Nama : Sofiana Samosir

Kelas :D
NPM : 24041117231
TUGAS BIOTEKNOLOGI
1. Carilah mekanisme kerja pemurnian protein dengan kromatografi afinitas kolom:
a. Nikel
b. Kitin
c. Maltose
Jawaban :

a. Membiarkan asam amino/ protein (makromolekul) meresap ke dalam matriks sampai molekul
yang disesuaikan dengan ligan berikatan seperti contohnya pada asam amino histidine yang
secara selektif berikatan kuat dengan ion nikel. Selanjutnya, akan dilakukan disosiasi antara
makromolekul dan ligan dengan mengubah larutan pencuci dan pengelusinya sehingga
makromolekul yang diinginkan dapat diperoleh dalam keadaan murni dan efluen.
b. Aktivitas pemecahan protein yang dimiliki oleh penanda intein sendiri dimana penanda intein
dapat melakukan pemisahan dengan memotong diri sendiri pada kromatografi afinitas kolom
sehingga protein target diperoleh dalam keadaan murni. Selain itu, pemotongan protein target
sehingga dapat memisahkan protein target dapat juga dilakukan dengan memberikan buffer
pH atau suhu pada kolom.
c. Mekanismenya dengan mengikat protein fusi yang nantinya akan dilepaskan kembali dengan
buffer elusi setelah kolom dicuci agar pengotor hilang sehingga didapatkan elusi protein fusi
yang diinginkan yang mana elusi tersebut ditampung sebagai fraksi yang nantinya akan
diamati dengan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 280 nm sesuai dengan
panjang gelombang protein fusi yang diinginkan/ditargetkan.