CUESTIONARIO I

1.-Drfenir el siguiente significado de:

* GLUCOSA: f. Azúcar de seis átomos de carbono presente en todos los seres vivos, ya que
se trata de la reserva energética del metabolismo célula.

*glucemia: f. Presencia de azúcar en la sangre, especialmente cuando es excesiva.

*Hiperglucemia: f Aumento de la glucosa en sangre por encima de los niveles normales.

*Hipoglucemia: Es la escasez de glucosa en la sangre. Puede ser una enfermedad

en si misma o aparecer como una complicación en las personas diabéticas.

2.- ¿Cuál es el valor normal de glucosa sanguínea en ayunas? (prepandial)

*Valor normal entre 70 mg/dL y 110 mg/dL

Mide la cantidad de este azúcar que circula por la sangre. Estas cifras se
miden cuando la persona se encuentra en ayunas.

3.- ¿Cuáles son los valores de glucosa en sangre (postprandial)

* El valor normal de glucosa en sangre es entre 90 y 110 mg/dl.

Este valor puede verse modificado si la muestra se analiza después de consumir algunos
alimentos altos en azúcar.

4.- ¿investigue el método enzimático (GOP)? de:

MÉTODO DE GLUCOSA OXIDASA/PEROXIDASA (GOD/PAP)

INTRODUCCIÓN:

Los métodos enzimáticos para cuantificar glucosa han ganado popularidad

gracias a la mayor especificidad y simplicidad de los análisis. Uno de estos, es el que
utiliza una reacción acoplada a 2 enzimas: Glucosa oxidasa (GOD) y Per oxidasa
(PAP). La primera actúa directamente sobre el sustrato (glucosa) originando ácido
glucónico y peróxido de hidrógeno. Este último, por acción de la peroxidasa, libera un
oxígeno el cual interactúa con un aceptor de oxígeno, dando lugar a un cromógeno
que puede cuantificarse fotométricamente y cuya absorbancia es directamente
proporcional a la concentración de glucosa.

FUNDAMENTO:

GOD
Glucosa + O2+ H 2O⎯ ⎯ ⎯ ⎯ ⎯ > ácido glucónico + H2O2

Peroxidasa
La reacción es lineal hasta 500 mg/dl. Para concentraciones superiores, diluir la
muestra con suero fisiológico repetir la determinación y multiplicar el resultado por el
factor de dilución.

REACTIVOS

1.-Solución reactiva: Glucosa oxidasa 6.000 U.I/l

Peroxidasa 1.500 U.I./l

4-aminofenazona 1,64 mM
Tampón fosfato 0,1 M[pH 8,0]
Fenol 2,6 Mm
2.-Patrón de referencia:
Se pesan 300 mg de glucosa anhidra para preparar 100 ml de material de

referencia en agua destilada (P.M glucosa = 180).

METODO DE REFERENCIA:

La FDA ha propuesto como el método de referencia para la glucosa un

procedimiento totalmente enzimático utilizando hexocinasa y glucosa-6-fosfato
deshidrogenasa (2). Passey y col. hicieron una revisión exhaustiva de 10 métodos
de glucosa y han utilizado el procedimiento de la hexocinasa como el método de
referencia..

FUNDAMENTO DEL MÉTODO:

Hexocinasa

Glucosa + ATP

Glucosa-6-fosfato + ADP
Mg ++

G-6-PDH

Glucosa-6-fosfato + NAD+

6-Fosfogluconato + NADPH + H+

La glucosa es fosforilada por la hexocinasa (HK) en presencia de trifosfato de

adenosina (ATP) y magnesio para formar glucosa-6-fosfato (G-6-P) y difosfato de
adenosina (ADP). La G-6-P es oxidada a continuación por la glucosa-6-fosfato
deshidrogenasa (G-6-PDH) en presencia de dinucleótido de nicotinamida adenina-
fosfato (NADP+) produciendo 6-fosfogluconato y NADPH.
La formación de NADPH produce un aumento en la absorbancia a 340 nm que es
directamente proporcional a la concentración de glucosa en la muestra.
RECOLECCION Y PREPARACION DE LA MUESTRA

La muestra de elección es suero fresco, claro y no hemolizado. El suero debe

separarse de las células tan pronto como sea posible para minimizar la
descomposición de la glucosa por el proceso de glicólisis. En muestras
adecuadamente procesadas, las concentraciones de glucosa son estables hasta
por 3 días a 4°C.
CÁLCULO Y RESULTADOS

Resultados
La concentración de glucosa se expresa en mmol/L ( ó en mg/dL).

Cálculo
A

Glucosa mmol/L (ó en mg/dL) = —— x concentración del estándar

As

A = absorbancia de la muestra desconocida

As = absorbancia del estándar

Ejemplo
0.325

Glucosa mmol/L (mg/dL) =— — — — x 8.4

0.604

= 4.5 mmol/L (ó 81 mg/dL)

0.325 = absorbancia de la muestra desconocida

0.604 = absorbancia del estándar

8.4 mmol/L (151 mg/dL) = concentración del estándar