IV.

CARA KERJA
Pembuatan Kurva Baku Asam Salisilat

Dibuat 5 konsentrasi kurva baku larutan asam salisilat

dilakukan

Scanning panjang gelombang optimum pada

spektrofotometer UV-Vis

dibaca

Absorbansi masing-masing seri konsentrasi pada panjang

gelombang maksimum yang diperoleh pada langkah 2

dibuat

Persamaan regresi linier antara konsentrasi dengan

absorbansi (syarat nilai r minimal 0,990)

Preparasi Membran Tikus

Cukur daerah punggung tikus yang telah dikorbankan

dengan pisau cukur

digunting dan diambil

Kulit bagian punggung yang telah dicukur dengan

diameter minimal 3 cm

diletakkan

Kulit yang telah dipisahkan ke dalam cawan petri berisi

larutan NaCl fisiologis hingga kulit dapat terendam
dengan baik
 dipisahkan

Lemak yang tersisa pada membrane kulit, rendam

membran dalam cawan petri berisi dapar fosfat pH 6,8
selama 15 menit

Percobaan Difusi

Siapkan larutan akseptor buffer fosfat pH 6,8 lalu

dikalibrasi alat Franz diffusion cell. Masukkan larutan
akseptor hingga permukaan rata, ukur volume yang
dibutuhkan
dimasukkan

Spinbar ke dalam alat

dikeringkan

Membran dengan kertas saring

disesuaikan

Diameter membran yang dipakai dengan permukaan

(lingkaran dalam) alat Franz diffusion cell
dioleskan

Secara merata 500 mg atau 5 ml sediaan pada membran

diletakkan

Membran pada daerah antara akseptor dan donor,

kencangkan bagias atas (donor)alat
diperiksa
 Apakah terjadi kebocoran. Pastikan bahwa larutan
akseptor menyentuh membrane bagian dalam

ditambahkan

5 ml dapar fosfat pH 6,8 pada kompartemen donor.

Pastikan jangan sampai kering.
dilakukan

Sampling sebanyak 2 ml pada menit ke-15, 30, 45, dan 60

serta jam ke-21, 22, 23, dan 24 atau jam ke-72, 73, 74,
dan 75

dikembalikan

Larutan akseptor sebanyak 2 ml untuk menjaga kondisi

sink

dibaca

Absorbansi larutan sampling pada panjang gelombang

maksimum kurva baku
dihitung

Kadar pada masing-masing waktu sampling dan lakukan

analisis