Terapi debridemen maggot mempromosikan

penyembuhan luka kaki diabetik dengan mengatur

aktivitas sel endotel

Xinjuan Sun, Jin'an Chen, Jie Zhang, Wei Wang,

Jinshan Sun, Aiping Wang

PII: S1056-8727 (15) 00447-X

DOI: doi: 10.1016 /j.jdiacomp.2015.11.009
Referensi: JDC 6586

Muncul di: Jurnal Diabetes dan Komplikasinya

Tanggal diterima: 24 Mei 2015

Tanggal revisi: 7 November 2015
Tanggal diterima: 9 November 2015

Kutip artikel ini sebagai: Sun, X. , Chen, J. '., Zhang, J., Wang, W., Sun, J. & Wang, A.,
Terapi debridemen maggot mempromosikan penyembuhan luka kaki diabetik dengan
mengatur aktivitas sel endotel, Journal of Diabetes and Its Complications ( 2015), doi:
10.1016 / j.jdiacomp.2015.11.009

Ini adalah file PDF dari manuskrip yang belum diedit yang telah diterima untuk publikasi.
Sebagai layanan kepada pelanggan kami, kami menyediakan naskah versi awal ini.
Naskah akan menjalani penyalinan, penyusunan huruf, dan peninjauan kembali bukti yang
dihasilkan sebelum diterbitkan dalam bentuk akhirnya. Harap dicatat bahwa selama proses
produksi kesalahan dapat ditemukan yang dapat mempengaruhi konten, dan semua
penafian hukum yang berlaku untuk jurnal yang bersangkutan.

MANUSKRIP YANG DITERIMA

Terapi debridemen belatung meningkatkan penyembuhan luka kaki diabetik dengan

mengatur aktivitas sel endotel

Xinjuan Sun, Jin'an Chen, Jie Zhang, Wei Wang, Jinshan Sun, Aiping

Wang* IPT
th
Departemen Endokrinologi, The 454 Rumah Sakit PLA, Nanjing 210002, Cina

Penulis yang sesuai: Aiping Wang

R
Alamat surat: 1 # Malu Street, Nanjing, provinsi Jiangsu, PR China

Telepon: +008602580865160 Fax: 025-80865029

U
SC AN
M
EPTED
C
AC
DITERIMA MANUSCRIPT

Abstrak

Untuk mengetahui peran maggot debridement therapy (MDT) padaluka kaki diabetik

penyembuhan, kami membandingkan faktor pertumbuhan pada luka sebelum dan

sesudah perawatan.

IPT
Selanjutnya, kami menggunakan sel endotel vena umbilikalis manusia (HUVECs) untuk mengeksplorasi

respon terhadap ekskresi / sekresi belatung pada penanda angiogenesis dan proliferasi.
R
Hasil penelitian menunjukkan adanya neo-granulasi dan angiogenesis padakaki

diabetik SC
lukasetelah MDT. Selain itu, ketinggian yang signifikan pada tingkat CD34 dan CD68

juga U
diamati pada luka diobati. In vitro, ES meningkatkan proliferasi HUVEC,

memperbaikitabung AN
pembentukan, dan meningkatkan ekspresi reseptor faktor pertumbuhan endotel vaskular 2 dengan

cara yang bergantung pada dosis. Hasil ini menunjukkan bahwa MDT dan

maggot ES bisa M
mempromosikan penyembuhan luka kaki diabetik dengan mengatur aktivitas

sel endotel. EPTED

Kata kunci: ulkus kaki diabetik, terapi debridemen belatung, HUVEC, angiogenesis
 C
AC
MANUSKRIP YANG DITERIMA

Pendahuluan

Diabetes mellitus (DM) adalah salah satu penyakit paling umum yang menyerang lebih dari

371 juta orang di seluruh dunia pada tahun 2012. Pada tahun 2030, angka ini
diperkirakan akan
meningkat menjadi 552

IPT
juta (1). Dari semua komplikasi diabetes, ulkus kaki diabetik (DFU) adalah salah satupaling

sindrom yangmerugikan dan merugikan. DFS didefinisikan sebagai setiap

nekrosis, gangren,
atauR yang
cacat kulit ketebalan penuhterjadi di bagian distal pergelangan kaki pada pasien

diabetes (2). The SC

risiko seumur hidup mengembangkan ulkus kaki pada pasien dengan diabetes dapat

setinggi 25% U
(3), dan kejadian amputasi ekstremitas bawah telah dilaporkan 46.1-9,600

per 100.000 pasien-tahun (4) .

AN
Proses penyembuhan terganggu pada diabetes, yang merupakan hasil dari

beberapa intrinsik M
Faktor(neuropati, masalah vaskular, efek sistemik komplikasi lainnya akibat

EPTED
diabetes) dan faktor ekstrinsik (infeksi luka, pembentukan kalus, dan tekanan berlebihan

di lokasi) (5). Oleh karena itu, tujuan utama terapi DFU meliputi tindakan antibakteri dan

suplementasi faktor pertumbuhan dan sitokin, yang mengarah pada stimulasi granulasi,

epidermisasi, dan angiogenesis (6).

C
 AC
Maggot debridement therapy (MDT) menawarkan keuntungan penting untuk

pengelolaan luka kronis yang terinfeksi, dan digunakan di ratusan klinik di seluruh dunia

(7; 8). MDT diyakini memiliki efek pada setidaknya tiga komponen persiapan dasar luka:

secara efektif menghilangkan jaringan yang tidak dapat hidup, membantu memerangi

infeksi dengan mengurangi beban biologis, dan dapat memfasilitasi proses renovasi.

Dilaporkan bahwa larva dan sekresinya memiliki efek antibakteri, mengurangi

peradangan dan neo-angiogenesis, dan meningkatkan penyembuhan luka (9-11).

Meskipun debridemen dan kemanjuran penyembuhan luka dari MDT telah dibuktikan

dalam studi klinis, tidak ada mekanisme yang diusulkan baru-baru ini (12;

MANUSCRIPT DITERIMA

13).

Dalam studi ini, kami menyelidiki faktor neo-angiogenik pada luka sebelum dan sesudah

MDT, dan menggunakan sel endotel vena umbilikalis manusia (HUVECs) sebagai sistem

model (14)

untuk menentukan perubahan ini.

R

Bahan dan Metode 1. Pasien SC

U
IPT
Pasien dalam penelitian ini dipilih secara acak. Informed consent diperoleh sebelum

AN
MDT. Penelitian ini diizinkan oleh komite etik rumah sakit Junxie (yang merupakan nama lain dari 454th

RSUD). Kriteria inklusi adalah pasien yang berkisar antara 2 sampai 3 dengan

Wagner M
Klasifikasi, yang tidak memiliki iskemia tungkai bawah.

EPTED
2. Aplikasi belatung
 Larva steril (Lucilia sericata) yang diperoleh dari lab kami diberikan secara gratis kepada

pasien yang berpartisipasi dalam penelitian ini. Larva muda disiapkan secara individual

untuk setiap pasien dan diterapkan dengan kepadatan satu belatung per 50-80 / cm2 dari

area luka.

C
AC
belatung yang diterapkan untuk sekitar 72 atau 120 jam, tergantung pada toleransi pasien

dan evaluasi medis dari luka. Kriteria untuk menghentikan pengobatan mungkin termasuk

1) rasa sakit yang parah, dimana pasien sangat menolak prosedur ini; 2) belatung terlalu

besar untuk lepas dari luka.

3. Patologi

Jaringan dari ulkus pasien difiksasi dengan formalin. Bagian tertanam parafin setebal

lima mikrometer digunakan untuk pewarnaan. Bagian-bagian tersebut secara singkat

dibenamkan

MANUSCRIPT DITERIMA

dalam xilena, dihidrasi melalui larutan etanol bertingkat, dan diinkubasi dalam 3%

hidrogen peroksida selama 5 menit untuk menghilangkan aktivitas peroksidase

intrinsik. Bagian

diinkubasi semalaman pada suhu 4 ° C dengan antibodi anti-CD34 dan anti-CD68

(1: 100), dan IPT

diinkubasi selama 30 menit dalam goat anti goat horseradish peroxidase (HRP) -antisera, dan

kemudian selama 1 jam di kompleks antiperoksidase peroksidase

spesifik
spesies. R
3,30-diaminobenzidine (DAB) digunakan sebagai kromogen dengan bagian yang

dikembangkan dalam SC
0,75 mg / mL DAB dengan 0,015% hidrogen peroksida dalam buffer Tris.
4. Kultur sel
U AN
HUVEC ditanam dalam cawan kultur jaringan 100 mm (Falcon; BD Bioscience

Discovery Labware, Bedford, MA, USA), yang mengandung media kultur sel

standar M
terdiri dari Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM; Life Technologies,

EPTED
Carslbad, CA, USA) dan 10% serum janin sapi (FBS; Sigma-Aldrich, St. Louis, MI,

USA). Sel diinkubasi pada 37 ° C dalam 5% (volume / volume) CO2 suasana lembab.

5. Koleksi ekskresi / sekresi (ES)

C
AC
L. sericata larvayang telah menetas dan disimpan dalam kondisi steril digunakan

untuk MDT. ES dikumpulkan dari larva instar ketiga. Singkatnya, 20 larva dicuci dalam

10 mL larutan garam buffer fosfat steril (PBS, pH 7,3; Life Technologies) selama 48 jam

pada suhu 37 ° C untuk memulihkan produk ES. Konsentrasi protein ditentukan

menggunakan uji kolorimetri protein (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, USA), sesuai

dengan instruksi pabrik.

6. Uji stimulasi sel HUVEC (ekskresi / sekresi belatung)

Sekitar 1 × 104 Sel HUVEC diunggulkan di 96-piring sumur, dan diinkubasi

MANUSCRIPT DITERIMA

selama 24 jam pada 37 ° C dalam 5% (volume / volume) CO2 suasana lembab. Setelah
inkubasi, masing-masing sumur dicuci dengan fosfat buffered saline (PBS). Medium
segar yang

mengandung ES, DMEM, 0,5% serum janin sapi (FBS), dan penicillin-streptomycin (100

IPT
U / mL penisilin dan 100 μg / mL streptomisin; Life Technologies) ditambahkan. ES

diencerkan dengan DMEM untuk mencapai konsentrasi protein yang sesuai dansetara

volume PBS yangditambahkan sebagai pengganti ES untuk kontrol.

R
SC
Untuk tes 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT),

U
setelah diinkubasi dengan ES, 20 μL larutan MTT 5 mg / mL ditambahkan ke setiap

sumur dan AN
sel diinkubasi selama 4 jam tambahan. Selanjutnya, 150 μL DMSO ditambahkan ke

masing-masing sumur, dan absorbansi dibaca pada 490 nm pada pembaca pelat mikro.

7. PCR waktu nyata kuantitatif

M
EPTED
RNA diekstraksi dari sampel di dalam sumur menggunakan metode fenol-kloroform.

Untuk transkripsi balik, sistem transkripsi balik ImProm-II (Promega, Madison, WI,

USA) digunakan. Selanjutnya dilakukan PCR real-time kuantitatif untuk mendeteksi

CD34, CD68, dan β-aktin. Kondisi PCR adalah sebagai berikut: denaturasi pada 95 ° C untuk
C
AC
10 detik dengan anil berikutnya pada 54 ° C selama 30 detik dan ekstensi pada 72 ° C

selama 30 detik. Menggunakan fluoresensi SYBR Green I, amplifikasi dilakukan

(LightCycler480; Roche Diagnostics, Tokyo, Japan) sesuai dengan protokol standar.

Faktor pertumbuhan endotel vaskular (VEGF), CD34, dan ekspresi mRNA CD68

dinormalisasi menjadi β-aktin.

8. Pembentukan tabung sel endotel

Matrigel dicairkan pada suhu 4ºC semalaman dan setiap sumur dari pelat 24 sumur yang

telah didinginkan sebelumnya dilapisi dengan 100 μL Matrigel dan diinkubasi pada suhu

37ºC selama 45 menit. HUVECs (4 ×

ACCEPTED MANUSCRIPT

104 sel) ditambahkan ke 1 mL DMEM dengan berbagai konsentrasi ES. Setelah

 inkubasi selama 12 jam pada suhu 37ºC dan 5% CO2, pembentukan tabung sel

endotel

dinilai setelah pencitraan dengan mikroskop terbalik kamera digital

Nikon.tubular

IPT
Strukturdihitung dengan menghitung secara manual bidang daya rendah (50 ×), dan

persentase penghambatan dinyatakan sebagai sebagian kecil dari kontrol (sumur yang

tidak diolah = 100%).

9. Analisis Statistik
R SC
Untuk studi in vivo, hasil dinyatakan sebagai mean ± standard error (SE). Uji

U
-Mahasiswa tdigunakan untuk membandingkan hasil dan perbedaan dianggap signifikan

ketika P <0,05. Hasil

M
EPTED
AN
1. MDT mempromosikan penyembuhan luka diabetik

Untuk menentukan peran MDT pada penyembuhan luka diabetes, kami

mengumpulkan jaringan dari pasien sebelum dan sesudah MDT. Hasil kami

menunjukkan perbaikan klinis, seperti

pengurangan jaringan nekrotik dan pembentukan jaringan granulasi yang sehat (Gambar 1a).
C
AC
Efek samping MDT tidak diamati kecuali untuk nyeri analgesik yang dapat dikontrol

(data tidak dipublikasikan). Selain itu, kami mengamati peningkatan yang signifikan

dari tingkat CD34 dan CD68 setelah MDT oleh imunohistokimia (Gambar 1b) dan

oleh PCR (Gambar 1c).

2. ES meningkatkan proliferasi sel dan angiogenesis di HUVECs

Untuk mengidentifikasi mekanisme dimana MDT mempengaruhi penyembuhan luka,

 kami menilai efek ES, yang merupakan bahan aktif utama yang diproduksi oleh belatung,

pada HUVEC. Kami juga mengevaluasi proliferasi (MTT) dan apoptosis dengan

pewarnaan annexin V / propidium iodine (PI) pada HUVECs yang diobati dengan ES.

Dibandingkan dengan kelompok yang tidak diobati,ES yang diobati

MANUSCRIPT DITERIMA

selsecara signifikan meningkat dalam proliferasi HUVEC (Gambar 2a), dan apoptosis

menurun secara signifikan (Gambar 2b). Sementara itu, ES juga merangsang

pembentukan tabung histomorfologi (Gambar 2c). Hasil ini menunjukkan bahwa ES

mungkin memicusel endotel

aktivitas.

IPT
3. ES mempromosikan ekspresi VEGFR-2 dan CD34 di HUVECs
R
Kami menyelidiki lebih lanjut untuk menguji ekspresi CD34 dan VEGF-R2 di

HUVEC dengan SC
PCR. Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 3, ekspresi VEGF-R2 dan CD34

meningkat padadiobati dengan ES U yang

kelompok, yang menunjukkan bahwa VEGF-R2 dan CD34 dapat mengatursel endotel

aktivitassetelah pengobatan ES. Diskusi

AN M
EPTED
Masalah kaki pada diabetes terus menjadi tantangan bagi para dokter. Proses

penyembuhan sering terganggu akibat iskemia vaskuler dan berbagai kelainan

metabolisme yang terjadi pada pasien diabetes (5). Oleh karena itu, pembentukan

kembali

jaringan vaskular fungsional merupakan komponen penting dari perbaikan luka yang berhasil (15).
C
 AC
Angiogenesis menginduksi proliferasi sel endotel, diferensiasi, migrasi, dan organisasi ke

dalam jaringan tubular bercabang (16). Telah dilaporkan bahwa produk akhir glikasi

lanjutan dapat menyebabkan disfungsi sel endotel pada diabetes (17). Kami berhipotesis

bahwa strategi yang mempromosikan aktivitas sel endotel dapat berkontribusi pada

penyembuhan luka diabetes.

MDT adalah metode debridement biosurgical yang diterima (18), yang telah disetujui

oleh Food and Drug Administration Amerika Serikat untuk pengobatan luka yang tidak

dapat disembuhkan. Lebih lanjut, meta-analisis terbaru menunjukkan bahwa MDT secara

signifikan meningkatkan

ACCEPTED MANUSCRIPT

penyembuhan luka(19). Selain langsung menelan jaringan nekrotik, sifat penyembuhan

luka MDT telah dibuktikan dalam banyak penelitian (20; 21). Hasil klinis kami

menunjukkan bahwa luka membaik dan kadar CD34 dan CD68 meningkat setelah

MDT, di mana IPT

menunjukkan peningkatan angiogenesis. Ini menunjukkan bahwa MDT mungkin memiliki

peran potensial dalam menginduksi angiogenesis selama penyembuhan luka.

Namun, R
mekanisme molekuleryang mendasari proses ini masih belum jelas.

SC
Penelitian awal telah menunjukkan bahwa molekul yang memberikan efek

menguntungkan dari U
peralatan belatungterkandung dalam ES (9; 22; 23). Studi lebih lanjut tentang ES telah

mengungkapkan bahwamungkin AN
berkontribusi pada debridemen, desinfeksi, dan tindakan penyembuhan luka dari terapi belatung

(10). Studi kami sebelumnya menunjukkan aktivitas antibakteri ES (24). Pada saat ini

M
Studi, kami mengamati bahwa jaringan granulasi yang sehat dominan pada luka
 setelah EPTED
MDT. Oleh karena itu, ES digunakan untuk memverifikasi mekanisme MDT dalam

penyembuhan luka. Seperti yang diharapkan, ada peningkatan pembentukan tabung

setelah perawatan ES. Penting untuk disebutkan bahwa ekspresi CD34 dan VEGF-R2

dalam HUVEC yang diberi perlakuan ES dalamkami juga

eksperimenmeningkat. Oleh karena itu, dapat dibayangkan bahwa ES dapat bekerja sama dengan
C
AC
mencapai angiogenesis, yang pada akhirnya bermanfaat untuk penyembuhan luka, dan

proses ini mungkin melibatkan pensinyalan VEGF-VEGFR. Studi lebih lanjut tentang

jalur sinyal ini, termasuk faktor-faktor yang mengatur pensinyalan angiogenik, sedang

berlangsung.

Sebagai kesimpulan, kami mengamati bahwa MDT dapat meningkatkan penyembuhan

luka dengan meningkatkan proliferasi endotel, memicu angiogenesis, dan ekskresi /

sekresi belatung dapat memfasilitasi proses ini. Identifikasi lebih lanjut dari molekul

spesifik yang meningkatkan angiogenesis di MDT berpotensi mengarah pada penemuan

obat untuk terapi penyembuhan luka yang sulit ditangani.

YANG DITERIMA

Kontribusi penulis

MANUSKRIPXinjuan Sun memperoleh data penelitian dan menulis naskah. Aiping

Wang meninjau IPT

dan mengedit manuskripnya. Wei Wang dan Jie Zhang berkontribusi dalam diskusi dan

meninjau / mengedit naskah. Jin'an Chen dan Bocheng Zhao memperoleh data

penelitian

dan berkontribusi dalam diskusi. Ucapan Terima Kasih

R U
SC AN
Kami berterima kasih kepada Dr. Jing Wang atas bantuan teknisnya. Penulis melaporkan tidak ada
konflik

kepentingan dengan pekerjaan ini.

M
EPTED
C
AC
DITERIMA

Referensi

MANUSCRIPT1. Waniczek D, Kozowicz A, Muc-Wierzgon M, Kokot T, Swietochowska E, Nowakowska-

Zajdel E: Metode tambahan dari terapi ulserasi kaki diabetik standar.komplementer danberbasis bukti
Pengobatanalternatif: eCAM 2013; 2013: 243568

IPT
2. Schaper NC, Andros G, Apelqvist J, Bakker K, Lammer J, Lepantalo M, Mills JL, Reekers J, Shearman CP,
Zierler RE, Hinchliffe RJ , Kelompok Kerja Internasional tentang Diabetik f: Pedoman khusus untuk diagnosis
dan pengobatan penyakit arteri perifer pada pasien dengan diabetes dan ulserasi kaki 2011.
Penelitian dan tinjauan diabetes / metabolisme 2012; 28 Suppl 1:
236-237 R
3. Boulton AJ, Vileikyte L, Ragnarson-Tennvall G, Apelqvist J: Beban global penyakit kaki diabetik.
Lancet 2005; 366: 1719-1724

SC
4. Apelqvist J, Bakker K, van Houtum WH, Schaper NC, Kelompok Kerja Internasional untuk Kaki Diabetik
Editorial B: Panduan praktis tentang pengelolaan dan pencegahan kaki diabetik: berdasarkan Konsensus
Internasional tentang Kaki Diabetik (2007) Disiapkan oleh Kelompok Kerja Internasional tentang

U.
Kaki DiabetikPenelitian dan tinjauan diabetes / metabolisme 2008; 24 Suppl 1: S181-187 5. Falanga
V: Penyembuhan luka dan kerusakannya pada kaki diabetik. Lancet 2005; 366: 1736-1743

AN
6. Lavery LA: Efektivitas dan keamanan prosedur bedah elektif untuk meningkatkan penyembuhan luka dan
mengurangi ulserasi ulang pada pasien diabetes dengan ulkus kaki. Penelitian dan ulasan diabetes / metabolisme
2012; 28 Suppl 1: 60-63

7. Sherman RA, Hall MJ, Thomas S: Belatung obat: obat kuno untuk beberapa orang kontemporer M
penderitaan. Tinjauan tahunan entomologi 2000; 45: 55-81
8. Wollina U, Liebold K, Schmidt WD, Hartmann M, Fassler D: Biosurgery mendukung granulasi dan
debridemen pada luka kronis - data klinis dan pengukuran spektroskopi pengiriman uang.Internasional
 EPTED
Jurnal Dermatologi2002; 41: 635-639
9. van der Plas MJ, van der Does AM, Baldry M, Dogterom-Ballering HC, van Gulpen C, van Dissel JT,
Nibbering PH, Jukema GN: Ekskresi maggot / sekresi menghambat beberapa respons pro-inflamasi neutrofil.
Mikroba dan infeksi / Institut Pasteur 2007; 9: 507-514
10. Bexfield A, Bond AE, Morgan C, Wagstaff J, Newton RP, Ratcliffe NA, Dudley E, Nigam Y: Turunan asam
amino dari ekskresi / sekresi Lucilia sericata dapat berkontribusi untuk efek menguntungkan dari terapi belatung
melalui peningkatan angiogenesis. Jurnal dermatologi Inggris 2010; 162: 554-562 11. Horobin AJ, Shakesheff

KM, Pritchard DI: Belatung dan penyembuhan luka: penyelidikan efek C

sekresidari larva Lucilia sericata pada migrasi fibroblas kulit manusia melalui fibronektin permukaan -coated.

Perbaikan dan regenerasi luka: publikasi resmi dari Wound Healing AC

Society [dan] European Tissue Repair Society 2005; 13: 422-433
12. Dumville JC, Worthy G, Bland JM, Cullum N, Dowson C, Iglesias C, Mitchell JL, Nelson EA, Soares MO,
Torgerson DJ, Ven USIIt: Terapi larva untuk ulkus kaki (VenUS II): uji coba terkontrol secara acak. Bmj 2009;
338: b773Opletalova
13.K, Blaizot X, Mourgeon B, Chene Y, Creveuil C, Combemale P, Laplaud AL, Sohyer-Lebreuilly I,
Dompmartin A: Terapi belatung untuk debridemen luka: percobaan multicenter acak. Arsip dermatologi 2012;
148: 432-438
14. Park HJ, Zhang Y, Georgescu SP, Johnson KL, Kong D, Galper JB: Sel endotel vena umbilikalis manusia
dan sel endotel mikrovaskuler dermal manusia menawarkan wawasan baru tentang hubungan antara metabolisme
lipid dan angiogenesis. Ulasan sel induk 200; 2: 93-102
15. Wietecha MS, Dipietro LA: Pendekatan Terapi untuk Regulasi Angiogenesis Luka. Kemajuan dalam
perawatan luka 2013; 2:
81-86 16. Ribatti D, Nico B, Crivellato E: Aspek morfologi dan molekuler dari morfogenesis vaskular fisiologis.
Angiogenesis 2009; 12: 101-111
17. Liu SH, Sheu WH, Lee MR, Lee WJ, Yi YC, Yang TJ, Jen JF, Pan HC, Shen CC, Chen WB, Tien HR, Sheu
ML: Produk akhir glikasi lanjutan Nepsilon-carboxymethyllysine menginduksi cedera sel endotel: keterlibatan
defosforilasi VEGFR-2 yang diatur oleh SHP-1. The Journal of Pathology 2013; 230: 215-227
18. Cickova H, Cambal M, Kozanek M, Takac P: Pertumbuhan dan Kelangsungan Hidup Belatung Lucilia
sericata yang Dikantongi pada Luka Pasien yang Menjalani Terapi Debridemen Maggot.komplementer dan

ACCEPTED

Pengobatan alternatifMANUSCRIPT berbasis bukti: eCAM 2013; 2013: 192149

19. Wilasrusmee C, Marjareonrungrung M, Eamkong S, Attia J, Poprom N, Jirasisrithum S, Thakkinstian A:
Terapi belatung untuk ulkus kronis: A kohort retrospektif dan a meta-analisis. Jurnal bedah Asia / Asian Surgical
Association 2013;
20. Honda K, Okamoto K, Mochida Y, Ishioka K, Oka M, Maesato K, Ikee R, Moriya H, Hidaka S, Ohtake T,
Doi K, Fujita T, Kobayashi S, Noiri E: Mekanisme baru dalam debridemen maggot terapi: protease dalam
ekskresi / sekresi meningkatkan produksi faktor pertumbuhan hepatosit. Jurnal fisiologi Amerika Fisiologi sel
2011; 301: C1423-1430

IPT
21. Sun X, Jiang K, Chen J, Wu L, Lu H, Wang A, Wang J: Tinjauan sistematis terapi debridemen belatung untuk
luka yang terinfeksi kronis dan bisul. Jurnal internasional penyakit menular: IJID: publikasi resmi dari

International Society for Infectious Diseases 2014; 25: 32-37 R

22. Bexfield A, Nigam Y, Thomas S, Ratcliffe NA: Deteksi dan karakterisasi parsial dua faktor antibakteri dari

ekskresi / sekresi obat belatung Lucilia sericata dan aktivitasnya melawan SC

Staphylococcus aureus resistenmethicillin (MRSA). Mikroba dan Infeksi / Institut Pasteur 2004; 6: 1297-1304
23. Pavillard ER, Wright EA: Antibiotik dari belatung. Alam 1957; 180: 916-917 24. Jiang KC, Sun XJ, Wang
W, Liu L, Cai Y, Chen YC, Luo N, Yu JH, Cai DY, Wang AP:

U
Ekskresi / sekresi dari belatung yang telah diolah bakteri lebih efektif melawanPseudomonas aeruginosa
biofilm. PloS satu 2012; 7: e49815

AN M
 EPTED
C
AC
MANUSCRIPT DITERIMA

LegendaLegenda
GambarGambar 1 Pengaruh MDT pada penyembuhan luka pada diabetes. (a) Larva
steril (L. sericata) yang diperoleh dari lab kami disiapkan secara individual untuk

setiap pasien dengan satu belatung per IPT

50-80 / cm2 area luka. Belatung diaplikasikan setiap 72 atau 120 jam, dan
foto diambil untuk menentukan perubahan. (b) Sebelum dan sesudah MDT, jaringan
dari R
ulkus pasiendifiksasi dalam formalin dan diwarnai dengan anti-CD34 dan anti-

CD68; SC
Tingkat ekspresidiamati dengan mikroskop cahaya. (c) PCR waktu nyata kuantitatif
digunakan untuk mengevaluasi ekspresi mRNA CD34 (kiri) dan CD68 (kanan) dari
jaringan pasien
sebelum dan setelah MDT.
U AN
Gambar 2 Pengaruh ES pada aktivitas HUVEC. (a) HUVEC diinkubasi dengan ES dan kemudian

aktivitas metabolik diukur dengan uji MTT. (b) Pemaparan HUVEC ke ES selama 24
M
jam menginduksi apoptosis, yang ditentukan dengan pewarnaan annexin V / PI (sumbu

horizontal EPTED
berarti pewarnaan dengan annexin V, sumbu vertikal berarti pewarnaan dengan PI). (c)

Pembentukan tabung diukur secara histomorfologis.

Gambar 3 ES mempromosikan ekspresi VEGFR-2 dan CD68 di HUVEC. Sel diobati

dengan ES selama 12 jam dan kemudian ekspresi mRNA VEGFR-2 (kiri) dan CD68
 (kanan) C
dianalisis dengan PCR waktu nyata kuantitatif.

AC
MANUSCRIPT DITERIMA

IPT
R
SC
U
AN
M
EPTED
C
AC

Gambar 1
MANUSCRIPT DITERIMA
 IPT
R
SC
U
AN
M
EPTED
C
AC

Gambar 2

Gambar 3
MANUSCRIPT DITERIMA IPT
R
SC
U
AN
M
EPTED
C
AC