RESPON IMUN SELULER TERHADAP INT0KSIKASI

2,3,7,8 TETRACHLORODIBENZO-p-DIOXIN PADA TIKUS

(The Cellular Immune Respon on the Intoxication
of the 2, 3,7, 8 Tetrachlorodibenzo-p-Dioxin in Rats)

R. Susanti
Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Negeri Semarang, Semarang

ABSTRAK

Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi efek 2,3,7,8 tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD) terhadap
respon imun seluler khususnya aktivitas proliferasi limfosit terhadap stimulasi con-A. Enam belas ekor tikus
putih jantan galur Sprague-Dawley berumur 2-2,5 bulan dengan berat badan 170-200 g diadaptasikan dengan
kondisi lingkungan penelitian selama 1 minggu. Semua tikus dibagi secara acak menjadi dua kelompok, masing-
masing kelompok terdiri dari 8 ekor. Kelompok pertama diberi 1 ml/kg bb/oral/hari PBS pH 7,2 sebagai placebo,
selama 60 hari. Kelompok kedua diberi 2,3,7,8 TCDD secara oral dengan dosis 5 mg,/kg bb pada hari pertama
dan 1 gg/kg bb/hari pada hari berikutnya selama 60 hari. Pada hari ke 30 dan 60, setiap kelompok diambil 4 ekor
tikus secara acak untuk diambil darahnya melalui pleksus retroorbitalls. Sampel darah dengan antikoagulan
selanjutnya diisolasi sel-sel limfosit dengan metode densitas gradien menggunakan histopaque-1077. Sel-sel
limfosit selanjutnya diamati aktivitas proliferasinya dengan distimulasi Con-A. Hasil penelitian menunjukkan
bahwa TCDD menurunkan respon imun seluler terutama indeks proliferasi limfosit (P<0.05) terhadap stimulasi
Con-A. Penurunan aktivitas proliferasi secara signifikan (P<0.05) terlihat pada pemberian TCDD selama 30
hari.

Kata kunci: 2,3,7,8 tetrachlorodibenzo-p-dioxin, respon imun seluler, limfosit

ABSTRACT

A research was conducted to evaluate the effects of the 2,3,7,8 tetracholorodibenzo-p-dioxin (TCDD)
on the cellular immune respon, especially proliferation activities of lymphocytes by Con-A stimulation.
Sixteen male Sprague Dawley rats, 2-2.5 months of age and 170-200 g of body weight were adapted to the
research environment for one week. All rats were randomly allotted into 2 groups of 8 rats. The first group was
given 1 ml/kg bw/oral./day of PBS pH 7,2 as placebo for 60 days. The second group was treated orally with
2,3,7,8 TCDD 5 mg/kg bw on the first day and followed by 1 mg TCDD/ kg bw/day for 60 days. On the day of
30 and 60, 4 rats in each group were randomly selected and blood samples were collected from retroorbital
plexus. The lymphocytes were separated by the density gradient methods using Histopaque-1077 for the
study of proliferation activities. The results of study indicated that the TCDD reduced the cellular immune
respon, especially the proliferation activies of lymphocytes by Con-A stimulation (P<0.05). The proliferation
activities were greatly reduced on the clay of 30 (P<0.05).

Keywords: 2,3,7,8 tatraclorodibenzo-p-dioxin, cellular immune respon, lymphocytes

The Intoxicationof the 2,3,7,8 Tetrachlorodibenzo-p-Dioxin in Rats (Susanti) 21

 PENDAHULUAN
Pencemaran dioksin pada berbagai produk
hewan seperti susu, produk yang mengandung susu,
daging ayam, daging sapi, telur serta produk hewan
lainnya terjadi pada awal tahun 1999 di Belgia,
belanda dan Perancis. Indonesia, sebagai salah satu
negara pengimpor beberapa. produk dari negara-
negara tersebut terpaksa menghentikan impor dan
menarik produk yang sudah terlanjur beredar.
Percemaran tersebut berasal dari kontaminasi dioksin
pada makanan ternak yang didistribusikan ke ratusan
petemakan di negara-negara Eropa (Winarno, 1999).
Pencemaran dioksin juga pernah terjadi di USA tahun
1949, 1971 dan 1977, di Vietnam tahun 1962, di Jepang
dan Cina tahun 70-an dan di Seveso, Italia tahun
1976 (Murray dan Thomas, 1992).
Dioksin merupakan produk samping senyawa
berbagai proses yang dilakukan oleh manusia seperti
pembuatan pestisida golongan tertentu dan
pembakaran bahan-bahan mengandung hidrokarbon
klorin. Proses pembuatan pestisida golongan fenoksi
dan klorofenol akan membebaskan sejumlah
kongener dioksin yang terkandung dalam pestisida.
tersebut (Ray dan Prasad, 1992). Pembakaran bahan-
bahan mengandung hidrokarbon terklorinasi seperti
polivinilklorida (PVC), poliklorobifenil (PCB), limbah
rumah sakit, limbah rumah tangga dan pembakaran
kertas yang diputihkan dengan klorofenol akan
menghasilkan dioksin (Roeder et al., 1998; Feil dan
Ellis, 1998).
Dioksin adalah senyawa organik yang
mengandung karbon, hidrogen dan klorin dengan
nama umum polychlorodibenzo-p-dioxin (PCDD).
Kongener dioksin tergantung pada jumlah dan letak
ion Cl - pada inti struktur dioksin. Diantara 75
kongener PCDD, yang paling toksik adalah 2,3,7,8
tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD). Menurut orga-
nisasi kesehatan dunia WHO, TCDD termasuk
karsinogenik paling berbahaya dan beracun
(Osweller et al., 1985).
Dioksin dapat memasuki tubuh melalui rantai
makanan, kontak dengan kulit, inhalasi dan
transplasenta (Roeder et al., 1998; Haschek dan
Rouseaux, 1991). Rantai makanan merupakan jalur
utama pemasukan dioksin ke dalam tubuh, baik
secara langsung melalul dioksin yang terkandung
22
dalam makanan maupun secara tidak langsung oleh
proses pengemasan/pengepakan jika menggunakan
bahan chlorinated hidrocarbon. Makanan asal hewan
lebih riskan terhadap dioksin karena sifat alami
dioksin yang mudah larut dalam lemak (Roeder et
al., 1998). Retensi dioksin tercatat pada jaringan hati,
lemak, otot/karkas, telur, jantung, limpa, ginjal, paru-
paru dan air susu baik air susu sapi maupun air susu
ibu (Roeder et al., 1998; Hascheck dan Rousseaux,
199 1; Feil dan Ellis, 1998). Hati dan lemak merupakan
deposit utama dioksin. Akumulasi dioksin dalam hati
berhubungan dengan induksi enzim spesifik hati,
sedangkan akumulasi dalam lemak berhubungan
dengan sifat lipofilik dioksin (Osweller et al., 1985).
Keracunan dioksin dapat menyebabkan
ganguan sistem saraf, kanker hati, ‘chloracne’,
gangguan ginjal, gangguan hati, anemia dan
imunosupresi. Namun karena keracunan dioksin ini
bersifat akumulatif, maka efek toksik baru timbul
setelah beberapa tahun (Osweiler et al., 1985;
Anonimus, 1999). Efek transplasenta dioksin
merupakan ancaman bagi kelangsungan hidup
generasi selanjutnya. Induk yang terpapar dioksin,
maka janin yang dikandungnya akan terkena dioksin
juga, sehingga janin yang baru dalam tahap
pertumbuhan dan perkembangan akan mengalami
gangguan pertumbuhan/perkembangan seperti ‘cleft
palate’ (langit-langit atas bercelah), hidronefrosis,
abnormalitas ginjal, abortus maupun mortalitas fetus
(Osweiler et al., 1985; Hascheck dan Rousseaux,
1991; Ray dan Prasad, 1992; Anonimus, 1999).
Sebagai senyawa produk samping, tanpa
disadari, dioksin merupakan toksikan lingkungan
yang dapat mencemari hewan dan manusia melalui
rantai makanan (Roeder et al., 1998), sehingga perlu
dikaji efek TCDD secara kronis dengan dosis rendah
yang diberikan setiap hari. Imunosupresi merupakan
salah satu efek toksik dioksin yang menarik untuk
diteliti karena dioksin dapat menurunkan sistem
pertahanan tubuh, sehingga manusia/hewan yang
keracunan toksin ini akan mudah terinfeksi agen
penyakit dan menimbulkan beberapa komplikasi
penyakit-penyakit lain. Limfosit T merupakan sistem
pertahanan tubuh spesifik seluler, yang berperan
pada pertahanan terhadap bakteri intraseluler, virus,
jamur, parasit dan keganasan (Baratawidjaja, 2000).
Proliferasi limfosit T oleh stimulasi mitogen
J.Indon.Trop.Anim.Agric.29 (1) March 2004
merupakan teknik in vitro untuk melihat korelasi in
vitro dan in vivo proses regulasi yang terjadi jika
antigen bereaksi dengan limfosit hospes (Stites,
1984). Mekanisme proliferasi limfosit T diawal dengan
pertemuan antigen dengan reseptor, yang
selanjutnya mengaktivasi serangkaian reaksi yang
mengaktivasi berbagai faktor sehingga sel-sel limfosit
T mengalami mitosis (Bellanti, 1993).
Penelitian ini dilakukan untuk melihat efek sub
kronis 2, 3, 7, 8 TCDD dengan dosis rendah yang
diberikan setiap hari terhadap respon imun seluler
terutama aktivitas proliferasi limfosit T terhadap
stimulasi ‘Concanavalin-A’ (Con-A). Con-A
merupakan mitogen lektin yang diekstrak dari
tanaman Canavalia ensiformis, yang dapat berikatan
dengan reseptor limfosit T dan menginduksi
proliferasinya (Beffett, 1993).
MATERI DAN METODE
Enam belas ekor tikus putih (Rattus
norvegicus) jantan galur Sprague-Dawley umur 2-
2,5 bulan, dengan berat badan 170-200 g (Unit
Pemeliharaan Hewan Percobaan/UHPHP, UGM)
diadaptasi selama 1 minggu. Semua tikus dibagi dalam
dua kelompok, masing-masing kelompok terdiri dari
8 ekor. Setiap kelompok tikus dipelihara dalam
kandang terpisah, diberi makan dan minum secara
ad libitum. Kelompok I sebagai placebo diberi larutan
salin yang disangga dengan fosfat (PBS) pH 7,2
secara oral dengan dosis 1 ml/kg bb/hari selama 60
hari. Kelompok II diberi 2, 3, 7, 8 tetrachlorodibenzo-
p-dioxin (2, 3, 7, 8 TCDD; Promochem, Jerman) secara
oral dengan dosis 35,0 mg/kg bb pada hari pertama
dan 1,0 mg/kg bb/hari pada hari berikutnya selama
60 hari. Pada hari ke 30 dan 60, tiap kelompok diambil
4 ekor tikus secara acak untuk diambil darahnya.
Pengambilan darah dilakukan melalui pleksus
retroorbitalis dengan mikrohematokrit. Sampel darah
diberi antikoagulan asam etilen diamina tetraasetat
(EDTA; Merck) dengan dosis 0,5-2,0 mg/ml darah
(Jain, 1986) untuk isolasi sel-sel limfosit.
Isolasi sel-sel limfosit dilakukan dengan teknik
densitas gradien, menggunakan Histopaque-1077
(Sigma) sesuai prosedur dari Barta (1993) dan Salasia
et al. (1995). Sebanyak 3 ml darah yang mengandung
The Intoxicationof the 2,3,7,8 Tetrachlorodibenzo-p-Dioxin in Rats (Susanti)
antikoagulan dialirkan melalui dinding tabung yang
telah berisi 3 ml larutan Histopaque-1077. Tabung
kemudian ditutup dan disentrifus dengan kecepatan
1800 rotation per minute (rpm) selama 30 menit pada
suhu kamar, sehingga terbentuk empat lapisan
berturut-turut dari bawah ke atas adalah eritrosit dan
granulosit (polimorfonuklear), Histopaque-1077,
‘buffy coat’ dan cairan plasma. Cairan plasma
dibuang dengan cara diaspirasi menggunakan pipet
Pasteur, sedangkan sel-sel yang terdapat pada
lapisan ‘buffy coat’ diambil dengan pipet Pasteur
dimasukkan dalam tabung steril untuk diisolasi
limfositnya.
Sel-sel pada lapisan ‘buffy coat’ yang telah
dipisahkan dalam tabung steril ditambah dengan 3
ml PBS pH 7,2 dan disentrifus dengan kecepatan
1600 rpm selama 10 menit pada suhu 18-200C.
Supernatan hasil sentrifus dibuang, sedangkan
endapannya ditambah lagi dengan PBS pH 7,2 dan
disentrifus. dengan kecepatan yang sama. Pencucian
endapan limfosit dengan PBS tersebut dilakukan tiga
kali. Limfosit yang telah terpisah dilarutkan dalam
medium kultur ‘rosewell park memorial institute-1640’
(RPMI-1640, Sigma). Larutan limfosit dihitung
dengan menggunakan hemositometer (AO, Spencer,
USA) sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi
kira-kira 4x106 sel/ml (Chauvin et al., 1995).
Viabilitas sel-sel limfosit dilihat dengan
pewarnaan biru tripan (Sigma) 0,06% (Barta, 1993).
Sel-sel yang hidup berwama transparan, dan sel yang
mati akan menyerap warna biru. Sel-sel limfosit yang
mempunyai viabilitas lebih dari 90% digunakan untuk
uji aktivitas proliferasi terhadap stimulasi Con-A
(Barta, 1993).
Uji aktivitas proliferasi limfosit dilakukan
dengan menggunakan plat mikrotiter 96 sumuran
berdasar rata (Nunclon, Denmark), ke dalam setiap
sumuran diisi 50 ml larutan limfosit. Stimulasi limfosit
dilakukan dengan cara menambahkan 50 ml mitogen
(1 mg/ml) ‘Concanavalin-A’ (Con-A; Sigma) ke dalam
sumuran. Sebagai kontrol digunakan larutan limfosit
yang ditambah dengan 50 ml medium kultur (RPMI-
1640). Plat mikrotiter kemudian ditutup dan
diinkubasi dalam inkubator yang mengandung 5%
C02 pada suhu 370C selama 72 jam. Setelah inkubasi,
ke dalam setiap sumuran ditambah 20 ml reagen
‘celltiter 96 aqueous one solution’ (Promega), dan
23
dimasukkan ke dalam inkubator kembali selama 4 jam.
Aktivitas proliferasi limfosit ditentukan dengan cara
membaca absorben larutan dengan menggunakan
pembaca ELISA (Titertex, Finlandia, MCC/340, MK
11) pada panjang gelombang 490 nm (Anonimus,
1996; Chauvin et al., 1995). Parameter yang diukur
menurut Barta (1993) adalah :
Indeks proliferasi relatif :
indeks stimulasi limfosit hewan yang diuji
indek stimulasi hewan yang sehat
Hasil penghitungan indeks proliferasi relatif
limfosit diolah secara statistik dengan analisis
varians pola faktorial 2x2 dan dilanjutkan dengan uji
T (Gill, 1978).
HASIL DAN PEMBAHASAN
Rerata indeks proliferasi limfosit tikus vang
diberi TCDD tersaji pada Tabel 1. Hasil analisis
statistik menunjukkan bahwa pemberian TCDD
secara signifikan (P<0.05) menurunkan indeks
proliferasi limfosit, tetapi lama waktu pemberian tidak
berpengaruh signifikan terhadap indeks proliferasi
limfosit. Interaksi antara TCDD dan lama pemberian
tidak memberikan pengaruh nyata. Dengan uji t
menunjukkan bahwa indeks proliferasi limfosit
kelompok tikus yang diberi TCDD selama 30 hari
menurun (P<0.05) dibandingkan kelompok tikus non-
TCDD (Tabel 1)
Tetrachlorodibenzo-p-dioxin menginduksi
imunotoksisitas melalui reseptor aryl hidrocarbon
(Ah) (Dean dan Murray, 1991; Murray dan Thomas,
1992; Rosenthal dan Luster, 1994) dan tanpa melalui
reseptor Ah (reseptor non Ah) (Rosenthal dan Luster,
1994). Target imunotoksisitas TCDD adalah epitel
sel timus, sungsum tulang belakang, limfosit (Murray
dan Thomas, 1992; Rosenthal dan Luster, 1994) dan
makrofag (Rosenthal dan Luster, 1994).
Efek imunotoksisitas TCDD pada limfosit
adalah mengganggu proses maturisasi dan
diferensiasi sel T (Dean dan Murray, 1991).
Pemberian dosis tunggal 0,01 mg TCDD/kg bb/SC
pada monyet akan menurunkan jumlah limfosit sel
‘helper T’ darah perifer (Pohjanvirta dan Tuomisto,
24
1994). Respon imunosupresif limfosit juga ditentukan
oleh dosis pemberian. Pemberian 1,5 mg TCDD/kg
bb/minggu pada monyet akan menurunkan
persentase dan jumlah absolut sel ‘helper T’ darah
perifer, tetapi dengan dosis 0,3 mg TCDD/kg bb/
minggu justru akan menginduksi peningkatan
subpopulasi limfosit (Pohjanvirta dan Tuomisto,
1994).
Senyawa TCDD berpengaruh menurunkan
aktivitas proliferasi limfosit B dan limfosit T (Roeder
et al., 1998; Pohjanvirta dan Tuomisto, 1994). Dua
puluh anak dari 44 anak korban kecelakaan dioksin
di Seveso, Italia menunjukkan penurunan respon
proliferasi sel B dan sel T limfosit terhadap mitogen
(Murray dan Thomas, 1992). Lebih lanjut, menurut
Osweller et al. (1985), TCDD lebih berefek pada ‘cell
mediated imunity’ (diperankan limfosit T) dari pada
imunitas humoral (diperankan limfosit B). Pemberian
TCDD akan menurunkan respon ‘cell mediated
imunity’ seperti proliferasi limfosit terhadap stimuli
mitogen, ‘delayed type hipersensitivity’, aktivitas
TC dan aktivitas TH (Haschek dan Rouseaux, 1991).
Mekanisme aksi TCDD pada penurunan
respon proliferatif limfosit mungkin melalui reseptor
Ah yang ditemukan pada limfosit (Rosenthal dan
Luster, 1994). Salah satu produk komplek gen Ah
adalah enzim ornitin dekarboksilase. Enzim tersebut
menurunkan kecepatan sintesis poliamin yang
sangat esensial untuk sintesis DNA, transkripsi dan
translasi. TCDD akan menginduksi enzim tersebut,
yang selanjutnya menurunkan kecepatan
pertumbuhan dan diferensiasi limfosit (Haschek dan
Rouseaux, 1991). Mekanisme penurunan aktivitas
proliferasi limfosit kemungkinan juga secara reseptor
non Ah, yaitu TCDD berefek langsung pada
membran sel. Penurunan aktivitas proliferasi melalui
mekanisme tersebut ditandai dengan menurunnya
kadar dan aktivitas reseptor limfosit serta adanya
gangguan ‘channel’ ion Ca2+ akibat TCDD (Landers
dan Bunce, 1991).
Pada penelitian ini, penurunan aktivitas
proliferasi limfosit akibat TCDD mungkin dipengaruhi
oleh adanya gangguan faktor-faktor yang berperan
dalam proses proliferasi. Secara umum proses
proliferasi terhadap stimulasi mitogen memerlukan
dukungan beberapa faktor seperti reseptor antigen
pada membran limfosit, channel ion Ca2+ membran,
J.Indon.Trop.Anim.Agric.29 (1) March 2004
 Tabel 1. Indeks proliferasi limfosit tikus yang diberi TCDD dengan dosis dan waktu yang berbeda terhadap
stimulasi Con-A
0 µg TCDD/kg bb/p.o/hari (PBS) 5µg TCDD/kg bb/p.o/hari; 1 µg /kg bb/p.o/hari
30 hari 60 hari 30 hari 60 hari
0.7703 1.2099 0.1384 0,6179
0.9688 0.5999 0.0643 0,1184
2.0244 0.3699 0,0098 0.1996
0.2364 1.8200 0.1192 0.8175

0.9999±0.74 a 0.9899±0.65 a 0.0829±0.06 b 0.4384±0.33 ab

ab
Superskrip yang berbeda menunjukkan perbedaan yang signifikan (P<0.05)

dan aktivitas ‘mitogen activated protein’ (MAP)
kinase (Pobjanvirta dan Tuomisto, 1994). Untuk
mengetahui gangguan pada reseptor membran sel
limfosit akibat TCDD perlu dikaji lebih lanjut.
Penurunan aktivitas proliferasi kemungkinan juga
disebabkan oleh induksi TCDD pada enzim ornitin
dekarboksilase melalui reseptor Ah sehingga
proliferasi limfosit terhambat (Haschek dan
Rouseaux, 1991). Dari. uji t terlihat bahwa TCDD
berpengaruh menurunkan aktivitas proliferasi
(P<0.05) pada pemberian selama 30 hari, sedangkan
pada pemberian selama 60 hari tidak berpengaruh.
nyata (P>0.05) menurunkan proliferasi limfosit. Efek
toksisitas TCDD selain ditentukan oleh dosis juga
ditentukan oleh jangka waktu pemberian, cara
pemberian dan pelarut TCDD (Pohjanvirta dan
Tuomisto, 1994).
KESIMPULAN
Pemberian TCDD secara oral pada tikus
dengan dosis permulaan 5mg/kg bb diikuti dengan 1
mg/kg bb/hari dapat menurunkan respon imun seluler
terutama indeks proliferasi limfosit (P<0.05) terhadap
stimulasi Con-A. Penurunan akfivitas proliferasi
secara signifikan (P<0.05) terlihat pada pemberian
TCDD selama 30 hari. Penurunan aktivitas proliferasi
limfosit kemungkinan disebabkan oleh gangguan
berbagai macam faktor yang terlibat dalam proses
proliferasi, melalui reseptor Ah maupun reseptor non
Ah.
UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terimakasih disampaikan kepada Prof
Dr. F. Grimm, LMU, Munchen, Germany dan Dr. drh.
Edi Boedi Santosa, yang telah membantu dalam
pengadaan TCDD dan literatur.
DAFTAR PUSTAKA
Anonimus. 1996. CellTiter 96 Aqueous One Solution
Cell Proliferation Assay. Promega Corporation.
USA.: 1 -10.
Anonimus. 1999. Dioksin Ada di Sekitar Kita. Intisari.
Edisi Agustus. PT. Intisari Meditama. Jakarta.:
22-30.
Baratawidjaja, K.G. 2000. Imunologi Dasar. Edisi ke-
4. Balai Penerbit Fakultas Kedokteran
Universitas Indonesia. Jakarta.
Barrett, J.T. 1988. Textbook of Immunology. An
Introduction to Immunochemistry and
Immunobiology. 5 th Ed. Mosby Company. St.
Louis. Missouri.
Barta, 0. 1993. Monographs in Animal Immunology.
Veterinary Clinical Immunology Laboratory.
Vol 2. Bar-Lab. Inc. USA.
Bellanti, J.A. 1993. Immunologi III. Gadjah Mada
University Press. Yogyakarta. (Diterjemahkan
oleh A. Samik Wahab).
Chauvin, A., G. Bouvet and C. Boulard. 1995. Humoral
and Cellular Immune Responses to Fasciola
hepatica Experimental Primary and Secondary
Infection in Sheep. Int. J. Parasitol. 25. : 1227-
1241.

The Intoxicationof the 2,3,7,8 Tetrachlorodibenzo-p-Dioxin in Rats (Susanti) 25

Dean, J.H., and M.J. Murray. 199 1. Toxic Responses
of the Immune System. In: Cassaret and
Doull’s Toxicology. The Basic Science of
Poison. M.O. Amdur, J. Doull, C.D. Klassen
(eds). 4th Ed. Pergamon Press. Inc. New York.:
309-312
Feil, V.J. and R.L. Ellis. 1998. The USDA Perspective
on Dioxin Concentrations in Dairy and Beef
J. Anim. Sci. 76.: 152-159.
Gill, B. D. 1978. Design and Analysis of Experiment
in the Animals and Medical Sciencies. 1st Ed.
Iowa States University Press. Ames.
Hascheck, W.M. and C.G. Rousseaux. 1991.
Handbook of Toxicology Pathology.
Academic Press. Inc. San Diego. California.
Jain, N.C. 1986. Schalm’s Veterinary Hematology. 4th
Ed. Lea and Febiger. Philadelphia.
Landers, J.P. and N.J. Bunce. 1991. The Ah Receptor
and the Mechanism of Dioxin Toxicity.
Biochern J. 276.: 273-287.
Murray, M.J. and P.T. Thomas. 1992. Toxic
Consequence of Chemical Interaction with the
Immune System. In: Principles and Practice
of Immunotoxicology. K. Miller, J.L. Turk, S.
Nickin and J.H. Dean (eds). Blackwell Scientific
Publications. Boston.: 65-71.
Osweiler, G.D., T.C. Carson, W.B. Buck and G.A. van
Gelder. 1985. Clinical and Domestic Veterinary
Toxicology. 3d Ed. Kendall/Hunt Publishing
Company. Dubuque. Iowa.
26
Pohjanvirta, R. and J. Tuomisto. 1994. Short-Term
Toxicity of 2,3,7,8 Tetrachlorodibenzo-p-
Dioxin in Laboratory Animals: Effects,
Mechanism and Animal Models. Pharmacol.
Rev. 46.:483-532.
Ray, RK. and A.K. Prasad. 1992. Immunotoxic and
Other Health Effects of TCDD and Tocic Oil.
In: Principles and Practice of
Immunotoxicology. K. Miller, J.L. Turk, S.
Nicklin, J.H. Dean. (eds). Blacwell Scientific
Publications. Boston.: 251-256.
Roeder, R.A., MJ. Garber and G.T. Schelling. 1998.
Assessment of Dioxin in Foods from Animal
Origin. J. Anim. Sci. 76.:142-15 1.
Rosenthal, G.J. and M.I. Luster. 1994. Immunotoxicity
and Inflammation. An Overview. In:
Xenobiotics and Inflammation. L.B. Schook
and D.L. Laskin. (eds). Academic Press. San
Dieao. California.: 1-12,
Salasia, S.I.O., C. Lammler and G. Herrmann. 1995.
Properties of a Streplococcus suis Isolate of
Serotype 2 and two Capsular Mutants. Vet.
Microbiol. 45.: 151-1-56.
Winarno, F.G. 1999. Ancaman Dioksin Bagi
Keamanan Pangan dan Kesehatan Manusia.
Seminar Nasional Dampak Pencemaran
Dioksin Terhadap Produk Pangan. Fakultas
Peternakan, Universitas Semarang. : 1- 13.
J.Indon.Trop.Anim.Agric.29 (1) March 2004