gram CaCO3 dan filtrat larutan teh tadi dimasukkan kedalam corong
pisah lalu diekstraksi sebanyak 4 kali, masing-masing dengan penambahan
25 ml kloroform
- Lapisan bawahnya diambilkemudian ekstrak (fase kloroform) ini diuapkan
menggunakan hot plate dilemari asam
- Ekstrak kafein yang didapat didiamkan selama 3 hari
b. Penentuan Kadar Kafein dari Bubuk Teh Merk 2Tang
- Ekstrak kafein bebas pelarut dimasukkan kedalam labu ukur 25 ml,
diencerkan dengan aquades hingga garis tanda batas dan dihomogenkan
- Diencerkan kembali sebanyak 50 kali
- Ditentukan kadarnya dengan spektrofotometer UV-Visible pada panjang
gelombang maksimum.

Interferensi : Panjang gelombang yang digunakan λ 266-280 nm.

Kadar kafein per 240 ml :

No. Produk Kadar

1. Minuman bersoda 23
2. Kopi 65-120
3. Minuman energy 70-85
4. Teh 20-90
5. Cokelat 5-35
6. Susu coklat 1-15

Perhitungan hasil : Konsentrasi sampel = Abs sampel x konsentrasi standar

Abs standar

Tindakan keamanan : Untuk menghindari hal-hal yang tidak diinginkan tetaplah

menggunakan APD ( alat pelindung diri)