Glukokortikoid Kulit Kepala sebagai Biomarker untuk Sindrom

Cushing Endogen: Validasi terhadap Dua Kohort Independen

Mesut Savas, Vincent L. Wester, Yolanda B. de Rijke, German Rubinsteind, Stephanie Zopp, Kristien
Dorst, Sjoerd A.A. van den Berg, Felix Beuschlein, Richard A. Feelders, Martin Reincke, Elisabeth F.C.
van Rossum

Abstrak

Latar Belakang / Tujuan: Pemeriksaan diagnostik dari sindrom Cushing (CS) memerlukan
berbagai tes yang hanya menemukan hasil paparan kortisol jangka pendek, sedangkan pasien
dengan CS endogen umumnya memiliki peningkatan kadar kortisol selama periode waktu yang
lebih lama. Penilaian kulit kepala muncul sebagai tes yang mudah digunakan dalam menemukan
hasil konsentrasi glukokortikoid selama periode waktu yang lama. Tujuan dari penelitian
multisenter, multinasional, prospektif, kontrol kasus ini adalah untuk mengevaluasi keefektifan
diagnostik glukokortikoid kulit kepala dalam skrining CS endogen. Metode: Kami menilai
kinerja diagnostik kortisol rambut (HairF), kortison rambut (HairE), dan jumlah keduanya
(sumHairF + E), yang diukur dengan teknik LC-MS / MS yang canggih, pada pasien yang tidak
diobati dengan CS endogen yang terkonfirmasi (n = 89) serta dalam kontrol komunitas (n = 295)
dari studi kohort Lifelines berbasis populasi. Hasil: Kedua glukokortikoid secara signifikan
meningkat pada pasien CS jika dibandingkan dengan kontrol. Efikasi diagnostik yang tinggi
ditemukan untuk HairF (area di bawah kurva 0,87 [95% CI: 0,83-0,92]), HairE (0,93 [0,89-
0,96]), dan sumHairF + E (0,92 [0,88-0,96]) (semua <0,001). Para peserta secara akurat
diklasifikasikan pada ambang batas optimal dalam 86% kasus (sensitivitas 81%, spesifisitas
88%, dan 94% nilai prediksi negatif [NPV]) oleh HairF, dalam 90% kasus (sensitivitas 87%, 90
% spesifisitas, dan 96% NPV) oleh HairE, dan dalam 87% kasus (sensitivitas 86%, spesifisitas
88%, dan 95% NPV) oleh sumHairF + E. HairE terbukti paling akurat dalam membedakan
pasien CS dari kontrol. Kesimpulan: Glukokortikoid rambut kulit kepala, terutama kortison
rambut, dapat dilihat sebagai biomarker yang menjanjikan dalam skrining untuk CS. Kemudahan
dalam pengumpulan dan pemeriksaan tambahan membuatnya layak untuk skrining lini pertama.

Kata kunci: Analisis rambut · Glukokortikoid · Diagnostik · Sindrom Cushing · Kortisol ·

Kortison
PENDAHULUAN

Cushing’s syndrome (CS) dihasilkan dari paparan berlebihan terhadap hormon

glukokortikoid serta dikaitkan dengan morbiditas dan mortalitas yang signifikan. Setelah
pengecualian CS eksogen yang disebabkan oleh obat yang mengandung glukokortikoid, berbagai
penyakit endogen dapat meningkatkan sekresi kortisol. Sekitar 70% kasus CS endogen
disebabkan oleh adenoma hipofisis yang menghasilkan ACTH berlebihan, menstimulasi adrenal
untuk memproduksi kortisol (mis., Sindrom Cushing). Sisa kasus CS endogen sebagian besar
terdiri dari penyebab adrenal dan produksi ACTH ektopik.

CS endogen jarang terjadi tetapi sering disertai dengan tanda dan gejala yang tidak
spesifik seperti penambahan berat badan, kelelahan, fitur sindrom metabolik, dan depresi. Ciri
yang lebih spesifik untuk CS termasuk mudah memar, muka kemerahan, dan miopati proksimal,
tetapi ini tidak terjadi pada semua pasien. Dilema klinis ini dapat menyebabkan keterlambatan
yang signifikan dalam diagnosis, yang sering dibuat ketika pasien memiliki kondisi tersebut
untuk jangka waktu yang lama dan pasien menampilkan banyak tanda dan gejala CS. Pedoman
saat ini merekomendasikan tiga tes skrining lini pertama yang berbeda: urinary free cortisol 24
jam (UFC), late-night salivary cortisol (LNSC), dan tes penekan deksametason 1 mg. Ketiga tes
bergantung pada kepatuhan pasien untuk pengumpulan sampel atau asupan obat, dan
keterbatasan mereka sering mengharuskan pengujian berulang. Selain itu, tes-tes ini dapat
dipengaruhi oleh beberapa faktor seperti fungsi ginjal (untuk UFC), mikrotrauma gingiva (untuk
LNSC), dan konsumsi obat (untuk tes penekan deksametason).

Penelitian terbesar sejauh ini menggunakan pengukuran kortisol rambut pada pasien
dengan CS. Rambut kepala memberikan informasi tentang paparan kortisol terintegrasi selama
berbulan-bulan. Hal ini sangat bermanfaat pada CS, di mana produksi kortisol bervariasi di
setiap hari. Dalam penelitian kami, kortisol rambut memberikan sensitivitas 93% dan spesifisitas
91% untuk CS, dibandingkan dengan tes lini pertama. Selanjutnya, analisis rambut dapat
digunakan untuk membuat garis waktu retrospektif dari paparan kortisol, yang dapat membantu
dalam kasus CS yang berulang.

Semua penelitian mengukur kortisol rambut pada CS mengandalkan immunoassays untuk

mengukur kortisol. Kemajuan terbaru dalam pengembangan analisis steroid rambut adalah profil
steroid rambut menggunakan liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS / MS).
Kami memvalidasi metode yang mengukur nilai rambut dari kortisol, kortison, testosteron,
androstenedion, dehydroepiandrosterone sulfate, dan 17α-hydroxyprogesterone. Berbeda dengan
immunoassay, LC-MS / MS kurang rentan terhadap gangguan, menawarkan sensitivitas yang
lebih tinggi, dan dapat digunakan untuk mengukur beberapa steroid secara bersamaan. Tujuan
dari penelitian ini adalah untuk menilai efektivitas diagnostik kortisol rambut (HairF) dan
kortison (HairE) yang diukur dengan LC-MS / MS dalam dua kohort yang dikumpulkan secara
independen dari pasien dengan CS endogen.

Subjek dan Metode

Peserta Studi

Peserta penelitian kami terdiri dari 295 kontrol dari masyarakat umum Belanda, yang
juga telah dimasukkan dalam penelitian kami sebelumnya, dan 89 pasien dengan CS terbukti
endogen. Semua kontrol direkrut dari Lifelines, yang merupakan studi kohort multidisiplin,
prospektif, berbasis populasi memeriksa dalam desain tiga generasi yang unik perilaku kesehatan
dan kesehatan yang terkait dengan 167.729 orang yang tinggal di utara Belanda. Penelitian ini
melakukan berbagai prosedur investigasi dalam menilai faktor-faktor biomedis, sosiodemografi,
perilaku, fisik, dan psikologis yang berkontribusi pada kesehatan dan penyakit populasi umum,
dengan fokus khusus pada multimorbiditas dan genetika kompleks. Pasien direkrut dari dua
lokasi klinik, satu di Belanda (Erasmus MC, Rotterdam; n = 19) dan satu di Jerman (Klinikum
der Ludwig-Maximilians-Universität München, Munich; n = 70). Pemeriksaan diagnostik
dilakukan sesuai dengan pedoman dan diagnosis CS, de novo atau berulang, secara biokimia
didirikan oleh ahli endokrin yang berpengalaman dan dibuktikan dengan pembedahan dan / atau
penyelidikan tambahan (mis., Pengambilan sampel sinus petrosal inferior bilateral).

Pengukuran Kulit Kepala

Pada semua peserta, sampel kulit kepala sekitar 100-150 rambut dikumpulkan dari
verteks posterior. Rambut dipotong sedekat mungkin dengan kulit kepala dan setelah
pengumpulan sampel disimpan dalam amplop gelap pada suhu kamar. Protokol untuk
pemprosesan dan analisis rambut diadaptasi dari metode sebelumnya yang dijelaskan secara rinci
di tempat lain. Singkatnya, sekitar 20 mg proksimal 3 cm (atau seluruh panjang sampel rambut,
jika rambutnya lebih pendek dari 3 cm) ditimbang dan dipotong menjadi potongan sepanjang 1
cm. Rambut dicuci dalam 2 mL isopropanol grade LCMS selama 2 menit dan dibiarkan kering
sepenuhnya. Steroid diekstraksi semalam dalam 1,4 mL metanol LCMS-grade, dan 100 μL
cortisold3 dan cortisone-d8 sebagai standar internal selama 18 jam pada 25 ° C sementara sampel
diguncang dengan lembut. Setelah ekstraksi, sampel rambut disentrifugasi pada 4.369 g (4.500
rpm) selama 5 menit, dan 900 μL ekstrak dipindahkan ke tabung bersih. Kami kemudian
menambahkan 750 μL metanol ke sampel rambut, yang dipintal lagi, setelah itu ekstrak 900 μL
dipindahkan ke tabung dengan ekstrak. Ekstrak diuapkan di bawah aliran nitrogen kontinu pada
37 ° C, dilarutkan dalam 1 mL air murni dan 20 μL metanol, dan dimurnikan menggunakan
ekstraksi fase padat.

Tabel 1. Karakteristik deskriptif dan glukokortikoid rambut kontrol dan pasien sindrom
Cushing

Konsentrasi kortisol dan kortison kemudian diukur dengan LC-MS / MS menggunakan

sistem Xevo TQ-S (Wates, Milford, MA, USA). HairF dan HairE berhasil ditentukan pada 91
dan 97% dari peserta penelitian. Data pada kedua glukokortikoid rambut tersedia untuk 89% dari
populasi penelitian. Koefisien variasi interassay untuk kortisol dan kortison masing-masing
adalah 14,8 dan 15,3%. Variasi koefisien intra-assay untuk kortisol dan kortison masing-masing
adalah <11 dan <8%. Batas kuantifikasi kortisol dan kortison yang lebih rendah adalah masing-
masing <1,3 dan <9,3 pg / mg. Untuk tujuan penelitian, pengukuran HairF dan HairE di bawah
batas kuantifikasi dimasukkan dalam analisis sebagai tindakan kuantitatif, karena tidak ada
metode substitusi yang diakui.
 Analisis statistik

Kami menggunakan SPSS versi 24 (IBM Corp., Armonk, NY, USA) dan RStudio versi
1.0.136 (RStudio, Inc., Boston, MA, USA) dengan paket pROC untuk analisis statistik. Nilai-
nilai glukokortikoid rambut secara logaritma ditransformasikan untuk mencapai distribusi
normal dan dilaporkan sebagai sarana geometrik dan 95% CI. Karakteristik dasar dianalisis
menggunakan ANCOVA jika berlanjut, dan menggunakan χ2 tes jika dikategori. Asosiasi antara
HairF dan HairE dinilai oleh korelasi Pearson. Efikasi diagnostik HairF, HairE, dan jumlah
HairF dan HairE (sumHairF + E) untuk skrining CS dinilai menggunakan kurva karakteristik
operasi penerima (ROC).

Cutoff optimal, didefinisikan sebagai titik kurva yang paling dekat dengan sudut topleft,
awalnya ditentukan untuk kohort 1 dan 2 secara terpisah. Untuk analisis utama, kedua kohort
digabungkan dan nilai cutoff optimal ditentukan untuk populasi lengkap. Tes DeLong digunakan
untuk membandingkan kurva ROC antara kedua kohort. Analisis berpasangan juga dilakukan
untuk menilai kemampuan membedakan hasil yang berbeda relatif satu sama lain. Selain itu,
kami menghitung akurasi diagnostik (yaitu, persentase subjek yang diklasifikasikan dengan
benar) dan parameter kinerja diagnostik lainnya (yaitu, sensitivitas, spesifisitas, positive
predictive value [PPV], nilai prediksi negatif [NPV], positive likelihood ratio [LR +], dan
negative likelihood ratio [LR-]). Dengan adanya variasi intraindividual dan interassay, kami juga
menghitung parameter kinerja diagnostik pada level 15 dan 30% lebih tinggi dan lebih rendah
daripada cutoff optimal. Selanjutnya, kami melakukan analisis sensitivitas untuk
memperhitungkan efek potensial glukokortikoid eksogen pada konsentrasi glukokortikoid
rambut. Kami mengulangi analisis ROC utama dengan hanya non pengguna dalam kelompok
kontrol. Hal ini menghasilkan pengecualian dari total 38 kontrol yang telah menggunakan semua
jenis glukokortikoid eksogen dalam 3 bulan sebelumnya. Di antara peserta ini, analisis rambut
berhasil pada 36/38 untuk HairF dan sumHairF + E, dan di 37/38 untuk HairE. Semua hasil
dianggap signifikan secara statistik dalam hal nilai p <0,05.

Hasil

Karakteristik Deskriptif dan Konsentrasi Glukokortikoid Rambut

 Karakteristik dan konsentrasi subyek glukokortikoid rambut ditunjukkan pada Tabel 1
dan Gambar 1. Rata-rata, kontrol lebih muda (42,3 tahun) dibandingkan pasien (50,2 tahun).
Mayoritas peserta adalah perempuan dalam kelompok kontrol (74,6%) dan kelompok CS
(74,2%). Glukokortikoid rambut yang dikelompokkan berdasarkan jenis kelamin ditunjukkan
pada Tabel S1 tambahan online (lihat www. Karger.com/doi/10.1159/000498886 untuk semua
bahan tambahan online). Secara umum, pria memiliki tingkat yang lebih tinggi dalam semua
pengukuran; Namun, perbedaan jenis kelamin yang signifikan dalam tiga indeks hanya ada pada
kontrol. Pasien CS pria dan wanita memiliki nilai yang lebih tinggi dibandingkan kontrol dari
jenis kelamin yang sama (semua p <0,001). Secara keseluruhan, ada hubungan linier yang kuat
antara HairF dan HairE (r = 0,821, p <0,001). Rata-rata geometris HairF lebih tinggi pada pasien
CS kohort 1 (17,3 pg / mg [95% CI: 9,5-31,3]) dan kohort 2 (11,7 pg / mg [95% CI: 8,5-16,2])
daripada di kontrol (2,7 pg / mg [95% CI: 2,5-2,9]) (keduanya p <0,001). HairE juga secara
signifikan lebih tinggi pada pasien (kelompok 1: 37,9 pg / mg [95% CI: 21,7-66,3]; kelompok 2:
40,9 pg / mg [95% CI: 30,8-54,4]) dibandingkan pada kelompok kontrol (8,2 pg / mg [95% CI:
7,8-8,7]) (keduanya p <0,001). Rata-rata geometrik dari jumlah kedua glukokortikoid rambut
juga lebih tinggi pada pasien CS dibandingkan pada kontrol. Tidak ada perbedaan yang
signifikan secara statistik dalam glukokortikoid rambut antara dua kelompok pasien.

Gambar. 1. Distribusi konsentrasi glukokortikoid rambut pada kontrol dan pasien sindrom
Cushing. Hair cortisol (HairF), hair cortisone (HairE), dan jumlah keduanya (sumHairF + E)
ditunjukkan untuk kontrol komunitas, serta untuk pasien sindrom Cushing dari dua kohort
independen. Data untuk setiap kelompok dirangkum sebagai rata-rata geometrik dengan CI 95%
yang sesuai. Garis hitam pekat sesuai dengan nilai cutoff optimal, dan garis putus-putus di atas
dan di bawah mengindikasikan level yang masing-masing sesuai dengan 15 dan 30% di atas dan
di bawah nilai cutoff optimal.

Efikasi Diagnostik Glukokortikoid Rambut untuk Skrining CS

Kurva ROC dengan parameter kinerja diagnostik yang sesuai untuk HairF, HairE, dan
sumHairF + E digambarkan pada Gambar 2. Analisis yang dikelompokkan berdasarkan jenis
kelamin ditunjukkan pada suplemen online Gambar S1. Ketiga indeks menunjukkan keefektifan
diferensiasi yang sangat signifikan di antara pasien CS dari kedua kohort secara terpisah dan
kombinasi (p <0,001 untuk semua area di bawah kurva [AUCs]).

Untuk HairF, cutoff optimal 4,7 pg / mg (AUC 0,87 [95% CI: 0,83-0,92]) diamati,
dengan akurasi 86%, sensitivitas 81%, dan spesifisitas 88%. Hasil tes positif mengkonfirmasi CS
dengan probabilitas 68%, sedangkan NPV adalah 94%. Sehubungan dengan HairE, analisis ROC
menghasilkan cutoff optimal 13,8 pg / mg (AUC 0,93 [0,89-0,96]). Hal ini memungkinkan
identifikasi yang benar dari 74/85 pasien CS dan 261/289 kontrol, yang sesuai dengan akurasi
90%, sensitivitas 87%, dan spesifisitas 90%. PPV dan NPV dengan HairE masing-masing adalah
73 dan 96%. Jumlah kedua glukokortikoid rambut juga menunjukkan keefektifan diagnostik
yang tinggi dengan AUC 0,92 (95% CI: 0,88-0,96). Pemotongan sumHairF + E yang optimal
adalah 18,9 pg / mg, dengan sensitivitas yang sesuai 86% dan spesifisitas 88%. Pada cutoff ini,
69/80 pasien CS dan 230/262 kontrol diidentifikasi dengan benar, menghasilkan akurasi 87%
dengan PPV 68% dan NPV 95%.

Dalam konteks analisis sensitivitas untuk memperhitungkan efek yang berpotensi

mempengaruhi obat yang mengandung glukokortikoid, kami menemukan AUC yang hampir
identik ketika hanya non pengguna yang dianggap sebagai kontrol (p <0,001 untuk ketiga indeks;
data tidak ditampilkan). Selain itu, tingkat cutoff optimal dengan sensitivitas dan spesifisitas
yang sesuai juga kira-kira sama untuk HairF (4,7 pg / mg; sensitivitas 81%, spesifisitas 87%),
HairE (13,8 pg / mg; sensitivitas 87%, spesifisitas 89%), dan sumHairF + E (16,2 pg / mg;
sensitivitas 89%, spesifisitas 85%). Akurasi diagnostik pada level ini adalah 86% untuk HairF,
89% untuk HairE, dan 86% untuk sumHairF + E.
 Cutoff optimal untuk semua hasil lebih rendah pada kelompok 2 dibandingkan pada
kelompok 1; Namun, hanya jumlah glukokortikoid rambut yang berbeda secara statistik dalam
efikasi diagnostik antara kedua kelompok (Gbr. 3). Analisis ROC berpasangan dari
glukokortikoid rambut menunjukkan bahwa HairE dan sumHairF + E lebih akurat daripada
HairF dalam skrining CS pada populasi penelitian lengkap (keduanya p <0,010; Gambar 4),
sedangkan HairE sedikit lebih akurat daripada nilai penjumlahan. (p = 0,041).

Gambar. 2. Analisis kurva karakteristik operasi penerima dari kinerja diagnostik glukokortikoid
rambut untuk sindrom Cushing. Titik merah mengacu pada nilai OC untuk skrining sindrom
Cushing. Tabel ini merangkum berbagai parameter kinerja diagnostik pada level OC dan level
tertentu lainnya. AUC, area di bawah kurva; HairE, konsentrasi kortison rambut; HairF,
konsentrasi kortisol rambut; sumHairF + E, jumlah HairF dan HairE; OC, ambang batas cutoff
optimal; LR, rasio kemungkinan; NPV, nilai prediksi negatif; PPV, nilai prediksi positif; Sens,
sensitivitas; Spec, spesifisitas.

Diskusi

Dalam studi multicenter ini, kami mengevaluasi keefektifan diagnostik kortisol rambut
kulit kepala dan konsentrasi kortison yang diukur dengan LC-MS / MS untuk skrining CS pada
dua kohort pasien independen. Kami menunjukkan bahwa kedua glukokortikoid secara
signifikan meningkat pada pasien bila dibandingkan dengan kontrol komunitas, sementara tidak
ada perbedaan antara kohort pasien. Sehubungan dengan kinerja diagnostik, kami menemukan
kapasitas diferensiasi tinggi HairF (akurasi 86%, sensitivitas 81%, dan spesifisitas 88%), HairE
(akurasi 90%, sensitivitas 87%, dan spesifisitas 90%), dan jumlah keduanya (akurasi 87%,
sensitivitas 86%, dan spesifisitas 88%). Tidak termasuk pengguna glukokortikoid eksogen dalam
kelompok kontrol mengungkapkan tidak ada efek signifikan pada temuan ini. Analisis
berpasangan menunjukkan bahwa HairE lebih akurat daripada HairF atau jumlah keduanya
dalam membedakan pasien dari kontrol.

Gambar 3. Perbandingan kurva karakteristik operasi penerima untuk skrining sindrom Cushing
oleh glukokortikoid rambut antara dua kohort pasien independen. HairE, konsentrasi kortison
rambut; HairF, konsentrasi kortisol rambut; sumHairF + E, jumlah HairF dan HairE.
Gambar 4. Analisis berpasangan untuk perbedaan efikasi diagnostik antara glukokortikoid
rambut untuk skrining sindrom Cushing. Hair cortisone (HairE) lebih akurat daripada hair
cortisol (HairF) dan jumlah dari kedua glukokortikoid (sumHairF + E) dalam membedakan
pasien dengan sindrom Cushing dari kontrol. sumHairF + E juga secara statistik lebih baik
daripada HairF sehubungan dengan keefektifan diagnostik.

Penilaian konsentrasi kortisol pada rambut kulit kepala sebelumnya telah dilakukan untuk
membandingkan level antara pasien CS dan kontrol. Penelitian yang dipublikasikan secara
konsisten menunjukkan peningkatan yang jelas pada pasien di segmen rambut proksimal 1 dan 3
cm. Kami juga telah menyelidiki keefektifan diagnostik HairF dalam membedakan pasien CS
dari kontrol yang sehat, serta pasien yang diduga CS tetapi pada siapa diagnosis akhirnya
dikeluarkan. Sensitivitas dan spesifisitas tinggi diamati dengan cutoff optimal yang serupa untuk
kedua analisis. Namun, penelitian ini dan sebelumnya hanya menganalisis HairF dan telah
melakukan analisis dengan immunoassay, rentan terhadap reaktivitas silang dan lebih rendah
daripada LC-MS / MS sehubungan dengan selektivitas dan deteksi. Temuan produksi lokal 11β-
hydroxysteroid dehydrogenase (11β-HSD) tipe 1 dan 2 - yang masing-masing, bertanggung
jawab untuk konversi kortison menjadi kortisol dan sebaliknya - di kulit, folikel rambut, dan
pelengkap kulit lainnya juga mempersulit interpretasi temuan sebelumnya pada pasien CS. Oleh
karena itu tetap dipertanyakan apakah konsentrasi kortisol rambut yang diukur hanya
mencerminkan paparan kortisol di masa lalu yang sebenarnya atau apakah ini diubah karena
konversi lokal oleh 11β-HSD.
 Di sini, kami menunjukkan untuk pertama kalinya bahwa HairF dan HairE meningkat
pada pasien CS dan bahwa kedua glukokortikoid memiliki keefektifan diagnostik yang tinggi.
Selain itu, kami menunjukkan kinerja diagnostik HairE yang relatif lebih baik dalam
membedakan pasien dari kontrol bila dibandingkan dengan HairF. Tes lain yang juga rentan
terhadap efek konversi lokal adalah tes skrining lini pertama dengan kortisol saliva - hal ini
karena aktivitas 11β-HSD2 dalam jaringan parotid. Sebuah studi sebelumnya oleh Perogamvros
et al. berfokus pada kedua glukokortikoid saliva pada pasien noncushingoid dan ditemukan,
serupa dengan penelitian saat ini, konsentrasi kortison yang lebih tinggi daripada kortisol,
sedangkan yang sebaliknya berlaku untuk fraksi bebas dalam serum. Menariknya, pengambilan
sampel setelah stimulasi adrenal dengan injeksi ACTH menunjukkan kortison saliva untuk
mencerminkan kortisol serum bebas lebih akurat daripada kortisol saliva. Evaluasi kortisol saliva
dan kortison dalam penelitian lain dengan pasien CS memang mengungkapkan akurasi
diagnostik yang tinggi dari kedua tindakan. Selain itu, penelitian terbaru oleh Kapoor et al.
dengan eksperimen kortisol radiolabel pada primata menegaskan bahwa kortisol yang
bersirkulasi diambil di rambut dan dapat diukur. Yang penting, penulis juga menunjukkan bahwa
sebagian besar kortisol yang diberikan dimasukkan sebagai kortison. Namun, penelitian lebih
lanjut diperlukan untuk memahami dinamika antara kortisol dan kortison di tingkat lokal dan
untuk menyelidiki nilai tambahan pengukuran kortison.

Keefektifan diagnostik tes skrining tergantung pada nilai cutoff yang dipilih untuk
membedakan pasien dari subyek tanpa penyakit. Hal ini membuatnya sulit untuk menempatkan
hasil kami dalam konteks tes yang direkomendasikan. Namun demikian, Elamin et al. secara
sistematis merangkum dan mengumpulkan hasil tes tradisional dalam pemeriksaan diagnostik
CS. Berdasarkan hal ini, efikasi diagnostik glukokortikoid rambut, terutama HairE, tampaknya
sangat mirip dengan midnight kortisol saliva (pooled LR + 8.8 dan LR- 0.1) dan UFC (pooled
LR + 10.6 dan LR– 0.2), meskipun sebagian besar dari studi yang dimasukkan memiliki populasi
kecil dengan prevalensi CS yang cukup tinggi. Karena diagnosis CS tidak dapat mengandalkan
tes skrining tunggal, penelitian lebih lanjut terutama harus membahas efektivitas diagnostik
glukokortikoid rambut dalam kombinasi dengan tes yang direkomendasikan lainnya. Selain itu,
seperti yang disebutkan dalam pedoman dan juga diamati di sini, ada sebagian besar positif palsu
dengan tes skrining, karena antara lain tingginya prevalensi kondisi cushingoid seperti
hiperkortisolistik (ringan), seperti gangguan kejiwaan, diabetes mellitus , dan obesitas) dan
jarangnya kejadian CS. Oleh karena itu, rekomendasi untuk membatasi pengujian pada subjek
dengan probabilitas a priori yang tinggi untuk memiliki CS dapat secara wajar diperluas ke
penilaian glukokortikoid rambut.

Tes skrining saat ini tunduk pada beberapa kesulitan dan keterbatasan yang kurang parah
atau sama sekali tidak ada dengan pengukuran rambut kulit kepala. Dari perspektif pasien,
pengambilan sampel rambut bersifat non-invasif dan tidak memerlukan instruksi spesifik berikut
(misalnya, pengumpulan output urin selama setidaknya 24 jam berturut-turut untuk UFC) atau
memaksakan pembatasan (misalnya, berpuasa atau tidak menyikat gigi sebelum pengumpulan air
liur untuk LNSC) karena dengan tes yang direkomendasikan; juga, sampel rambut dapat
dikumpulkan, disimpan, dan diposkan melalui pos dengan mudah, yang sangat berguna bagi
pasien yang harus menempuh jarak jauh ke lokasi klinik. Untuk para profesional perawatan,
mudah bahwa pengukuran rambut tidak tergantung pada waktu kerjasama pasien atau hari dan
tidak dipengaruhi oleh stres akut. Fitur unik dari pengukuran ini yang mencakup paparan
glukokortikoid jangka panjang membuatnya juga berguna dalam skrining CS siklikal. Pedoman
saat ini merekomendasikan pengukuran UFC atau kortisol saliva jika dicurigai siklus CS;
Namun, tes ini dapat menghasilkan hasil yang normal ketika pasien diskrining setelah
peningkatan berkala kadar kortisol. Kami sebelumnya menunjukkan kegunaan pengukuran
rambut dalam situasi seperti itu pada beberapa pasien yang memiliki hasil tes skrining normal
pada saat evaluasi tetapi secara retrospektif meningkatkan konsentrasi kortisol dalam segmen
rambut yang sesuai dengan periode tanda dan gejala cushingoid.

Sejumlah besar pasien dan kontrol dan evaluasi multicenter adalah di antara kekuatan
utama dari pekerjaan saat ini. Selain itu, semua konsentrasi glukokortikoid rambut ditentukan
dengan sensitivitas dan spesifisitas tinggi menggunakan teknik LC-MS / MS yang canggih. Studi
ini, terbatas pada cara kontrol dari komunitas tidak diskrining untuk CS. Namun demikian,
mengingat kelangkaan gangguan ini, dengan kurang dari 5 kasus per juta orang, sangat tidak
mungkin bahwa kontrol dikelompokkan secara keliru. Selain itu, hasilnya tidak disesuaikan
untuk perancu potensial seperti paparan UV, mencuci rambut, atau diabetes mellitus. Namun,
dipertanyakan apakah faktor-faktor ini akan secara substansial mempengaruhi hasil, karena
perbedaan besar (5-6 kali lipat) antara kontrol dan pasien CS di tingkat glukokortikoid rambut.
 Sebagai kesimpulan, penilaian rambut kulit kepala untuk glukokortikoid rambut,
khususnya konsentrasi kortison, menunjukkan keefektifan diagnostik yang tinggi dalam
membedakan pasien CS dari kontrol. Karena kesederhanaan dan pengambilan sampel non-
invasif, serta kinerja diagnostiknya, hal ini dapat dilihat sebagai biomarker yang menjanjikan dan
potensi tambahan untuk armamentarium dari tes skrining CS. Untuk memungkinkan penggunaan
nilai cutoff tetap yang seragam, kami menyarankan upaya lebih lanjut untuk membakukan atau
menyelaraskan hasil antara pusat internasional.