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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE
MANABÍ
Facultad ciencias de la salud
Carrera de medicina

Microbiología Práctica
Trabajo en grupo
Hemocultivo
Integrantes:
Cevallos AlcivarCristhian
Delgado Burgos Mariela
Obregón Pinargote Fausto
Solórzano Cárdenas Lissette

3 semestre paralelo B

Catedrático:
Lcdo. Jorge Zambrano
 INTRODUCCIÓN

Definimos como bacteriemia la presencia de bacterias en la sangre que se pone de

manifiesto por el aislamiento de éstas en los hemocultivos. La bacteriemia es una
complicación grave de las infecciones bacterianas, con importantes implicaciones
pronosticas, que se presenta en general en pacientes hospitalizados.
El término fungemia se utiliza para designar la presencia de hongos en la sangre, de forma
análoga a como hemos definido bacteriemia. La mayoría de las fungemias son causadas por
levaduras como Candida y Criptococcus y tienen las mismas implicaciones y metodología
diagnóstica que las bacteriemias
Los hemocultivos han llegado a considerarse un elemento importante para el diagnóstico de
las bacteriemias.
 HEMOCULTIVO

DEFINICIÓN
El hemocultivo es un medio diagnóstico que se realiza para la detección e identificación de
microorganismos en la sangre utilizando el examen directo y cultivo, y definir los patrones
de susceptibilidad de las bacterias por medio del antibiograma.
Un hemocultivo se realiza para identificar si hay una bacteriemia, lo cual contribuye a
adecuar la terapia antimicrobiana de acuerdo al microorganismo aislado y a la sensibilidad
in vitro que éste presente, ya que la terapia, generalmente se plantea en forma empírica.

TOMA DE MUESTRAS

1.- Elección del punto de venopucción y asepsia de la piel.

Antes de la extracción de cada hemocultivo se preparará el
material necesario. Se utilizará una bandeja que contenga:
antiséptico yodado (povidona, yodo u otro yodóforo),
alcohol isopropílico al 70%, jeringas de 20 ml., agujas para
venopunción, gasas y guantes estériles, esparadrapo,
compresor de goma y frascos para hemocultivos aerobios y
anaerobios.
Cada una de las muestras de sangre se obtendrá de venopunciones diferentes y los puntos se
seleccionarán previamente. Las venas del antebrazo son las que se utilizan generalmente
para este fin. La extracción de la sangre no debe realizarse a través de catéter, salvo en los
casos de sospecha de sepsis
Se limpiará rigurosamente el punto elegido de la piel con alcohol isopropílico o etílico al
70% y posteriormente se extenderá sobre el mismo tintura de yodo al 1 ó 2% durante 30
segundos o povidona yodada durante 1 minuto. Es importante esperar a que el compuesto
yodado se seque para que ejerza su acción oxidante y evitar tocar con los dedos el lugar de
la venopunción, así como hablar o toser mientras se realiza la extracción. En pacientes
alérgicos al yodo, la piel se limpiará dos veces con alcohol.
Antes de realizar la extracción se limpiarán con un antiséptico los tapones de los frascos de
hemocultivo.

2.- Extracción de la sangre.

Se inserta la aguja en la vena elegida para
extraer el volumen de sangre determinado
que es 10ml por punción en el adulto, 1-2ml
en el neonato, hasta 5ml en niños mayores
de 5 años. Una vez terminado el
procedimiento se quitará el compresor y se
retirará la jeringa con la aguja de la vena.
No poner algodón u otro material no estéril
sobre la aguja en el momento de sacarla de la vena. Se inocularán los frascos rápidamente,
para evitar la coagulación de la sangre en la jeringa, atravesándolos con la aguja en
posición vertical.
No es necesario cambiar la aguja para hacerlo. Es conveniente recordar que el vacío que
incorporan los frascos succiona rápidamente el contenido de la jeringa. Se inoculará en
primer lugar el frasco anaerobio evitando la entrada de aire. Si la vena se pierde durante la
extracción, utilizar un nuevo equipo de aguja y jeringa. Retirar los restos de yodo de la piel
y cubrir con una gasa estéril.
La extracción de sangre se hará sin anticoagulante, excepto en los hemocultivos
cuantitativos que se describirán en el apartado correspondiente.

3.- Dilución y volumen de la sangre.

La dilución de la sangre es necesaria con el fin de neutralizar las propiedades bactericidas
de ésta y el posible tratamiento antimicrobiano del paciente. Se recomienda una dilución
1/10. Diluciones superiores no son aconsejables aunque pueden ser aceptadas, sobre todo
en el caso de los niños. El volumen de sangre a cultivar admitido en general para adultos es
de 10 ml por extracción, aunque algunos autores recomiendan 20 ó 30 ml. En niños,
especialmente recién nacidos y prematuros, de 1 a 5 ml.

4.- Número de hemocultivos y medios de cultivo.

Es aconsejable extraer la sangre antes de comenzar el tratamiento antimicrobiano Se
recomienda obtener 2 ó 3 muestras en 24 horas con un intervalo entre ellas superior a una
hora. Sin embargo, generalmente se aceptan dos o tres extracciones separadas 30 minutos
cada 24 horas. En casos de extrema urgencia como meningitis, shock séptico, etc. el
intervalo puede reducirse. Los 10 ml. de sangre de cada extracción se repartirán a partes
iguales en dos frascos con tapón de goma con medios de cultivo aerobio y anaerobio.
Existen numerosos tipos de frascos de hemocultivo, además de los referidos para el
crecimiento de microorganismos aerobios y anaerobios. Destacan entre ellos los
optimizados para pequeños volúmenes de sangre, útiles en pediatría, los medios con resinas
que neutralizan los antibióticos que recibe el paciente, los selectivos para hongos, etc. que
pueden ser utilizados en casos específicos.

5.- Etiquetado de los frascos y transporte.

Los frascos se marcarán con una etiqueta en la que
conste el nombre del paciente, el número de la cama
y la hora de la extracción para identificar
correctamente las parejas de frascos de cada una de
las extracciones.
Cada extracción se acompañará de un volante en el
que consten, al menos, los siguientes datos: nombre
y dos apellidos del paciente, fecha y hora de
extracción, servicio de procedencia, número de cama, nombre del médico que realiza la
petición, diagnóstico del paciente y tratamiento antibiótico previo. Los hemocultivos se
enviarán inmediatamente al Laboratorio de Microbiología. Si no es posible, se incubarán en
estufa a 35-37ºC. Si no se dispone de ésta, se dejarán a temperatura ambiente, nunca en
nevera.
 MEDIOS DE CULTIVO

Métodos convencionales:
Tinción de Gram

Otros métodos:

hm Medios bifásicos: Medios con una fase liquida y solida.m

hm Hemocultivos por lisis y centrifugación: El hemocultivo es tratado con
saporina que es lisante celular y centrifugado, sembrando el precipitado libera gérmenes
intracelulares: recuperación de hongos (H. capsulatum), brucella, micobacterias
m

También se puede realizar una tinción con naranja de acridina o un subcultivo ciego en
medios sólidos.m

1.m Naranja de acridina: La tinción con naranja de acridina permite la

visualización de bacterias mediante el examen de la muestra teñida en el microscopio de
fluorescencia. Esta técnica es sencilla de realizar, proporciona una información rápida y se
correlaciona con el aislamiento de bacterias en los subcultivos con una elevada sensibilidad
y especificidad.

La tinción con naranja de acridina se realizará de una muestra de los frascos aerobios de
cada una de las parejas de hemocultivos sin signos macroscópicos de crecimiento
bacteriano.
La sangre de los frascos se obtendrá con jeringa y aguja según el siguiente procedimiento:
después de limpiar los tapones de los frascos con alcohol de 70º, atravesar con una aguja,
previamente conectada a la jeringa, el tapón del frasco en dirección vertical y aspirar el
contenido. Tras ello se depositará una gota de sangre en un portaobjeto bien limpio,
previamente rotulado con el mismo número que el hemocultivo
La extensión realizada en la porta se tiñe con naranja de acridina y se examina en el
microscopio de fluorescencia. En los casos en los que se visualice algún microorganismo,
se realizará tinción de Gram.

2.m Subcultivo ciego: En los casos en que no se realice la tinción con naranja de
acridina se hará un subcultivo ciego tras las primeras 18-24 horas de incubación. Para ello,
se extraerá una muestra de los frascos de hemocultivos como se ha descrito en el apartado
anterior y se sembrará en agar chocolate que se incubará a 35-37ºC, en atmósfera con 5-
10% de CO² durante 72 horas. También se puede sembrar en una placa de agar sangre que
se incubará en aerobiosis. Las placas se examinarán diariamente para detectar lo antes
posible el crecimiento de bacterias. Algunos autores siembran una estría
de Staphylococcus hemolítico en la placa de agar sangre para favorecer el crecimiento de
colonias satélites. No es necesario sembrar en anaerobiosis el subcultivo de 24 horas.

El subcultivo ciego retrasa la información inicial respecto al naranja de acridina, pero

permite obtener colonias aisladas en 24-72 horas por lo que el resultado definitivo no se
demora.

CAUSAS FRECUENTES DE CONTAMINACIÓN DE

LOS HEMOCULTIVOS

1.m Mala desinsectación de la piel en el sitio de toma de muestra.

2.m Uso de desinfectantes contaminados.
3.m Uso de caldos de cultivo contaminados.
4.m Mala desinfección del frasco durante los procesos invasivos del subcultivo.
5.m Mala desinfección de la tapa del frasco previamente a la inoculación de la muestra
en el mismo.
6.m Manipuleo del laboratorio.

GERMENES FRECUENTES PRODUCTORES DE

BACTERIEMIA

hm Staphylococcusaureusm
hm Staphylococcus C negativosm
hm Enterococcusm
hm Streptococcus del tipo viridiansm
hm Neumococom
hm Bacilos Gram negativos no fermentadoresm
hm Haemophilusinfluenzae tipo Bm

Ú



Es un agente patogénico que actúa como un microorganismo saprófito, se encuentra en la
piel del individuo sano pero en ocasiones en que las defensas de la piel caen puede causar
enfermedad. El principal grupo de riesgo son pacientes hospitalizados o
inmunocomprometidos.
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m
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 en tinción de Gram
§ 

Es un género de bacterias del ácido láctico del divisiónFirmicutes. Los miembros de este
género eran clasificados como 

m m hasta 1984 cuando los análisis de

ADN genómicos indicaron que un género separado era más apropiado.1
Los enterococos son cocoGram-positivos que se presentan en parejas (diplococos), siendo
difícil distinguirlos de 

 sólo en base a sus características físicas. Dos de las

especies son comensales en el intestino humano:
m
y
m
. El enterococo es
un organismo facultativo aerobio, esto es, prefiere usar oxígeno, aunque sobrevive bien en
su ausencia.2 Típicamente exhiben gamma-hemolisis en agar sangre de cordero.

§
  


Es un término pseudotaxonómico para referirse un gran grupo de
bacteriasestreptocococomensales que pueden ser o bien del tipo Į-hemolítico, que producen
una coloración verde (de ahí el nombre viridans) en las placas de agar sangre, o bien del
tipo no hemolítico.
Los estreptococos viridans se pueden distinguir del streptococcuspneumoniae mediante una
prueba de optoquina, pues los estreptococos viridans son resistentes a esta sustancia.




 , es un microorganismo patógeno capaz de causar en humanos

diversas infecciones y procesos invasivos severos. Se trata de una bacteria Gram positiva de
1,2-1,8 µm de longitud, que presenta una forma oval y el extremo distal lanceolado. Es
inmóvil, no forma endosporas, y es un miembro alpha-hemolítico del
género 

.1 Generalmente, se presenta en forma de diplococo, por lo que

inicialmente fue denominado 

 , aunque existen algunos factores que

pueden inducir la formación de cadenas. Neumococo es un patógeno casi exclusivamente
humano causante de un gran número de infecciones (neumonía, sinusitis, peritonitis, etc) y
de procesos invasivos severos (meningitis, septicemia, etc), particularmente en ancianos,
niños y personas inmunodeprimidas.
El hábitat natural de neumococo es la nasofaringe humana y la colonización puede tener
lugar durante los primeros días de vida.
i
 
 
 m

Es una bacteria que provoca distintas enfermedades graves.
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:
· . Infección de las membranas que envuelven el cerebro y el resto del sistema
nervioso central.
· : Infección diseminada por vía sanguínea, que puede afectar a todos los órganos.
· : Infección de la epiglotis (cubre la entrada a la laringe). Provoca la asfixia.
· 
: Infección del tejido pulmonar.
· : Infección de una articulación.
Se contagia por vía respiratoria, por la tos, estornudos o simplemente el aire. El germen
suele permanecer en la nariz o garganta del niño sin causar síntomas, pero ocasionalmente
pasa a los pulmones o la circulación sanguínea (infección "invasiva") y causa las graves
enfermedades ya mencionadas.
La infección por este germen es característica de los primeros años de vida. Resulta rara en
menores de 2-3 meses y en mayores de 5 años previamente sanos.

Son factores de riesgo para la infección por Hib, además de la edad:

· Déficits inmunitarios: inmunodeficiencia, inmunosupresión, asplenia (falta de bazo)...
· Asistencia a guardería, hacinamiento doméstico o existencia de hermanos menores de 7
años.

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m


m
hm http://es.wikipedia.org/wiki/Hemocultivo m
hm http://www.seimc.org/documentos/protocolos/microbiologia/cap3.htmm
hm http://www.encolombia.com/medicina/enfermeria/enfermeria4401-guia.htmm
hm http://www.umm.edu/esp_ency/article/003744.htmm
hm http://html.rincondelvago.com/hemocultivo.htmlm
hm http://www.ispch.cl/lab_sal/doc/proc_emo.pdf
hm http://www.vacunas.org/index.php?option=com_content&task=view&id=635&Item
id=26
G
m


Presencia de bacterias patógenas en la sangre.


es la presencia de hongos en la sangre


Semejante


constituyen un grupo de infecciones causadas por un hongo oportunista que
puede tener expresión cutánea, gastrointestinal, sistema respiratorio y genitales del
género ‘, de los cuales ‘
 es la más frecuente

   cuyo significado es "esfera oculta", es un género de fungi. Las especies

crecen en cultivo como levaduras



- es la prueba microbiológica que se realiza para determinar la sensibilidad
de una colonia bacteriana a un antibiótico o grupo de antibióticos.

!m"se refiere a una técnica para realizar un determinado experimento en un tubo de
ensayo, o generalmente en un ambiente controlado fuera de un organismo vivo


 Que es un resultado inmediato de la experiencia, que solo se funda en la
observación de los hechos.

 #m  también llamado $

, 
$, es
un alcohol incoloro, inflamable, con un olor intenso y muy miscible con el agua.

Bacteria o microfito que requiere aire u oxígeno libre para vivir.


La bacteria anaeróbica es un tipo de bacteria que no vive ni se desarrolla en
presencia de oxígeno.

% Es el proceso que se hace en la vena para extraer sangre o inyectar algo.
Es la recolección de una muestra de sangre de una vena, usualmente para pruebas
de laboratorio. Nombre alternativos. Extracción de sangre; flebotomía

&un dispositivo que puede ser introducido dentro de un tejido o vena. Los catéteres
permiten la inyección de fármacos, el drenaje de líquidos o bien el acceso de otros
instrumentos médicos.

! 
Comunicar por medios artificiales [una enfermedad contagiosa].


 
Un efecto bactericida es aquel que produce la muerte a una bacteria. Un
efecto bactericida está producido por sustancias bactericidas. Estas sustancias son
secretadas por los organismos como medios defensivos contra las bacterias.

' (La reducción de la concentración de una sustancia química.

( es una sustancia química producida por un ser vivo o derivada sintética de ella
que a bajas concentraciones mata o impide el crecimiento de ciertas clases
de microorganismos sensibles, generalmente bacterias.

 
es compuesto orgánico y a heterocycle del nitrógeno.

  
es la propiedad de una sustancia para emitir luz cuando es expuesta a luz o
radiaciones electromagneticas. Las radiaciones absorbidas, son transformadas en luz de
una longitud de onda mayor al incidente.

 mSon un filo de bacterias, la mayoría de las cuales tienen una pared
celular Gram-positiva. Algunas de ellas carecen de paredes celulares por lo que no se
colorean con latinción de Gram y además carecen de la segunda membrana encontrada en
la mayoría de las bacterias Gram negativas.