1

BAB III
METODE KERJA

3.1 Alat Dan Bahan

3.1.1 Alat
1. Beaker glass
2. Corong
3. Erlenmayer
4. Instrumen HPLC
5. Labu ukur
6. Micropipet
7. Penyaring membrane
8. Pemanas
9. Timbangan
10. Vial

3.1.2 Bahan
1. Aquadest
2. H2SO4
3. Larutan baku nipagin & nipasol
4. Metanol
5. Nipagin
6. Nipasol

3.2 Cara Kerja

A. Fase Gerak
Metanol : Air dengan perbandingan 40 : 60

B. Larutan Baku / Larutan Pemabanding

1. Dipipet sebanyak 1 ml, 2 ml, 3 ml, 5 ml, 7 ml dari larutan induk
nipagin & nipasol 50 ppm
 2

2. Dimasukan ke dalam labu ukur 10 ml

3. Ditambah 1 ml H2SO4 2M pada masing – masing labu terukur
4. Ditambah pelarut campur sampai tanda batas 10 ml dikocok
homogeny
5. Disaring dengan penyaring membrane 0,2 µm di masukan ke
dalam vial

C. Sampel Cream
1. Ditambahkan 1 ml H2SO4 kedalam 2 ml cream/lotion,
ditambahkan 15 ml pelarut campur, dipanaskan pada pemanas
sonic 60o
2. Diambil dan ditampung larutan / filtrate
3. Residu/sisa cream ditambahkan 15 ml pelarut campur, dipanaskan
dengan sonic pada suhu 60o C
4. Diambil dan ditampung larutan/filtrate yang kedua
5. Residu/sisa cream ditambahkan 19 ml pelarut campur, dipanaskan
dengan sonic pada suhu 60o C
6. Diambil dan ditampung larutan/filtrate
7. Filtrate di enaptuangkan lalu hasilnya disaring dengan penyaring
membrane 0,2 µm di masukan ke dalam vial

D. Sampel Larutan
1. Ditimbang 0,1 gram nipagin dan 0,1 gram nipasol
2. Dilarutkan dengan pelarut campur 50 ml, dikocok hingga larut dan
disaring
3. 5ml filtrate pertama dibuang
4. Diambil 5 ml flltrat, dimasukan kedalam labu ukur 10 ml,
ditambah 1 ml H2SO4 2 M
5. Ditambah pelarut campur hingga tanda batas 10 ml
8. Dikocok dan disaring dengan penyaring membrane 0,2 µm di
masukan ke dalam vial
 3

Setiap Larutan pembanding, sampel cream dan larutan yang sudah masuk
ke dalam vial diinjek kan ke dalam alat/instrument HPLC, dimana alat
HPLC sudah diatur dengan panjang gelombang laju alir 1 ml/menit
 4

BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Data Pengamatan

4.2 Perhitungan
A. Fase Gerak & Pelarut campur
Metanol : air ( 40 : 60 )
40
Metanol = x 300 ml = 120 ml
100
60
Air = x 300 ml = 180 ml
100

B. Pembanding
 Konsentrasi 10 ppm
0,2 ml x 500 ppm = 10 ml x N2
0,2 ml x 500 ppm
N2 =
10 ml
N2 = 10 ppm

 Konsentrasi 50 ppm
1 ml x 500 ppm = 10 ml x N2
1ml x 500 ppm
N2 =
10 ml
N2 = 50 ppm

 Konsentrasi 100 ppm

2 ml x 500 ppm = 10 ml x N2
2ml x 500 ppm
N2 =
10 ml
N2 = 100 ppm

 Konsentrasi 150 ppm

3 ml x 500 ppm = 10 ml x N2
 5

3 ml x 500 ppm
N2 =
10 ml
N2 = 150 ppm
 Konsentrasi 200 ppm
4 ml x 500 ppm = 10 ml x N2
4 ml x 500 ppm
N2 =
10 ml
N2 = 200 ppm

C. Sampel cream
100 mg x
Batas bawah : =
100 ml 2ml
100 mg x 2 ml
x=
100 ml
x = 2 mg
200 mg 2000 µg
Konsentrasi : = = 40 ppm
50 ml 50 ml
200 mg x
Batas Atas : =
100 ml 2ml
200 mg x 2 ml
x=
100 ml
x = 4 mg
4 mg 4000 µg
Konsentrasi : = = 80 ppm
50 ml 50ml

D. Sampel larutan
100 mg 1000 µg
Konsentrasi : = = 20 ppm
50 ml 50 ml