Anda di halaman 1dari 1

Daun sawi muda dicuci hingga bersih dan dikeringkan dengan tissue.

Kemudian ditimbang sebanyak 300


mg, dihaluskan dan dimasukkan ke dalam tabung mikro steril. Ditambahkan 250 πL buffer ekstraksi dan
100 πL mercaptoethanol. Divortex selama 5 detik. Selanjutnya inkubasi tabung sampel kedalam
waterbath dengan suhu 60°C selama 30 menit, tiap 10 menit divortex. Ditambahkan kloroform :
isoamilalkohol (24:1) sebanyak 1x volume sampel kedalam tabung sampel. Lalu dikocok selama 10 menit
kemudian disentrifugasi dengan kecepatan 15.000 x g selama 5 menit pada suhu 4°C. Supernatan
diambil dan dipindahkan kedalam tabung 1,5 ml baru. Kemudian ditambahkan isopropanol dingin
sebanyak 1x volume sampel kedalam tabung sampel. Dikocok dan diinkubasi pada suhu -20°C (freezer)
selama 30 menit. Lalu disentrifugasi dengan kecepatan 15.000 x g selama 5 menit. Dibuang supernatan
didalam tabung, dan ditambahkan etanol 70% sebanyak 100 πL. Kemudian disentrifugasi dengan
kecepatan 12.000 x g selama 10 menit. Supernatan dalam tabung dibuang dan diresuspensi dengan 100
πL buffer TE. Dan disimpan pada suhu -20°C

Anda mungkin juga menyukai