Terapi gen sebagai alat potensial untuk mengobati neuroblastoma

22001101038 Ghina Nur Azizah

Pendahuluan

Neuroblastoma merupakan tumor padat yang disebabkan oleh pembelahan cepat

neuroblas yang tidak berdiferensiasi. Tumor ini menyerang anak-anak berusia 5 tahun. Beberapa
strategi dikembangkan dan diuji untuk menyembuhkan neuroblastoma, hal ini telah menemui
keberhasilan yang terbatas karena alasan yang berbeda. Banyak onkogen dideregulasi selama
onset dan perkembangan neuroblastoma dan dengan demikian menawarkan kesempatan untuk
menghindari penyakit ini jika ekspresi gen ini dikembalikan ke keadaan normal.

Terapi gen adalah alat yang ampuh untuk menghambat efek merusak dari onkogen
dengan memasukkan gen yang dikoreksi / normal ke dalam genom. Terapi gen berbasis vektor
virus dan non-virus telah dikembangkan untuk mengirimkan gen target ke dalam sel
neuroblastoma. Upaya ini telah memberikan harapan untuk membawa rezim pengobatan baru
melawan neuroblastoma. Beberapa strategi pengobatan berbasis terapi gen telah diuji dalam uji
klinis terbatas yang menghasilkan beberapa hasil positif.

Kanker, telah perhatian utama bagi kesehatan manusia. Beberapa upaya telah dilakukan
untuk pengobatan yang dapat mengancaman kesehatan ini. Namun beberapa pengobatan kanker
yang sudah berlangsung lama termasuk pembedahan, kemoterapi, radiasi, terapi hormon dan
terapi diferensiasi masih belum bisa mengobati kanker ini. Tantangan utama yang dihadapi
adalah ketidakmampuan untuk membedakan sel kanker dari sel jinak atau sel normal. Oleh
karena itu, terdapat banyak efek samping dari perawatan anti kanker yang mengakibatkan hasil
yang buruk dan banyak ketidaknyamanan bagi pasien. Dari banyak pengobatan yang tersedia,
terapi gen yang menggunakan vektor virus dan non-virus dengan cepat mulai berkembang.
Selama beberapa dekade terakhir, kanker telah menjadi kasus yang jelas untuk terapi gen. Saat
ini metode pengiriman gen virus dan non-virus digunakan untuk mencoba pengobatan bagi
banyak penyakit termasuk kanker.
METODE VIRAL

Keberhasilan terapi gen bergantung pada pengembangan sistem penargetan yang efisien.
Vektor virus telah banyak digunakan untuk terapi gen kanker karena kemanjuran transfer gen
yang relatif tinggi dengan mekanisme pembunuhan yang berbeda (Gambar 1 dan 2). Vektor
retroviral dan adenoviral adalah di antara sistem vektor yang paling sering dipilih. Meskipun
sistem pengiriman yang semakin efisien sedang dikembangkan, beberapa tantangan yang perlu
dielakkan dalam membuat vektor berbasis virus sebagai sistem pengiriman yang ideal termasuk
imunogenisitas, efektivitas transfer terbatas, stabilitas, tingkat ekspresi gen dan kurangnya
spesifisitas tumor.

Gambar 1. Mekanisme kematian sel

tertentu yang telah terbukti efektif pada
neuroblastoma.

Gambar 2. Dua strategi penggunaan

terapi gen untuk studi kanker

Retrovirus

Vektor retroviral sangat penting untuk peningkatan terapi gen. Salah satu keunggulan
mereka yang paling berbeda adalah kemampuannya untuk berintegrasi secara stabil ke dalam
genom inang yang memungkinkan transfer gen permanen. Mereka pertama kali digunakan
sebagai vektor terapi gen pada tahun 1990-an karena defisiensi Adenine deaminase. Pada tahun
2015, retrovirus telah digunakan sebagai sistem pengiriman untuk mentransfer gen target yang
berbeda dan di ~ 18,4% dari semua uji klinis untuk terapi gen di seluruh dunia.

Virus terkait adeno

Adeno-related virus (AAV) secara luas dan cepat mendapatkan popularitas sebagai
vektor terapi gen terutama karena non-patogenisitasnya pada manusia. Selain itu, AAV memiliki
imunogenisitas yang rendah dan mampu mentransduksi sel yang tidak membelah dan membelah
sehingga menjadi pilihan yang layak dalam mengobati neuroblastoma. Keuntungan lain dari
AAV sebagai vektor terapi gen adalah kemampuannya yang unik untuk ekspresi berkelanjutan
terutama dalam kasus neuroblastoma sehingga membentuk metode praktis untuk pengiriman gen
terapeutik jangka panjang. AAV juga memiliki sifat unik di mana ekspresi transgen yang stabil
dapat dicapai tanpa mempengaruhi proses angiogenesis normal. Ini membantu penggunaan
vektor ini dalam menargetkan tumor agresif dengan sifat metastasis.

Adenovirus

Adenovirus (Ad) dikenal sebagai vektor yang paling banyak digunakan untuk terapi gen dan
sekarang telah digunakan untuk menunjukkan kemajuan yang luas bahkan dalam kasus
neuroblastoma. Replikasi vektor Adenovirus yang rusak digunakan sebagai kendaraan
pengiriman gen dan vaksin, sedangkan vektor kompeten replikasi (oncolytic) digunakan untuk
terapi gen kanker. Istilah virus oncolytic mengacu pada kemampuan virus (melekat atau
direkayasa secara genetik) untuk secara khusus mengenali sel tumor dan kemudian
membunuhnya. Adenovirus dikenal non-patogen secara sistemik sambil memastikan siklus
replikasi yang panjang. Mereka juga menginduksi diferensiasi neuroblas sambil menghambat
proses siklus sel.

VEKTOR VIRAL LAINNYA

Virus polio dapat menginfeksi neuron motorik istimewa sementara tingkat mutasinya
yang tinggi memastikan aktivitas replikasi yang berkelanjutan. Virus polio oncolytic yang
direkayasa secara khusus menyebabkan eliminasi lengkap sel neuroblastoma setelah injeksi
intra-tumoral melalui imunitas yang dimediasi sel-T. Selain itu, virus ini juga 'memvaksinasi'
model tikus terhadap paparan lebih lanjut ke sel neuroblastoma, yang disuntikkan melalui vena
ekor. Virus polio tetap non-patogen dan kekebalan yang ada terhadap virus tidak menghambat
aktivitas replikasinya. Virus juga tidak menyebabkan kelumpuhan inang yang menunjukkan
keuntungan yang jelas dari penggunaan vektor ini. Namun, replikasi yang bergantung pada
kondisi dari vektor virus ini menyisakan sedikit ruang untuk penggunaannya dalam uji coba pada
manusia.
STRATEGI TERAPI GEN NON-VIRAL

Sementara pengobatan untuk neuroblastoma yang menggunakan vektor virus

mendapatkan daya tarik yang cepat, sering kali diketahui bahwa metode virus memiliki tingkat
kemanjuran yang lebih rendah karena tanggapan kekebalan yang tinggi yang mencegah regresi
tumor lengkap. Pengobatan klasik telah terbukti sia-sia karena tumor terus menunjukkan
resistensi. Pembersihan aliran darah yang cepat dari vektor virus telah sangat mengurangi
kesempatan untuk pemberantasan tumor sepenuhnya dengan menggunakan mekanisme ini.
Toksisitas jaringan yang timbul dari pengenalan sistemik dari vektor virus adalah penyebab
kekhawatiran lain yang mengarah pada pengembangan pengiriman gen sistemik yang lebih baik
dengan menggunakan vektor non-virus. Namun, tantangan terbesar dalam kasus metode
pengiriman nonviral adalah penargetan tumor yang tidak efisien. Beberapa terapi gen non-virus
baru yang akan datang menunjukkan pengiriman sistemik yang lebih efisien dengan tingkat
toksisitas rendah dan meningkatkan tingkat kelangsungan hidup bebas peristiwa. Misalnya,
menurunkan regulasi Ran (protein nuklir terkait Ras) dengan RNA terlindung transferin telah
terbukti mengurangi pertumbuhan tumor dalam model praklinis neuroblastoma tanpa toksisitas
yang signifikan.

KOMBINASI TERAPI GEN DAN SEL DENGAN TARGET NEUROBLASTOMA

MSC adalah sel induk dewasa multipoten dari garis keturunan mesodermal, yang dapat
diisolasi dari beberapa jaringan seperti sumsum tulang, dermis, tali pusat, darah tepi dan jaringan
adiposa. Sel-sel ini mampu berdiferensiasi menjadi lemak, tulang rawan, tulang, jaringan ikat
dan otot di seluruh tubuh dan ketika dilahirkan i.v. mampu memasukkan jaringan tumor dan
memprogram ke dalam fibroblast terkait tumor. Oleh karena itu, metode ini memanfaatkan
vektor Adenovirus yang direkayasa secara genetik dan mengkompensasi kurangnya kapasitas
penargetan tumor dengan menyuntikkan MSCs i.v. ke dalam sistem. Hal ini diamati menjadi
efektif dalam kasus neuroblastoma metastasis ekstra kranial terutama pada pasien dengan
kemungkinan rendah untuk bertahan hidup jangka panjang meskipun telah diberikan kemoterapi
dosis tinggi.

STUDI MANUSIA

Pada tahun 2010, seorang anak laki-laki berusia 6 tahun dengan neuroblastoma stadium 4
menjalani pengobatan berkelanjutan dari tiga regimen kemoterapi yang berbeda termasuk
transplantasi sel induk autologous. Dia disuntik dengan 1011 partikel virus Adv513 COXLD24
(dipandu ultrasound) langsung ke lokasi tumor. Partikel virus memiliki kapsid chimeric untuk
meningkatkan pengiriman gen ke sel, promotor COX2 yang menggerakkan gen E1A dan 24
penghapusan. Beberapa efek samping pengobatan termasuk demam, diare, sakit perut dan
kerusakan hati tingkat 2. Namun, 71% penurunan massa pada pencitraan CT tumor primer
diamati dengan penurunan penanda tumor serologis secara bersamaan. Partikel virus diamati
seiring dengan peningkatan limfosit T sitotoksik dalam darah 3 minggu setelah terapi diberikan.
Pasien tetap hidup 14 bulan setelah terapi.

KESIMPULAN

Neuroblastoma, tumor padat yang disebabkan oleh pembelahan cepat neuroblas yang
tidak berdiferensiasi, adalah keganasan paling umum pada masa kanak-kanak yang menyerang
anak-anak berusia 5 tahun. Beberapa pendekatan dan strategi yang dikembangkan dan diuji
untuk menyembuhkan neuroblastoma telah menemui keberhasilan yang terbatas karena alasan
yang berbeda. Banyak gen diketahui terlibat dalam permulaan dan perkembangan neuroblastoma
dan dengan demikian menawarkan kesempatan untuk menghindari penyakit ini jika ekspresi gen
ini dikembalikan ke keadaan normal. Terapi gen adalah alat yang ampuh untuk memodulasi
tingkat ekspresi gen target dalam sel tertentu dan hal yang sama dapat digunakan untuk
mengontrol neuroblastoma. Baik terapi gen berbasis vektor virus dan non-virus telah
dikembangkan dan diadopsi untuk mengirimkan gen target ke dalam sel neuroblastoma dengan
banyak di antaranya menunjukkan hasil yang menjanjikan. Upaya ini telah memberikan beberapa
harapan dalam mempertimbangkan terapi gen sebagai rezim pengobatan baru melawan
neuroblastoma. Sementara masa depan neuroblastoma masih belum jelas, fakta bahwa beberapa
strategi pengobatan berbasis terapi gen telah divalidasi dalam uji klinis yang memberikan hasil
positif menunjukkan bahwa teknologi ini dapat ditetapkan sebagai alat yang efektif untuk
mengatasi neuroblastoma. Upaya bersama untuk mengidentifikasi gen kandidat yang lebih kuat
dan cara pengiriman akan membuat terapi gen menjadi pengobatan pilihan dengan efek yang
tepat.
REFERENSI

Kumar, M. D., Dravid, A., Kumar, A., & Sen, D. (2016). Gene therapy as a potential tool for
treating neuroblastoma—a focused review. Cancer Gene Therapy.