Jurnal Kedokteran Hewan Sangkot Sayuti Nasution, dkk

ISSN : 1978-225X

DETEKSI IMUNOHISTOKIMIA ANTIGEN Coxiella burnetii SEBAGAI

PENYEBAB Q FEVER PADA SAPI
Immunohistochemical Detection of Coxiella burnetii as Etiological Agent of Q Fever in Cattle
Sangkot Sayuti Nasution1,2, Agus Setiyono1, dan Ekowati Handharyani1
1
Laboratorium Patologi Departemen Klinik Reproduksi dan Patologi Institut Pertanian Bogor, Bogor
2
Balai Veteriner Medan, Medan
E-mail: sansaynas@gmail.com

ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan mendeteksi keberadaan antigen Coxiella burnetii sebagai penyebab Q fever pada organ sapi yang dikumpulkan di
rumah potong hewan (RPH) Kota Medan dan Kabupaten Deli Serdang. Pada penelitian ini telah dikumpulkan organ limpa, paru-paru, dan hati
dari 162 ekor sapi. Sampel organ tersebut kemudian diperiksa secara imunohistokimia dengan metode streptavidin peroksidase untuk melihat
keberadaan antigen Coxiella burnetii menggunakan antibodi poliklonal terhadap Coxiella burnetii. Hasil pemeriksaan imunohistokimia
menunjukkan 62/162 (38,3%) sampel sapi imunoreaktif terhadap Coxiella burnetii. Berdasarkan asal pengambilan sampelnya, sebanyak 40/101
(39,6%) sampel sapi yang berasal dari RPH Kota Medan dan 22/61 (36,1%) sampel sapi yang berasal dari RPH di Kabupaten Deli Serdang
menunjukkan hasil imunoreaktif. Dilihat dari jenis organnya, dari 162 sampel sapi, antigen Coxiella burnetii dapat dideteksi pada 61 (37,7%)
organ limpa, 12 (7,4%) organ paru-paru dan 2 (1,2%) organ hati. Hasil ini menunjukkan telah adanya infeksi Coxiella burnetii pada sapi di Kota
Medan dan Kabupaten Deli Serdang.
_________________________________________________________________________________________________________________
Kata kunci: Coxiella burnetii, sapi, imunohistokimia

ABSTRACT
The aim of this study was to detect the presence of Coxiella burnetii antigen as etiological agent of Q fever in various organs of cattle
collected from Medan and Deli Serdang slaughterhouse. In this study, we collected various organ such as spleen, lung, and liver from 162
cattles. The organs tissue were examined using immunohistochemical method to showed the presence of Coxiella burnetii antigen using anti
Coxiella burnetii antibody. The examination result shows that 62/162 (38.3%) cattles were immunoreactive to Coxiella burnetii antibody. Based
on the origin of the sample collection, a total of 40/101 (39.6%) cattles originating from Medan slaughterhouse and 22/61 (36.1%) from Deli
Serdang slaughterhouse were immunoreactive. Out of 162 cattles 61 (37.7%) of the Coxiella burnetii antigen were detected in spleen, 12 (7.4%)
lungs and 2 (1.2%) liver. The result indicates the presence of Coxiella burnetii infection in cattle in North Sumatra.
____________________________________________________________________________________________________________________
Key words: Coxiella burnetii, cattle, immunohistochemistry

PENDAHULUAN diperoleh di rumah potong hewan (RPH) di Bali

Salah satu penyakit yang dapat mengganggu
produktivitas ternak ruminansia dan bersifat zoonosis
adalah penyakit Q fever. Q fever terdapat hampir di
seluruh dunia kecuali Selandia Baru (Rodolakis, 2006;
Angelakis dan Raoult, 2010). Pada Tahun 2009 wabah
besar Q fever pernah terjadi di Belanda yang
menyerang lebih dari 2.300 orang dan menyebabkan 6
orang meninggal dunia. Kasus tersebut diduga berasal
dari kambing yang terinfeksi Coxiella burnetii
(Enserink, 2010). Australia sebagai negara pengekspor
sapi terbesar ke Indonesia masih belum bebas dari
penyakit ini. Cooper et al. (2011) melakukan kajian
seroprevalensi pada sapi potong di Queensland
Australia, 16,8% sampel serum tersebut seropositif
terhadap Coxiella burnetii.
Di Indonesia, Q fever pertama kali dilaporkan
menyerang sapi dengan 189 serum sapi positif terhadap
antibodi Coxiella burnetii (Kaplan dan Bertagna,
1955). Miyashita et al. (2001) menemukan adanya
kasus pneumonia yang disebabkan oleh Coxiella
burnetii pada seorang pasien yang pernah tinggal di
Indonesia. Mahatmi et al. (2007), berhasil mendeteksi
agen penyakit ini pada 6,68% sampel organ sapi
brahman cross; 5,7% pada organ domba yang diperoleh
di Bogor; serta 4,29% pada organ sapi bali yang
dengan metode polymerase chain reaction (PCR). Dari
data di atas diketahui bahwa kasus Q fever telah lama
ada di Indonesia. Namun demikian, informasi
penyebarannya di berbagai daerah masih sangat
terbatas.
Q fever adalah penyakit zoonosis yang disebabkan
oleh Coxiella burnetii, merupakan bakteri Gram negatif
intraseluler (Maurin dan Raoult, 1999 ; Woldehiwet et
al., 2004 ; Roest et al., 2011). Reservoir penyakit ini
sangat luas termasuk mamalia, unggas, dan arthropoda
terutama caplak (Angelakis dan Raoult, 2010).
Ruminansia domestik merupakan reservoir utama
terhadap kasus yang terjadi pada manusia (Astobiza et
al., 2012). Sapi, domba, dan kambing merupakan
reservoir utama pada hewan (Fournier et al., 1998 ;
Maurin dan Raoult, 1999). Infeksi pada sapi umumnya
berlangsung asimtomatik tetapi dapat menyebabkan
abortus, subfertilitas, dan metritis (Porter et al., 2011).
Gejala klinis Q fever pada manusia sering digambarkan
sebagai gejala flu-like (Woldehiwet, 2004; Porter et al.,
2011). Dengan tidak spesifiknya gejala klinis yang
ditimbulkan tidak disarankan untuk melakukan
diagnosis secara klinis (EFSA, 2010).
Rute utama infeksi penyakit ini adalah melalui
inhalasi (aerosol) dengan dosis infeksi yang sangat
rendah, meskipun oleh satu sel bakteri tersebut

147
Jurnal Kedokteran Hewan
(Woldehiwet, 2004). Target sel dari Coxiella burnetii
adalah monosit/makrofag (Shannon dan Heinzen, 2009;
Angelakis dan Raoult, 2010). Setelah multiplikasi
primer pada limfonodus regional, akan disusul dengan
bakteremia (Woldehiwet, 2004). Pada fase akut infeksi,
kehadiran Coxiella burnetii dapat ditemukan pada paru-
paru, hati, limpa, dan darah (Maurin dan Raoult, 1999).
Pada fase kronis Coxiella burnetii dapat bereplikasi di
dalam makrofag (Fournier et al., 1998).
Kasus pada hewan berlangsung asimtomatik, maka
diperlukan suatu usaha untuk mendeteksi agen
penyebab penyakit ini melalui metode uji yang dapat
membuktikan keberadaan agen tersebut. Penelitian ini
dilakukan dengan mendeteksi antigen Coxiella burnetii
pada sampel organ yang telah difiksasi dengan buffered
neutral formalin (BNF), menggunakan teknik
imunohistokimia (IHK). Studi histopatologi dan IHK
menunjukkan keberadaan antigen dan distribusi antigen
Coxiella burnetii pada plasenta sapi (Hansen et al.,
2011). Norina et al. (2011) melakukan studi
retrospektif pada organ kambing yang terinfeksi
Coxiella burnetii dengan teknik IHK, dan berhasil
mendeteksi keberadaan agen tersebut pada berbagai
organ seperti hati, limpa, paru-paru, plasenta, dan
ginjal. Penelitian ini bertujuan mendeteksi keberadaan
Coxiella burnetii sebagai penyebab Q fever pada sapi di
Sumatera Utara, khususnya di Kota Medan dan
Kabupaten Deli Serdang.
MATERI DAN METODE
Sampel yang digunakan untuk pemeriksaan IHK
adalah organ limpa, paru-paru dan hati. Organ-organ
tersebut dikumpulkan dari 162 ekor sapi dari RPH Kota
Medan dan Kabupaten Deli Serdang (RPH NP 96 dan
RPH Tani Asli). Organ diambil dengan ukuran 1 cm3,
kemudian dimasukkan ke dalam BNF. Organ yang
diperoleh dievaluasi secara IHK dengan metode
streptavidin peroksidase. Sampel organ yang
imunoreaktif pada pemeriksaan IHK kemudian
diwarnai dengan pewarnaan rutin hematoksilin dan
eosin (HE) untuk pemeriksaan histopatologis. Bahan
dan peralatan yang digunakan dalam penelitian ini
antara lain kit imunohistokimia (LSAB Kit DAKO),
antibodi poliklonal terhadap Coxiella burnetii, tissue
processor, embedding center, microtome, pisau
microtome, waterbath, gelas obyek, dan lain-lain.
Data yang diperoleh diolah menggunakan microsoft
excel dan disajikan dalam bentuk persentase sapi yang
imunoreaktif. Distribusi antigen pada organ yang
imunoreaktif pada pemeriksaan IHK serta deskripsi
histopatologis dengan pewarnaan HE pada organ yang
imunoreaktif ditampilkan dalam bentuk gambar.
Imunohistokimia
Pewarnaan imunohistokimia digunakan untuk
mendeteksi keberadaan antigen Coxiella burnetii pada
berbagai organ yang diambil. Distribusi antigen akan
divisualisasikan dengan warna coklat spesifik apabila
terdapat Coxiella burnetii. Jaringan dari sampel ketiga
148
Vol. 9 No. 2, September 2015
organ pada blok parafin dipotong dengan ketebalan 5
µm dan ditempelkan pada gelas obyek yang telah
dilapisi dengan poly l lysine 1%. Tahap selanjutnya
dilakukan deparafinasi menggunakan xylene serta
rehidrasi dengan alkohol konsentrasi bertingkat dan
akuades. Jaringan yang sudah direhidrasi dipanaskan
dalam bufer sitrat menggunakan microwave selama
lima menit, kemudian dicuci dengan phospate buffered
saline tween 20 (PBST) sebanyak tiga kali masing-
masing selama lima menit untuk tujuan antigen
retrieval. Proses dilanjutkan dengan blocking
endogenouse peroxidase menggunakan H2O2 3%
selama 30 menit, kemudian dicuci dengan PBST
sebanyak tiga kali masing-masing selama lima menit.
Blocking ikatan nonspesifik dilakukan dengan menetesi
jaringan menggunakan fetal bovine serum (FBS) 1%
selama 30 menit kemudian dicuci dengan PBST
sebanyak tiga kali masing-masing selama lima menit,
selanjutnya jaringan ditetesi dengan antibodi primer
(antibodi poliklonal, rabbit anti-Coxiella burnetii FKH-
IPB) dan inkubasikan selama satu malam pada suhu
4 C dan kemudian dicuci kembali dengan PBST
sebanyak tiga kali masing-masing selama lima menit.
Jaringan ditetesi dengan antibodi sekunder (biotinilated
link universal) selama 30 menit setelah pencucian, dan
dilanjutkan dengan pencucian menggunakan PBST
sebanyak tiga kali masing-masing selama lima menit.
Selanjutnya jaringan ditetesi dengan streptavidin HRP
selama 30 menit, kemudian dicuci lagi dengan PBST
sebanyak tiga kali masing-masing selama lima menit.
Chromogen 3,3’-diaminobenzidine (DAB) kemudian
diteteskan pada jaringan dan dibiarkan selama 15 detik.
Setelah pemberian DAB, dilakukan perendaman pada
akuades dan dilanjutkan dengan pemberian
counterstain menggunakan Mayer’s hematoksilin
selama 25 detik. Jaringan kemudian dicuci dengan
akuades dan disusul dengan proses dehidrasi
menggunakan alkohol bertingkat dan clearing dengan
xilol. Jaringan dalam gelas obyek kemudian dilakukan
mounting dengan permount dan diberi cover glass.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Konsep dasar dari IHK adalah menunjukkan adanya
antigen di dalam jaringan oleh antibodi yang spesifik.
Ketika ikatan antigen dan antibodi terjadi, ikatan ini akan
diperlihatkan dengan sebuah reaksi warna histokimia
(Ramos-Vara 2005). Pada metode uji yang dilakukan,
chromogen DAB telah digunakan untuk menunjukkan
adanya ikatan tersebut, terlihat warna coklat spesifik
yang dapat dilihat dengan mikroskop cahaya biasa.
Pada penelitian ini telah dikumpulkan organ limpa,
paru-paru, dan hati dari 162 ekor sapi. Hasil pemeriksaan
IHK menunjukkan, sebanyak 62/162 (38,3%) sampel
sapi imunoreaktif terhadap antibodi Coxiella burnetii
(Tabel 1). Organ limpa yang positif ditunjukkan dengan
adanya warna coklat spesifik di dalam sitoplasma sel-sel
makrofag dan sebagian besar terdapat di daerah pulpa
merah (Gambar 1A). Pada pemeriksaan sediaan limpa
yang imunoreaktif dengan pewarnaan HE terlihat adanya
Jurnal Kedokteran Hewan Sangkot Sayuti Nasution, dkk

populasi sel-sel radang makrofag dan neutrofil pada Perubahan yang ditemukan dengan pewarnaan HE
pulpa merah (Gambar 2A), kongesti, pigmen adalah adanya fokus radang berupa nekrosis sel-sel
hemosiderin serta deplesi folikel limfoid. Meskipun hepatosit, infiltrasi sel-sel radang mononukleus serta
demikian, lesi tersebut tidak konsisten pada semua organ hemoragi (Gambar 2C). Organ hati merupakan organ
imunoreaktif yang diperiksa. yang paling sedikit menunjukkan hasil imunoreaktif
terhadap antibodi Coxiella burnetii.
Tabel 1. Hasil pemeriksaan imunohistokimia terhadap limpa, Rute infeksi utama Coxiella burnetii adalah melalui
paru-paru, dan hati dari 162 ekor sapi aerosol (inhalasi), dengan dosis infeksi yang sangat
Hasil rendah bahkan walaupun oleh satu sel bakteri tersebut
Jumlah
imunohistokimia (Woldehiwet, 2004). Target sel dari infeksi Coxiella
Lokasi pengambilan sampel
Imuno- burnetii adalah monosit/makrofag (Shannon dan
(ekor) %
reaktif
Heinzen, 2009; Angelakis dan Raoult, 2010). Dari hasil
RPH Kota Medan 101 40 39,6
RPH Kabupaten Deli Serdang pewarnaan IHK yang telah dilakukan diketahui bahwa
RPH NP 96 36 13 36,1 kehadiran antigen tersebut pada organ yang
RPH Tani Asli 25 9 36,0 imunoreaktif ditemukan pada sel-sel makrofag. Hal ini
Subtotal Kabupaten Deli Serdang 61 22 36,1 sesuai dengan temuan Lepidi et al. (2006), secara
Total 162 62 38,3 imunohistokimia bakteri intraseluler obligat seperti
Coxiella burnetii ditemukan di dalam makrofag seperti
Deteksi antigen Coxiella burnetii pada organ paru- pada kasus endokarditis. Hal yang sama juga
paru juga terlihat pada sel-sel makrofag yang terdapat ditunjukkan oleh hasil pemeriksaan IHK pada kasus
pada interstitium paru-paru dan di sekitar bronkus hepatitis kronis yang disebabkan oleh Q fever (Lepidi
(Gambar 1B). Temuan ini sejalan dengan perubahan et al., 2009).
histopatologis, terdapat penebalan jaringan interstitium Deteksi antigen Coxiella burnetii pada organ limpa,
(Gambar 2B) dan aktivasi sel-sel radang di sekitar paru-paru, dan hati menunjukkan jumlah yang berbeda.
bronkus. Penebalan jaringan insterstitium disebabkan Deteksi tertinggi ditemukan pada limpa, disusul organ
oleh infiltrasi sel-sel radang limfosit, makrofag, dan paru-paru, dan hati (Tabel 2). Perbedaan jumlah organ
neutrofil. Hal ini menunjukkan adanya pneumonia yang imunoreaktif pada limpa, paru-paru, dan hati,
interstitialis. Perubahan lain yang ditemukan paru-paru kemungkinan berkaitan dengan rute infeksi dimana rute
adalah kongesti, perdarahan, edema, dan adanya utama infeksi penyakit ini adalah melalui pernafasan
atelektasis. (inhalasi), serta perbedaan tahap infeksinya pada
Pengujian pada organ hati juga menunjukkan masing-masing individu sapi. Tingginya temuan pada
adanya kehadiran antigen Coxiella burnetii pada organ limpa kemungkinan berkaitan dengan fungsinya
sitoplasma sel makrofag di daerah porta (Gambar 1C). sebagai organ pertahanan, dimana fungsi limpa analog

Gambar 1. Hasil pewarnaan imunohistokimia. Warna coklat menunjukkan hasil imunoreaktif pada sel-sel makrofag. A= Limpa, B= Paru-
paru, C= Hati. 400x.

Gambar 2. Hasil pewarnaan HE. A= Organ limpa, menunjukkan adanya sel-sel makrofag (panah) dan neutrofil (kepala panah) pada pulpa
merah. B= Paru-paru mengalami pelebaran insterstitium oleh adanya infiltrasi sel-sel radang makrofag (panah) dan limfosit (kepala panah). C=
Hati, terlihat adanya nekrosis hepatosit, infiltrasi sel-sel radang mononukleus. 400x.

149
Jurnal Kedokteran Hewan
dengan limfonodus. Fungsi limpa antara lain adalah
menyaring material asing dan mikroorganisme serta
membuang eritrosit yang sudah tua dan rusak. Proses
ini berlangsung pada bagian pulpa merah dari limpa
(Fry dan McGavin, 2006). Perbedaan temuan pada
organ ini berguna secara diagnostik dalam hal
penentuan jenis organ yang diambil untuk pengujian
penyakit Q fever khususnya pada sapi.
Tabel 2. Hasil pemeriksaan imunohistokimia berdasarkan
jenis organ
Jumlah sampel Hasil imunohistokimia
Jenis organ
(Organ) Imunoreaktif % telah adanya infeksi Q fever di Kota Medan dan
Limpa 162 61 37,7
Paru-Paru 162 12 7,4
Hati 162 2 1,2
Perubahan paru-paru yang ditemukan pada kasus Q
fever dapat berupa interstitial pneumonia yaitu terdapat
infiltrasi sel-sel radang terutama makrofag, limfosit,
dan sedikit neutrofil serta eksudat pada alveoli.
Meskipun demikian, lesi ini bukanlah merupakan
perubahan spesifik oleh Q fever. Perubahan ini dapat
juga disebabkan oleh infeksi penyakit lainnya (Maurin
dan Raoult, 1999). Indikasi adanya infeksi Coxiella
burnetii pada hati umumnya ditandai dengan lesi
granulomatosa, selain itu ditemukan juga perubahan
lain seperti portal triaditis, hiperplasia sel-sel Kupffer,
dan degenerasi lemak. Perubahan histopatologi yang
dapat ditemui berupa nekrosis sel-sel hepatosit yang
bersifat fokal dan infiltrasi sel-sel radang yang terdiri
atas makrofag, limfosit, dan neutrofil. Makrofag
epiteloid, giant cells berinti banyak, dan fibrin juga
dapat ditemukan (Maurin dan Raoult, 1999).
Lesi yang lebih khas ditunjukkan oleh adanya
ruangan kosong (central clear space) dan cincin fibrin
yang terdapat di antara granuloma atau di pinggir
granuloma yang disebut dengan doughnut granuloma
(Maurin dan Raoult, 1999). Lesi granuloma jarang
ditemukan pada kasus yang bersifat kronis, yang
kemungkinan disebabkan oleh lemahnya respons imun
oleh sel-sel T. Lesi dominan yang ditemukan pada
infeksi kronis hati adalah hepatitis reaktif yang tidak
spesifik, infiltrasi sel-sel radang limfositik, dan fokus
nekrosis (Maurin dan Raoult, 1999).
Pada penelitian ini semua organ yang imunoreaktif
tidak ada yang menunjukkan lesi granuloma baik pada
limpa, paru-paru maupun hati. Ada kemungkinan
bahwa infeksi yang terjadi pada sapi yang imunoreaktif
telah berlangsung kronis. Dengan tidak adanya
perubahan yang patognomonik secara histopatologis
dengan pewarnaan HE, diperlukan uji yang
menunjukkan keberadaan agen ini pada organ, seperti
metode IHK yang telah dilakukan.
Lebih lanjut, temuan di atas tentu sangat bermakna
secara epidemiologi. Berdasarkan data yang diperoleh,
diketahui bahwa sapi yang dipotong adalah jenis
brahman cross eks impor yang digemukkan oleh
feedloters selama beberapa bulan sebelum dipotong di
RPH. Hasil penelitian ini mengindikasikan adanya
150
Vol. 9 No. 2, September 2015
infeksi penyakit ini pada sapi di Kota Medan dan
Kabupaten Deli Serdang Provinsi Sumatera Utara,
sehingga penting dilakukan usaha pencegahan dan
pengendalian penyakit ini agar tidak menyebar lebih
luas lagi pada populasi sapi di seluruh daerah di
Provinsi Sumatera Utara.
KESIMPULAN
Antigen Coxiella burnetii sebagai penyebab Q fever
telah dapat dideteksi pada organ sapi menggunakan
metode imunohistokimia. Temuan ini mengindikasikan
Kabupaten Deli Serdang Provinsi Sumatera Utara.
UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih disampaikan kepada
BPPSDMP Kementerian Pertanian dan Laboratorium
Patologi Fakultas Kedokteran Hewan IPB yang telah
membantu penyediaan bahan dan fasilitas penelitian,
sehingga penelitian ini dapat dilaksanakan
DAFTAR PUSTAKA
Angelakis, E. and D. Raoult. 2010. Q Fever. Vet. Microbiol.
140:297-309.
Astobiza, I., J.J.H.C. Tilburg, A. Pinero, A. Hurtado, A.L. Garcia-
Perez, M.H. Nabuurs-Franssen, and C.H.W. Klaassen. 2012.
Genotyping of Coxiella burnetii from domestic ruminants in
northern Spain. BMC. Vet. Res. 8(241):1-8.
Cooper, A., R. Hedlefs, M. Mcgowan, N. Ketheesan, and B. Govan.
2011. Serological evidence of Coxiella burnetii infection in beef
cattle in Queensland. Aust. Vet. J. 8(7):260-2644.
EFSA (European Food Safety Authority). 2010. Scientific opinion on
Q fever. EFSA. J. 8(5):1-144.
Enserink, M. 2010. Questions abound in Q-fever explosion in the
Netherlands. Sci. 327(5963):266-267.
Fournier, P.E., T.J. Marrie, and D. Raoult. 1998. Diagnosis of Q
fever. J. Clin. Microbiol. 36(7):1823-1834.
Fry, M.M. and M.D. McGavin. 2006. Bone Marrow, Blood Cells,
and Lymphatic System. In Pathologic Basis of Veterinary
Disease. McGavin M.D. and J.F. Zachary (Eds.). 4th ed.
Academic Press, Elsievier, Mosby, St Louis.
Hansen, M.S., A. Rodolakis, D. Cochonneau, F. Jens. J.F. Agger,
A.B. Christoffersen, T.K. Jensen, and J.S. Agerholm. 2011.
Coxiella burnetii associated placental lesions and infection level
in parturient cows. Vet. J. 190:135-139.
Kaplan, M.M. and P. Bertagna. 1955. The geographical distribution
of Q fever. Bull. Wld. Hlth. Org. 13:829-860.
Lepidi, H., B. Coulibaly, J.P. Casalta, and D. Raoult. 2006.
Autoimmunohistochemistry: A new method for the histologic
diagnosis of infective endocarditis. JID. 193:1711-1717.
Lepidi, H., F. Gouriet, and D. Raoult. 2009. Immunohistochemical
detection of Coxiella burnetii in chronic Q fever hepatitis. J.
Europ. Soc. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 15(2):169-170.
Mahatmi, H., A. Setiyono, R.D. Soejoedono, and F.H. Pasaribu.
2007. Deteksi Coxiella burnetii penyebab Q fever pada sapi,
domba dan kambing di Bogor dan Bali. J. Vet. 8(4):180-187.
Maurin, M. and D. Raoult. 1999. Q fever. Clin. Microbiol. Rev.
12(4):518-553.
Miyashita, N., H. Fukano, H. Hara, F. Hara, T. Nakajima, Y. Niki,
and T. Matsushima. 2001. A case of Coxiella burnetii pneumonia
in an adult. Nih. Kok. Gak. Zas. 39(6):446-451.
Norina, L., Y. Sabri, M.Y. Goh, Z. Saad, A.B. Sarenasulastri, H.
Latifah, J. Jamilah, and M.M. Noordin. 2011.
Immunohistological localization of Coxiella burnetii in various
organs of naturally Q-fever infected goats. Pertanika J. Trop.
Agric. Sci. 34(1):167-173.
Jurnal Kedokteran Hewan
Porter, S.R., G. Czaplicki, J. Mainil, R. Guatteo, and C. Saegerman.
2011. Q fever: Current state of knowledge and perspectives of
research of a neglected zoonosis. Int. J. Microbiol. :1-22.
Ramos-Vara, J.A. 2005. Technical aspects of immunohistochemistry.
Vet. Pathol. 42:405-426.
Rodolakis, A. 2006. Q fever, state of art: Epidemiology, diagnosis
and prophylaxis. Small. Rum. Res. 62:121-124.
Roest, H.I.J., R.C. Ruuls, J.J.H.C. Tilburg, M.H. Nabuurs-Franssen,
C.H.W. Klaassen, P. Vellema, R.V.D. Brom, D. Dercksen, W.
Sangkot Sayuti Nasution, dkk
Wouda, M.A.H. Spierenburg, A.N.V. Spek, and A.G.D. Boer.
2011. Molecular epidemiology of Coxiella burnetii from
ruminants in Q fever outbreak, The Netherlands. Em. Inf. Dis.
17(4):668-674.
Shannon, J.G. and R.A. Heinzen. 2009. Adaptive immunity to the
obligate intracellular pathogen Coxiella burnetii. Immunol. Res.
43(1-3):138-148.
Woldehiwet, Z. 2004. Q fever (coxiellosis): Epidemiology and
pathogenesis. Res. Vet. Sci. 77:93-100.
151