Anda di halaman 1dari 10

Ringkasan

Bagaimana kita mengetahui gen terbuat dari DNA?


Pertanyaan tentang gen sebenarnya terbuat dari apa menjadi perhatian utama para ahli biologi
molekuler pada paruh pertama abad ke-20. Karena saat ini diketahui bahwa gen harus
ditempatkan pada kromosom, dan bahwa kromosom sebagian besar terdiri dari protein dan
DNA, asumsi yang masuk akal dibuat bahwa gen harus terdiri dari salah satu zat ini. Pada
tahun-tahun awal, protein dianggap sebagai kandidat yang paling mungkin, karena, dari apa
yang diketahui tentang struktur molekul pada saat itu, ia menawarkan lebih banyak ruang
untuk variasi yang penting untuk menjelaskan ribuan gen yang harus dimiliki organisme
mana pun. memiliki. Pada tahun 1928, orang Inggris Fred Griffith melakukan serangkaian
percobaan yang tidak hanya menunjukkan untuk pertama kalinya fenomena transfer genetik
pada bakteri, tetapi juga bertindak sebagai langkah pertama untuk membuktikan bahwa DNA
adalah materi genetik. Berbagai upaya dilakukan sepanjang tahun 1930-an untuk mengisolasi
dan mengidentifikasi prinsip transformasi, seperti yang kemudian dikenal, dan pada tahun
1944 Avery, MacLeod dan McCarty menerbitkan sebuah makalah, yang untuk pertama
kalinya mengusulkan DNA sebagai materi genetik.

Replikasi DNA
Penjelasan struktur DNA oleh Watson dan Crick pada tahun 1953 berdiri sebagai salah satu
terobosan ilmiah besar di abad ke-20. Mekanisme yang mereka usulkan dikenal sebagai
replikasi semikonservatif. DNA, disebut demikian karena setiap molekul anak terdiri dari
satu untai induk dan satu untai yang baru disintesis. Heliks ganda parental DNA terlepas dan
setiap untai bertindak sebagai cetakan untuk produksi untai komplementer baru, dengan
nukleotida baru ditambahkan sesuai dengan aturan pasangan basa.

Replikasi DNA pada prokariota


Replikasi DNA terjadi di garpu replikasi, struktur berbentuk Y yang dibentuk oleh untaian
yang terpisah. Garpu bergerak di sepanjang DNA saat replikasi berlangsung. Replikasi
dimulai pada urutan tertentu yang disebut ori-gin replikasi. Saat 'ritsleting' bergerak, dan
lebih banyak DNA untai tunggal yang terbuka, DNA polimerase III menambahkan nukleotida
baru untuk membentuk untai kedua yang lengkap, sesuai dengan aturan pasangan basa.
Gugus -OH untuk melampirkan nukleotida baru. Jadi, DNA polimerase III hanya dapat
bekerja pada 5 arah. Primer adalah urutan pendek DNA untai tunggal atau RNA yang
dibutuhkan oleh DNA poli-merase sebagai titik awal untuk perluasan rantai. Ketika replikasi
terjadi, nukleotida komplementer ditambahkan ke salah satu untai secara terus menerus
kemudian menggantinya dengan nukleotida DNA. Terakhir, file fragmen bergabung bersama
oleh aksi DNA ligase. Replikasi dua arah (Gambar 11.3), dengan dua garpu bergerak
berlawanan arah; ketika mereka bertemu, seluruh kromosom disalin dan direplikasi selesai *.

Apa yang terjadi jika replikasi salah?


Sangatlah penting bahwa sintesis untai kedua DNA komplementer harus dilakukan dengan
akurat, tetapi kadang-kadang, nukleotida non-komplementer dimasukkan; ini dapat terjadi
sesering sekali dalam setiap 10.000 nukleotida. Ini mampu memotong nukleotida yang 'salah'
dan menggantinya dengan yang benar.
Replikasi DNA pada eukariot
Pada organisme eukariotik, DNA berbentuk linier, tidak melingkar, sehingga proses replikasi
berbeda dalam beberapa hal. Replikasi terjadi secara dua arah, menciptakan banyak
gelembung replikasi yang bergabung satu sama lain sampai seluruh kromosom tertutup.

Apa sebenarnya yang dilakukan gen?


Pada awal abad ke-20 Archibald Garrod telah mengusulkan bahwa kelainan bawaan seperti
alkaptonuria mungkin disebabkan oleh kerusakan pada enzim metabolik kunci tertentu,
sehingga untuk pertama kalinya menawarkan penjelasan tentang bagaimana informasi
genetik diekspresikan. Tatum di tahun 1940-an, yang eksperimennya dengan cetakan roti
Neurospora mengarah pada perumusan satu gen, satu hipotesis enzim. Meskipun sekarang
diakui agak terlalu umum, model ini terbukti berguna pada tahun-tahun ketika dasar
molekuler dari aksi gen sedang dijelaskan. Setelah menetapkan bahwa gen terbuat dari DNA,
dan memiliki model untuk struktur DNA yang menjelaskan bagaimana ia dapat menyalin
dirinya sendiri, pada tahun 1950-an terbuka jalan bagi para ilmuwan untuk mengetahui
mekanisme yang digunakan informasi yang dikodekan dalam DNA. urutan diubah menjadi
protein tertentu. Anda mungkin ingat dari bahwa DNA dan protein adalah polimer yang 'blok
pembangunnya' dapat disatukan dalam jumlah urutan yang hampir tak terbatas. Perantara
inilah yang melakukan tugas penting untuk meneruskan informasi yang dikodekan di situs
sintesis protein. Arus informasi searah ini dapat diringkas:

dan sering disebut sebagai Dogma Sentral biologi, karena dapat diterapkan pada semua
bentuk kehidupan. Terkadang pesan dikodekan DNA ditranskripsi menjadi RNA ribosom
atau RNA transfer; jenis RNA ini tidak diterjemahkan ke dalam protein tetapi mewakili
produk akhir itu sendiri.

Kode genetic
Messenger RNA membawa informasi dalam bentuk kode genetik yang mengarahkan sintesis
protein tertentu. Dari 64 kemungkinan kombinasi tiga huruf A, C, G dan U, 61 sesuai dengan
asam amino tertentu, sedangkan tiga sisanya bertindak sebagai pesan 'stop', yang
menunjukkan bahwa pembacaan pesan harus dihentikan pada saat itu. Mutasi frameshift
memiliki efek ini. Karena hanya ada 20 asam amino yang harus diperhitungkan, maka kode
genetiknya mengalami degenerasi, yaitu asam amino tertentu dapat dikodekan oleh lebih dari
satu triplet.

Transkripsi dalam prokariota


Dalam garis besar berikut, kami akan menjelaskan bagaimana mRNA disintesis, tetapi perlu
diingat bahwa terkadang produk transkripsi adalah rRNA atau tRNA. DNA polimerase, dapat
menggunakan bahan beruntai tunggal sepenuhnya, yaitu tidak diperlukan primer. Pertama, ia
mengenali urutan pendek DNA yang disebut promotor, yang terjadi di hulu gen. Kofaktor
protein yang disebut sigma membantu keterikatan pada ini, dan dilepaskan kembali segera
setelah transkripsi dimulai. Promotor memberi tahu RNA polimerase di mana transkripsi
harus dimulai, dan juga di untai mana. Efisiensi yang digunakan promotor untuk mengikat
RNA polimerase menentukan seberapa sering gen tertentu akan ditranskripsi. Promotor
terdiri dari dua bagian, satu 10 basis di hulu, dan 35 basis lainnya di hulu. RNA polimerase
berikatan dengan promotor, dan heliks ganda DNA menyebabkan lepas sedikit demi sedikit,
memperlihatkan urutan pengkodean pada satu untai.

Berbeda dengan urutan promotor, terminator tidak ditranskripsikan. Transkripsi pada


eukariota berjalan di sepanjang garis yang sama, tetapi dengan perbedaan tertentu. Yang
paling penting dari ini adalah bahwa pada eukariota, produk transkripsi tidak bertindak
langsung sebagai mRNA, tetapi harus dimodifikasi sebelum dapat menjalani translasi.

Translasi
Pesan yang dikodekan dalam mRNA diterjemahkan menjadi urutan asam amino di ribosom.
Asam amino dibawa ke ribosom oleh molekul RNA transfer. Setiap tRNA bertindak sebagai
adaptor, yang di satu ujungnya memuat urutan komplementer untuk kodon triplet tertentu,
dan di ujung yang lain asam amino yang sesuai. Ia mengenali kodon tertentu dan
mengikatnya dengan pasangan basa komplementer, sehingga memastikan bahwa asam amino
yang sesuai ditambahkan ke rantai peptida yang sedang tumbuh pada titik tersebut. Enzim
yang disebut sintetase aminoasil-tRNA memastikan bahwa setiap tRNA digabungkan dengan
asam amino yang benar dalam proses yang bergantung pada ATP. Setidaknya ada satu jenis
tRNA untuk setiap asam amino, masing-masing dengan antikodon tiga basa,
memungkinkannya untuk mengikat urutan triplet komplementer pada mRNA. Sebuah tRNA
yang membawa formilmetionin kemudian berikatan dengan kodon start AUG pada mRNA.
Aktivitas peptidil transferase memutuskan hubungan antara asam amino pertama dan tRNA-
nya, dan membentuk ikatan peptida dengan asam amino kedua. Ribosom bergerak bersama
oleh satu triplet sehingga tRNA kedua menempati situs-P. TRNA pertama dilepaskan dari
asam aminonya, dan diteruskan ke situs-E sebelum dilepaskan dari ribosom. TRNA
aminoasil ketiga bergerak ke situs-A, sesuai dengan kodon berikutnya pada mRNA.

Pengaturan ekspresi gen


Induksi ekspresi gen
Sintesis banyak enzim yang diperlukan untuk katabolisme substrat diatur oleh induksi enzim.
Jika molekul substrat tidak ada di lingkungan, tidak ada gunanya mensintesis enzim yang
diperlukan untuk memecahnya. Contoh dari hal ini yang telah dipelajari secara mendalam
berkaitan dengan enzim β-galaktosidase, yang digunakan oleh E..

Laktosa −−−−−−−−− Glukosa + Galaktosa

Sekelompok gen yang terkait secara fungsional yang terlibat dalam regulasi sintesis enzim
dan ditempatkan bersama pada lokus yang sama disebut operon. Ini berisi gen struktural dan
pengatur. Ini terdiri dari tiga gen struktural yang ditunjuk Z, Y dan A, yang dikelompokkan
bersama dan berbagi promotor dan terminator yang sama. Kode gen masing-masing untuk β-
galaktosidase, permease dan transasetilase.

Permease diperlukan untuk pengangkutan laktosa ke dalam sel, sedangkan peran


transasetilase tidak sepenuhnya jelas, meskipun penting untuk metabolisme laktosa.
Pengelompokan ketiga gen bersama-sama dengan cara ini memastikan ekspresi 'semua atau
tidak sama sekali' dari ketiga protein. Transkripsi gen struktural ini ke dalam mRNA masing-
masing dimulai oleh enzim RNA polimerase yang mengikat urutan promotor. Gen struktural
kemudian ditranskripsi menjadi mRNA, yang kemudian diterjemahkan ke dalam tiga protein
yang dijelaskan di atas, dan laktosa dipecah. Dengan tidak adanya laktosa, hanya ada
sejumlah kecil β-galaktosidase yang ada dalam E.. Ketika semua laktosa telah dikonsumsi,
protein penekan bebas untuk memblokir gen operator sekali lagi, dan sintesis β-galaktosidase
lebih lanjut yang tidak perlu berhenti. Operon lac dapat dikontrol oleh protein regulator
positif dan negatif. Transkripsi operon hanya terjadi jika protein pengatur lain yang disebut
protein aktivator katabolit terikat pada urutan promotor. Aktivasi lac operon terjadi hanya
jika ada laktosa dan glukosa tidak ada.

Represi ekspresi gen


Operon trp berisi sekelompok gen yang mengkode lima enzim yang terlibat dalam sintesis
asam amino triptofan. Di hadapan triptofan, sel tidak perlu mensintesisnya sendiri, sehingga
operon dimatikan. Hal ini dicapai dengan mengikat triptofan dan mengaktifkan protein
penekan, yang pada gilirannya mengikat operator trp operon dan mencegah transkripsi enzim
sintetis. Triptofan di sini dikatakan bertindak sebagai korepresor. Saat triptofan digunakan
dan levelnya di dalam sel turun, penekan kembali ke bentuk tidak aktifnya, memungkinkan
transkripsi enzim sintesis triptofan terus berjalan tanpa hambatan.

Regulasi gen global


Sistem regulasi gen yang dibahas di atas berlaku untuk operon individu; terkadang,
namun, perubahan kondisi lingkungan memerlukan regulasi banyak gen
sekaligus. Sistem regulasi global ini merespons rangsangan seperti penipisan oksigen
dan perubahan suhu, serta memanfaatkan sejumlah mekanisme yang berbeda.

Dasar molekuler mutasi


Setiap perubahan yang dilakukan pada urutan DNA suatu organisme disebut mutasi. Ini
mungkin atau mungkin tidak berpengaruh pada fenotipe organisme. Hasil uji fluktuasi
bersama dengan bukti lain mengarah pada pemahaman bahwa mutasi terjadi secara spontan
di alam pada frekuensi yang sangat rendah. Setiap perubahan pada urutan DNA dapat
diwariskan, sehingga mutasi merupakan sumber utama variasi evolusioner.

Bakteri merupakan alat yang luar biasa untuk mempelajari mutasi karena jumlahnya yang
besar dan waktu generasi yang sangat singkat. Karena urutan DNA suatu gen mewakili
informasi kode yang sangat teratur, sebagian besar mutasi memiliki efek netral atau
merugikan pada fenotipe organisme, tetapi kadang-kadang mutasi terjadi yang memberikan
keuntungan bagi suatu organisme, membuatnya lebih mampu bertahan dan bereproduksi pada
organisme tertentu. lingkungan Hidup. Mutasi terjadi secara spontan di bagian mana pun dari
genom organisme. Mutasi spontan yang menyebabkan inaktivasi fungsi gen terjadi pada
bakteri dengan kecepatan sekitar satu di antara sejuta gen tertentu pada setiap putaran
pembelahan sel.

Bagaimana mutasi terjadi?


Gambar 11.17
Gambar 11.17 mengingatkan kita bagaimana kode dalam DNA ditranskripsikan menjadi
messenger RNA dan kemudian diterjemahkan menjadi urutan asam amino. Setiap kali DNA
mengalami replikasi, urutan yang sama ini akan diteruskan, mengkode urutan asam amino
yang sama. Sel memiliki mekanisme perbaikan untuk meminimalkan kesalahan ini, tetapi apa
yang terjadi jika kesalahan masih saja terjadi? Pada Gambar kita dapat melihat efek dari satu
nukleotida dimasukkan ke dalam untai alih-alih yang lain.

Mutasi missense mengubah arti pesan yang dikodekan dalam Ini adalah contoh jenis mutasi
yang paling sederhana, mutasi titik, di mana satu nukleotida telah diganti dengan yang lain.
Mesin penerjemahan juga 'tidak menyadari' kesalahan tersebut, dan sebagai konsekuensinya,
asam amino yang berbeda akan dimasukkan ke dalam rantai polipeptida. Konsekuensi dari
pengungkapan asam amino yang 'salah' dalam produk protein dapat berkisar dari tidak
berpengaruh sama sekali hingga hilangnya total sifat biologisnya. Hal ini dapat dipahami dari
segi struktur protein, dan bergantung pada apakah asam amino yang terpengaruh memiliki
peran penting, dan apakah asam amino pengganti memiliki sifat polar / non-polar yang serupa
atau berbeda. Ini paling sering terjadi pada nukleotida ketiga dari triplet. Mutasi nonsense
menghasilkan kodon 'stop' yang dimasukkan ke dalam mRNA pada titik terjadinya, dan
penghentian translasi prematur. Jenis mutasi titik lainnya adalah mutasi nonsense. Ingatlah
bahwa dari 64 kemungkinan permutasi triplet dari empat basa DNA, tiga adalah kodon 'stop',
yang mengakhiri rantai polipeptida.

Mutasi dapat menambah atau menghilangkan nukleotida


Mutasi lain melibatkan penyisipan atau penghapusan nukleotida. Mutasi frameshift
menghasilkan perubahan pada kerangka pembacaan, dan urutan asam amino yang berubah
menghasilkan aliran bawah dari titik terjadinya. Ini dikenal sebagai mutasi frameshift, dan
dalam banyak kasus akan mengakibatkan perubahan besar pada produk protein akhir.
Mutasi bisa dibalik
Ketika ini terjadi, genotipe dan fenotipe asli dipulihkan. Tidak mengherankan, mengingat
kekhususan ini, laju mutasi balik jauh lebih jarang. Fenotipe wildtype dimungkinkan untuk
dipulihkan, bukan melalui pembalikan dari perubahan basa aslinya, tetapi karena mutasi
kedua di lokasi yang berbeda. Efek mutasi kedua ini adalah menekan efek mutasi pertama.
Ini disebut penekan atau mutasi situs kedua.

Mutasi memiliki berbagai mekanisme


Beberapa basa nukleotida terjadi dalam bentuk alternatif yang langka, yang memiliki sifat
pasangan basa yang berbeda. Misalnya, seperti yang Anda ingat dari Bab 2, sitosin biasanya
memiliki gugus amino yang menyediakan atom hidrogen untuk berikatan dengan gugus keto
komplementer guanin.

Mutagen kimiawi dapat dibagi menjadi lima kelas:


Analog dasar
Sebuah analog basa mampu 'meniru' salah satu dari empat basa DNA normal dengan
memiliki struktur kimia yang cukup mirip untuk dimasukkan ke dalam molekul DNA alih-
alih basa itu selama replikasi. Namun 5-BU mampu tautomerisasi ke bentuk enol, yang ingat,
berpasangan dengan G, bukan A. Sedangkan untuk timin bentuk enol jarang, untuk 5-BU
lebih sering terjadi, maka kesalahan pemasangan dengan guanine lebih sering terjadi . TA
telah diganti dengan CG - tetapi frekuensinya jauh meningkat.

Agen alkilasi
Mereka bertindak dengan mengalkilasi guanin atau timin pada atom oksigen yang terlibat
dalam ikatan hidrogen. Substitusi yang dibawa oleh agen alkilasi dapat berupa transisi atau
transversi.

Agen deaminasi
Asam nitrat adalah mutagen yang kuat, yang mengubah afinitas pasangan basa dari sitosin
dan
adenin dengan mengganti gugus amino dengan atom oksigen. Transisi terjadi di keduanya
arah, AT → GC dan GC → AT. Perhatikan bahwa meskipun guanine mengalami deaminasi,
namun guanin properti pasangan dasar tidak terpengaruh.

Agen interkalasi
Mutagen ini mengerahkan efeknya dengan menyisipkan diri di antara nukleotida yang
berdekatandalam satu untai DNA. Mereka mendistorsi untaian di situs ini dan menyebabkan
penambahanatau, yang lebih jarang, penghapusan nukleotida. Hal ini menyebabkan mutasi
frameshift, dan seringkali selama replikasi, mutagen terikat mengganggu sintesis untai baru,
yang mengarah ke apenghapusan kotor nukleotida. Ethidium bromide, biasanya digunakan
untuk visualisasisejumlah kecil DNA di laboratorium biologi molekuler, merupakan agen
interkalasi; Itu memiliki struktur planar dengan dimensi yang kurang lebih sama dengan
pasangan purin-pirimidin.
Agen hidroksilasi
Hidroksilamina memiliki efek mutagenik spesifik, menghidroksilasi gugus amino sitosin
menyebabkan transisi GC → AT.Analog dasar dan agen interkalasi tertentu hanya dapat
menggunakan efek mutageniknyajika mereka dimasukkan ke dalam DNA saat bereplikasi.
Lainnya, yang bergantung padamengubah pasangan basa dengan memodifikasi struktur basa
DNA, efektif pada keduanyamereplikasi dan tidak mereplikasi DNA.

Mutagen fisik
Seperti disebutkan di awal bagian ini, agen mutagenik pertama yang didemonstrasikan adalah
sinar-X; bersama dengan sinar ultraviolet, mereka adalah mutagen fisik yang paling umum
digunakan. Sinar-X, seperti bentuk radiasi pengion lainnya, menyebabkan pembentukan
radikal bebas yang sangat reaktif. Ini dapat menyebabkan perubahan dalam struktur dasar
serta perubahan kromosom yang besar. Untaian DNA dapat dipatahkan dan ditarik kembali
secara tidak benar, sehingga menghasilkan kesalahan dalam urutan.

Kerusakan DNA bisa diperbaiki


Semua organisme telah mengembangkan cara untuk memperbaiki kerusakan pada DNA
mereka, selain mekanisme proofreading yang dijelaskan sebelumnya Cara paling umum
untuk menangani mutasi adalah melalui metode yang disebut perbaikan eksisi, di mana enzim
mengenali dan memotong wilayah DNA yang berubah dan kemudian mengisi basis yang
hilang, menggunakan untai lainnya sebagai cetakan. Perbaikan ketidakcocokan digunakan
untuk memperbaiki penggabungan basis yang lolos dari sistem proofreading. Dalam situasi
seperti ini, tidak langsung jelas mana basa yang benar dan mana yang salah, jadi bagaimana
sel mengetahui untai mana yang harus diganti? Dalam E. coli, untai lama dibedakan dari yang
baru dengan fakta bahwa beberapa basa dimetilasi. Ini hanya terjadi beberapa saat setelah
replikasi, sehingga untaian yang baru disintesis tidak akan memiliki gugus metil dan dengan
demikian dapat dikenali.

Uji karsinogenisitas: uji Ames


Tes Ames menilai kemampuan suatu zat untuk menyebabkan mutasi balik pada strain
auksotrofik Salmonella yang kehilangan kemampuan untuk mensintesis asam amino histidin.
Tingkat mutasi balik dibandingkan dengan ada dan tidak adanya zat uji.

Transfer genetik pada mikroorganisme


Berbagai mekanisme mutasi yang dijelaskan di atas menghasilkan perubahan dalam susunan
genetik suatu organisme. Hal ini juga dapat terjadi melalui rekombinasi, di mana materi
genetik dari dua sel bergabung untuk menghasilkan varian yang berbeda untuk salah satu sel
induk.

Transformasi
Kami telah merujuk pada eksperimen klasik Fred Griffith pada tahun 1928, demonstrasi
pertama bahwa transfer genetik dapat terjadi pada bakteri. Griffith sebelumnya telah
mendemonstrasikan keberadaan dua strain bakteri Streptococcus pneumoniae, yang
merupakan salah satu agen penyebab pneumonia pada manusia, dan juga sangat mematikan
pada tikus.

1. Tikus yang disuntik dengan sel hidup dari bentuk-R tidak terpengaruh.
2. Tikus yang disuntik dengan sel hidup bentuk S mati, dan sejumlah besar bakteri bentuk S
mati dipulihkan dari darah mereka.
3. Tikus diinjeksi sel berbentuk S yang telah dimatikan dengan pemanasan pada suhu 60 60C
tidak terluka dan tidak ada bakteri yang ditemukan dari darah mereka.
4. Tikus yang disuntik dengan campuran sel bentuk-R hidup dan sel bentuk S yang mati
panas mati, dan bakteri bentuk S yang hidup diisolasi dari darah mereka.

Bakteri bentuk-S yang ditemukan dari tikus dalam percobaan keempat yang penting memiliki
kapsul polisakarida seperti bentuk-S lainnya, dan, secara kritis, mampu meneruskan
karakteristik ini ke generasi berikutnya. Griffith menyimpulkan bahwa beberapa zat yang
belum diketahui telah berpindah dari sel bentuk-S yang terbunuh panas ke beberapa bentuk-R
yang hidup dan memberi mereka kemampuan untuk membuat kapsul.

Bagaimana transformasi terjadi?


Salah satu alasan mengapa hanya sebagian kecil sel penerima yang berubah adalah karena
hanya sebagian kecil dari mereka yang pada satu waktu berada dalam status kompetensi.
Ekspresi protein yang penting untuk proses transformasi bergantung pada sekresi faktor
kompetensi. Yang terakhir, ada perubahan stabil dari komposisi genetik sel, dan fenotipe baru
diekspresikan pada generasi berikutnya.

Kompetensi yang diinduksi


Transformasi tidak dianggap terjadi secara alami pada E. coli, tetapi, jika menjalani
perawatan tertentu di laboratorium, sel-sel spesies ini dapat dibuat untuk mengambil DNA,
bahkan dari sumber yang sama sekali tidak terkait.

Transfer gen dalam konjugasi hanya satu cara


Proses konjugasi awalnya digambarkan sebagai fusi dari dua sel pasangan untuk
menghasilkan zigot diploid, yang kemudian menjalani meiosis untuk menghasilkan keturunan
haploid dengan genotipe yang dimodifikasi. Namun, penelitian William Hayes menunjukkan
bahwa perkembangan koloni sel rekombinan bergantung pada kelangsungan hidup hanya satu
dari strain yang berpartisipasi, strain lain hanya diperlukan sebagai donor DNA. coli, ada dua
jenis kawin yang berbeda, yang kemudian dikenal sebagai F + dan F−, bergantung pada
apakah mereka memiliki plasmid yang disebut plasmid F. Dalam campuran sel F + dan F, sex
pilus menghubungi sel F, kemudian berkontraksi, untuk menarik kedua sel menjadi satu.
Untai tunggal DNA plasmid kemudian melewati saluran yang dibuat di antara dua sel, dan
memasuki sel F. Ini kemudian berfungsi sebagai templat untuk produksi untai kedua
komplementer, dan demikian pula untai tunggal yang tertinggal di sel donor direplikasi,
meninggalkan kita dengan salinan untai ganda dari plasmid F di kedua sel. Dengan
memperoleh plasmid F, sel F-penerima telah diubah menjadi F +. coli, akhirnya sisa plasmid
F akan memasuki sel F, membawa ke belakang. Sel-F yang menerima DNA dari sel Hfr
biasanya tetap F-, tidak seperti yang bersilangan dengan F + Sel, karena sisa urutan F tidak
ditransfer. Segera menjadi jelas bahwa fenomena ini memberikan peluang besar untuk
menentukan posisi relatif gen pada kromosom bakteri. Ini dilakukan dengan percobaan
perkawinan terputus, di mana waktu yang diperbolehkan untuk konjugasi sengaja dibatasi
oleh kerusakan mekanis dari sex pili, dan berkorelasi dengan sifat fenotipik yang ditransfer
ke sel penerima. Dengan cara ini peta genetik dari kromosom bakteri dapat dikembangkan.

Elemen transposable
Karena setiap fragmen kromosom dapat dikemas secara keliru dengan cara ini, semua gen
ditransfer pada frekuensi yang sama. Hasil transduksi khusus dalam efisiensi transfer yang
jauh lebih tinggi untuk gen tertentu, namun terbatas pada gen yang memiliki lokasi
kromosom tertentu. Ingat kembali dari Bab 10 bahwa dalam siklus hidup lisogenik, DNA fag
diintegrasikan ke dalam kromosom inang, dan kemudian, mungkin setelah banyak putaran
pembelahan sel, dipotong lagi sebelum memasuki kembali siklus litik. Setelah menginfeksi
sel lain, gen yang ditransduksi akan mengalami rekombinasi dan dimasukkan ke dalam
kromosom penerima. Meskipun terbatas pada gen di sekitar integrasi fag lisogenik, ini adalah
bentuk transfer yang sangat efisien, karena gen terintegrasi secara stabil ke dalam sel inang.
Eksperimen transduksi, seperti yang melibatkan konjugasi, dapat digunakan untuk
menentukan posisi relatif gen pada kromosom bakteri.