Nama.

: Dandi Ananda Putra

Nim. : 1948201016
Kelas. : Farmasi 3A
Resume : Kimia medisinal

ABSTRAK: K v 11.1 (hERG) penghambat dengan potensi yang sebanding tetapi di ff kinetika pengikatan yang salah mungkin menampilkan pro-
risiko aritmia. Dalam studi ini, kami mengeksplorasi struktur -

hubungan kinetik dalam empat seri K v 11.1 pemblokir di samping strukturnya - Sebuah ffi hubungan nity. Kami mempelajarinya meskipun dramatis
di ff erences di a ffi nities dan tingkat asosiasi, hampir tidak ada variasi dalam konstanta laju disosiasi molekul ini dengan waktu tinggal (RT) hanya beberapa menit. Oleh

karena itu, kami mensintesis 16 molekul baru, khususnya dalam golongan senyawa piridinium, untuk mengatasi fenomena aneh ini lebih jauh. Kami menemukan molekul dengan RT yang
sangat pendek (misalnya 0,34 menit untuk 37) dan RT yang lebih lama (misalnya, 105 menit untuk 38). Ini memungkinkan kami untuk

membangun a k di - k mati - K D peta kinetik untuk semua senyawa dan kemudian membagi peta menjadi empat kuadran sementara, memberikan kerangka kerja yang mungkin untuk
kategorisasi K yang lebih jauh dan lebih tepat. v 11.1 pemblokir. Selain itu, dua perwakilan
senyawa ( 21 dan 38) diuji dalam tes penjepit patch, dan RT mereka dihubungkan ke IC fungsional mereka 50 nilai-nilai. Kami
fi Temuan sangat menyarankan pentingnya studi ligan secara simultan a ffi nities dan parameter kinetik, yang dapat membantu
menjelaskan dan memprediksi K v 11.1-dimediasi kardiotoksisitas.

 Kata Pengantar
Keamanan jantung telah menjadi perhatian utama yang dihadapi industri farmasi
dan badan pengatur selama beberapa dekade terakhir. Sejumlah besar obat,
termasuk obat jantung dan nonkardiak, telah dibatasi dalam aplikasinya atau
ditarik dari pasar karena Konsep struktur - Sebuah ffi nity relationship
(SARs) yang menggambarkan kesalingtergantungan antara struktur majemuk
dan ikatan a ffi nities telah dieksplorasi secara ekstensif selama beberapa
dekade terakhir. 11,12 Namun, studi serupa yang menggambarkan
ketergantungan antara struktur senyawa dan kinetika pengikatan, disebut
sebagai struktur - Hubungan kinetik (SKR) kurang diteliti sampai saat ini.
Baru-baru ini, narkoba - kinetika target, khususnya reseptor - waktu tinggal
ligan (RT), telah terbukti juga menentukan potensi terapeutik kandidat obat
in vivo dan untuk memprediksi obat e ffi cacy dan keamanan. 13,14 Akibatnya,
muncul kesadaran akan pentingnya mengukur kinetika obat – interaksi
target. SKR sekarang sedang dilaporkan dan dibahas untuk pengikatan ligan
ke reseptor berpasangan protein G (GPCR) dan enzim.

Skema 1. Sintesis Clo fi lium Derivatives (19 dan 20)

Skema 2. Sintesis Symmetrical 2,6-Substituted N- Methylated Pyridines dengan
Berbagai Panjang Rantai Alkil

 Hasil dan Diskusi

Kimia. Senyawa 19, 20, 24, 25, 27 - 30, dan 39 – 46 baru disintesis untuk
mendapatkan senyawa dengan nilai RT yang beragam disamping rentang yang
beragam K saya dan k di nilai-nilai. Semua senyawa lainnya dipilih dari
perpustakaan internal kami berdasarkan perbedaan a ffi nities dan parameter
kinetik, dan sintesis senyawa ini telah dilaporkan dalam penelitian kami yang
diterbitkan sebelumnya.
Seperti yang ditunjukkan pada Skema 1, clo fi turunan lium (4- (4-
chlorophenyl) butyl- dietyl-heptylammonium) 19 dan 20 dibuat dari 4-
iodotoluena dalam urutan tiga langkah sebagai berikut: Sonogashira cross-
coupling dari 4-iodotoluene dan propargyl alkohol, pembentukan tosylate yang
sesuai, dan penggantian tosylate dengan amina sekunder yang sesuai.
Untuk menyelidiki e ff dll fl fleksibilitas dalam rantai samping turunan
piridinium alifatik, beberapa tersubstitusi 2,6 simetris N- senyawa metilasi
piridin dengan di ff panjang rantai alkil yang salah ( 24, 25, dan 27 - 30)
disintesis sesuai dengan Skema 2. The fi senyawa seri pertama (S23a -.
Skema 3. Sintesis Symmetrical 2,6-Substituted N- Methylated Pyridines dengan
Di ff Substituen Biphenyl yang salah
 reaksi kopling. 25 Itu fi senyawa akhir ( 24, 25, dan 27 - 29) disintesis dalam hasil
yang relatif tinggi dengan pengurangan ikatan rangkap tiga menjadi ikatan tunggal dan
metilasi piridin netral. 3diperoleh langsung dari S23e dengan metilasi nitrogen pusat
dengan hasil yang baik sebesar 94%.
Selanjutnya, masuk fl pengaruh di ff substituen lain di cincin fenil pada suatu
ffi nities dan parameter kinetik K v 11.1 blocker dieksplorasi, dan serangkaian
biphenylpyridines tersubstitusi ( 39 - 46) disintesis. Seperti yang ditampilkan di
Skema 3, gabungan S32 diperoleh dengan reaksi Sonogashira dari 2,6-dibromo-
piridin dan ethynyltrimethylsilane dengan Pd (PPh 3) 4 dan CuI sebagai katalis
bukan PdCl 2 ( PPh 3) 2 dan CuI ditampilkan di Skema 2. 29 Setelah deproteksi satu
pot dan Castro - Stephens berpasangan dengan 1-bromo-4-iodobenzene, 30 S32
diubah menjadi S33 dalam hasil rendah yang mungkin disebabkan oleh pembentukan
homocoupling Glaser oksidatif yang tidak diinginkan dan intrapolimerisasi molekul
yang bereaksi. 31 Reaksi Suzuki selanjutnya dilakukan dengan S33 dan di ff salah
asam fenilboronat tersubstitusi untuk menghasilkan senyawa piridin netral ( S34a -
e), 32 dari mana fi senyawa akhir ( 39, 40, 43, 44, dan 46) diturunkan melalui metilasi
nitrogen pusat dalam hasil sedang hingga tinggi. Selanjutnya, demetilasi 44 dengan
tribromida boron menyebabkan pembentukan senyawa 45. Khususnya, rute sintetik
yang disebutkan di atas tidak sesuai untuk memproduksi bifenilpiridin netral dengan
substituen metoksi dan klorin pada posisi meta cincin benzen kedua. Karenanya, 41
dan.
42 disintesis oleh di ff beberapa metode yang ditunjukkan pada Skema 4. Dalam
fi Langkadhengan dofetilide, dibuktikan dengan bentuk kurva yang sama
dibandingkan denganpertama, reaksi Suzuki diterapkan antara asam fenilboronat
tersubstitusi dan 1-bromo-4-iodobenzena dengan adanya di ff katalis paladium
keliru untukdiproduksi S43a
Skema 4. Sintesis Symmetrical 2,6-Substituted N- Methylated Pyridines (41 dan 42)
senyawa yang diuji dihitung dari IC 50 nilai-nilai yang disebutkan di atas 35 memiliki
kesepakatan yang baik dengan turunan kinetik K D data ( K D = k mati/ k di, Gambar 3A),
hanya K saya nilai-nilai digunakan untuk meringkas SAR dalam penelitian ini.
Konsistensi K saya dan K D nilai-nilai yang diperpanjang sebelumnya fi mencari
pengamatan yang lebih umum, 2 membuktikan keandalan [ 3 H] dofetilide uji asosiasi
kompetisi dalam menilai kinetika ligan tak berlabel di K v 11.1 saluran. Selain itu, k di
nilai untuk semua ligan signifikan fi berhubungan erat dengan mereka K saya nilai ( P <
0,0001, Gambar 3B), yang sesuai dengan kami data yang dipublikasikan. 2 Dalam
publikasi yang sama a ffi nities dan parameter kinetik senyawa induk dalam penelitian
ini, dofetilide, E-4031, dan clo fi lium

Gambar 1. Kurva perpindahan representatif dari spesi fi c [ 3 H] mengikat dofetilide

dengan 9, 25, 31, 37, 38, dan 40. Eksperimen dilakukan di
25 ° C menggunakan 20 μ g dari HEK293 K v 11.1 protein membran. Data yang
ditampilkan berasal
dari setidaknya tiga eksperimen independen yang dilakukan di duplikat.
Gambar 2. Kurva asosiasi persaingan perwakilan [ 3 H] dofetilide dengan tidak

adanya (kontrol) atau adanya unlabeled 31, 37, dan 38 di IC mereka 50 konsentrasi
nilai. Eksperimen dilakukan di 25 ° C menggunakan 20 μ g dari HEK293 K v 11.1
protein membran. Data yang ditampilkan berasal dari setidaknya tiga eksperimen
independen yang dilakukan di duplikat.
Gambar 3. Korelasi antara p K saya dan p K D ( A) atau p k di ( B) nilai semua
senyawa yang diuji seperti yang diperoleh dari [ 3 H] dofetilide kompetitif
percobaan perpindahan dan pengujian asosiasi persaingan, masing-masing.

Gambar 4. Peta kinetik semua senyawa yang diuji di mana tingkat disosiasi (hal k
mati, k mati: min - 1) diplot di y sumbu, sedangkan tingkat asosiasi (hal k di, k di: nM - 1 ·
min - 1) diplot di x sumbu. Identik K D nilai dapat dihasilkan dari di ff kombinasi
yang salah dari k di dan k mati nilai ( K D = k mati/ k di, garis putus-putus diagonal).
Kuadran ( I, II, III,Iv)secara sewenang-wenang de fi diwarnai dengan garis horizontal
merah dan garis vertikal hijau menurut variasinya k di, k mati dan K D nilai dalam
kombinasi dengan tiga senyawa referensi astemizole (titik merah), dofetilide (kuning
titik), dan ranolazine (titik hijau). Persimpangan merah dan hijau garis-garis disusun
pada garis putus-putus diagonal yang mewakili a K D nilai 316 nM, sementara
intersepnya dengan y dan x sumbu adalah 1 (RT = 10 min) dan 3,5 ( k pada = 3.2 × 10 - 4
nM - 1 · min - 1), masing-masing. Perhatikan bahwa parameter kinetik senyawa 34
tidak bisa ditentukan karenabke K-nya yang agak rendah v 11.1 a ffi nity dan dengan
demikian dikecualikan dalam peta ini.
Gambar 5. ( A) Penghambatan yang bergantung pada konsentrasi 21 dan 38 untuk
K v 11.1 arus ekor dalam eksperimen elektrofisiologi. (B) Tergantung waktu
penghambatan K v 11.1 arus ekor oleh 21 dan 38 ( 1 μ M). Percobaan

dilakukan pada suhu kamar dengan menggunakan HEK293 K v 11.1

sel. Data yang ditampilkan berasal dari setidaknya tiga eksperimen
independen.

Tabel 1. Pengikatan A ffi nities dan parameter kinetik dari turunan dofetilide

c R R R n n K k di k KD R
o say ( nM - mati ( n T
m 1 2 3 1 2 a 1 · min ( mi M) (
p ( n - 1) n - m
d M) 1) nt
)
1 4- 4- H. 2 2 47 0,0054 0.27 5 3.
TI TI ± ± ± 3 7
D D 1 0,0015 0,06 ±
A A ± 0.
K K 8
2 2 6
2 4- 4- CH 2 2 24 0,041 0.82 2 1.
TI TI 3 ± ± ± 0 2
D D 2 0,004 0,09 ±
A A ± 0.
K K 1
2 2 4
3 4- 4- CH 2 2 4. 0.15 0.26 3.0 3.
TI TI 2 2 ± ± ± 8
D D CH ± 0,06 0,07 0.2 ±
A A 3 0, 1.
K K 5 0
2 2
4 4- 4- CH 2 2 65 0,0096 0.30 41 3.
TI TI 2 ± ± ± ± 3
D D CH 13 0,0019 0,08 11 ±
A A 2 F 0.
K K 9
2 2
5 4- 4- CH 2 2 20 0,0046 0.40 99 2.
TI TI 2 3 ± ± ± ± 5
D D CN 6 0,0012 0,05 26 ±
A A 0.
K K 3
2 2
6 4- 4- CH 2 2 58 0,0013 0.35 26 2.
TI TI 2 8 ± ± 0 9
D D CO ± 0,0001 0.10 ± ±
A A OH 31 52 0.
K K 8
2 2
7 4- 4- CO 2 2 25 0,0098 1.8 13 0
TI TI CH 1 ± ± 2 ± ,
D D 3 ± 0,0034 0.2 5 5
A A 32 6
K K ±
 2 2 0
,
0
6
8 4- 4- CO 2 2 35 0,0025 0.61 24 1.
TI TI CF 3 5 ± ± 7 6
D D ± 0,0003 0,09 ± ±
A A 14 27 0.
K K 3
2 2
9 4- 4- CH 4 2 1. 0.64 0.26 0.7 3.
TI TI 3 6 ± ± 3 ± 8
D D ± 0.29 0,05 0.3 ±
A A 0. 9 0.
K K 3 7
2 2
1 4- 4- CH 4 1 66 0,0028 0.22 8 4.
0 TI TI 3 ± ± ± 5 5
D D 6 0,0008 0,05 ±
A A ± 1.
K K 0
2 2 7
1 3, 3, CH 2 2 55 (6.2 ± 0.19 58 5.
1 4- 4- 3 71 3.0) ± 07 3
di- di- ± x10 - 5 0,01 ± ±
Cl Cl 50 22 0.
7 8 2
1 H. 4- CH 2 2 94 (5.6 ± 0.30 59 3.
2 O 3 4 0,9) ± 1± 3
C ± x10 - 4 0,07 19 ±
H 58 7 0.
3 7
 fl fleksibilitas, 24,39 perpanjangan rantai alkil antara pusat
nitrogen dan bagian fenoksi meningkatkan K v 11.1 a ffi tingkat nities dan
asosiasi ( 9 melawan 2) sambil memperpendek yang lain penaut alkil dengan
cincin fenil menurunkan a ffi tingkat nities dan asosiasi ( 10 melawan 2 dan
9). Namun, 9 ( RT = 3.8 ± 0,7 menit) dan 10 ( RT = 4,5 ± 1,0 menit)
menunjukkan hal serupa karakteristik disosiasi di K v 11.1 saluran dibandingkan
dengan senyawa lain pada Tabel 1, menunjukkan rantai yang bervariasi panjang
antara nitrogen pusat dan dua cincin aromatik perifer yang diberikan dapat
diabaikan e ff dll pada disosiasi proses ligan jenis ini dari K v 11.1 saluran. Di
Selain itu, penggantian NO 2 kelompok pada cincin fenoksi dan fenil dengan
3,4-di-Cl atau kelompok lain seperti OCH 3 secara dramatis menurunkan K v

11.1 a ffi nities dan tingkat asosiasi ligan ( 11 dan 12 melawan 2). Senyawa 11
memiliki
terendah a ffi nity ( K i = 5571 ± 507 nM), tingkat asosiasi paling lambat
( k pada = 6.2 ± 3.0) × 10 nM - 1 · min - 1), tetapi RT terpanjang 5,3 ±
0,2 menit di K v 11.1 saluran di antara semua turunan dofetilide ( 1 -
12). Ini menyiratkan bahwa penambahan penarikan elektron
kelompok pada cincin aromatik mengurangi a ffi nities dan kinetika
asosiasi K v 11.1 blocker dengan menghambat mereka π- susun dan
interaksi hidrofobik dengan Phe656 dan Tyr652

Tabel 2. Pengikatan A ffi nities dan Kinetic Parameter dari E-4031 Derivatif

c R R X R n K k di k K D R
o 3 saya ( nM - 1 mati ( n T
m 1 2 ( n · min - ( min M) (
p M) 1) - 1) m
d n
t)
1 4- 3,4 C 2 5 0,021 0.39 36 2
3 Cl -di- H 4 ± ± ± .
Cl 0,009 0,06 22 6
± ±
0
 3 .
4
1 4- H. C 3 6 0,017 0.49 34 2
4 C H 0 ± ± ± .
H 0,003 0.12 14 0
3 ± ±
0
2 ,
5
1 H. H. N 2 5418 (2.7 ± 0.46 181 2
5 ± 0,6) × ± 2 ± .
374 10 – 4 0,03 313 2
±
0
.
1
16 4-
Cl H. C
H C
H 2 48 0,048
± 0.35
± 18
±9 2.
3 ± 0,022 0,09 9±
1 0.
8

c R R2 SE n K k di ( nM k mati K D RT
o BU saya - 1 · min - ( min ( nM) (mnt
m 1 AH ( nM 1) - 1) )
p )
d
1 4-Cl-C 6 • CH 2 6 31 ± 0,048 ± 0.37 16 ± 2.7
7 H. 4 CH CH 2 • 5 0,019 ± 10 ±
2 0,04 0.3
1 C 6 H. 5 - HC: 6 119 0,0098 ± 0,50 86 ± 2.0
8 CH 2 CH - ±2 0,0042 ± 45 ±
0.12 0,5
1 4-CH 3- •C • C 6 328 (3.2 ± 0.13 1188 7.7
9 C 6 H. 5 • 2 ± 2.0) × 10 ± ± ±
613 - 4 0,03 122 1.6
2 4-CH 3- •C • C 2 119 (3.1 ± 0.15 637 6.7
0 C 6 H. 5 • 6 ± 0,7) × 10 ± ± ±
141 - 4 0,05 339 2.0
2 (C 6 H. •C • C 6 97 ± 0,0035 ± 0.27 100 3.7
1 5) 2 CH • 13 0,0008 ± ± 52 ±
0,06 0.8
22 4-Cl-C
H. 5 C
6
H •C• • C 6 1.8
± 0.17
0,07 ± 1.2 0.13
0.6 ±
± 7.7
±
C 2
0.2 0,04 2.6
H3
Tabel 3. Pengikatan A ffi nities dan Parameter Kinetik Clo fi Derivatif lium
 Kesimpula

Meskipun a ffi nities dan tingkat asosiasi senyawa di K v 11.1 saluran telah

ditemukan di ff er jauh dan berkorelasi satu sama lain, penelitian ini adalah fi
terlebih dahulu untuk memverifikasi itu K v 11.1 blocker dapat memiliki
sangat di ff RT yang berbeda, dengan hingga lebih dari 300 kali lipat ff erence
( 37 melawan 38) di saluran tersebut. SelanjutnyaSelanjutnya, investigasi
komprehensif terhadap turunan dofetilide, E-4031, clo fi lium, dan piridinium
pada rentang sca ff olds adalah fi pertama untuk mengilustrasikan dampak dari
beberapa parameter yang diuraikan di atas pada tingkat asosiasi dan RT
senyawa di K v 11.1 saluran selain ikatannya a ffi nities. Khususnya, tidak
seperti konsistensi SAR untuk semua senyawa,
senyawa, kami menggambarkan a k di -k mati -K D peta kinetik dan membagi
semua senyawa ini menjadi empat kuadran (toksik untuk kuadran II, aman
untuk kuadran IV, dan mencurigakan untuk kuadran saya dan AKU AKU AKU
pada Gambar 4), yang mungkin memberikan informasi berharga bagi peneliti
farmasi untuk merancang strategi yang lebih baik menilai K v 11.1
kewajiban. Selain itu, tingkat asosiasi dari dua senyawa yang dipilih ( 21
dan 38) ditemukansesuai dengan baik dengan tingkat blok mereka saat ini
dalam studi penjepit patch, dan RT mereka yang berbeda adalah alasan yang
mungkin untuk perbedaan mereka ff pengaruh dalam potensi fungsional jika
dibandingkan dengan pengikatannya a ffi nities. Meski jauh dari lengkap, in
Analisis lebih lanjut menunjukkan bahwa parameter kinetik ( k di dan RT)
serta a ffi nities ( K saya) harus diperhatikan
pertimbangan selama pemeriksaan K v 11.1 reaksi merugikan yang dimediasi.
UntukUntuk menyimpulkan, yang baru fi menemukan besar variasi RT
mendorong analisis struktur yang ekstensif - Hubungan RT, dan kombinasi SAR
dan SKR membuka jalan baru bagi ahli kimia obat untuk lebih e ffi secara efisien
merancang entitas kimia baru dengan K rendah atau dapat diabaikan v 11.1-
kardiotoksisitas yang diinduksi.