RESISTENSI QUINOLONE

Resistensi kuinolon menjadi masalah klinis umum yang mengancam penggunaan obat-obatan
ini. Mekanisme resistensi dikelompokkan ke dalam tiga kategori berbeda. Perubahan seluler
yang terkait dengan masing-masing mekanisme tidak saling eksklusif dan dapat terakumulasi
untuk menciptakan strain yang menunjukkan tingkat resistensi kuinolon yang sangat tinggi.
Target-Mediated Quinolone Resistance. Resistensi kuinolon paling sering dikaitkan dengan
mutasi spesifik pada girase dan / atau topoisomerase IV. Secara umum, mutasi enzim tipe I
memberikan resistensi obat <10 kali lipat. Seleksi untuk tingkat resistensi yang lebih tinggi (~
10-100 kali lipat) biasanya menghasilkan strain dengan mutasi pada kedua enzim. Meskipun
mutasi telah dipetakan di seluruh subunit A dan B girase dan topois omerase IV dalam
quinolone- strain resisten, asam amino yang paling sering bermutasi adalah residu serin dan asam
yang menjangkar jembatan ion air-logam. Mungkin, gangguan jembatan ion air-logam
menyebabkan resistensi kuinolon yang diamati. Biasanya, di kedua laboratorium dan isolat
klinis, perubahan di serin terdiri> 90% dari kolam mutan, dengan perubahan pada residu asam
yang terdiri dari sebagian besar lainnya mutasi. Secara umum, mutan girase dan topoisomerase
IV mempertahankan aktivitas pembelahan DNA tipe liar dengan tidak adanya obat. Namun,
kuinolon menunjukkan sedikit kemampuan untuk meningkatkan tingkat pembelahan DNA yang
dimediasi enzim pada konsentrasi yang relevan secara klinis. Lebih lanjut, pengikatan obat-
enzim berkurang secara signifikan, dan kuinolon kehilangan banyak kemampuannya untuk
menghambat ligasi DNA atau membentuk kompleks terner enzim-DNA-obat yang stabil, Mutasi
resistansi pada residu serin di girase dan topoisomerase IV tampaknya tidak mempengaruhi
aktivitas katalitik dengan tidak adanya obat. Sebaliknya, mutasi pada residu asam menurunkan
aktivitas katalitik keseluruhan 5-10 kali lipat. Ini mungkin menjelaskan, setidaknya dalam
sebagian, mengapa mutasi serin ditemukan jauh lebih sering. Residu serin sangat dilindungi di
seluruh spesies bakteri. Hal ini menimbulkan pertanyaan mengapa residu asam amino pada
girase dan topoisomerase IV yang tidak memiliki fungsi yang jelas selain memberikan kepekaan
terhadap kelas antibakteri sintetis dipertahankan secara konsisten di seluruh masa bakteri.
Kemungkinan yang menarik datang dari penelitian tentang nybomycin, antibiotik yang
diproduksi oleh Streptomyces spp. Senyawa ini menampilkan sedikit aktivitas melawan strain S.
aureus yang mengekspresikan girase tipe liar. Namun, nybomycin aktif terhadap strain yang
mengekspresikan Ser - »Leu quinolone-resistant GyrA. ° 7 Dengan demikian, residu serin yang
dilestarikan dapat mewakili "mutasi resistansi "yang memberikan perlindungan terhadap
antibiotik yang terjadi secara alami Plasmid-Mediated Quinolone Resistance. Baru-baru ini
plasmid yang membawa gen resistensi kuinolon telah diidentifikasi sebagai masalah klinis yang
muncul yang umumnya menyebabkan resistensi tingkat rendah (10 kali lipat). Namun, resistensi
setinggi ~ 250 kali lipat telah telah dilaporkan. Tidak seperti resistansi yang dimediasi target,
yang ditransmisikan secara vertikal dari generasi ke generasi, resistensi kuinolon yang dimediasi-
plasmid dapat ditransmisikan secara horizontal (melalui konjugasi bakteri) serta resistensi
kuinolon biasanya membawa gen tambahan yang menyebabkan resistensi. untuk kelas obat lain.
Namun, ulasan ini akan fokus pada mereka yang mempengaruhi sensitivitas kuinolon 5,71 secara
vertikal.

Tiga keluarga gen dikaitkan dengan resistensi kuinolon yang dimediasi-plasmid. Yang pertama
adalah gen Qnr, yang menyandikan protein (~ 200 asam amino panjangnya) yang merupakan
bagian dari keluarga protein pentapeptide repeat. Sekitar 100 varian Qnr telah diidentifikasi
hingga saat ini dan telah diklasifikasikan ke dalam setidaknya lima subfamili yang berbeda.
Protein ini berbagi homologi dengan McbG dan MfpA, yang merupakan DNA mimik.7473,70
Protein Qnr tampaknya memberikan resistensi quinolone dengan dua mekanisme berbeda.
Seperti McbG dan MfpA, mereka mengurangi pengikatan gyrase dan topoisomerase IV pada
DNA. Dengan demikian, mereka melindungi sel-sel dari kuinolon dengan menurunkan jumlah
target enzim yang tersedia pada kromosom. Mereka juga berikatan dengan gyrase dan
topoisomer IV dan menghambat kuinolon memasuki kompleks pembelahan yang dibentuk oleh
enzim.76,77,80,81. Protein berkode plasmid kedua yang terkait dengan resistensi kuinolon
adalah aac (6 ') - Ib-cr. 2,8 Protein ini adalah varian dari asetiltransferase aminoglikosida yang
mengandung dua mutasi titik spesifik, W102R dan D179Y. Enzim ini mengakumulasi nitrogen
tak bersubstitusi dari cincin piperazine C7 yang ditemukan dalam norfloxacin dan ciprofloxacin,
yang mengurangi aktivitas obat. Meskipun acetyltransferases aminoglyco-side jenis liar dan
mutan mampu asetilasi obat lain, hanya enzim mutan yang aktif terhadap kuinolon. Kelompok
ketiga protein resistensi kuinolon yang dikodekan-plasmid terdiri dari pompa efluks. Sejauh ini,
tiga telah diidentifikasi: OqxAB, QepAl, dan QepA2. Sedangkan dua protein yang terakhir telah
ditemukan dalam infeksi bakteri manusia, O ^ * AB terlihat hampir secara eksklusif pada infeksi
hewan. Resistensi Kuinolon yang Dimediasi oleh Kromosom. Kuinolon diatur oleh konsentrasi
seluler yang menentang aksi penyerapan obat yang dimediasi difusi dan eflux yang dimediasi
pompa. Berbeda dengan spesies Gram-positif, membran luar dari bakteri Gram-negatif
menimbulkan penghalang tambahan yang harus dilewati obat untuk masuk ke dalam sel. Oleh
karena itu, pemasukan obat pada spesies Gram-negatif difasilitasi oleh saluran protein yang
disebut porins. Jika ekspresi porin diregulasi, dapat menyebabkan resistensi level rendah
terhadap kuinolon.

Selain pengenalan pompa efl-encoded plasmid, peningkatan ekspresi pompa efflx-encoded

kromosom juga dapat menyebabkan resistensi kuinolon. Paling umum, peningkatan pompa ini
disebabkan oleh protein pengatur. Secara umum, perubahan mutasi dalam penyerapan kuinolon
dan retensi menyebabkan resistensi tingkat rendah dan tanpa adanya mekanisme resistensi
tambahan, tampaknya tidak menjadi masalah klinis utama. Namun, menurunkan konsentrasi
seluler kuinolon menciptakan latar belakang yang menguntungkan untuk bentuk resistensi lain
untuk dan diperbanyak.
Penjelasan Gambar 6
Mekanisme resistensi quinolone. (1) Resistansi yang dimediasi target. Mutasi di Girase dan
Topoisomerase IV melemah interaksi enzim. (2) Resistansi mediasi plasmid. (2A) Protein QNR
(Kuning) Turunkan ToSoisomerase-DNA mengikat dan melindungi kompleks enzim- dna dari
Quinolones. (2) -BR-CR adalah Ciprofloxacin dan Norfloxacin, menurunkan keefektifan mereka,
mengurangi efektivitasnya. (2C) Pompa eflux yang berkencil plasmid menurunkan konsentrasi
quinolones dalam resistensi. (3) resistansi kromosom.

MENGATASI RESISTENSI QUINOLONE

Seperti dibahas di atas, mutasi pada gyrase dan topoisomerase IV adalah penyebab paling umum
dari resistensi kuinolon tingkat tinggi. Oleh karena itu, pengembangan kuinolon baru yang
mempertahankan aktivitas melawan enzim bermutasi ini memiliki potensi untuk sangat
memperluas kemanjuran klinis obat ini. Sayangnya, tidak ada obat seperti itu yang muncul di
klinik. Rintangan awal untuk pengembangan obat terhadap girase resisten dan topoisomerase IV
adalah konsep bahwa tidak praktis untuk merancang kuinolon terhadap setiap mutasi yang
umum. Konsep ini didasarkan pada asumsi bahwa mutasi yang berbeda menyebabkan resistensi
oleh mekanisme yang berbeda. Studi terbaru menunjukkan bahwa ini bukan masalahnya. Seperti
dibahas di atas, sebagian besar mutasi yang relevan secara klinis menyebabkan resistensi
kuinolon melalui mekanisme bersama, yaitu dengan mengganggu jembatan ion air-logam.113
Oleh karena itu, setidaknya dalam teori, harus dimungkinkan untuk mengatasi sebagian besar
contoh resistensi yang dimediasi target dengan merancang obat seperti kuinolon yang tidak lagi
tergantung pada jembatan ion air-logam untuk interaksi utamanya dengan gyrase atau
topoisomerase IV. Studi terbaru yang meneliti quinazolinediones telah memberikan wawasan
tentang bagaimana hal ini mungkin. Quinazolinediones secara struktural mirip dengan kuinolon.
Namun, mereka tidak memiliki asam keto yang mengkelat ion logam penghubung. Berbeda
dengan kuinolon yang relevan secara klinis, beberapa quinazolinediones mempertahankan (atau
benar-benar menunjukkan aktivitas yang lebih tinggi) terhadap gyrase dan topoisomerase IV
yang membawa mutasi pada serin penahan atau residu asam. Pengamatan ini telah dilaporkan
menggunakan enzim yang dimurnikan serta strain bakteri yang resisten terhadap kultur. Studi
struktural menunjukkan bahwa kuinolon dan quinazolinedion berinteraksi dengan topoisomerase
IV dalam kantung pengikat obat yang sama. Dengan demikian, diyakini bahwa kerangka
quinazolinedione mampu memediasi pengikatan obat-enzim secara langsung dan tidak
memerlukan ion logam divalen. Untuk titik ini, karbonil C2 dari quinazolinediones kemungkinan
membentuk residu arginin yang dikonservasi (Arg121 berdasarkan penomoran E. coli GyrA) .
Namun, interaksi ini diharapkan lebih lemah daripada interaksi jembatan ion air-logam yang
digunakan oleh kuinolon. Memang, dengan tidak adanya substituen tambahan yang membentuk
interaksi yang kuat dalam quinazolinediones kompleks pembelahan memiliki aktivitas yang lebih
buruk daripada kuinolon yang terstruktur secara kognitif. Studi terbaru menunjukkan bahwa
interaksi antara
quinazolinediones yang sangat
aktif dan bakteri topoisomerase
tipe II dimediasi terutama
melalui kontak baru yang
dibuat oleh 3'-(aminometil)
pyrrolidinyl substituen C7. 3,9
Kelompok C7 ini tidak
terwakili dalam kuinolon yang
relevan secara klinis. .
Sayangnya, gugus 3'-
(aminometil) pyrrolidinyl juga
tampak memediasi kontak baru
dengan topoisomerase Ila dan
menghasilkan obat yang
meracuni enzim manusia.
Dengan demikian, salah satu
tantangan utama dalam
mengatasi resistensi kuinolon
adalah identifikasi substituen
C7 (dan berpotensi lainnya)
yang dapat membedakan antara
bakteri dan enzim tipe II
manusia. Studi awal telah
membedah peran substituen
kuinolon dan quinazolinedione
dalam memediasi pengikatan
dan fungsi obat terhadap
topoisomerase Ila. Mereka
menunjukkan bahwa adalah
mungkin untuk menghasilkan
obat yang mempertahankan aktivitas melawan enzim bakteri yang tahan kuinolon tanpa bereaksi
silang dengan enzim manusia. Dengan demikian, pendekatan "mekanistik" untuk penemuan obat
memiliki potensi.
Penjelasan Gambar 7
Peran substituen dan elemen inti kuinolon dan kuinazolinedion yang memediasi aktivitas obat
terhadap bakteri topoisomerase tipe II bakteri dan manusia. Hasil didasarkan pada studi dengan
B. anthracis topoisomerase IV dan human topoisomerase IIla.3 Untuk kuinolon, pengikatan obat
yang relevan secara klinis dengan topoisomerase IV dimediasi terutama melalui jembatan ion
air-logam. Ikatan kuinolon yang mengatasi resistensi dimediasi terutama oleh substituen pada
C7. Ikatan kuinolon dengan topoisomerase manusia Ila juga dimediasi oleh substituen C7.
Kelompok di C8 memengaruhi kemampuan kuinolon untuk bertindak melawan enzim tipe I
manusia tetapi tidak diperlukan untuk pengikatan obat. Untuk quinazolinediones, interaksi
antara obat dan topoisomerase tipe IV dan resisten) dimediasi melalui substituen C7. Efek
substituen C7 dan C8 pada aktivitas quinazolinedione terhadap topoisomerase Ia adalah sama
seperti yang dijelaskan untuk kuinolon. Grup amino N3 berperan dalam pengikatan
quinazolinediones dengan enzim manusia.