JURNAL FARMASI KALBAR Volume 4, No 1

UNIVERSITAS TANJUNGPURA (2019)

NASKAH PUBLIKASI

PROFIL KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS EKSTRAK ETANOL DAUN

SENGGANI (Melastoma malabathricum L.) METODE PERKOLASI

THIN LAYER CHROMATOGRAPHY PROFILE OF LEAF ETHANOL EXTRACT

SENGGANI (Melastoma malabathricumshot L.) PERCOLATION METHOD

Tion Rusmawijayanto1, Sri Luliana2 and Isnindar2

1Pharmacy Study Program, 2Pharmaceutical Biology Laboratory,

Faculty of Medicines University of Tanjungpura

Jl. Prof. DR. H Hadari Nawawi 78124
E-mail: tion.rusmawijayanto@gmail.com

ABSTRAK

Identifikasi metabolit hasil ekstraksi dilakukan secara kualitatif, untuk mengatahui adanya
senyawa target dalam sempel. Tujuan penelitian ini adalah mengidentifikasi senyawa fenol
dan senyawa flavonoid pada ekstrak etanol daun senggani. Metode yang digunakan yaitu
kromatografi lapis tipis (KLT), dengan Fase diam silica GF254 dan fase gerak ethyl acetate ;
formac acid ; glacial acetic acid ; aquades (100:11:11:26), menggunakan standar asam galat
untuk fenol dan rutin untuk flavonoid. Kesimpulan, terdapat senyawa fenol dan senyawa
flavonoid pada ekstrak etanol daun senggani dengan nilai Rf 0,92 dan 0,34.

Kata kunci: KLT, Melastoma malabathricum L., Fenol dan Flavonoid.

ABSTRACT

Identifying the metabolite of the extraction is done qualitatively, To identify the presence of
the target compounds in the sempel. The purpose of this research is to identify the phenol
compounds and the flavonoids compounds on the senggani leaf ethanol extract. The method
used is thin layer chromatography (TLC), with the silent phase of silica GF254 and phase motion
ethyl acetate; formac acid; glacial acetic acid; Aquades (100:11:11:26), using standardized acid
gallic for phenol and routine for flavonoids. In conclusion, there are phenol compounds and
flavonoids compounds on the senggani leaf ethanol extract with an Rf value of 0.92 and 0.34.

Keywords: TLC, Melastoma malabathricum L., Phenol and Flavonoids.

jurnal.untan.ac.id
 Tion et al.
PENDAHULUAN
Senggani (Melastoma malabathricum L.)
merupakan tanaman yang tumbuh liar pada
semak belukar dan terdapat cukup cahaya
[1]. Secara empiris daun senggani di
mamfaatkan masyarakat untuk obat diare,
mengatasi gangguan pencernaan, luka
sayat, sakit gigi dan sariawan [2].
Masyarakat Kabupaten Sintang, Kalimatan
Barat menggunakan daun senggani untuk
obat demam, yang mana beberapa helai
daun senggani direbus kurang lebih 15
menit dan di konsumsi tiga kali sehari.
Skrining fitokimia yang telah dilakukan
menunjukan adanya senyawa fenolik,
flavonoid, saponin, steroid atau triterpenoid
dan tanin [3]. Studi lain yang yang telah
dilakukan menunjukan adanya beberapa
aktivitas seperti antioksidan [4], antibakteri,
antihipertensi, antipiretik [5], antiinflamasi,
sitotoksik dan penyembuhan luka [6].
Oleh karena adanya beberapa senyawa
yang berperan aktif dalam aktivitas
pemulihan dan pemeliharahan kesehatan,
maka peneliti ingin mengetahui profil
kromatografi lapis tipis dari ekstrak etanol
daun senggani untuk mengidentifikasi
senyawa fenol (asam galat) dan senyawa
flavonoid (rutin). Kemudian diamati dari
perubahan warna setelah penyemprotan
menggunakan pereaksi spesifik dan nilai Rf
yang di peroleh.
METODE
Alat
Alat yang digunakan dalam penelitan ini
yaitu: Alat-alat gelas (pyrex), seperangkat
alat perkolasi modifikasi, Vakum buther,
rotary evaporator (Buchi R100), waterbath,
Vol 4, No 1 (2019)
desikator (NORMAX), lemari asam ( ESCO
model EFH-4A1), hot plat (schott
Instrument), silica GF254, chamber, spray KLT
(pirex), lampu UV 254 nm dan 366 nm
(Merck tipe 1.13203,0001), kamera DSRL
(Merck canon 1300D)
Bahan
Bahan yang digunakan yaitu: sempel daun
senggani, etanol 96%, rutin hasil isolat,
asam galat, ethyl acetate, formac acid p.a,
glacial acetic acid p.a, aquades p.i, AlCl3, dan
FeCl3.
PROSEDUR KERJA
Perlakuan Pengeringan Sempel
Sempel daun senggani diambil di Jalan Parit
Haji Husen 2, Bangka Belitung Darat,
Pontitanak Tenggara, Kota Pontianak,
Kalimantan Barat Indonesia. Hasil
pengumpulan sempel akan dilakukan sortasi
basah, pencucian sempel, perajangan,
pengeringan, sortasi kering, penghalusan
dan pengayakan. Perlakukan pengeringan
dilakukan dengan mengoven sempel pada
suhu 40-500C [3].
Proses Ekstraksi
Proses ekstraksi menggunakan metode
perkolasi modifikasi dengan pelarut etanol
96%. Sempel daun senggani sebanyak 86,3
gram dimasukan dalam colom perkolator,
kemudian dialirkan pelarut etanol secara
kontinu hingga titik akhir yang ditentukan.
Hasil ekstraksi berupa maserat yang
selanjutnya disaring dengan vakum buthner
dan dievaporator pada suhu 550C. Pelarut
sisa hasil evaporator kemudian di waterbath
hingga diperoleh ekstrak kental dan
disimpan di desikator.
jurnal.untan.ac.id
 Tion et al.
Uji Kromatografi Lapis Tipis
Uji KLT yang dilakukan mengikuti penelitian
dari; Suman dkk, 2017 : Amruta dkk, 2018
dengan sedikit modifikasi reagen
penyemprot [7][8]. Ekstrak etanol daun
senggani dan pembanding dalam bentuk
larutan, ditotolkan pada plat silika GF254
sebanyak 2-3 kali totolan dan dibiarkan
sampai kering. Fase gerak yang digunakan
yaitu ethyl acetate ; formac acid ; glacial
acetic acid ; aquades (100:11:11:26) dan
ambil bagian atas secukupnya, pindahkan
kedalam chambar. Plat yang telah ditotol
kemudian dielusi sampai batas
pengembangan, plat diangkat dari chamber
dan diangin-anginkan hingga kering.
Kemudian, diamati pada sinar tampak UV
254 nm dan UV 366 nm, selanjutnya plat
disemprot dengan preaksi spesifik FeCl3 1%
dan AlCl3 5%.
Analisis hasil
Analisis hasil dalam penentuan identifikasi
kromatografi lapis tipis menggunakan nilai
RF (Retardation factor), Nilai RF yang dapat
diterima adalah RF < 1.
Jarak noda bercak (cm)
Nilai Rf =
Jarak tempuh pelarut (cm)
HASIL DAN PEMBAHASAN
Determinasi
Sampel yang digunakan dalam penelitian ini
adalah tanaman senggani. Hasil determinasi
dengan no surat: 036/A/LB/FMIPA/
UNTAN/2019 menunjukkan spesies
Melastoma malabathricum L. Tujuan
determinasi adalah untuk menghindari
kasalahan dalam pengambilan sampel.
Vol 4, No 1 (2019)
Ekstraksi
Proses ekstraksi menggunakan metode
perkolasi. Sebelum dilakukan proses
ekstraksi sempel daun senggani yang di
gunakan dikeringkan menggunakan oven,
yang bertujuan untuk mempersingkat
proses pengeringan dan mempertahankan
metabolit dengan suhu yang konstan. Selain
itu, untuk menghindari terjadinya
pertumbuhan jamur dan kapang pada
sempel. Luliana dkk, 2016 melaporkan salah
satu metode yang baik untuk pengeringan
sempel daun senggani menggunakan oven
pada suhu 400C - 500C [3].
Prinsip ekstraksi metode perkolasi adalah
menarik metabolit dengan pelarut yang
selalu baru secara kontinu [9]. Hasil
ekstraksi diperoleh ekstrak kental berwarna
hitam pekat sebanyak 20,3 gram. Waktu
proses ekstraksi, pelarut serta suhu, dapat
meningkatkan jumlah ekstrak yang di
hasilkan [3][10]. Hal ini karena, setiap
metode ekstraksi, pelarut dan suhu yang
digunakan memiliki keutungan dan
kelebihan yang dapat meningkatkan jumlah
ekstrak [10].
Penelitian Awang dkk, 2016 dan Amalia dkk,
2019 menyatakan salah satu pelarut yang
baik untuk menarik metabolit dalam sempel
daun senggani adalah etanol 96% [11][12].
Hal ini karena etanol merupakan salah satu
pelarut yang bersifat polar yang dapat
menarik metobolit pada daun senggani,
seperti senyawa fenolik dan flavonoid.
Metabolit yang memiliki sifat polar maupun
nonpolar dapat diekstraksi dengan prinsip
like dissolve like.
jurnal.untan.ac.id
 Tion et al. Vol 4, No 1 (2019)

G R S G R S G R S G R S G R S

(a) (b) (c) (d) (e)

Gambar 1. Pola kromatogram hasil uji fitokimia secara KLT dengan fase diam silika GF254 dan fase gerak
ethyl acetate ; formac acid p.a ; glacial acetic acid p.a ; aquades p.i (100:11:11:26)

Keterangan : (a) Hasil pengamatan pada sinar tampak, (b) sinar tampak setelah di semprot AlCl3 5%,
(c) sinar tampak setelah di semprot FeCl3 1%, (d) sinar tampak UV 245 nm, (e) sinar tampak UV 366 nm
setelah disemprot AlCl3 5%, (G) Asam galat, (R) rutin , (S) ekstrak daun senggani.

Penelitan Luliana dkk, 2020 melaporkan,
penggunaan suhu dalam ekstraksi dapat
meningkatkan jumlah ekstrak yang di
hasilkan [10]. Suhu optimum dalam
ekstraksi selain meningkatkan kecepatan
proses ekstraksi juga menjaga metabolit
yang tidak tahan terhadap pemanasan [13].
Suhu optimum yang digunakan diduga
membuka dinding sel tumbuhan sehingga,
memudahkan pelarut membawa metabolit
pada saat proses ekstraksi berlangsung.
semprot pereaksi FeCl3 1%, diperkuat
dengan standar asam galat yang juga
berwarna biru kehitaman. Harbone dkk,
1987 menyatakan positif mengandung
fenol jika noda bercak berwarna hijau,
merah, ungu, biru, atau hitam yang kuat
[14]. Selanjutnya, identifikasi senyawa
flavonoid memberikan hasil positif
berwarna kuning pada sempel dan standar
rutin setalah disemprot menggunakan
perekasi AlCl3 5%.

Kromatografi Lapis Tipis Hasil sinar tampak UV 254 menghasilkan

Hasil pola kromatogram (Gambar 1)
menujukan adanya noda bercak yang
terpisah diamati pada sinar tampak UV 254
nm dan UV 366 nm. Penyemprotan pereaksi
spesifik FeCl3 1% untuk identifikasi adanya
senyawa golongan fenol dan pereaksi
spesifik AlCl3 5% untuk identifikasi adanya
senyawa golongan flavonoid.
Senyawa fenol ditunjukan dengan warna
biru kehitam pada plat KLT setelah di
sempel hitam gelap, sedangkan pada UV
366 berflouresensi [15]. Bila noda bercak
secara kualitatif masih tidak terlihat jelas di
perlukan penampak bercak, sehingga dapat
diamati dari warna yang dihasilkan.
Beberapa pereaksi penampak bercak dapat
dilihat pada table 1. Secara umum,
penampak bercak digunakan untuk melihat
adanya senyawa target yang ditunjukan
dengan perubahan warna dan nilai Rf yang
diperoleh.
jurnal.untan.ac.id
 Tion et al. Vol 4, No 1 (2019)

Tabel 1. Penampak Bercak Secara Umum Yang Sering Digunakan [15], [16].
Penampak Bercak
Senyawa Hasil Warna
Secara Umum
Fenolik FeCl3 Biru Kehitaman
AlCl3 Kuning
Flavonoid Uap Amoniak Hijau Kebiruan
Sitroborat Hijau Muda - Hijau Kekuningan

Tabel 2. Hasil Nilai Rf dari Ekstrak Etanol Daun Senggani dan Rf Pembanding [8].
Nilai Rf Nilai Rf Golongan Nama
No
Sempel Pembanding Senyawa Senyawa
1 0,12 - Fenol -
2 0,34 0,34 Flavonoid Rutin
3 0,54 - Flavonoid -
4 0,66 - Flavonoid -
5 0,70 - Flavonoid -
6 0,82 - Flavonoid -
7 0,92 0,92 Flavonoid Asam galat

Hasil elusi KLT (Tabel 2.) menghasilkan
beberapa spot dan nilai Rf yang berbeda-
beda. Senyawa target rutin ditunjukan pada
nilai Rf 0,34 dan senyawa target asam galat
pada nilai Rf 0,92. Hasil ini didukung oleh
penelitian Awang dkk, 2016 dan Joffry dkk,
2012 yang menyatakan senyawa asam galat
dan rutin merupakan senyawa mayor
compounds dalam ekstrak etanol daun
senggani [11][6].
Study lain melaporkan, pada ekstrak
metanol daun senggani juga terdapat
kuersetin [10], kaempferol – 3 – O - ( 2”,6”-
di-O-p-trans-coumaroyl )- β-glucosidec
[17][18], Ursolic acid, 2-Hydroxyursolic acid,
Asiatic acid [19], p-Hydroxybenzoic acid, dan
kaempferolA [6].
PENUTUP
Kesimpulan
Hasil penelitian, menunjukan adanya
senyawa asam galat (fenol) dan rutin
(flavonoid) dengan masing–masing nilai Rf
0,92 dan 0,34 pada ekstrak etanol daun
senggani.
DAFTAR PUSTAKA
[1] Dalimartha S, Atlas Tumbuhan Obat
indonesia, Edisi I, Trubus Agr. Jakarta:
Trubus Agriwidya, 1999.
[2] M. Handayani, O. Lambui, and I.
Nengah, “Ethanol Extracts of
Melastoma malabathricum L. Leaves
Potential as anti- bacterial agent on
Salmonella,” J. Sci. Technol., vol. 6,
no. 2, pp. 165–174, 2017.
[3] S. Luliana, P. Nera Umilia, and K. N.
Manihuruk, “Pengaruh Cara
Pengeringan Simplisia Daun Senggani
( Melastoma malabathricum L .)
Terhadap Aktivitas Antioksidan
Menggunakan Metode DPPH ( 2 , 2-
difenil-1- pikrilhidrazil ) Abstrak,”
jorunal Pharm sci, vol. 3, no. 3, pp.
120–129, 2016.
jurnal.untan.ac.id
 Tion et al.
[4] Z. A. A. Alnajar, M. A. Abdulla, H. M.
Ali, M. A. Alshawsh, and A. H. A. Hadi,
“Acute toxicity evaluation,
antibacterial, antioxidant and
immunomodulatory effects of
Melastoma malabathricum,”
Molecules, vol. 17, no. 3, pp. 3547–
3559, 2012.
[5] M. T. Rajenderan, “Ehno medicinal
uses and antimicrobial properties of
Melastoma malabathricum,” J. Segi,
vol. 3, no. 2, pp. 34–44, 2010.
[6] S. M. Joffry et al., “Melastoma
malabathricum (L.) smith
ethnomedicinal uses, chemical
constituents, and pharmacological
properties: A review,” Evidence-based
Complement. Altern. Med., vol. 2012,
no. May, 2012.
[7] S. L. E. and S. K. Mittal, “Identification
of Isolated Flavonoid Glycoside From
Methanolic Extract of Cucumis
dipsaceus Ehrenb. (Fruit),” Int. J.
Pharmacogn. Phytochem. Res., vol. 9,
no. 07, pp. 1051–1059, 2017.
[8] J. Amruta and A. Chaturvedi,
“Medicinally important secondary
metabolites detected in weed plants
of lamiaceae,” J. Nat. Prod. An Indian,
vol. 4, no. 1, 2008.
[9] E. Hanani, “Analisis Fitokimia,”
Jakarta: Buku Kedokteran EGC, 2014,
pp. hal11-13.
[10] S. Luliana, Isnindar, and T.
Rusmawijayanto, “The Effect Of
Senggani Leaves ( Melastoma
Malabathricum L .) Extraction
Method On Total Phenolic Levels ,
Total Flavonoids , And Antioxidant
Activities,” Eur. J. Biomed. Pharm.
Sci., vol. 7, no. 5, 2020.
Vol 4, No 1 (2019)
[11] M. Azrie et al., “Comparison of
different solvents on the extraction of
melastoma malabathricum leaves
using soxhlet extraction method,” J.
Der Pharm. Lett., vol. 8, no. 17, pp.
153–157, 2016.
[12] T. Amalia, F. C. Saputri, and S. Surini,
“Total phenolic contents, quercetin
determination and anti elastase
activity of Melastoma malabathricum
L. Leaves extract from different
method of extractions,” Pharmacogn.
J., vol. 11, no. 1, pp. 124–128, 2019.
[13] H. Nurhasnawati, F. Handayani, and
A. F. Samarinda, “Perbandingan
Metode Ekstraksi Maserasi dan
Sokletasi Terhadap Aktivitas
Antioksidan Ekstrak Etanol Daun
Jambu Bol (Syzygium malaccense L.),”
J. Ilm. Manuntung, vol. 3, no. 1, pp.
91–95, 2017.
[14] Harborne J.B, Metode Fitokimia :
Penuntun cara modern menganalisa
tumbuhan. Terbitan Kedua.
Terjemahan Kosasih Padmawinata
dan Iwang Soediro. Bandung: : ITB,
1987.
[15] B. Sopiah, H. Muliasari, and E.
Yuanita, “Skrining Fitokimia dan
Potensi AktivitaS Antioksidan Ekstrak
Etanol Daun Hijau dan Daun Merah
Kastuba,” J. Ilmu Kefarmasian
Indones., vol. 17, no. 1, p. 27, 2019.
[16] D. W. Ningrum, D. Kusrini, and E.
Fachriyah, “Uji Aktivitas Antioksidan
Senyawa Flavonoid dari Ekstrak
Etanol Daun Johar (Senna siamea
Lamk),” J. Kim. Sains dan Apl., vol. 20,
no. 3, pp. 123–129, 2017.
jurnal.untan.ac.id
 Tion et al. Vol 4, No 1 (2019)

[17] D. Susanti, H. M. Sirat, F. Ahmad, and

R. Mat Al, “Bioactive constituents
from the leaves of elastoma
malabathricum L,” J. Ilm. Farm., vol.
5, no. 1, pp. 1–8, 2008.
[18] S. S. Koay, “Establishment Of Cell
Suspension Culture Of Melastoma
Malabathricum L. For The Production
Of Anthocyanin, PhD Thesis,” Univ.
sains malaysia, 2008.
[19] N. S., S. H. Baek, and A. Asari,
“Chemical components of Melastoma
malabathricum,” ACGC Chem. Res.
Commun., vol. 16, pp. 28–22, 2003.

jurnal.untan.ac.id