Laporan 2015 B2P2TOOT Penentuan Parameter
Laporan 2015 B2P2TOOT Penentuan Parameter
Tahun : 2015
KEMENTERIAN KESEHATAN RI
BADAN PENELITIAN DAN PENGEMBANGAN KESEHATAN
BALAI BESAR LITBANG TANAMAN OBAT DAN OBAT TRADISIONAL
2015
LAPORAN PENELITIAN
Tahun : 2015
oleh
KEMENTERIAN KESEHATAN RI
BADAN PENELITIAN DAN PENGEMBANGAN KESEHATAN
BALAI BESAR LITBANG TANAMAN OBAT DAN OBAT TRADISIONAL
2015
i
SUSUNAN TIM PENELITI
Susunan personalia pada penelitian ”Penentuan Parameter Kontrol Kualitas Tiga
Bahan Baku Jamu Seledri (Apium grafiolens) Kepel (Stelechocarpus burahol) dan
Sembung (Blume balsamifera)” berdasarkan Surat Keputusan Kepala Balai Besar
Penelitian dan Pengembangan Tanaman Obat dan Obat Tradisional No.
LB.02.01/VI.3/678/2015 adalah sebagai berikut:
ii
SURAT KEPUTUSAN PENELITIAN
iii
iv
KATA PENGANTAR
Puji syukur kami panjatkan kepada Allah SWT atas rahmat-Nya sehingga kami dapat
menyelesaikan laporan penelitian yang berjudul “PENENTUAN PARAMETER
KONTROL KUALITAS TIGA BAHAN BAKU JAMU SELEDRI (Apium grafiolens)
KEPEL (Stelechocarpus burahol) DAN SEMBUNG (Blume balsamifera)”.
Hasil penelitian ini diharapkan dapat sebagai alternatif kontrol kualitas bahan baku jamu
terutama untuk ketiga simplisia seledri (Apium grafiolens) kepel (Stelechocarpus burahol)
dan sembung (Blume balsamifera)”.
Kami menyadari bahwa hasil penelitian ini jauh dari sempurna. Oleh karena itu segala
bentuk tanggapan terhadap laporan penelitian ini sangat kami harapkan sebagai
masukan untuk perbaikan serta sebagai bahan penelitian lebih lanjut.
Semoga jamu dapat dimanfaatkan dalam pelayanan kesehatan formal dan dapat
meningkatkan kesehatan masyarakat Indonesia.
v
ABSTRAK
Kandungan kimia yang merupakan parameter spesifik yang sangat dibutuhkan dalam
kontrol kualitas bahan baku jamu. Kandungan kimia dalam bahan baku jamu dapat
diartikan sebagai senyawa berkahsiat (zat aktif) atau zat penanda. Seledri (Apium
graviolens) Kepel (Stelechocarpus burahol) dan Sembung (Blume balsamifera)
merupakan 3 bahan baku jamu yang digunakan dalam ramuan jamu tersaintifik.
Kandungan kimia dalam ketiga bahan baku jamu tersebut ditetapkan sebagai total
flavonoid. Metode yang digunakan adalah spektrofotometri dengan reagen AlCl3 pada
panjang gelombang 420 nm. Simplisia seledri mengandung 0,42 – 0,69 %, Kepel 1,05 –
1,59 % dan Sembung 0,45 – 0,73% total flavonoid yang dihitung sebagai kuersetin.
vi
DAFTAR ISI
SUSUNAN TIM PENELITI ..................................................................................................... ii
SURAT KEPUTUSAN PENELITIAN .................................................................................... iii
KATA PENGANTAR .............................................................................................................. v
RINGKASAN EKSEKUTIF ................................................................................................... vi
ABSTRAK ............................................................................................................................. vi
DAFTAR ISI ......................................................................................................................... vii
DAFTAR TABEL ..................................................................................................................viii
DAFTAR GAMBAR..............................................................................................................viii
DAFTAR LAMPIRAN ...........................................................................................................viii
PENDAHULUAN ................................................................................................................... 1
A. Latar Belakang................................................................................................................ 1
B. Tinjauan Pustaka............................................................................................................ 2
C. Tujuan dan Manfaat ....................................................................................................... 4
METODE................................................................................................................................ 5
A. Kerangka Konsep ........................................................................................................... 5
B. Tempat dan Waktu ......................................................................................................... 5
C. Desain Penelitian ........................................................................................................... 5
D. Alat dan Bahan ............................................................................................................... 5
E. Prosedur Kerja ................................................................................................................ 5
F. Analisis ............................................................................................................................ 7
HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................................................................. 8
A. Seledri (Apium grafiolens) ............................................................................................. 8
B. Kepel (Stelechocarpus burahol) ................................................................................. 11
C. Sembung (Blume balsamifera) ................................................................................... 12
KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................................................... 14
UCAPAN TERIMA KASIH ................................................................................................... 15
KEPUSTAKAAN .................................................................................................................. 16
PENGESAHAN .................................................................................................................... 18
LAMPIRAN .......................................................................................................................... 19
vii
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Hubungan kadar baku kuersetin dengan serapan ................................................. 9
Tabel 2. Kadar total flavonoid sampel seledri ..................................................................... 10
Tabel 3. Kadar total flavonoid sampel kepel ....................................................................... 11
Tabel 4. Kadar total flavonoid sampel sembung................................................................. 12
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Herba dan simplisia seledri ................................................................................. 8
Gambar 2. Hasil pemindaian panjang gelombang sampel seledri ....................................... 8
Gambar 3. Hubungan serapan dan waktu inkubasi (operating time) ................................... 9
Gambar 4. Hubungan kadar kuersetin dengan serapan (kurva kalibrasi) ......................... 10
Gambar 5. Daun dan simplisia kepel .................................................................................. 11
Gambar 6. Daun dan simplisia sembung ............................................................................ 12
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Pembuatan baku kuersetin ............................................................................. 19
Lampiran 2. Perhitungan pengenceran baku kuersetin ...................................................... 20
Lampiran 3. Contoh perhitungan kadar total flavonoid ....................................................... 21
viii
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Efek yang ditimbulkan oleh suatu obat disebabkan oleh senyawa yang terkandung
didalamnya, demikian juga yang terjadi pada formula/ramuan obat tradisional (jamu).
Dalam formula obat konfensional (modern) komposisi dan kandungan kimia yang
bertanggung jawab terhadap aktifitas medis sudah sangat jelas, sehingga memudahkan
dalam mengontrolnya. Sedangkan ramuan jamu memiliki komposisi lebih dari 1
tumbuhan obat (simplisia) dimana masing-masing simplisia juga memiliki kandungan
senyawa kimia yang tidak sedikit. Senyawa-senyawa tersebut dalam interaksi yang unik
menimbulkan efek dalam tubuh, baik efek positif (terapetik) maupun efek negatif (efek
samping).
Klinik Saintifikasi Jamu, Balai Besar Litbang Tanaman Obat dan Obat Tradisional sejak
2007 telah melakukan penelitian berbasis pelayanan terhadap lebih dari 10 ramuan jamu,
5 diantaranya telah lolos sebagai “Jamu Tersaintifik” dari Komisi Nasional Jamu yaitu
ramuan jamu untuk hipertensi ringan, ramuan jamu untuk hiperurecemia, ramuan jamu
untuk wasir, ramuan jamu untuk dispepsia dan rauan jamu untuk artritis genu. Sedangkan
ramuan-ramuan yang lain masih dalam tahap penelitian baik penelitian preklinik yang
menguji khasiat dan keamanan terhadap hewan coba, penelitian observasi klinis (pre-
post test) dengan jumlah pasien terbatas dan segera memasuki tahap uji klinis (RCT)
yang melibatkan berbagai instansi, rumah sakit maupun dinas kesehatan daerah yang
tergabung dalam Jejaring Saintifikasi Jamu.
1
B. Tinjauan Pustaka
1. Seledri (Apium grafiolens)
Seledri (Apium graviolens) merupakan salah satu kaomponen utama dalam ramuan
jamu antihipertensi ringan yang telah mendapatkan sertifikat sebagai “Jamu
Tersaintifik” selain daun kumis kucing (Orthosiphon stamineus) dan pegagan
(Centela asiatica) (Agus T, 2012). Seledri berefek seperti kalcium antagonis, yaitu
beraktivitas pada reseptor pembuluh darah dan akan memberi efek relaksasi.
Naiknya tekanan darah pada penderita hipertensi menyebabkan pengencangan
pembuluh darah. Seledri bersifat menghambat pengencangan tersebut. Herba seledri
mempunyai efek hipotensi baik pada penderita hipertensi maupun pada percobaan
hewan pada pengukuran tekanan darah tikus secara tidak langsung, fraksi asam dari
ekstrak etanol memiliki efek penurunkan tekanan darah yang tidak terlalu besar tetapi
stabil (Anonim, 2000). Dalam batas dosis tertentu kekuatan dan lama efek penurunan
tekanan darah meningkat dengan bertambahnya dosis. Kandungan alkaloid dalam
seledri juga berefek sedatif dan antikonsulvan pada tikus . Konsumsi seledri dapat
mengurangi ketegangan pembuluh darah (Yoppi, 2007). Konsumsi herba seledri
segar lebih dari 200 g sekali minum dapat menyebabkan penurunan tekanan darah
secara tajam sehingga dapat terjadi shock. (Anonim, 2000)
Kandungan kimia seledri adalah Kandungan kimia pada seledri antara lain 11,21-
diokso-2β,3β,15α-trihidroksiurs-12-en-2-O-β-d-glukopiranosid 11,21-diokso-3β,15α,
24-trihidroksiurs-12-ene-24-O-β-d-glukopiranosid,21-diokso-3β,15α,24-trihidro
oksiolean-12-en-24-O-β-d-glukopiranosid, apigenin-7-O-[2′′-O-(5′′′-O-feruloil)-β-d-
apiofuranosil]-β-d-glukopiranosid (Kailan, 2009); manitol, apigenin-7-O-glukosida,
7,7-di-O-metilamentoflavon (Hadi S, 2008); asam d-galakturonat, l-ramnosa, l-
arabinosa, d-galaktosa (Ovodova, 2009). Flavonoid (apiin, apigenin, isoquersitrin),
kumarin (apigravin, apiumetin, apiumosid, bergapten, selerin, selereosid,
isoimperatorin, isopimpinelin, ostenol, rutaretin, seselin, umbeliferon, 8-hidroksi-5-
metoksipsoralen), manitol, minyak atsiri (3-butilftalida, limonen, santalol, selenin,
sedanenolid, eudesmol) (Anonim, 2007)
2
2. Kepel (Stelechocarpus burahol)
Kepel secara tradisional digunakan sebagai obat untuk menurunkan kadar asam urat
dan diuretik. Aktivitas flavonoid sebagai penurun kadar asam urat diperoleh melalui
penghambatan enzim xantin oksidase (Purwantiningsih, 2010) Flavonoid selain dapat
menghambat enzim xantin oksidase juga bersifat sebagai antioksidan penangkap
radikal superoksida (Sunarni, 2007). Hasil penelitian menunjukkan pemberian infus
daun kepel bisa menurunkan kadar asam urat darah pada tikus dan ayam. Fraksi
larut dan tidak larut petroleum eter daun kepel dapat menyebabkan penurunan kadar
asam urat darah ayam hiperurikemia. Ekstrak etnaol dan ekstrak heksan dari daun
kepel juga memiliki aktivitas hipourikemia yang signifikan (Purwantiningsih, 2009)
Daunnya mengandung flavonoida dan polifenol. Daun kepel telah diteliti mampu
menurunkan kadar asam urat darah hewan uji dengan kemungkinan kandungan
aktifnya flavonoid yang memiliki aktivitas anti-oksidan kuat sehingga diprediksi
memiliki juga efek menghambat enzim xantin oksidase.
Kandungan kimia kepel antara lain flavonoid, tanin dan steroid. Daun, daging buah,
biji dan akar kepel mengandung saponin, flavonoid dan polifenol. Bijinya
mengandung alkaloid. Kulit batang mengandung alkaloid fenantren laktam,
aristolaktam B1 dan B2. Kulit batang dan daun mengandung senyawa sterol,
ergosterol, stigmasterol dan β-sitosterol (Rahminiwati, 2010)
3
3. Sembung (Blume balsamifera)
a. Tujuan Umum
b. Tujuan Khusus
1). Memperoleh metode kontrol kualitas yang sesuai pada bahan baku jamu
seledri
2). Memperoleh metode kontrol kualitas yang sesuai pada bahan baku jamu kepel
3). Memperoleh metode kontrol kualitas yang sesuai pada bahan baku jamu
sembung
2. Manfaat
Dengan diperolehnya informasi parameter kontrol kualitas dan metode yang sesuai
maka penjaminan kualitas bahan baku yang digunakan dalam penelitian Saintifikasi
Jamu dapat dilaksanakan secara rutin dan memberikan hasil yang berkelanjutan.
4
METODE
A. Kerangka Konsep
Bahan Jamu
Metode Analisis
Efek Farmakologi
- Khasiat
- Keamanan
C. Desain Penelitian
Jenis penelitian ini adalah eksperimental laboratorium.
E. Prosedur Kerja
a. Penyiapan Bahan Uji
Simplisia yang diperoleh dari kebun budidaya Balai Besar Litbang Tanaman Obat
dan Obat Tradisional, dibersihkan, dipisahkan dari bahan pengotor, selanjutnya
5
dicuci, ditiriskan, dan di potong. Bahan dikeringkan dengan menggunakan oven
pada suhu 500C hingga kandungan air mencapai yang dipersaratkan FHI.
Ditimbang seksama 200 mg serbuk simplisia, dimasukan dlam labu alas bulat,
di tambahkan laritan 20 ml HMC 20 ml, tambhakan 1 ml HCL pekat dan 20 ml
aseton, direfluks 30 menit, diangkat dan didinginkan, disaring ampas
dipisahkan dari filtratnya untuk ditambah dengan 20 ml aseton dan di refluks
kembali selama 30 menit, diangkat, didinginkan dan disaring. Filtrat di
kumpulkan dan di genapkan menjadi 100 ml dengan labu takar. Diambil 20 ml
ditambah 20 ml air dan di partisi dengan asam asetat sebanyak 3 kali,
dilanjutkan dengan digenapkan menjadi 50 ml menggunakan labu takar hingga
diperoleh larutan uji.
2) Metode Modifikasi
Dibuat kurva kalibrasi dengan pembanding kuersetin pada kadar 10-50 ppm
6
F. Analisis
Data yang diperolah dibandingkan dan dioleh dengan program statistik untuk
mengetahui perbedaan yang terjadi.
7
HASIL DAN PEMBAHASAN
Dilakukan konfirmasi terhadap metode penetapanan parameter kontrol kualitas yang
disarankan oleh farmakope herbal Indonesia. Selanjutnya di bandingkan dengan metode
lain atau metode yang dimodifiklasi sehingga diperoleh pengerjaan lebih cepat,
sederhana dan murah yaitu dengan melakukan beberapa modifikasi dalam tahapan-
tahapannya.
8
Oleh sebab itu kandungan total flavonoid 0,6% yang dihitung sebagai apiin tidak
dapat diterapkan. Sehingga dilakukan standardisasi tersendiri berdasarkan
kandungan total flavonoid yang dihitung sebagai kuersetin. Tahapan yang dilakukan
adalah :
1. Penentapan operating time
Penetapan operating time untuk mendapatkan waktu reaksi yang memberikan
respon serapan yang stabil.
2. Kurva Kalibrasi
Hubungan antara kandungan kuersetin dengan respon absorbansi dinyatkan
dalam bentuk kurva kalibrasi sebagaiman disajikan dalam tabel 1 dan gambar 4.
Tabel 1. Hubungan kadar baku kuersetin dengan serapan
Kadar
No Serapan Persamaan
Kuersetin (ppm)
1. 10,78 0,109 A = -0,032
2. 21,56 0,239 B = 0,013
3. 32,34 0,389 R = 0,996
4. 43,12 0,549
5. 53,90 0,655
9
Gambar 4. Hubungan kadar kuersetin dengan serapan (kurva kalibrasi)
Kadar Total
No Sampel
Flavonoid
1 0,42
2 0,45
3 0,45
4 0,46
5 0,47
6 0,52
7 0,54
8 0,55
9 0,56
10 0,62
11 0,74
12 0,87
Rata-rata 0,55
Sedangkan pada parameter non spesifik yang meliputi kadar sari dan kadar abu
kurang dapat digunakan sebagi patokan karena data yang diperoleh memiliki
koefisien variasi yang sangat besar, sehingga kurang dapat digunakan sebagai
10
patokan. Kadar sari larut alkohol mulai dari 12,34 s.d 40,92% dengan koefisien
variasi 21,80%; dan kadar abu 13,9 s.d 19,24%
Kadar Total
No Sampel
Flavonoid
1 1,01
2 1,04
3 1,05
4 1,23
5 1,26
6 1,27
7 1,29
8 1,32
9 1,35
10 1,38
11 1,67
12 1,95
Rata-rata 1,32
11
C. Sembung (Blume balsamifera)
Kadar Total
No Sampel
Flavonoid
1 0,40
2 0,41
3 0,49
4 0,50
5 0,62
6 0,62
7 0,62
8 0,72
9 0,76
10 0,77
11 0,40
12 0,41
Rata-rata 1,32
12
Hasil modifikasi metode yang ada diperoleh nilai kadar total flavonoid mulai dari 0,40 s.d
0,77% dengan rata rata 0,59+0,14%.
13
KESIMPULAN DAN SARAN
Parameter kontrol kualitas spesifik yang dapat diterapakan dalam bahan baku jamu
Seledri (Apium graviolens), Kepel (Stelechocarpus burahol) dan Sembung (Blume
balsamifera) adalah dengan penetapan total flavonoid yang dihitung sebagai kuersetin.
1. Kadar total flavonoid yang dihitung sebagai kuersetin dalam simplisia Seledri
adalah 0,42 – 0,69%
2. Kadar total flavonoid yang dihitung sebagai kuersetin dalam simplisia Kepel
adalah 1,05 – 1,59%
3. Kadar total flavonoid yang dihitung sebagai kuersetin dalam simplisia Sembung
adalah 0,45 – 0,73 %
14
UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis beserta tim dalam penelitian ini memanjatkan puji dan syukur kepada Tuhan
Yang Maha Esa karena berkat rahmat dan karunia-Nya sehingga kami dapat
menyelesaikan penelitian yang berjudul “PENENTUAN PARAMETER KONTROL
KUALITAS TIGA BAHAN BAKU JAMU SELEDRI (Apium grafiolens) KEPEL
(Stelechocarpus burahol) DAN SEMBUNG (Blume balsamifera)” Selain itu, kami ingin
mengucapkan terima kasih kepada:
1. Indah Yuning Prapti, SKM., M.Kes. dan Dra. Lucie Widowati M.Si., Apt. selaku
Kepala Balai Besar Litbang Tanaman Obat dan Obat Tradisional yang telah
memberikan kesempatan, dukungan dan fasilitas untuk terlaksananya penelitian
ini.
2. Drs. Slamet Wahyono M.Sc., Apt., selaku Ketua Pembina Penelitian Ilmiah yang
telah memberikan bimbingan dalam penelitian ini.
3. Dr.rer.nat Yosi Bayu Murti, M.Si., Apt. yang telah banyak memberikan arahan,
saran dan bimbingan dalam pelaksanaan penelitian ini.
4. Kelompok peneliti di Balai Besar Litbang Tanaman Obat dan Obat Tradisional
Tawangmangu atas segala bantuan dan konsultasinya.
Dan semua pihak yang tidak dapat kami sebutkan satu persatu yang telah membantu
dalam menyelesaikan penelitian ini. Semoga upaya penelitian ini dapat bermanfaat untuk
meningkatkan derajat kesehatan masyarakat dan kiranya Allah SWT selalu melimpahkan
rahmat dan hidayah-Nya kepada kita semua.
15
KEPUSTAKAAN
Alia DMH, KC Wonga, and PK Lima, 2005, Flavonoids from Blumea balsamifera,
Fitoterapia, vol. 76: 128-130.
Anonim, 2000, Acuan Sediaan Herbal, vol. 1, Badan POM RI, Jakarta.
Anonim, 2010, Peraturan Menteri Kesehatan No. 003/MENKES/PER/I/2010 tentang
Saintifikasi Jamu dalam Penelitia Berbasis Pelayanan Kesehatan, Menteri
Kesehatan RI
Anonim, 2007, Seledri (Apium graveolens), Serial data ilmiah terkini tanaman obat, Badan
Pengawasan Obat dan Makanan, Jakarta
Anonim, 2008, Farmakope Herbal Indonesia, Departemen Kesehatan, Jakarta
Giri, L., Andola, H. C., Purohit, V. K., Raurat, M. & Bhatt, I. 2010, Chromatographic and
Spectral Fingeprinting Standardization of Traditional Medicines : An overview
as Modern Tools. Research Journal of Phytochemistry 4 (4), 234-241.
Hadi S, 2008, Isolasi dan Identifikasi Komponen Kimia Ekstrak Etanol 95% dari Apium
graveolens Linn. Var secalinum alef, Tesis. ITB Central Library , Bandung
Indonesia.
Kailan Z, F Zhao, Z Liu, Y Zhuang, L Chen and F Qiu, 2009, Triterpenoids and flavonoids
from Celery (Apium graveolens), Department of Natural Products Chemistry, J.
Nat. Prod., 72(9): 1563–1567
Kementerian Kesehatan RI, 2010, Vademekum Tanaman Obat, Jakarta, Departemen
kesehatan
Liang, Y.Z., Xie, P. & Chan, K. 2004, Quality control of herbal medicines. Journal of
Chromatography B, 812, 53–70.
Ovodova RG, VV Golovchenko, SV Popov, GY Popova, NM Paderin, AS Shashkov, and
YS Ovodov, 2009. Chemical composition and anti-inflammatory activity of
pectic polysaccharide isolated from celery stalks, J. Food Chemistry, vol. 114,
2(15): 610-615
Purwantiningsih and A.H. Rahman, 2009, In Vivo Study of The Hypouricemic Effect of
The Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. F. & Th.) Leaves Extract
Compared with Allopurinol, Malaysian Journal of Pharmacy, 1(7).
Purwantiningsih, A.H. Rahman and I. Purwantini, 2010, Antihyperuricemic Activity of The
Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. F. & Th.) Leaves Extract and
Xanthine Oxidase Inhibitory Study, International Journal of Pharmacy and
Pharmaceutical Sciences (IJPPS), 2(2): 123-127.
Rahminiwati, M., I. Batubara, S. Sa’diah, L.K. Darusman and T. Mitsunaga, 2010, Anti-
acne Potency of Kepel (Stelechocarpus burahol)’s Leaf and Fruit. Proceeding
of International Conference on Medicinal Plants. Surabaya. Indonesia, 287-291.
Soares PK & Scarminio IS. 2008, Multivariate chromatographic fingerprint preparation
and authentication of plant material from the genus Bauhinia. Phytochem Anal.
19:78-85
Sunarni, T., 2007, Flavonoid Antioksidan Penangkap Radikal dari Daun Kepel
(Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook f. & Th.), Majalah Farmasi Indonesia, 18(3):
111-116.
16
Yoppi I, 2007, Tanaman obat yang berkhasiat sebagai antihipertensi, Karya Ilmiah
Fakultas Farmasi UNPAD.
17
PENGESAHAN
Menyetujui
Kepala Balai Besar Litbang
Tanaman Obat dan Obat Tradisional
18
LAMPIRAN
Lampiran 1. Pembuatan baku kuersetin
Berdasarkan COA yang ada, kuersetin (BM 302,27) tersedia dalam bentuk kuersetin
dihidarat (MB 338,27) dengan kemurnian > 98%, sehingga kadar kuersetin dengan
penimbangan 24,62 mg dan dilarutkan dalam 20,0 ml Metanol adalah:
19
Lampiran 2. Perhitungan pengenceran baku kuersetin
Pembuatan larutan baku apigenin, kuersetin, rutin dan hesperidin dengan kadar yang
lebih rendah dilakukan pengenceran berdasarkan rumus
C2 x V2
C1 x V1 = C2 x V2 atau V1 =
C1
Di mana C1 : Kadar kuersetin induk
C2 : Kadar kuersetin yang diinginkan
V1 : Volume kuersetin induk yang dibutuhkan
V2 : Volume akhir kuersetin pada kadar yang diinginkan
Contoh: Untuk membuat 10,0 ml baku apigenin 21,56 ppm maka diperlukan
larutan baku apigenin 215,6 ppm sejumlah:
C2 x V 2
V1 =
C1
21,56 ppm x 10,0 ml
=
215,6 ppm
= 1 ml
Jadi 1 ml larutan baku kuersetin 215.6 ppm ditambah dengan 9,0 ml metanol akan
menghasilkan larutan baku kuersetin dengan kadar 21.56 ppm.
20
Lampiran 3. Contoh perhitungan kadar total flavonoid
Hasil pembacaan baku kuersetin pada panjang gelombang 420 nm diperoleh persamaan
kurva kalibrasi : y = 0,013 x – 0,032 dengan koefisien korelasi 0,996
Kadar
No Serapan Persamaan
Kuersetin (ppm)
1. 10,78 0,109 A = -0,032
2. 21,56 0,239 B = 0,013
3. 32,34 0,389 R = 0,996
4. 43,12 0,549
5. 53,90 0,655
Pada sampel seledri no 8 dari hasil pembacaan diperoleh absorbansi 0,391 diplotkan
dalam persamaan kurva kalibrasi diperoleh :
Y = 0,013 x -0,032
0,391 = 0,013 x -0,032
(0,391 + 0,032)
x=
0,013
x = 27,57 ppm
Dalam larutan sampel yang direaksikan terdapat total kuersetin sebesar 27,57 ppm.
Volume larutan sampel yang direaksikan adalah : 10 ml x pengenceran 2 kali = 20 ml.
Dalam 15 ml larutan yang direaksikan terdapat :
27,57 x 20
x=
1.000
= 0,5515 mg
Berat penimbangan sampel adalah 100,3 mg, sehingga kadar flavonoid dalam sampel
adalah
0,5515
kadar = x 100%
100,3
= 0,55 %
21