Hipofisis ikan adalah kelenjar endokrin dari asal ganda yang ditemukan di sisi perut otak tengah yang

melekat padanya melalui tangkai. Kelenjar pituitari memproduksi dan menyimpan hormon
gonadotropin (GtH), yang memainkan peran penting dalam ovulasi dan sperma. Hipofisis adalah teknik
di mana induk ikan yang matang dirangsang oleh pengenalan hormon hipofisis untuk bertelur dalam
kondisi tawanan. Ekstrak kelenjar pituitari yang disuntikkan melewati hubungan otak-hipofisis, bekerja
langsung pada ovarium dan testis, memberikan peningkatan kadar GtH darah yang biasanya mendahului
pemijahan. Teknik ini telah dikembangkan untuk menghasilkan bibit berkualitas baik dari spesies ikan
tertentu di penangkaran dengan memanipulasi reproduksi dengan pengaturan waktu dan sinkronisasi
produksi telur, sementara pengumpulan bibit alami menghasilkan beberapa spesies liar yang tidak
diinginkan dan tidak menguntungkan untuk budidaya. Makalah ini menjelaskan organisasi umum dan
morfologi kelenjar pituitari dan perannya dalam menginduksi pembiakan ikan

Dalam jalur biosintesis estrogen, serangkaian androgen (steroid) terbentuk dalam sel teka dan leydig
betina dan jantan secara khusus dengan bantuan sejumlah enzim di bawah stimulasi LH. Androgen
termasuk testosteron dan androstenedion yang terbentuk kemudian disebarkan ke dalam sel granulosa
pada wanita dan sel sertoli pada pria, setelah itu sel granulosa / sertoli mengubah steroid androgen
(androstenedione atau testosteron) menjadi estrogen oleh enzim yang disebut P450 aromatase (P450
sitokrom Cyp19a1) di bawah pengaruh FSH (Gbr. 2). Seluruh proses berlangsung dalam dua sel yang
berbeda karenanya disebut sebagai dua hipotesis sel. Protein Cyp19a1 adalah satu-satunya enzim yang
memainkan peran kunci dalam diferensiasi jenis kelamin [18, 19]. Selain itu, FSH adalah gonadotropin
yang penting, karena merangsang pertumbuhan ovarium dan spermatogenesis testis selama
gametogenesis; dan LH terutama merupakan pematangan gamet akhir (ovulasi atau spermiasi). Terlepas
dari banyak penelitian tentang FSH dan LH di teleost, fungsinya dalam reproduksi masih tetap tidak
terdefinisi dengan baik. Ini bisa jadi karena kurangnya penelitian tentang pendekatan genetik pada
teleost dewasa [20]

Organisasi umum dan morfologi kelenjar hipofisis telah dijelaskan dalam sejumlah ikan teleost. Hipofisis
adalah kelenjar endokrin utama, tubuh seukuran kacang yang melekat pada pangkal otak yang penting
dalam mengendalikan pertumbuhan, perkembangan, dan berfungsinya kelenjar endokrin lainnya. Itu
terletak di sisi perut otak. Ini adalah tubuh kecil, lembut, keputihan yang ukuran dan bentuknya berbeda
dengan spesies. Ini kurang lebih bulat di carps; oval di catla dan rohu dan berbentuk buah pir di mrigal.
Itu terletak di rongga cekung yang disebut sella turcica dan ditutup oleh membran yang disebut
durameter, yang melekat pada otak oleh tangkai infundibular (Gbr. 1) [1]. Ini menghasilkan hormon
gonadotropik (GtH) yang penting untuk pematangan dan pemijahan ikan. Gonadotropin ini termasuk
Follicle Stimulating Hormone (FSH) dan Luteinizing Hormone (LH) yang disekresikan dan dikorelasikan
dengan siklus kematangan gonad.

Seperti pada vertebrata yang lebih tinggi, hipofisis atau hipofisis ikan terdiri dari dua jaringan berbeda
yang mampu menghasilkan hormon-adenohipofisis (hipofisis anterior) yang berasal dari kantong
embrionik, kantong Rathke yang timbul dari atap rongga bukal sebagai evaginasi luar dan neurohipofisis
(hipofisis posterior) yang berasal dari evaginasi ke bawah dari lantai ke ventrikel ketiga [2].
Adenohypophysis mengatur fungsi gonad pada ikan dan merupakan tempat sintesis, penyimpanan dan
pelepasan ke dalam sirkulasi beberapa peptida dan hormon. Adenohypophysis dibagi menjadi rostral
(pro-adenohypophysis) dan proksimal (meso-adenohypophysis) pars distalis, dan pars intermedia
(metaadenohypophysis)Seperti pada vertebrata yang lebih tinggi, hipofisis atau hipofisis ikan terdiri dari
dua jaringan berbeda yang mampu menghasilkan hormon-adenohipofisis (hipofisis anterior) yang
berasal dari kantong embrionik, kantong Rathke yang timbul dari atap rongga bukal sebagai evaginasi
luar dan neurohipofisis (hipofisis posterior) yang berasal dari evaginasi ke bawah dari lantai ke ventrikel
ketiga [2]. Adenohypophysis mengatur fungsi gonad pada ikan dan merupakan tempat sintesis,
penyimpanan dan pelepasan ke dalam sirkulasi beberapa peptida dan hormon. Adenohypophysis dibagi
menjadi rostral (pro-adenohypophysis) dan proksimal (meso-adenohypophysis) pars distalis, dan pars
intermedia (metaadenohypophysis).

The neurosecretory nuclei of the hypothalamus produce neurohormones control pituitary hormone
secretion, thus constituting the hypothalamo-hypophysial axis. The neurohypophysial hormones are
structurally and functionally related peptide hormone. Their main representatives are oxytocin and
vasopressin. The neurohypophysis interdigitates into all areas of adenohypophysis but major
interdigitations are found in pars intermedia. The neurosecretory materials from the neurons of
preoptic nucleus are transported through the axons and stored in the axonal terminals ending at the
junction between neurohypophysis and adenohypophysis which is called as neuroadeno interface. This
interface is highly vascular and it is the centre for storage and release of hormones.

Inti neurosekresi hipotalamus menghasilkan neurohormon mengendalikan sekresi hormon hipofisis,

sehingga merupakan sumbu hipotalamo-hipofisial. Hormon neurohypophysial adalah hormon peptida
yang terkait secara struktural dan fungsional. Perwakilan utama mereka adalah oksitosin dan vasopresin.
Neurohypophysis interdigitates ke semua area adenohypophysis tetapi interdigitations utama
ditemukan di pars intermedia. Bahan neurosekresi dari neuron nukleus preoptik diangkut melalui akson
dan disimpan di terminal aksonal yang berakhir di persimpangan antara neurohypophysis dan
adenohypophysis yang disebut sebagai antarmuka neuroadeno. Antarmuka ini sangat vaskular dan
merupakan pusat penyimpanan dan pelepasan hormon.

Gonadotropin adalah sel yang mensekresi dan paling sering terletak di distalis pars proksimal. Ini
diidentifikasi berdasarkan reaksi tinctorial dengan asam periodik (pereaksi Schiff dan pewarnaan
tetrachrome Herlant'a). Namun, jumlah mereka, granulasi gonadotrof dan peran dalam siklus reproduksi
diteliti dalam beberapa spesies berbudaya yaitu, Cyprinus carpio (Leray 1965; Blanc-Livni dan Abraham
1968), Cirrhinus mrigala (Moitra dan Sarkar, 1976), Clarias batrachus (Lehri 1966, 1970), Heteropneustes
fossilis (Sundararaj 1959 & 1960), dan Mugil cephalus (Blanc-Livni dan Abraham 1968). Umumnya,
jumlahnya tinggi dan bergranulasi selama musim kawin aktif dibandingkan dengan musim non-kawin
lainnya. Kelenjar pituitari ikan menghasilkan dan mengeluarkan dua gonadotropin: 1) Hormon
Penstimulasi Folikel (FSH) dan 2) Hormon Luteinizing (LH). Kedua FSH dan LH bertindak pada dua sel
berbeda yang pada gilirannya membantu dalam sintesis estrogen seperti yang dijelaskan di bawah ini
(Gbr. 2 ). Pada vertebrata, reproduksi dikontrol oleh dua hormon induk gonadotropik dari kelenjar
hipofisis, FSH dan LH. Kedua gonadotropin termasuk dalam keluarga hormon glikoprotein, terdiri dari
satu subunit α umum dan satu subunit β spesifik hormon [13]. Sejumlah penelitian telah dilakukan

dilaporkan dalam berbagai spesies ikan tentang peran fisiologis FSH dan LH [14] dan peraturan mereka
[15]; Namun, pengetahuan kami tentang fungsi FSH dan LH masih terpisah-pisah. Sekarang umumnya
diyakini bahwa mirip dengan rekan mamalia mereka, FSH ikan sebagian besar terlibat dalam
mempromosikan perkembangan dan pertumbuhan gonad awal, sedangkan LH memainkan peran
penting dalam mengatur tahap akhir gametogenesis, termasuk pematangan dan pelepasan gamet akhir
(ovulasi dan sperma) ) [16, 17]. Beberapa penelitian menunjukkan bahwa pada teleost, seperti halnya
pada spesies mamalia, perubahan fungsional hipofisis dan ovarium secara langsung dan tidak langsung
di bawah kendali hormon pelepasan hipotalamus. Lobus medium hipofisis karper rumput hanya
memiliki satu jenis gonadotrof yang mengandung dua jenis butiran yang berbeda dalam ukuran dan
reaksi pewarnaan. Gonadotrof menunjukkan aktivitas sintesis dan pelepasan hormon yang luas setelah
perawatan LH-RH. Hal ini dibuktikan dengan semakin berkurangnya jumlah butiran kecil, peningkatan
jumlah dan ukuran butiran heterogen yang sangat besar dan munculnya vakuola sitoplasma. Butiran
kecil kemungkinan adalah butiran yang mensekresi LH dan butiran besar, butiran sekresi FSH. Karena
peningkatan cepat LH hipofisis, ovarium diaktifkan

Dalam jalur biosintesis estrogen, serangkaian androgen (steroid) dibentuk dalam sel teka dan leydig
betina dan jantan masing-masing dengan bantuan sejumlah enzim di bawah stimulasi LH. Androgen
termasuk testosteron dan androstenedion yang terbentuk kemudian disebarkan ke dalam sel granulosa
pada wanita dan sel sertoli pada pria, setelah itu sel granulosa / sertoli mengubah steroid androgen
(androstenedione atau testosteron) menjadi estrogen oleh enzim yang disebut P450 aromatase (P450
sitokrom Cyp19a1) di bawah pengaruh FSH (Gbr. 2). Seluruh proses berlangsung dalam dua sel yang
berbeda karenanya disebut sebagai dua hipotesis sel. Protein Cyp19a1 adalah satu-satunya enzim yang
memainkan peran kunci dalam diferensiasi jenis kelamin [18, 19]. Selain itu, FSH adalah gonadotropin
yang penting, karena merangsang pertumbuhan ovarium dan spermatogenesis testis selama
gametogenesis; dan LH terutama merupakan pematangan gamet akhir (ovulasi atau spermiasi). Terlepas
dari banyak penelitian tentang FSH dan LH di teleost, fungsinya dalam reproduksi masih tetap tidak
terdefinisi dengan baik. Ini bisa jadi karena kurangnya penelitian tentang pendekatan genetik pada
teleost dewasa [20]

LH yang diproduksi oleh kelenjar hipofisis berikatan dengan LHR (reseptor LH) pada sel teka dan leydig
dan merangsang sintesis androgen oleh kolesterol yang telah masuk dengan bantuan protein Star dan
pada gilirannya menyebabkan luteinisasi pada wanita dan mempromosikan produksi testosteron pada
wanita. laki-laki Sedangkan, FSH menstimulasi sel granulosa dan sertoli untuk sintesis estrogen dengan
mengikat FSHR (reseptor FSH) yang menyebabkan pertumbuhan dan pematangan folikel ovarium pada
wanita dan spermatogenesis pada testis pria. Namun, prosesnya tidak spesifik untuk spesies; tetapi, ada
variasi besar dalam efektivitasnya pada spesies yang berbeda

Sejarah pemuliaan induced pada

ikan Upaya pertama pemuliaan terinduksi dengan menggunakan ekstrak hipofisis dilakukan oleh B.A.
Houssay (1930) di Argentina dengan ikan vivipar [23]. Ia berhasil mendapatkan kelahiran dini ikan muda.
Selanjutnya, berdasarkan garis Houssay, Von Ihering dan timnya dari Brasil, pada tahun 1934, berhasil
membiakkan ikan lele dengan hormon hipofisis dan karenanya memberikan kredit untuk konsep
pembiakan ikan yang diinduksi saat ini kepada orang Brazil [24]. Di India, upaya pertama pada
pemuliaan terinduksi dilakukan oleh Hameed Khan pada tahun 1938 pada mrigal, Cirrhinus mrigala oleh
administrasi kelenjar hipofisis mamalia tetapi telur tidak dibuahi [25]. Kemudian pada tahun 1955, H.L.
Chaudhari berhasil menginduksi pemijahan pada spesies ikan mas kecil, Esomus danricus dengan
memberikan injeksi kelenjar hipofisis katla pituitari intra-peritoneal. Keberhasilan pertama dalam
pemuliaan Induced Carps India Utama (L. rohita dan C. mrigala) adalah pada tahun 1957 oleh H.L
Chaudhari dan K. H. Alikunhi di Central Inland Fisheries Research Institute, gardu, Cuttack (Orissa) [26,
27]. Sejak itu, teknik ini telah distandarisasi dan disempurnakan untuk produksi benih ikan skala besar
Hypophysation in fishes

Agar ekstrak hipofisis menjadi efektif, ikan donor harus matang secara seksual baik jantan atau betina.
Juga, ekstraksi kelenjar hipofisis lebih disukai dekat atau dalam musim pemijahan. Selama musim kawin
(JuneAugust) induk yang sudah dewasa dipilih dari kolam induk dan disuntik dengan injeksi hormon
untuk perkembangbiakan / hipofisis terinduksi. Proses berikut terdiri dari pengumpulan dan identifikasi
induk, pengumpulan dan preservation of pituitary glands, preparation of pituitary extract and site, dose,
method and time of injection [28]

.Identification of brooders for breeding purpose

1. Female brooder characters: Bulging belly, swollen pink vent and eggs oozes out on pressing the belly

2. Male brooder characters: White coloured liquid (Milt) oozes out when belly pressed, Pectoral fins
rough to touch

Rasio induk untuk setiap perempuan dua laki-laki (berat perempuan = berat laki-laki) lebih disukai untuk
yang sukses. Rasio 1: 2 diikuti karena pejantan dalam ikan karper umumnya lebih kecil daripada betina
dan untuk memastikan pembuahan lengkap telur yang dihasilkan oleh betina, disarankan untuk
menggunakan dua jantan per betina dan pada suhu ideal antara 24-31 oC untuk berkembang biak.

Pengumpulan kelenjar hipofisis Kelenjar hipofisis ikan dikumpulkan dengan membedah dan
menghilangkan sebagian kulit kepala seperti yang ditunjukkan (Gbr. 3) dan langkah-langkah berikut
diikuti [29]. • Kasing otak (tempurung kepala) dilepas secara miring menggunakan pisau tukang daging
dan tengkorak dilepas.

Otak terpapar dengan mengeluarkan darah, zat kelabu dan zat berlemak dengan foreceps dan kapas. •
Ujung anterior kemudian terlepas, yaitu saraf optik dan penciuman otak menggunakan foreceps dan
dengan hati-hati mengangkat seluruh otak tanpa mengganggu kelenjar hipofisis dan meletakkannya
kembali untuk mengekspos hipofisis di bawah membran. • Dengan hati-hati, membran dikeluarkan yang
menutupi kelenjar dan cairan menggunakan kapas dan kemudian kelenjar hipofisis benar-benar terbuka.
• Kemudian dengan hati-hati kumpulkan kelenjar pituitari dengan memasukkan ujung tumpul forsep
dan dipindahkan ke vial yang mengandung bahan pengawet, mis. Alkohol absolut atau aseton.

Preservation of pituitary glands There are three methods for preservation of fish pituitary glands
according the facilities available with the farmers, which are as described below. A. Preservation in
absolute alcohol Immediately after collection, the glands are washed and transferred to fresh absolute
alcohol in amber coloured glass vials. Every after 24 hrs, pituitary glands are washed with absolute
alcohol and stored at room temperature in a dark place to avoid the sunlight. To increase the shelf life of
the glands it is advised to refrigerate. During washing and storage, absolute alcohol dehydrates the
glands, dissolves fats and preserves it for a longer time (up to 2 years). Vials are labelled for information
includes date of collection, fish name, maturity stage and other details if any.

Paling sering, ekstrak kelenjar pituitari (PGE) disiapkan tepat sebelum injeksi. Berdasarkan berat induk
yang akan diinjeksi, jumlah total kelenjar yang dibutuhkan dihitung dan digunakan untuk persiapan
ekstrak. Sekitar 10% kelenjar ekstra diambil untuk mengkompensasi pemborosan selama prosedur
ekstraksi. Kelenjar yang diawetkan dikeluarkan dan dikeringkan menggunakan kertas blotting. Jika
kelenjar aseton-kering digunakan, mereka dapat langsung diambil untuk maserasi. Gunakan sepertiga
dari media untuk homogenisasi dan dua pertiga sisanya untuk membilas homogenizer dan batang kaca.
Untuk mempersiapkan ekstrak, awalnya kelenjar ditimbang dan dihomogenisasi dalam air suling atau
0,3% garam fisiologis dan kemudian suspensi disentrifugasi pada 5000rpm selama 5-10 menit.
Pertahankan tingkat pengenceran 20-30 mg hipofisis dalam 1,0 mL media. Setelah mentransfer konten
dari homogenizer jaringan ke tabung centrifuge, centrifuge ekstrak pada 5000 rpm selama 5-10 menit
(di lokasi pertanian dapat digunakan centrifuge (Gbr. 4D). Setelah itu, supernatan dikumpulkan
menggunakan jarum suntik untuk menginduksi perkembangbiakan.

Time of injection Most commonly injections are given in the evening hours considering the water
temperature is ideal during the night hours and expected successful breeding. Conclusion Quality seed is
the prime requirement for the fish breeding of any species. A few years back, the only source for
procurement of fish seed was from its natural spawning ground. By this method pure stock of seed of
selected species in adequate quantity could not be made available for farming. Last three decades have
witnessed a phenomenal growth in the technology of seed production of different species of fishes as a
result of which, at present, seed of many species of cultural value are available on a commercial scale.
More emphasis should be given to refine this technique species specifically to breed indigenous species
of market importance and to preserve the biodiversity.