Nama : Nandini Putri Nur Fajar Nilai :

Kelas : 13-8
NIS : 17.63.08764
Tanggal : 4 September 2020

JUDUL PENETAPAN:
PENETAPAN KADAR THIAMIN PADA TABLET VITAMIN B1 DENGAN HPLC

I. Prinsip Analisis (20) :

1. Pengertian HPLC

HPLC adalah suatu sistem kromatografi yang fase geraknya dialirkan dengan
cepat dengan bantuan tekanan dan pompa dan hasilnya dideteksi dengan suatu
instrumen. Jenis HPLC yang digunakan adalah kromatografi partisi terbalik
(Tjandrawati, 2003). Metode ini bekerja dengan cara memisahkan campuran menjadi
komponen-komponen penyusunnya. Setelah itu dilakukan analisis kuantitatif dan
kualitatif untuk mengetahui jenis senyawa penyusun campuran dan kadarnya
(Rubianto, 1999).
Alur Kerja Alat HPLC

Dengan bantuan pompa fase cair yang dialrkan melalui kolom ke detektor,
cuplikan dimasukan ke dalam fase gerak dengan cara penyuntikan. Di dalam kolom
terjadi pemisahan komponen-komponen campuran karena perbedaan kekuatan
interaksi antara solute dengan fase diam. Setiap komponen yang keluar dari kolom
akan dideteksi oleh detektor dan direkam dalam bentuk kromatogram.

2. Pengertian Reserve Phase

Reserve phase atau disebut juga kolom fasa terbalik adalah kolom yang fasa
diamnya bersifat non polar, kabalikan dari fasa normal yang fasa diamnya bersifat
polar. Pada teknik ini senyawa yang memiliki tingkat kepolaran lebih tinggi akan
terelusi lebih awal (Putra, 2004)
 3. Kolom fase diam C18

Kolom fase diam C18 merupakan fase diam pada HPLC fase terbalik yang
merupakan hidrokarbon alkil yang bersifat non polar yang terikat pada basis silika.
Fase diam jenis C18 mampu memisahkan senyawa dengan tingkat kepolaran tinggi,
sedang dan rendah. Rantai alki yang lebih endek pada fase diam sangat sesuai
digunakan untuk senyawa polar. Siika yang tidak termodifikasi menyebabkan waktu
retensi yang bervarasi dikarenakan adanya kandungan air (Lux,2004)

II. Persiapan Sampel (20) :

a.Identifikasi sampel : Sampel Vitamin B1
Kode sampel : 03-4/LABAI-3/HPLC/2020
Tgl. Penerimaan : 4 September 2020
Sifat fisik sampel
- Wujud padat/cair/gas : Padat
- Warna : Putih
- Bau : Normal
Label klaim sampel vitamin B1 mengandung 25 mg/tablet
Persyaratan keberterimaan 25 mg/tablet ± 10%

b. Persiapan sampel
-Pembuatan Larutan Buffer Fosfat 0,04 M

Potassium phosphate Disaring dengan

Ditimbang 5,4444 Dimasukan ke dalam
monobasic ( KH2PO4 ) membrane filter PFTE
gram KH2PO4 piala gelas 100 ml
0,45 micrometer

Dimasukan ke dalam
botol pelarut dan dilabeli
 -Pembuatan Deret Standar Thiamin (0-50 ppm)

Dihimpitkan,
Dihomogenkan(1000 ppm)

Ditimbang 0,1000 gram Dimasukan ke dalam LU

Thiamin.HCl (p.a) 100 ml + buffer fosfat
(pelarut)

+ Buffer fosfat.
Dihimpitkan,
dihomogenkan

Dipipet 10,00 ml ke LU Buat deret standar :

100 ml +buffer fosfat 0 5 10 15 20 30 50 ppm
(100 ppm) 0 2,5 5 7,5 10 15 25 ml

Disaring dengan
membrane filter PVDF Diinjeksikan ke HPLC
0,2 micrometer

-Persiapan Sampel

Dihaluskan 2 Ditimbang Dimasukan ke

Ditimbang 5
tablet ± 0,2000 g LU 100 ml +
tablet Vitamin B1 sampai halus buffer fosfat
 Dikocok selama 5
menit, lalu dienapkan

Disaring dengan Dipipet 5 ml ke LU 50

kertas saring ml + buffer fosfat,
whatman No.41 dihomogenkan

Disaring dengan Diinjeksikan ke HPLC

membrane filter PVDF
0,2 micrometer

III. Data Hasil Pengamatan (15):

1. Data Penimbangan
Bobot kaca arloji + 5 tablet vitamin. 26,4002 gram
B1
Bobot kaca arloji kosong 25,3891 gram
Bobot 5 Table Vitamin B1 1,0111 gram
Bobot kaca arloji + Thiamin.HCl 21,6921 gram
Bobot kaca arloji kosong 21,5921 gram
Bobot thiamin.HCl 0,1000 gram
Bobot kaca arloji + KH2PO4 29,6035 gram
Bobot kaca arloji kosong 24,1591 gram
Bobot KH2PO4 5,4444 gram
Simplo Duplo
Bobot kaca arloji + Sampel 25,5892 gram 25,5892 gram
Bobot kaca arloji kosong 25,3890 gram 25,3890 gram
Bobot Sampel 0,2002 gram 0,2002 gram

2. Data Pengukuran
 No Konsentrasi
Nama (ppm) Waktu Retensi Area Keterangan
1 Standar Ethanol 0 1,893 0,0000
5 1,035 62,09148
10 1,011 139,23180
15 1,016 206,85321
20 0,998 247,43216
30 0,963 371,40308
50 1,002 641,71387

2 Sampel Obat Simlo 0,996 326,55246

Sintesis
Duplo 1,002 316,26962

IV. Pengolahan Data Hasil pengukuran (25):

- Tabel dan Grafik excel

Konsentrasi (X) Area (Y)

Konsentrasi Vs Area
0 0,00000 700
5 62,09148 600
500
10 139,23180 400
Area

300
15 206,85321
200
20 247,43216 100
0
30 371,40308 0 10 20 30 40 50 60
Konsentrasi
50 641,71387
x

Y = 12,6699x + 3,0906

- Perhitungan C sampel Simplo dan Duplo

( Area−Intersep)
- C Simplo = x FP - C Duplo =
Slope
( Area−Intersep)
x FP
Slope

(326,55246−3,0906)
= x 10 =
12,6699
(316,26962−3,0906)
x 10
12,6699
 = 255,3 ppm = 247,18 ppm

- Perhitungan Kadar Thiamin (%)

Volume labu
ppm x
- % Thiamin (simplo) = 1000 - % Thiamin (duplo) =
x 100 %
mg sampel
Volume labu
ppm x
1000 100%
x
mg sampel

100
255,3 ppm x
= 1000 =
x 100 %
200,2 mg
100
247,18 x
1000
x 100 %
200,2
= 12,75% = 12,34 %

- Perhitungan Kadar Thiamin (mg/Tablet)

% Thiamin
- Kadar thiamin (mg/Tablet)(Simplo) = x Bobot rata−rataTablet
100

12,75 %
= x 202,22
100

= 25,78 mg/Tablet

% Thiamin
- Kadar Thiamin (mg/Tablet)(duplo) = x Bobot rata−rataTablet
100

12,34
= x 202,22
100

= 24.95 mg/Tablet

Simplo + Duplo
- Rata-rata % Thiamin (mg/Tablet) =
2

25,78+24,95
=
2
= 25,365
 Selisih antara simplo dan dulpo
- RPD =
Rata−rataC sampel

25,78−24,95
= x 100%
25,365

= 3,27%

V. Kesimpulan (15) :
Pada penetapam kadar thiamin dalam vitamin B1 dengan HPLC didapatkan
kadar thiamin sebesar 25,365 mg/Tablet. Kadar thiamin tersebut telah memenuhi
persyaratan keberterimaan 25 mg/Tablet ± 10%.

V. Daftar Pustaka (5):

- Penetapan kadar simvastatin dengan KCKT. (2015). Farmaka Volume 14 Nomor 4, 70-75.

Savira Silma Aulia, I. s. (t.thn.). penetapan kadar simvastatin menggunakan KCKT. Farmaka
volume 14 Nomor 4, 70-75.

- Utari, D. A. (2016). Penetapan kadar thiamin pada Tablet Vitamin B1 dengan HPLC.
Dapartemen Perindustrian SMK-SMAk Bogor.

- Arifin, Zaenal, Drs. H.E Krisnadi, 2012 Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT). Bogor:
Sekolah Menengah Kejuruan- SMAK Bogor

Bogor, 4 September 2020

Guru Praktik Siswa

(...................................) (Nandini Putri Nur Fajar)

0 ppm
5 ppm
10 ppm
15 ppm
20 ppm
30 ppm
50 ppm
Simplo
Duplo