Nama : Anak Agung Ngurah Dwi Tisna Adi Putra

NIM : P07134019146

Kelas :IIIC

Mata Kuliah :Hematologi I

Pemeriksaan Hemoglobin Metode Cyanomethemoglobin

 Tujuan Pembelajaran
Tujuan dari video ini adalah untuk memberi informasi kepada penonton tentang perkiraan
hemoglobin dengan metode Drabkin.
Sorotan video ini:
- Prinsip
- Prosedur
- Kontrol Kualitas
- Interpretasi hasil

Hemoglobin dengan metode cyanomethemoglobin adalah metode yang

direkomendasikan secara internal untuk menentukan hemoglobin.

 Prinsip
Darah diencerkan dalam larutan reagen (potassium cyanide and potassium ferricyanide).
Kemudian mengubah hemoglobin menjadi methemoglobin yang diubah menjadi
cyanmethemoglobin oleh potassium cyanide. Absorbansi larutan kemudian diukur dalam
spektrofotometer pada panjang gelombang 540 nm atau dalam kalorimeter menggunakan
filter kuning-hijau.
 Peralatan :
- Mikropipet
- Colorimeter atau spektrofotometer terapan
 1. Prinsip penerapan yang sama
2. Panjang gelombang estimasi yang tersedia berbeda
 Reagen
1. Larutan Drabkin's
- Mempunyai pH 7,0-7,4, pH ini harus dicek setiap bulan dan harus dipertahankan
pH nya 7,0-7,4
- Tidak stabil jika terkena cahaya dan dapat disimpan pada suhu ruangan
- Disimpan dalam suhu kamar dalam botol borosilikat coklat untuk beberapa bulan
- Reagen harus bening dan berwarna kuning pucat
- Reagen tidak boleh dibekukan
- Ketika diukur terhadap air sebagai blanko VEL dalam spektrofotometer pada
panjang gelombang 540 nm
- Jika suhu ruang lebih tinggi dari 30°C kemudian simpan di lemari es tetapi
dibawa suhu kamar sebelum digunakan

Reagen harus di buang jika :

- Keruh
- pH tidak sesuai
- Jangan memipet reagen menggunakan mulut
2. Hb standard
- Tersedia secara komersial pada konsentrasi tertentu
- Disimpan dalam botol coklat karena bersifat fotosensitif
- Paparan cahaya menyebabkan penurunan kekuatan standar
- Konsentrasi standard yang digunakan adalah 14,8 g %
 Sampel EDTA (sampel darah vena atau dengan darah kapiler pada jari)
 Prosedur
1. Ambil 5ml larutan Drabkin taruh di dalam tabung reaksi
2. Campur sampel darah dengan inversi lembut (homogenkan sampel)
3. Pipet 2 ml darah kemudian usap permukaan luar pipet dengan kertas tisu untuk
membuang kelebihan darah
4. Masukkan pipet ke dalam tabung yang berisi larutan Drabkin dan keluarkan darah
 secara perlahan ke dalam larutan.
5. Aduk rata dan diamkan selama 15 menit ukur absorbansi larutan ini pada 540 nm
6. Dalam spektrofotometer setelah mengatur kerapatan optik pada nol dengan
menggunakan larutan drabkin sebagai blanko.

 Menghitung konsentrasi hemoglobin dalam sampel dengan menggunakan rumus

atau kurva

Rumus : Konsentrasi standar hemoglobin =

(absorban sampel / absorban standar X konsentrasi standar)

Konsentrasi standar tersedia pada kit insert

Ukur absorbansi terhadap blanko larutan drabkin

 Penyusunan kurva standar estimasi hemoglobin dengan metode

cyanmethemoglobin
Di laboratorium di mana beberapa sampel diuji dalam sehari, ini adalah latihan
penting untuk membakukan metode pengujian. Untuk itu, Anda memerlukan konsesi
drop dan standar hemoglobin.
1. Konsentrasi standar yang digunakan adalah 14,8 g %
2. Standar HiCN referensi internasional WHO juga tersedia secara komersial
sebagai sampul bersegel 10 ml & stabil selama bertahun-tahun
3. Buat pengenceran dari larutan standar dengan larutan drabkin
4. Dalam tabung reaksi pertama ambil 5 ml larutan drabkin
5. Pada tabung reaksi kedua buat satu ml standar dengan 4 ml larutan drabkin,
Pengenceran standar adalah pengenceran 1 dalam 5 atau 0,2
6. Pada tabung reaksi ketiga membuat 2 ml standar dengan 3 ml larutan drabkin.
Faktor pengenceran di sini akan menjadi 0,4.
7. Pada tabung reaksi keempat campurkan 3ml standar dengan 2 ml larutan drabkin,
Faktor pengenceran adalah 0,6.
 8. Pada tabung reaksi kelima campurkan 4ml standar dengan 1 ml larutan drabkin, di
sini faktor pengencerannya adalah 0,8.
9. Dalam tabung reaksi keenam, ambil 5 ml larutan standar, factor pengenceranya
adalah 1,0
10. kekuatan standar diketahui yaitu 14,8 g/dl

Nilai hemoglobin dapat dihitung dengan : Pengenceran vaktor X kekuatan standard

Setelah OD sampel diambil, nilai Hb yang sesuai dapat langsung terbaca, dengan
memplot pada grafik

TT Standard vol Larutan drabkin vol Faktor Nilai dari

no. (mL) (mL) pengenceran HB
1. 0 5 0 (0/5) 0.0
2. 1 4 0.2 (1/5) 2.9
3. 2 3 0.4 (2/5) 5.9
4. 3 2 0.6 (3/5) 8.9
5. 4 1 0.8 (4/5) 11.8
6. 5 0 1.0 (5/5) 14.8
Kurva kalibrasi baru harus disiapkan kapan pun
1. metode tes
2. colorimeter
3. jenis kuvet diubah
4. banyak reagen
 Keuntungan :
1. Semua dari Hb kecuali sulfhemoglobin diubah menjadi cyanmethemoglobin
2. Kesalahan visual dihilangkan karena tidak diperlukan pencocokan warna
3. Standar referensi yang handal dan stabil tersedia dari WHO
 Kerugian :
1. Kalium sianida adalah zat beracun
2. Laju konversi darah yang mengandung karboksihemoglobin sangat lambat
3. Protein plasma abnormal menyebabkan kekeruhan
4. Jumlah leukosit yang tinggi menyebabkan kekeruhan pada pengenceran darah
Tentang referensi :
Brith Day Day 7 Day 1 bulan 2 3-6 1 tahun 2-6 6-12
3 14 bulan bulan tahun tahun
14-22 5-11 13.5- 12.5- 11.5-16.5 9.4-13 11.1- 11.1- 11-14 11.5-
21.5 20.5 14.1 14.1 15.5

pria wanita
13-17 12-15