Dibuat larutan asam sulfanilat dengan melarutkan 0,1 gram asam sulfanilat dalam 20

mL aquadest dan diaduk hingga homogen. Larutan stok fosfor 100 mg/dL dibuat dengan
cara melarutkan 0,439 gram KH 2 PO 4 dalam labu ukur 100 mL dengan air lalu diad hingga
tanda batas. Selanjutnya adalah pembuatan larutan kerja fosfor standar 1;0,2;0,5 mg/dL.
Larutan ini dibuat dengan memipet 1 mL larutan stok fosfor ke dalam labu ukur 100 mL lalu
diencerkan dengan TCA 5%.selnjutnya dipipet 2 dan 5 mL dari larutan tersebut ke labu ukur
100 mL dan diad dengan TCA 10% hingga tanda batas. Pembuatan larutan ammonium
molibdat dilakukan dengan melarutkan 2,5 gram ammonium molibdat ke dalam 80 mL air
dan 30 mL H 2 SO4 .
Sampel urin yang telah disiapkan diencerkan dengan aquabides dengaan rasio 1:10.
Lalu dipipet 0,5 mL sampel dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan 4,5 mL
TCA 5%. Sampel lalu disentrifugasi pada kecepatan 1500 rpm semalam 5 menit dan diambil
supernatannya lalu dimasukkan ke dalam well yang telah disediakan. Selanjutnya dipipet 5
mL TCA 5% dan larutan standar ke dalam well. Selanjutnya sampel dan standar ditambahkan
0,4 mL larutan asam sulfanilat. Selanjutnya sampel diukur absorbansinya menggunakan
spektrofotometer. Plot absorbansi terhadap konsentrasi untuk penentuan konsentrasi.