No Perlakuan Hasil

1
2 Supernatan yang dihasilkan dibuang lalu CaCl2 di dalam tabung
ditambahkan ke dalam tabung 500 μl
CaCl2 dingin, diresuspensi kemudian
disentrifugasi dengan kecepatan 5.700 x g
selama 5 menit.
3 Supernatan dibuang kembali lalu CaCl2 di dalam tabung. Sampel menjadi
ditambahkan ke dalam tabun 200 μl keruh dan suhu turun
CaCl2 dingin, diresuspensi dan diinkubasi
dalam es.
4 Tabung diinkubasi lebih lanjut dalam es Sampel keruh agak kental
selama 20 menit, lalu diberi kejut panas
(heat-shock) selama 90 detik dengan suhu
42℃ dan segera dipindahkan ke dalam es
untuk diinkubasi kembali selama 10
menit.
Ditambahkan media LB ke dalam tabung Sampel keruh agak encer
mikrosentrifuga hingga 1 ml setelah
inkubasi 10 menit, dilanjutkan dengan
inkubasi dalam shaker-incubator pada
suhu 37℃ dengan kecepatan rotasi 150
rpm selama 1,5 jam.
Disiapkan media cawan Media cawan LB/Kan/X-Gal/IPTG siap
LB/Kanamisin/X-Gal/IPTG dengan cara digunakan
menambahkan 50 μl X-Gal dan 100 μl
IPTG ke media cawan LB/kanamisin, lalu
diinkubasi pada suhu 37℃ selama lebih
kurang 30 menit.
Sebanyak 100 μl hasil inkubasi Sampel tersebar pada cawan
ditumbuhkan dengan cara plating ke
media cawan LB/Kan/X-Gal/IPTG
Cawan diinkubasi selama 18 jam pada
suhu 37℃