Anda di halaman 1dari 14

HHS Akses Publik

Penulis ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor Naskah

penulis naskah
J Nanomed Nanotechnol. Penulis naskah; tersedia di PMC 2019 Januari 4.
Diterbitkan dalam bentuk diedit akhir sebagai:
J Nanomed Nanotechnol. 2018; 9 (5):. doi: 10,4172 / 2157-7.439,1000519.

Kemajuan dalam sistem pengiriman untuk doxorubicin


na Zhao1. Martin C Woodle2, dan A. James Mixson1
1
Departemen Patologi, Universitas Maryland School of Medicine, 10 S. Pine St., University of
Maryland School of Medicine, Baltimore, Maryland 21201, Amerika Serikat
2
Aparna Biosciences Corp, 9119 Gaither Rd., Gaithersburg, MD 20877, Amerika Serikat.

Abstrak
Doxorubicin adalah agen kemoterapi digunakan secara luas. Meskipun utilitas, beberapa efek
samping yang merugikan, terutama cardiotoxicity ireversibel dan nefrotoksisitas reversibel, telah
mendorong pengembangan operator liposomal, banyak yang disetujui FDA. khasiat antitumor
persiapan liposom-Dox disetujui dapat menyamai atau melebihi dari doxorubicin konvensional.
Karena liposom ini operator terakumulasi dalam jaringan tumor padat melalui perembesan
ditingkatkan dan efek retensi (EPR), ini operator memiliki profil keamanan yang ditingkatkan.
Namun demikian, masalah yang signifikan dengan persiapan pemberian obat saat doxorubicin
adalah kurangnya efikasi terhadap tumor yang menunjukkan resistensi multidrug. Dalam ulasan
ini, kami mempertimbangkan pengembangan sistem pengiriman obat untuk doxorubicin,

Kata kunci
doxorubicin; nanopartikel; sistemik; intratumoral; resistensi multidrug

PENGANTAR
Doxorubicin (Dox) sendiri atau dalam kombinasi dengan kemoterapi lain adalah terapi lini
pertama yang umum untuk berbagai kanker termasuk payudara, ovarium, kandung kemih,
dan paru-paru (Gambar. 1). Meskipun mekanisme aksi untuk Dox masih sedang dipelajari,
mekanisme yang diusulkan termasuk interkalasi ke DNA mengganggu ekspresi gen,
generasi spesies oksigen reaktif, dan penghambatan topoisomerase II, sebuah girase penting
untuk sintesis DNA dan replikasi [1]. Baru-baru ini, Denard et al. menemukan bahwa Dox
peningkatan kadar ceramide intraseluler, mengakibatkan pelepasan faktor transkripsi
membran, CREB3L1 [2]. CREB3L1 mempengaruhi ekspresi beberapa gen, salah satunya
adalah penekan tumor, p21. Khususnya, sel-sel tumor dengan tingkat yang lebih tinggi dari
CREB3L sensitif terhadap doxorubicin, sedangkan mereka dengan tingkat rendah tahan [3].

Terlepas dari apakah satu atau beberapa dari mekanisme yang diusulkan adalah dalam
bermain, Dox memiliki aktivitas spesifik sel-siklus. Selain menyebabkan G0 / S dan G2 /
M penangkapan, juga meningkatkan
Zhao et al. Page 2

Konflik kepentingan
Penulis ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor Naskah

Para penulis tidak memiliki konflik kepentingan.


radikal oksigen mengakibatkan apoptosis. Dox memiliki p53 mekanisme dependen dan
independen. Khususnya, metode pengiriman dapat mempengaruhi jalur diaktifkan oleh Dox.
Misalnya, bolus injeksi mengakibatkan apoptosis yang signifikan dari sel diperlakukan
terkait dengan penangkapan G2, fosforilasi p53, dan peningkatan kadar BAX dan p21 [4].
Sebaliknya, sel-sel terkena tingkat konstan Dox menunjukkan belum menurun jumlah sel
sedikit apoptosis.

Efek samping jangka panjang yang paling serius dari terapi Dox adalah kardiomiopati
ireversibel, yang didasarkan pada total dosis kumulatif. Dalam satu studi klinis, ~ 4% dari
pasien yang menerima dosis 500-550 mg / m2 dikembangkan gagal jantung kongestif, 18%
dengan dosis 551- 600 mg / m2, dan 36% dengan dosis kumulatif lebih tinggi dari 601 mg /
m2 [5 ]. Peningkatan kadar spesies oksigen reaktif mengakibatkan apoptosis dalam hati
tampaknya memiliki peran penting dalam Dox kardiomiopati. Upaya untuk mengurangi Dox
kardiomiopati dan efek samping lainnya telah dilakukan melalui liposomal pengiriman obat
[6, 7].

FDA-DISETUJUI liposomal-doxorubicin PERSIAPAN


Beberapa sistemik diberikan liposomal Dox telah diteliti dan disetujui termasuk pegylated
(Doxil®, Lipodox®) dan unpegylated bentuk (Myocet®). liposom ini menggabungkan Dox
menjadi inti berair. Adapun khasiat, konsensus umum belum tercapai bahwa persiapan
liposom ini meningkatkan kelangsungan hidup pada pasien kanker payudara dengan satu
pengecualian [8]. Pada pasien kanker yang memiliki risiko tinggi penyakit jantung (yaitu,
kardiomiopati atau MI), pegylated liposomal doxorubicin (PLD) tidak meningkatkan
survival dibandingkan dengan Dox konvensional. Yang penting, ada profil keamanan yang
lebih baik dengan liposomal Dox formulasi. Dibandingkan dengan pasien yang diobati
dengan Dox konvensional, pasien yang diobati dengan liposomal-Dox pameran kurang
cardiotoxicity, mual dan muntah, serta kurang mielosupresi [1, 9]. Lebih sedikit efek
samping dengan persiapan liposom mungkin karena akumulasi lebih besar dari liposomal-
Dox (yaitu, Doxil®) di jaringan tumor (dan jumlah yang lebih kecil pada jaringan lain)
melalui retensi ditingkatkan dan permeabilitas efek (EPR). Berdasarkan meningkat
Leakiness pembuluh darah tumor dan mengurangi limfatik, EPR memungkinkan penargetan
pasif liposom untuk tumor dibandingkan dengan jaringan lain. Nanopartikel (NP), termasuk
liposom antara 10 dan 200 nm, tergantung pada EPR untuk akumulasi mereka pada tumor.

PRE-CLINIAL Platform PENGIRIMAN DOX


Meskipun efikasi dan keamanan profil ditingkatkan dari operator liposom klinis-disetujui,
upaya terus mengembangkan operator Dox dengan peningkatan efektivitas dan keamanan
lebih lanjut. Sedangkan beberapa bentuk liposomal dari Dox yang disetujui FDA, tidak ada
bentuk-bentuk pemberian obat non-liposomal telah menerima persetujuan regulasi. Serupa
dengan bentuk liposome, produk Dox nonliposomal tergantung pada efek EPR. Dalam
ulasan ini, kita akan fokus pada pembawa Dox dalam uji pra-klinis. Pertama, kita akan
memeriksa operator yang telah dikembangkan untuk meningkatkan akumulasi Dox pada
tumor. Kedua, kita akan meninjau operator Dox, yang juga menggabungkan agen
penghambatan yang membalikkan resistensi sel tumor ke Dox. Dox resistensi oleh tumor
sering dimediasi oleh resistensi multidrug meningkatkan penghabisan seluler Dox. Ketiga,

J Nanomed Nanotechnol. Author manuscript; available in PMC 2019 January 04.


Zhao et al. Page 3
sejak beberapa operator telah dimanfaatkan DNA untuk mengikat Dox, kita akan membahas
bentuk pengiriman secara terpisah. Beberapa pasangan basa dalam DNA, di pasangan basa
Penulis ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor Naskah

GC tertentu, memiliki afinitas tinggi untuk Dox. Sedangkan bagian yang disebutkan di atas
membahas operator dirancang untuk secara sistemik disampaikan, bagian akhir membahas
kemajuan untuk meningkatkan pengiriman lokal dari Dox.

Nanopartikel Dox Pengiriman Obat.


beragam jenis nanopartikel (NP) pembawa obat telah dikembangkan dan diuji untuk
pengiriman sistemik dan pelepasan Dox di lokasi tumor. Kami akan memeriksa operator NP
oleh kelas dalam bagian ini meliputi NP polimer dan konjugat, misel, exosomes, dan NP
paramagnetik, untuk meningkatkan pengiriman Dox pada tumor.

NP polimer dan conjugates-Chitosan adalah polisakarida biodegradable linear di mana


NP telah dirumuskan untuk memberikan kemoterapi [10-14] dan asam nukleat [15, 16].
Dalam sebuah studi awal, kelompok Maitra tergabung konjugat dekstran-Dox menjadi
nanopartikel chitosan [10]. Mereka membandingkan konvensional “bebas” Dox, konjugat
dekstran saja, dan konjugat kelompok NP kitosan-dekstran untuk mengurangi ukuran tumor
(Subkutan ditanamkan tumor J774A.1 makrofag) dan memperpanjang kelangsungan hidup
di Balb / c tikus. Pengobatan dimulai pada saat ukuran tumor sekitar 200 mm3 dan 4 dosis
intravena mingguan diberikan. NP kelompok (16 mg / kg / dosis) adalah yang paling efektif
dengan sekitar regresi 50% dalam ukuran tumor pada hari 90 dibandingkan dengan ukuran
maksimum pada hari 45. Selain itu, kelompok perlakuan dengan nanopartikel memiliki
hidup lama dengan 50% dari tikus hidup pada hari 90. Sebaliknya, semua tikus pada
kelompok Dox bebas meninggal hari 60 dan hanya 25% dari tikus pada kelompok dekstran-
konjugat selamat hari 90 [10]. Demikian pula, sebuah penelitian terbaru menemukan bahwa
Dox-loaded chitosan NP nyata menghambat pertumbuhan tumor dan berkepanjangan
kelangsungan hidup tikus dibandingkan dengan bebas Dox [14]. Khususnya, dalam kedua
studi,

Dalam salah satu dari beberapa laporan yang membandingkan khasiat NP mereka dengan
Doxil®, Lee et al. menunjukkan bahwa dosis tunggal dendrimer-Dox konjugat sembuh tikus
dengan subkutan ditanamkan kanker usus besar [17]. Terutama, C-26 sel karsinoma kolon
resisten terhadap Dox. Pembawa 8 nm terdiri dari poliester dendrimer-PEG konjugat dengan
struktur globular topologi. Sebagai hasil dari struktur ini, doxorubicin kovalen terikat itu
dianggap terutama terletak di dalam interior NP globular. Pembawa dendrimer-Dox
memiliki paruh lebih dari 24 jam, memungkinkan EPR untuk menjadi lebih efektif. Sebuah
hidrazon linkage pH-sensitif diaktifkan Dox akan dirilis dalam lingkungan asam tumor dan /
atau endosomes dalam sel tumor. Pada dosis maksimal ditoleransi dari konjugat (20 mg /
kg), kelangsungan hidup tikus tumor-bearing adalah 100%. Hasil yang sama ditemukan
dengan Doxil® tapi dengan hanya 90% dari tikus yang masih hidup. Hasil yang paling
efektif diamati pada hari ke 8 setelah implantasi. Hal itu beralasan bahwa aktivitas lebih
rendah pada jaman dulu adalah karena pembuluh darah tumor cukup, sedangkan pada waktu
kemudian, tumor itu terlalu besar untuk pengobatan yang efektif. Meskipun hasil in vivo
serupa antara kedua kelompok pengobatan, penurunan berat badan secara signifikan kurang
pada kelompok konjugat diobati. Para penulis menunjukkan bahwa keuntungan potensial
dari pembawa dendrimer-konjugat dibandingkan dengan Doxil® adalah bahwa berbagai
obat dapat dilampirkan. Selain polimer-konjugat, ada peptida-Dox konjugat (yaitu, sel-
penetrasi peptida) yang telah menunjukkan ditandai penghambatan sel tumor in vitro [18].

J Nanomed Nanotechnol. Author manuscript; available in PMC 2019 January 04.


Zhao et al. Page 4
Upaya alternatif ditargetkan kanker hati dengan polimer Dox-loaded NP [19]. NP dihiasi
dengan ligan polisakarida, pullalan (Pul) dan / atau arabipogalactan (AGN). Kedua ligan
Penulis ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor Naskah

menargetkan reseptor asialoglycoprotein, yang berlimpah di hepatosit dan sel-sel kanker


hati. Dalam penelitian in vitro menunjukkan bahwa NP ligan bertarget memiliki serapan
yang tinggi menjadi garis sel kanker hati, HepG2, dibandingkan dengan NP non-target.
Selain itu, peningkatan konsentrasi galaktosa itu, gula dengan afinitas tinggi untuk reseptor
asialoglycoprotein yang sama, mengurangi penyerapan ligan ditargetkan NP (Pul, AGN, dan
Pul / AGN), sedangkan galaktosa tidak berpengaruh pada penyerapan NP ditargetkan. Dari
NP diuji, Pul-NP-Dox menunjukkan penghambatan terbesar dari tumor hati primer manusia
yang telah ditanamkan secara subkutan. Dibandingkan dengan kelompok yang tidak diobati,
pengobatan Pul-NP-Dox memberikan pengurangan sekitar 75% pertumbuhan tumor. Seiring
dengan penghambatan tumor yang lebih besar, tumor necrosis adalah terbesar dalam
kelompok Pul-NP. Dengan pengurangan ditandai tingkat tumor kolagen pada kelompok Pul-
NP, penulis berspekulasi bahwa penetrasi tumor lebih besar dari partikel terjadi. Sedangkan
PulNP-Dox menunjukkan sedikit atau tidak ada toksisitas pada tikus, Dox konvensional saja
menunjukkan cardiotoxicity signifikan dan toksisitas ginjal.

Kelompok lain dimasukkan Dox ke pegylated nanopartikel amphiphilic kopolimer


carborane-terkonjugasi (PLMB-Dox) dan mempelajari khasiat menuju U14 serviks
allografts kanker [20]. Strategi ini dikombinasikan memberikan Dox untuk tumor in vivo
dengan terapi capture boron neutron (BNCT). Penambahan carboranes nyata meningkat
enkapsulasi Dox di NP melalui ikatan hidrogen. Keuntungan kedua dari carborane itu
penggunaan dari BNCT. Setelah iradiasi neutron termal, carboranes non-radioaktif di NP
menghasilkan dua partikel energi tinggi, yang sitotoksik terhadap sel tumor. Setelah tumor
subkutan mencapai 60 sampai 90 mm3, tikus disuntik pada hari berturut-turut dengan Dox
(10 mg / kg) atau PCMB-Dox NP (10 mg / kg Dox), dan dalam kedua kasus dengan dan
tanpa radiasi. Pada akhir penelitian (hari 27), pengobatan yang paling efektif adalah NP
PCMB-Dox ditambah radiasi, menunjukkan lebih dari 90% inhibisi dibandingkan dengan
kelompok kontrol saline. PCMBDox NP menekan pertumbuhan tumor sekitar 80%
sedangkan konvensional tumor Dox saja berkurang hanya sekitar 30%. Khususnya, tidak ada
efek racun yang diamati pada PCMB-Dox sebagaimana dibuktikan oleh histologi, kimia
darah, dan berat badan.

Micelles-Studi menggabungkan kedua kurkumin dan Dox dalam misel NP menunjukkan


sinergi aktivitas antitumor mereka [21]. NP misel yang terdiri dari konjugat PEG-Dox
dibentuk oleh basis Schiff pH-sensitif. Selain itu, kurkumin dimasukkan dalam misel melalui
interaksi hidrofobik dengan konjugat PEG-Dox. NP ini adalah berbentuk bulat dan sekitar
180 nm dalam ukuran. Uji in vitro menunjukkan bahwa sekitar 90% dari Dox dirilis pada 48
jam pada pH 5.0, sedangkan hanya sekitar 10% dirilis pada 48 jam pada pH 7,4. Dalam
model tikus dengan tumor HepG2, studi farmakokinetik menunjukkan tingkat peningkatan
dari Dox dan curcumin pada tumor dibandingkan dengan obat bebas. Konsisten dengan
temuan ini, NP mengandung Dox dan kurkumin memiliki efek antitumor yang lebih besar
dibandingkan dengan perawatan obat bebas gabungan atau NP hanya berisi Dox. NP-Dox-
Curcumin dihambat ukuran tumor hampir 70% dibandingkan dengan kelompok yang tidak
diobati, sedangkan Dox / kurkumin campuran dan kelompok NP-Dox dihambat ukuran
tumor dengan hanya sekitar 40%. Seiring dengan penghambatan tumor yang lebih besar,
kelompok NP-Dox-Curcumin menunjukkan nekrosis tumor secara signifikan lebih besar
dibandingkan dengan kelompok perlakuan lainnya.

J Nanomed Nanotechnol. Author manuscript; available in PMC 2019 January 04.


Zhao et al. Page 5
Sebuah misel kompleks polyionic dikembangkan untuk bekerja memberikan plasmid dan
Dox untuk sel-sel tumor in vitro [22]. Sebuah polimer diblokir dari TAT, PEG, dan PEI telah
Penulis ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor Naskah

kompleks dengan DNA plasmid


untuk membentuk NP misel polyionic. The Dox itu konjugasi PEI melalui ikatan hidrazin
pH-sensitif. Tidak seperti studi dibahas nanti, doxorubicin dalam persiapan ini tidak
intercalate ke dalam DNA. Sitotoksisitas dan dosis-respons dari konjugat ini Dox dengan
blok TAT-PEG-PEI polimer dibandingkan dengan bebas Dox. konjugat yang menunjukkan
doseresponse melawan tumor dan sel endotel tetapi umumnya kurang efektif dibandingkan
dengan Dox gratis. Para penulis berspekulasi hal ini disebabkan karena rilis Dox tertunda.
adsorpsi elektrostatik dari NGR peptida menargetkan ligan pada permukaan misel
memungkinkan ditingkatkan penyerapan dan penargetan terhadap kedua endotel mitogenik
(HUVEC) dan sel-sel tumor (HepG2, MCF7). Menarik, plasmid mengekspresikan GFP
dimasukkan sebagai bagian dari misel, meningkatkan kemungkinan memberikan kedua gen
antitumor dan Dox ke tumor.

alternatif Carriers-Exosomes adalah salah satu operator terbaru yang akan digunakan
untuk mengangkut Dox [23, 24]. Exosomes adalah subclass dari vesikel ekstraseluler dengan
ukuran mulai dari 30 nm ke 200 nm, yang menawarkan potensi terapi untuk memberikan
agen. Dox dimuat exosomes (6 mg / kg), diberikan iv dua kali seminggu, benar-benar
menghambat pertumbuhan MDA-MB-231 xenografts tumor [24]. khasiat mirip dengan
Doxil®. Dalam model syngeneic kelas tinggi kanker ovarium serosa, tumor exosome-Dox (6
mg / kg) dihambat secara signifikan lebih dari maksimal ditoleransi gratis Dox (3mg / kg).
Terutama, maksimal ditoleransi dosis mereka, Exo-Dox (6 mg / kg) menunjukkan tidak ada
cardiotoxicity dalam penelitian ini sedangkan Dox gratis (3 mg / kg) lakukan. Toksisitas
Menurunnya ExoDox mungkin karena kemampuannya terbatas untuk menyeberangi
endotelium miokard [24].

Dalam penelitian lain, Dox itu konjugasi operator magnetik, dimana obat dapat diarahkan
untuk tumor dengan magnet eksternal. Wuang dan rekan dilapisi nanopartikel paramagnetik
dengan asam polymethacrylic yang Dox itu terkonjugasi melalui obligasi sensitif pH [25].
peningkatan tingkat Dox rilis dari NP pada pH rendah (pH-5.5) dikaitkan dengan
pembunuhan besar dari MDA-MB-231 sel. Kombinasi pH rendah dan pemanasan awal NP
ke 420C, yang selanjutnya dapat meningkatkan pelepasan Dox, ditingkatkan pembunuhan
sel. Karena NP paramagnetik yang menumpuk di lingkungan asam tumor mungkin panas
ketika ditempatkan dalam medan magnet, pendekatan ini menawarkan janji besar untuk
menargetkan doxorubicin khusus untuk tumor padat. Selain itu, medan magnet telah
digunakan untuk menargetkan NP besi oksida superparamagnetic (SPIONS) secara spesifik
untuk tumor in vivo. Sejauh ini, meskipun, SPIONS sarat dengan Dox telah terbatas pada in
vitro studi [26, 27]. Dalam sebuah studi, Spion pegylated sarat dengan Dox menunjukkan
fluoresensi spektral konsisten dengan endocytic internalisasi dan menunjukkan sitotoksisitas
yang sama sebagai bebas Dox menuju sel-sel kanker payudara MCF7 [26].

Penargetan Doksorubisin Resistance


NP dapat digunakan untuk membatasi resistensi obat tumor dengan melewati pompa
penghabisan melalui serapan seluler. Gratis Dox secara pasif diangkut melalui membran sel,
sehingga rentan untuk pompa penghabisan. Sebaliknya, sebagian besar NP dibahas dalam
ulasan ini dapat mengatasi perlawanan melalui induksi dari serapan obat endocytic. Karena
jenis masuk dan rilis intraseluler dari Dox tidak terkait dengan pompa membran dan
penghabisan selular, penghabisan membran sel dari Dox dapat dihindari. Meskipun

J Nanomed Nanotechnol. Author manuscript; available in PMC 2019 January 04.


Zhao et al. Page 6
demikian, bagian ini akan fokus pada nanopartikel yang menggabungkan muatan Dox
dengan inhibitor penghabisan atau dengan inhibitor diarahkan mekanisme alternatif Dox
Penulis ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor Naskah

tahan (MDR1 / P-gp, c-Juni, BCL-2).

Untuk memajukan khasiat Dox terhadap sel tahan, satu studi dievaluasi penggabungan Dox
dengan DNAzyme (Dx), yang ditargetkan faktor transkripsi C-Juni, menjadi nanopartikel
(Gambar 2) [28]. Laporan ini sebagian didorong oleh penelitian sebelumnya bahwa
kombinasi bebas Dox dan nanopartikel transportasi C-Juni DNAzyme (Dx) pertumbuhan
tumor hampir sepenuhnya menghambat [29]. C-Juni adalah onkogen transkripsi yang
mempromosikan pertumbuhan tumor dan angiogenesis [30, 31]. Selain itu, down-regulasi C-
Juni dikenal untuk mengurangi transporter MDR1, yang memiliki peran penting dalam
penghabisan obat hidrofobik seperti doxorubicin pada sel kanker prostat [32]. Nanopartikel
silika mesopori (MSN) yang dirancang untuk melepaskan DNAzyme awal dengan rilis
berkelanjutan kemudian Dox. Dibandingkan dengan partikel MSN menggabungkan hanya
Dox, MSN-DxJun-Dox nyata ditingkatkan akumulasi seluler dari doxorubicin. Konsisten
dengan hasil ini, c-Jun dan MDR1 secara signifikan berkurang pada sel diperlakukan oleh
kelompok MSN-DxJun-Dox. Sedangkan kedua Dox dan c-Juni DNAzyme itu penting dalam
mengurangi invasi sel (melalui uji Matrigel), yang DNAzyme memiliki peranan penting
dalam mengurangi migrasi dengan uji in vitro. Meskipun kapasitas muat rendah dari MSN
untuk Dox, mereka dipamerkan signifikan
aktivitas terhadap sel-sel kanker prostat. Sebuah keuntungan potensial dari NP ini berkurang
toksisitas dari Dox. Demikian pula, penelitian lain juga menunjukkan pentingnya rilis
temporal sebuah siRNA yang menargetkan gen tahan PGP dan Dox [33, 34].

Strategi di atas digunakan pengurangan protein transporter pompa penghabisan (yaitu,


MDR1 / P-glikoprotein) untuk meningkatkan sensitivitas sel-sel ganas ke Dox. Pendekatan
lain untuk mengobati sel-sel tumor kemoterapi tahan adalah untuk mengurangi protein non-
pompa seperti anti-apoptosis BCL-2 protein. Chen et al. diselidiki co-pengiriman
doxorubicin dan siBcl2 dengan NP MSN (MSN-siBcl2-Dox), menggunakan garis
doxorubicin-tahan ovarium sel (A2780 / AD) [35]. SiRNA itu elektrostatis melekat pada
bagian luar NP MSN, menyediakan rilis awal setelah serapan ke dalam sel, sedangkan Dox
melekat secara internal oleh obligasi sulfhidril-sensitif dan dirilis nanti. The cyto-toksisitas
MSN-siBcl2-Dox menuju A2780 sel / AD adalah 132 kali lipat lebih besar dari bebas Dox.
Menariknya, Bcl2 siRNA disampaikan oleh tingkat Bcl2 mRNA MSN dikurangi dengan
80%.

Liu et. al memanfaatkan multifungsi kecil molekul, quercetin, untuk membalikkan resistensi
sel tumor, dengan beberapa aspek baru untuk pengiriman nanopartikel dari Dox. Penelitian
gabungan quercetin dan nanopartikel silikon mesopori untuk memberikan Dox ke sel-sel
kanker payudara sensitif dan tahan [36]. Dox melekat quercetin melalui ikatan koordinasi
pH-sensitif antara besi dan Dox. Dox dirilis (~ 80%) dari NP dalam waktu 24 jam pada pH
5, pH perkiraan endosomes terlambat. Sebaliknya, relatif sedikit dari Dox (15%) dirilis pada
pH 7,4. Quercetin meningkatkan penyerapan nanopartikel serta terbalik multidrug resistance.
Untuk membalikkan resistensi obat, quercetin perlu dibebaskan dari NP. Para peneliti
memberikan bukti bahwa kuersetin ini dirilis dari NP dengan menginkubasi NP dengan
protease. Bukti lebih lanjut yang mendukung pelepasan quercetin berasal dari penghambatan
dalam data vitro. The quercetin-Dox- NP menunjukkan ditandai aktivitas penghambatan in
vitro terhadap kedua sel sensitif dan tahan yang setara dengan doxorubicin bebas gabungan
dan pengobatan quercetin.

J Nanomed Nanotechnol. Author manuscript; available in PMC 2019 January 04.


Zhao et al. Page 7
DNA diselingi Dox NP.
DNA adalah salah satu operator awal anthracycline untuk menunjukkan aktivitas antitumor
Penulis ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor Naskah

[37, 38]. Pada dosis yang lebih tinggi dari daunorubisin (2,5 mg / kg), DNA: kompleks
daunorubisin memperpanjang rentang hidup tikus bantalan tumor L1201 dibandingkan
daunorubisin gratis. Sekitar 30% dari tikus selamat di hari 40 diobati dengan kompleks
DNA-daunorubisin sedangkan semua tikus yang diobati dengan obat bebas meninggal
sebelum hari 20. Studi-studi awal dirangsang laporan tambahan untuk menggabungkan
anthracycline (yaitu, doxorubicin) dengan DNA atau RNA, dan percobaan kemudian
diarahkan ke arah tumor padat. Selain Dox mengikat RNA / aptamers DNA, asam nukleat
“konjugat” doxorubicin-diselingi telah terintegrasi ke dalam polimer atau liposomal
operator. Khususnya, banyak NP menjanjikan lainnya menargetkan DNA untuk tumor
belum diuji sebagai pembawa Dox [39-41].

Kebanyakan artikel menunjukkan bahwa Dox mengikat dengan afinitas yang lebih tinggi
untuk GC pasangan basa (bp) dari DNA daripada yang lain [42-44]. Namun demikian, satu
kelompok melaporkan bahwa pasangan basa dari anthracyclines CA mengikat berdekatan
erat dan membebaskan mereka lebih lambat dari GC berdekatan [45, 46]. Meskipun afinitas
tinggi Dox untuk DNA, terikat Dox berada dalam kesetimbangan dengan bebas Dox [45,
47]. Setelah Dox mengikat DNA, fluoresensi yang dipadamkan memungkinkan penentuan
efisiensi penjeratan dan kapasitas bongkar [48].

Aptamers: Ligan dan Carriers-Bagalkot dan rekan diselingi doxorubicin tidak dengan
DNA tetapi dengan aptamer RNA [49]. pendinginan maksimal fluoresensi Dox terjadi
sekitar 1: 1 rasio molar. Karena Dox mengikat kuat ke urutan GC, studi pendinginan
konsisten dengan urutan satu GC di aptamer tersebut. RNA aptamer menargetkan reseptor
PMSA pada sel kanker prostat LNCaP. Konjugat fisik aptamer-Dox tidak nyata
mempengaruhi penargetan aptamer tersebut. Kemampuan mengikat aptamer-Dox konjugat
untuk sel LNCaP adalah 84% dari yang oleh aptamer dimodifikasi, menunjukkan bahwa
konjugasi Dox tidak secara signifikan mempengaruhi sasaran aptamer tersebut. Belang-
belang pewarnaan dalam sitosol sel LNCaP diamati dengan konjugat aptamer-Dox konsisten
dengan serapan endocytic. Untuk memvalidasi studi serapan ini, penghambatan
pertumbuhan sel secara signifikan lebih dengan konjugat aptamer-Dox di sel LNCaP dari
konjugat di PC-3 sel, yang tidak mengekspresikan reseptor LNCaP. Dox sendiri memiliki
penghambatan yang sama di kedua baris sel, menunjukkan bahwa perbedaan penghambatan
adalah karena konjugasi dan bukan karena perlawanan dari sel. Demikian pula, laboratorium
lain ditargetkan MUC1 mengungkapkan MCF-7 sel [50] dengan konjugat aptamer-Dox
pegylated. Sedangkan penelitian in vitro menunjukkan sekitar penghambatan 70% dari
MCF-7 sel dengan konjugat, sel-sel non-mengekspresikan MUC1, menunjukkan hanya
sekitar 20% inhibisi dibandingkan dengan kontrol sel. menunjukkan bahwa perbedaan
penghambatan adalah karena konjugasi dan bukan karena perlawanan dari sel. Demikian
pula, laboratorium lain ditargetkan MUC1 mengungkapkan MCF-7 sel [50] dengan konjugat
aptamer-Dox pegylated. Sedangkan penelitian in vitro menunjukkan sekitar penghambatan
70% dari MCF-7 sel dengan konjugat, sel-sel non-mengekspresikan MUC1, menunjukkan
hanya sekitar 20% inhibisi dibandingkan dengan kontrol sel. menunjukkan bahwa perbedaan
penghambatan adalah karena konjugasi dan bukan karena perlawanan dari sel. Demikian
pula, laboratorium lain ditargetkan MUC1 mengungkapkan MCF-7 sel [50] dengan konjugat
aptamer-Dox pegylated. Sedangkan penelitian in vitro menunjukkan sekitar penghambatan
70% dari MCF-7 sel dengan konjugat, sel-sel non-mengekspresikan MUC1, menunjukkan
hanya sekitar 20% inhibisi dibandingkan dengan kontrol sel.

J Nanomed Nanotechnol. Author manuscript; available in PMC 2019 January 04.


Zhao et al. Page 8
Meskipun aptamer mungkin memiliki tujuan ganda sebagai ligan penargetan dan sebagai
pembawa Dox, aptamer bisa berfungsi semata-mata sebagai ligan untuk nanopartikel. Dalam
hal ini, ada beberapa laporan yang menarik yang mencakup domain DNA terpisah untuk
mengikat Dox. Hanya satu dari studi ini telah diperpanjang dalam upaya vitro untuk tumor
studi penghambatan. Charbgoo et al. dimasukkan Dox di dalam target “misel DNA” untuk
menghambat sel kanker [48]. Selanjutnya, misel berisi KLA peptida sitotoksik untuk
meningkatkan efek sitotoksik dari NP menuju sel-sel kanker. Sedangkan peptida KLA itu
konjugasi NP, Dox melalui interkalasi dengan DNA dimuat ke dalam NP. Untuk
mengurangi efek sitotoksik misel Dox-KLA menuju sel non-ganas, DNA-aptamer, yang
menargetkan diekspresikan MUC1 pada sel adenocarcinoma, termasuk pada bagian luar NP.
Kelebihan dari aptamer bebas mengurangi toksisitas dari Dox KLA anti-Muc NP dalam
mengekspresikan sel kanker MUC1 (MCF7), menunjukkan bahwa ambilan misel itu
diperlukan untuk kegiatan Dox. Sitotoksisitas terhadap sel kanker payudara secara in vitro
ditingkatkan dengan menggabungkan Dox dan KLA ke dalam misel dibandingkan dengan
efek sitotoksik Dox- atau KLA-satunya misel. Satu dosis Dox KLA anti-MUC1 NP yang
ditargetkan (2,5 mg / kg) menghambat pertumbuhan tumor (C26, mouse usus carcinoma)
secara signifikan lebih dari kelompok yang tidak diobati atau bebas doxorubicin (P <0,05).
Selain itu, ditargetkan kelangsungan hidup NP berkepanjangan dengan 60% dari tikus hidup
pada hari 30. Sebaliknya, semua tikus di kelompok Dox tidak diobati dan bebas meninggal
oleh hari 21 dan 30, masing-masing. Kelebihan dari aptamer bebas mengurangi toksisitas
dari Dox KLA anti-Muc NP dalam mengekspresikan sel kanker MUC1 (MCF7),
menunjukkan bahwa ambilan misel itu diperlukan untuk kegiatan Dox. Sitotoksisitas
terhadap sel kanker payudara secara in vitro ditingkatkan dengan menggabungkan Dox dan
KLA ke dalam misel dibandingkan dengan efek sitotoksik Dox- atau KLA-satunya misel.
Satu dosis Dox KLA anti-MUC1 NP yang ditargetkan (2,5 mg / kg) menghambat
pertumbuhan tumor (C26, mouse usus carcinoma) secara signifikan lebih dari kelompok
yang tidak diobati atau bebas doxorubicin (P <0,05). Selain itu, ditargetkan kelangsungan
hidup NP berkepanjangan dengan 60% dari tikus hidup pada hari 30. Sebaliknya, semua
tikus di kelompok Dox tidak diobati dan bebas meninggal oleh hari 21 dan 30, masing-
masing. Kelebihan dari aptamer bebas mengurangi toksisitas dari Dox KLA anti-Muc NP
dalam mengekspresikan sel kanker MUC1 (MCF7), menunjukkan bahwa ambilan misel itu
diperlukan untuk kegiatan Dox. Sitotoksisitas terhadap sel kanker payudara secara in vitro
ditingkatkan dengan menggabungkan Dox dan KLA ke dalam misel dibandingkan dengan
efek sitotoksik Dox- atau KLA-satunya misel. Satu dosis Dox KLA anti-MUC1 NP yang
ditargetkan (2,5 mg / kg) menghambat pertumbuhan tumor (C26, mouse usus carcinoma)
secara signifikan lebih dari kelompok yang tidak diobati atau bebas doxorubicin (P <0,05).
Selain itu, ditargetkan kelangsungan hidup NP berkepanjangan dengan 60% dari tikus hidup
pada hari 30. Sebaliknya, semua tikus di kelompok Dox tidak diobati dan bebas meninggal
oleh hari 21 dan 30, masing-masing. menunjukkan bahwa ambilan misel itu diperlukan
untuk kegiatan Dox. Sitotoksisitas terhadap sel kanker payudara secara in vitro ditingkatkan
dengan menggabungkan Dox dan KLA ke dalam misel dibandingkan dengan efek sitotoksik
Dox- atau KLA-satunya misel. Satu dosis Dox KLA anti-MUC1 NP yang ditargetkan (2,5
mg / kg) menghambat pertumbuhan tumor (C26, mouse usus carcinoma) secara signifikan
lebih dari kelompok yang tidak diobati atau bebas doxorubicin (P <0,05). Selain itu,
ditargetkan kelangsungan hidup NP berkepanjangan dengan 60% dari tikus hidup pada hari
30. Sebaliknya, semua tikus di kelompok Dox tidak diobati dan bebas meninggal oleh hari
21 dan 30, masing-masing. menunjukkan bahwa ambilan misel itu diperlukan untuk kegiatan
Dox. Sitotoksisitas terhadap sel kanker payudara secara in vitro ditingkatkan dengan
menggabungkan Dox dan KLA ke dalam misel dibandingkan dengan efek sitotoksik Dox-

J Nanomed Nanotechnol. Author manuscript; available in PMC 2019 January 04.


Zhao et al. Page 9
atau KLA-satunya misel. Satu dosis Dox KLA anti-MUC1 NP yang ditargetkan (2,5 mg /
kg) menghambat pertumbuhan tumor (C26, mouse usus carcinoma) secara signifikan lebih
Penulis ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor Naskah

dari kelompok yang tidak diobati atau bebas doxorubicin (P <0,05). Selain itu, ditargetkan
kelangsungan hidup NP berkepanjangan dengan 60% dari tikus hidup pada hari 30.
Sebaliknya, semua tikus di kelompok Dox tidak diobati dan bebas meninggal oleh hari 21
dan 30, masing-masing. Satu dosis Dox KLA anti-MUC1 NP yang ditargetkan (2,5 mg / kg)
menghambat pertumbuhan tumor (C26, mouse usus carcinoma) secara signifikan lebih dari
kelompok yang tidak diobati atau bebas doxorubicin (P <0,05). Selain itu, ditargetkan
kelangsungan hidup NP berkepanjangan dengan 60% dari tikus hidup pada hari 30.
Sebaliknya, semua tikus di kelompok Dox tidak diobati dan bebas meninggal oleh hari 21
dan 30, masing-masing. Satu dosis Dox KLA anti-MUC1 NP yang ditargetkan (2,5 mg / kg)
menghambat pertumbuhan tumor (C26, mouse usus carcinoma) secara signifikan lebih dari
kelompok yang tidak diobati atau bebas doxorubicin (P <0,05). Selain itu, ditargetkan
kelangsungan hidup NP berkepanjangan dengan 60% dari tikus hidup pada hari 30.
Sebaliknya, semua tikus di kelompok Dox tidak diobati dan bebas meninggal oleh hari 21
dan 30, masing-masing.

Dox juga telah dimasukkan ke dalam GC oligonukleotida yang kaya di mana seorang ATP
responsif aptamer dianil [51]. Selain itu, kaya GC oligonukleotida bersama-sama dengan
miR34-sebuah dikomplekskan ke operator kationik PEI. Mereka menetapkan bahwa
doxorubicin dibebaskan dari aptamer-GC membangun bila terkena konsentrasi ATP
intraseluler dari 4mm. Sebaliknya, konsentrasi ekstraseluler dari ATP (0,4 mM) hanya
minimal dirilis doxorubicin. Dengan demikian, aptamer itu penting untuk rilis intraseluler
dari Dox. Ketika sel-sel A549 kanker paru-paru manusia diinkubasi dengan PEI / GC-Dox /
mir-34a, ada peningkatan apoptosis dibandingkan dengan baik PEI / mir-34a atau PEI / GC-
Dox saja. Penurunan terbesar dalam jumlah sel dan sel migrasi terlihat dengan PEI / GC-
Dox / mir34a. Konsisten dengan apoptosis dan penghambatan migrasi sel,

Untuk menargetkan mengekspresikan sel-sel kanker prostat PMSA, Dox itu diselingi dalam
lingkaran DNA bergulir [52]. Lingkaran bergulir tergabung aptamer PMSA, sebuah spacer
pH-sensitif untuk melepaskan Dox, dan segmen GC-diperkaya untuk mengikat Dox.
Lingkaran bergulir NP memiliki ukuran rata-rata 234 bp dan dirilis Dox mudah dalam
lingkungan asam dibandingkan dengan lingkungan fisiologis (80% vs 20% rilis di 3 ½ jam).
Selain itu, NP ditargetkan diambil oleh sel-sel PMSA positif secara signifikan lebih dari sel
PMSA-negatif. Namun, tidak ada penelitian penghambatan dilaporkan dengan NP Dox-
loaded.

Plasmid, kromosom, dan Oligonucleotide DNASatu kelompok telah melihat dua


strategi yang berbeda (intravena atau pengiriman lokal) untuk menggabungkan Dox dengan
imunostimulan CpG untuk mengurangi pertumbuhan tumor [47, 53]. Dalam kedua studi,
kombinasi Dox dan CpG DNA setidaknya aditif. Dalam sebuah studi co-kultur dengan sel
karsinoma kolon (usus 26 / luc) dan makrofag (RAW264.7), hasil penelitian menunjukkan
bahwa imunostimulan plasmid CpG dan Dox setidaknya aditif efek anti-proliferasi mereka
melawan sel-sel kanker usus besar. Untuk studi in vivo dengan imunokompeten BALB / c
tikus, konjugat CpG plasmid-Dox disuntikkan secara intravena. plasmid CpG diinokulasi ke
tikus peningkatan kadar TNF dan IL12. Dalam sel-sel kanker usus besar ditanamkan ke hati,
kombinasi CpG-Dox akumulasi signifikan lebih dalam jaringan tumor dari bebas Dox.
Konsisten dengan temuan ini, pertumbuhan sel kanker usus besar di hati berkurang jauh

J Nanomed Nanotechnol. Author manuscript; available in PMC 2019 January 04.


Zhao et al. Page 10
dengan DoxCpG dari bebas Dox. Kelompok CpG plasmid-Dox menunjukkan aktivitas
antitumor lebih dari kelompok CpG, Dox, atau CpG bebas-Dox.
Author ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor Manuscript

Chen et al. determined that Dox and c-myc siRNA (si-myc) NPs inhibited solid tumors [54].
The carriers of these therapeutic agents were pegylated liposomes in which a targeting NGR
peptide ligand was attached. Whereas Dox (0.3 mg/kg) did not inhibit tumor growth in a
mouse model compared to an untreated group, the si-myc siRNA NP reduced tumor growth
moderately. Interestingly, the Dox-si-myc-NP reduced tumor growth significantly more that
si-myc NPs. Both Dox, which intercalated with thymus DNA, and the si-myc were
entrapped within liposomes. Notably, the dose of Dox was significantly lower than in most
other studies in which the dose of Dox was 5 mg/kg or higher. In addition to the targeting
ligand NGR, many tumor-selective ligands are promising for conjugation to the surface of
the NP [55].

One of the more novel carriers of Dox is the tetrahedron DNA structure [56] (Fig. 3). A
tumor penetrating peptide, which targets neuropilin-1 (NRP-1), was conjugated to the
structure. The size of the tetrahedron structure, together with the Dox, was about 15 nm in
size. There were approximately forty Dox molecules in each targeted tetrahedron. Compared
to an untargeted form, the uptake of the targeted tetrahedron structure was significantly
greater in a glioblastoma cell line. Consistent with greater uptake, the targeted tetrahedron
structure had a greater inhibitory effect (IC50–2.478 μM) than the untargeted structure
(IC50–4.785 μM). In a cell line that did not have the neuropilin-1 receptor, no difference in
the uptake or inhibition was observed with the targeted or untargeted tetrahedron
nanoparticles. Moreover, the tetrahedron structure was relatively stable to biological media
compared to degradation of double stranded DNA structure within 4 h. Moreover, Dox was
more readily released at an acidic pH than at physiological pH, suggesting release in
lysosomes.

Progress with Local Therapy


Systemically administered anticancer treatments are greatly limited by extensive side effects
mainly due to nonspecific distributions in vivo. In contrast to systemic delivery, local
delivery of Dox increases drug delivery to the tumor with reduced toxicity to normal tissues.
Moreover, local therapy offers an alternative to surgery or radiation in cancers with high
local recurrence or in primary or metastatic cancers juxtaposed to vital structures. Doxil®
has been approved for systemic use, and whereas doxorubicin can be administered
intratumorally, pre-clinical studies demonstrate that this route has significant side effects at
dosages sufficient to control the growth of tumors [57, 58]. There are several approaches
that have been used for intratumor delivery of doxorubicin (Table 1). Solution-based
biomaterials containing Dox rapidly become gels once injected into the tumors. The
colloidal solution(sol)-gel change may be due to thermosensitive biomaterials or due to
exchange of buffers. Alternatively, nanoparticles either alone or embedded in a matrix have
also shown efficacy in reducing tumor size locally.

To address the problem of high local recurrence in breast-conserving therapy, several


investigators have examined Dox embedded in different nanomaterials. Yaun et al. [59]
designed Dox-loaded nanofibers which released Dox in two phases-one an early release and
the other a sustained release. To achieve these different rates of release, the nanoparticle is
comprised of two components: the electrospun polylactic acid (PLLA) polymer and the
mesoporous silica nanoparticle (MSN). Whereas PLLA fibers can release Dox quickly, the

J Nanomed Nanotechnol. Author manuscript; available in PMC 2019 January 04.


Zhao et al. Page 11
MSN which are incorporated in the PLLA fibers showed sustained release of the Dox over
16 weeks. Various Dox loaded scaffolds were implanted into the remnant MDA-MB-231
Author ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor Manuscript

tumors. Whereas tumors of the Dox-loaded PLLA fibers and PLLA-(MSN-Dox) resulted in
early and late necrosis (and apoptosis), respectively, tumors of the PLLA-(MSN-Dox)-Dox
had enhanced and sustained necrosis (and apoptosis). The in vivo histological data
corresponded to the release of Dox from these different scaffolds.

Nanofiber gels containing Dox to treat breast cancer locally (Fig. 4) were also formed by a
different strategy [60]. Oppositely charged peptides that contained aliphatic alkyl tails
selfassembled into gels. Initially, Dox was mixed with the negatively charged peptide
(LaurylVVAGEEE) and co-assembly was initiated by the addition of positively charged
peptide (Lauryl-VVAGKKK) at pH, 7.4. Encapsulation of Dox was 100% in this gel with
sustained release of Dox for 7 days from the gel under in vitro conditions. Based on released
properties and stability of the gel, the 1% gel was selected for in vivo testing of the
gelincorporating Dox. The gels did not show any cytotoxicity in vivo as indicated by the
normal histology of organs. Furthermore, local in vivo injection of Dox (10 mg/kg)
encapsulated gels adjacent to the tumor site reduced tumor size significantly more than free
Dox (~33%) or control PBS (~50%) injections. The tumors of the Dox-gel treated group also
showed increased apoptosis compared to control or Dox-treated groups.

The biodegradable polymeric hydrogel, poly(organophosphazene), is an injectable delivery


system that has been used to deliver Dox to treat solid tumors in murine mouse models [57,
61]. Poly(organophosphazene) transforms from an emulsion to a gel at body temperature. In
vitro studies at 370C in PBS showed a steady release of about 60% of Dox by 28 days.
Although intratumoral injections of the Dox treatment alone initially showed greater
antitumor efficacy (SNU-601, a gastric carcinoma), by day 12 the tumor gel-Dox treatment
inhibited tumor growth similar to the Dox-alone treatments (30 mg/kg). At day 12, all mice
in the Dox-treated group were euthanized because of significant weight loss. Compared to
the control saline-treated group in which their tumors had increased 200% at day 28, the low
dose (22.3 mg/kg) and high dose (44.5 mg/kg) groups of the polymer-Dox treated groups
had tumors which decreased by 50% and 75%, respectively. Notably, the toxicity of the gel
treated groups was markedly less than the Dox only treated group. Whereas all mice treated
with Dox alone (30 mg/kg) were euthanized by day 12 due to the high toxicity of the drug,
there were no significant untoward effects from the polymer-Dox gel groups for 28 days as
evidenced by their similar weight curves to the saline-treated group. The investigators
speculate that Dox is release at least in part from the degraded gel by lysosomal enzymes. In
another similar study, investigators used a thermosensitive biodegradable diblock polymer
([polyethylene glycol]-b-polycaprolactone), which formed a gel at 370C [62]. In mice
bearing B16F10 cancer xenografts, a single intratumoral injection of Dox-loaded MP gel

(0.4 mg, 20 mg/kg) inhibited the growth of tumors similar to repeated intratumoral injections
of Dox-only.

With the soluble solution of a phospholipid (E80), medium chain triglycerides, and ethanol
(PME), an intratumoral gel was formed containing high levels of Dox [58]. Upon injection
into the tumor, the ethanol diffused from PME enabling the gel to form. The optimal PME
ratio that allowed sustained release of Dox over a 14 day period was 72:17:11. The mice
bearing sarcoma 180 tumors had significant reduction in the size of the tumors treated with
the gel-Dox compared to the saline treated group. During the 14 days of therapy, there was
little to no increase in the size of the tumors. The dose of Dox entrapped within the gel of the

J Nanomed Nanotechnol. Author manuscript; available in PMC 2019 January 04.


Zhao et al. Page 12
tumor was 30 mg/kg. Compared to the intravenous Dox treatment group, there was
significantly more apoptosis in gel-Dox treated group. Moreover, the tumor-bearing mice
treated with the Dox-gel showed no toxicity during the 14 days of treatment. Their weight
gain was similar to saline treated mice. Consistent with the low toxicity, levels of Dox in the
serum from the gel were low and remained at 20–25 ng/ mL for several days. Moreover, at
various times up to the 14th day, the levels of Dox in the tumor remained high, yet normal
tissues had very low levels of Dox. In contrast, concentrations in serum of Dox-only (30 mg/
kg) injected in the tumor had significantly higher concentration of Dox transiently (2849 ng/
mL). The toxicity of the Dox-only was marked in that all mice died by 4 days, and similarly,
the mice injected iv with Dox died by the 7th day. Although administering the dose of Dox
in which the mice did not die from toxicity would have been helpful, this study shows a
promising biocompatible gel comprised of simple components [58].

Similarly, a phospholipid-based in situ-forming gel platform was developed for co-delivery


of Dox and bromotetrandrin (W198). By inhibiting the cellular efflux of Dox from tumor
cells, W198 can enhance the sensitivity of resistant tumors to Dox. The gel showed in vitro
sustained release of these two antitumor agents over a 20-day period. With a single
intratumoral injection, the gel-Dox-W198 (12 mg/kg) had the greatest inhibitory activity
compared to the other treatment groups. Whereas the gel-Dox-W198 inhibited resistant
MCF7/Adr tumors by 75%, the gel-Dox reduced tumor size by 52% compared to the control
saline group. In contrast to the intratumoral injection of the free solution of Dox and W198,
the gel delivery platforms had blood counts (hematocrit, RBC, WBC) within normal limits,
and there was no cardiotoxicity [63].

To treat colorectal tumors in a mouse model, a protein, zein, has been used to form a gel in
which Dox was incorporated [64]. Zein is a major storage protein that comprises about 50%
of the protein of corn. The zein-Dox was soluble in glycerol formal and became a gel as the
glycerol formal was replaced by physiologic buffer or interstitial tumor fluid. In vitro release
of Dox from the gels extended up to 7 days. Intratumoral injections of mice treated with
Dox-loaded gels (5 mg/kg) markedly reduced the tumor size compared to mice treated with
Dox-only or the untreated groups. The concentration of Dox in the zein-Dox group was
decreased in the blood, heart, and lungs compared to the free drug, raising the potential of
reduced side effects. Never-theless, the immunogenicity of zein in humans is a potential
concern for this strategy.

As discussed earlier, the group of Nishikawa injected intravenously a Dox-CpG plasmid to


reduce tumor growth [47]. In a later and very novel study, this group prepared a hydrogel
comprised of interlinking X-shaped CpG oliogonucleotides [53]. Combining Dox with the
immunogenic CpG hydrogel resulted in prolonged inhibition of colon carcinomas in vivo
compared to Dox-only, hydrogel alone, or CpG-free hydrogel.

Kim and colleagues developed a complexed delivery platform to deliver 5-FU and Dox [65].
The poly (lactic-co-glycolic acid (PLGA) microcapsule with the Dox was added to the
thermosensitive copolymer PEG-(polycaprolactone-poly-L-lactic acid) emulsion containing
5-FU. This emulsion was free flowing at room temperature and gellified at body
temperature. The delivery system was designed to release 5-FU in the first stage and Dox in
the second stage. High levels of both drugs with this formulation were found in the tumor
with little to negligible levels in normal tissues. Compared to either drug alone, the
combination of 5-FU and Dox inhibited significantly more the rapidly growing B16F10

J Nanomed Nanotechnol. Author manuscript; available in PMC 2019 January 04.


Zhao et al. Page 13
melanoma tumors in vivo. The size of the tumors in this combination-treated group
decreased by about 95% compared to the size of the control saline-treated group.
Author ManuscriptAuthor

Of the recently developed therapies tested for intratumoral delivery of Dox, one study was
distinctive in that only nanoparticles were injected [66]. They found that intratumoral
Author ManuscriptAuthor

injection of Dox conjugated to ultra-small gold nanoparticles (~5 nm) markedly inhibited
tumor growth of mouse and human tumors. The injections were given intratumorally every 2
to 3 days with each dose of Dox containing 0.2 mg/kg. On day 16, the sizes of Dox-resistant
B16 tumors in the PBS-, Dox alone-, and gold-Dox treatment groups were about 2000, 550,
and 300 mm3, respectively. Concomitant with the marked reduction in tumor size, the
goldDox treatment group had the greatest degree of apoptosis [66].
ManuscriptAuthor

Conclusion.
This review highlights the diverse number of NP carriers studied for enhanced therapeutic
application of Dox. The diversity and novelty also include tumor targeting ligands and
ManuscriptAuthor

ligand linkages attached to these nanostructures. At least short term, these Dox-loaded NPs
showed low toxicity compared to conventional Dox. Nevertheless, except for two studies of
these alternative carriers of Dox [17, 24], the remainder of the nanoparticles studied were not
TABLE

compared to FDA-approved nanoparticles such as Doxil®. This comparison would be


ManuscriptAuthor

helpful to ascertain whether these novel nanoparticles have advantages that would support
1

clinical development.
ManuscriptAuthor

One of the most immediate unmet needs for Dox is to address the frequent observance of
drug resistance to therapy. Mesoporous silica nanoparticles have been the most commonly
investigated carrier for the dual delivery of Dox and inhibitors targeting cellular resistance
(to Dox). Dox-resistance in cell lines is dependent on both pump and non-pump
Manuscript

mechanisms. Pump mechanisms include those that directly (i.e., MDR1/P-gp) or indirectly
(c-Jun) increase levels of Dox efflux. Alternatively, since NPs containing Dox are
endocytized and located near the perinuclear membrane, the cellular membrane efflux
Manuscript

mechanisms may be less effective in lowering doxorubicin levels compared to free


doxorubicin that passively enters the cell.
LOCAL DELIVERY OF DOXORUBICIN

The most developed of the delivery systems are the local formulations impregnated with
Dox. The local delivery systems show impressive inhibition of tumor growth in vivo. In
addition to recurrence of local disease, primary malignancies such as brain glioma may also
be treated with local therapy. The utility of local therapy with Dox compared to the surgical
removal or radiation therapy of the tumor remains to be established. Nevertheless, local
delivery platforms of Dox offer a great deal of promise for regional treatment of tumors,
tumors impending on vital structures, or tumors that rarely metastasize.

J Nanomed Nanotechnol. Author manuscript; available in PMC 2019 January 04.


Zhao et al. Page 14
Author ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor ManuscriptAuthor Manuscript

J Nanomed Nanotechnol. Author manuscript; available in PMC 2019 January 04.