Pengembangan sistem pemberian obat merupakan hal mendasar untuk mengatasi

keterbatasan yang dipaksakan oleh molekul dengan bioavailabilitas oral yang buruk tetapi tinggi
potensi terapi. Untuk mengembangkan perangkat untuk pengiriman RSV karena itu
potensi
relevansi terapeutik dalam beberapa gangguan termasuk
penyakit neurodegeneratif [6], kami fokus pada optimalisasi
formulasi hidrogel berbasis karomer / agaros dari keduanya secara reologis
dan sudut pandang biologis in vitro.
Sebagai langkah pertama kami memilih pelarut di mana mendispersikan Carbopol 974P
dengan membandingkan air dan PBS. Baik sebelum dan sesudah perlakuan termal,
dispersi yang disiapkan dalam PBS kurang kental dari pada yang diperoleh pada
air. Bahkan, ketika karbomer didispersikan dalam air atau larutan alkali, itu
ionisasi gugus karboksilat dan tolakan elektrostatik antara
kelompok anionik menentukan peningkatan viskositas [40]. Sebaliknya, di
keberadaan elektrolit viskositas berkurang, karena muatan
sebagian dilindungi oleh kation [41]. Karena karakteristik ini muncul
lebih menguntungkan untuk mencapai dispersi obat yang homogen dalam
pembawa, semua hidrogel diselidiki disiapkan oleh dispersi
Carbopol 974P dalam PBS.
Masalah sterilisasi adalah langkah penting dalam pengembangan dan klinis
terjemahan biomaterial. Bertujuan menghasilkan, dalam satu suntikan, steril dan
gel seperti padat, kami
berfokus pada metode pemanasan dan menyelidiki kemungkinan untuk bergerak
dari pemanasan microwave hingga autoklaf. Agarose umumnya meleleh di dalam
microwave oven atau autoclave dalam protokol dasar untuk resolusi
Fragmen DNA [42], sementara itu dilaporkan dalam formulasi cair
karbomer bereaksi dengan oksigen, yang mengarah pada pengurangan atau kehilangan permanen
viskositas. Proses ini dikatalisis oleh sinar matahari, sinar UV dan beberapa logam
di dalam air; khususnya, melacak tingkat besi dan logam transisi lainnya
secara katalitik dapat menurunkan Carbopol
polimer.
Panas dapat mempercepat proses ini, tetapi ketika kehilangan viskositas dialami
setelah sterilisasi pada 121 C, masalahnya dapat dihentikan dengan menghilangkan deaerasinya
formulasi di bawah vakum dan memecahkan vakum dengan gas inert [43].
Hasil penelitian menunjukkan bahwa P.Ethyl-m dan P-Ethyl-a sebanding dalam
dalam hal sifat reologi dan kinerja biologis in vitro dengan
fibroblas yang diabadikan, sehingga autoklaf dipilih sebagai pemanasan
metode, karena metode persiapan ini menawarkan keuntungan untuk keduanya
memproduksi dan mensterilkan gel. Sebagai langkah selanjutnya, kami memvariasikan netralisasi
agen dan jumlah donor OH dan mengevaluasi efeknya
modifikasi sehubungan dengan formulasi yang dioptimalkan. Tambahan dari
zat penetral meningkatkan jumlah gugus karboksilat itu
menyebabkan pembengkakan mikroel karbomer dan dapat memfasilitasi jaringan
pembentukan. Bahkan, pada pH yang lebih tinggi tolakan antara muatan negatif
menyebabkan uncoiling maksimum dan dispersi menjadi lebih dekat
dikemas dan terjerat [44]. Penggunaan alkohol untuk mempromosikan hidrogen
ikatan adalah strategi umum untuk menghasilkan hidrogel berbasis karbomer [45].
Poliol dan gula dapat ditambahkan sebagai donor hidroksil dengan efek
penebalan gel, tetapi kehadiran mereka juga dapat membantu pembubaran yang buruk
obat yang larut dalam air, seperti RSV. Seperti yang dijelaskan [36], dalam karya ini ini
pendekatan diikuti dengan menambahkan 1,2-propanadiol dan gliserol. PH
nilai P.Ethyl-a dan P.NaOH.0 (5.8) dapat dibandingkan, sedangkan nilainya
berkurang untuk P.Ethanol.0 (4.6). P.NaOH.0 lebih tebal dan menyajikan a
jaringan yang lebih kuat sehubungan dengan gel lainnya, seperti yang ditunjukkan oleh yang
terbesar
modulus penyimpanan dan viskositas kompleks pada semua frekuensi yang diselidiki
(Gbr. 3). Stabilitas jaringan ini dibuktikan oleh fakta bahwa itu
diperlukan untuk meningkatkan suhu lebih dari 80 C untuk mengamati transisi
dari gellike menjadi perilaku cair (Gbr. 4) dan deformasi sehubungan dengan suatu
regangan yang dikenakan lebih rendah dari yang diukur untuk
P.Ethyl-a dan P.Ethanol.0 (Gbr. 5). Viskositas kompleks yang lebih besar
P.NaOH.0 sehubungan dengan P.Ethyl-a (Gbr. 3) mungkin dikaitkan dengan a
interaksi alkohol yang berbeda dengan mikroomer karbomer setelah
perawatan termal. Sebuah studi yang solid [46], meneliti efek dari
interaksi polimer-pelarut pada sifat reologi poli (akrilik)
asam) gel, melaporkan bahwa peningkatan kadar air sehubungan dengan
jumlah alkohol mendukung polimer-pelarut. interaksi lebih dari interaksi polimer-polimer,
menyebabkan perpanjangan
rantai polimer dan meningkatkan viskositas suspensi polimer.
Akhirnya, perbedaan reologis antara P.Ethanol.0 dan P.NaOH.0
(keduanya tidak mengandung donor OH, Fig. (keduanya tidak mengandung donor OH, Fig.
(keduanya tidak mengandung donor OH, Fig. (keduanya tidak mengandung donor OH, Fig.
(keduanya tidak mengandung donor OH, Fig.) (keduanya tidak mengandung OH donor, Gambar.
(keduanya tidak mengandung donor OH, Gambar. 3, 4, 5) tampaknya tidak berhubungan dengan)
tampaknya tidak berhubungan dengan) tampaknya tidak berhubungan dengan) tampaknya tidak
terkait dengan tampaknya tidak berhubungan dengan) tampaknya tidak berhubungan dengan)
tampaknya tidak berhubungan dengan
agen penetral yang berbeda, tetapi lebih kepada nilai pH yang berbeda. Ini
hasilnya sesuai dengan penelitian sebelumnya, melaporkan itu
trietanolamin dan natrium hidroksida tidak menghasilkan reologi yang nyata
perubahan untuk gel dengan nilai pH yang sama [47].
Evaluasi sitokompatibilitas dilakukan dengan dua sel yang berbeda
model. L929 mouse fibroblast, garis sel referensi yang direkomendasikan oleh
banyak institusi standar [37], dipilih sebagai model jaringan lunak
respon, sedangkan garis sel neuroblastoma SHSY5Y dipilih sebagai model
neuron dopaminergik untuk penelitian penyakit Parkinson.
Uji elusi dengan sel L929 sangat penting untuk menyoroti itu
trietilamina menunjukkan efek sitotoksik yang lebih besar daripada trietanolamina
natrium hidroksida dan bahwa penghapusan donor OH meningkatkan sel
kelangsungan hidup. Hasil ini menunjukkan bahwa toksisitas gliserol dan
1,2-propanediol tergantung konsentrasi, tetapi mereka juga menyarankan itu
donor OH tidak sangat berinteraksi dengan matriks karbomer / agarosa.
Bahkan pengurangan viabilitas sel terlihat dari titik waktu pertama,
tanpa perbedaan yang signifikan dibandingkan dengan titik waktu terakhir
diperiksa. Uji elusi lebih lanjut dengan SH-SY5Y memungkinkan membandingkan
kinerja P.Ethanol.0 dan P.NaOH.0 dengan model sel populer
neuron mamalia, menunjukkan bahwa P.NaOH.0 adalah kandidat yang lebih baik untuk
aplikasi masa depan sebagai sistem pengiriman obat terhadap neurodegenerasi.
Formulasi yang berbeda diselidiki memungkinkan kita untuk mengamati itu bahkan
meskipun konsentrasinya relatif rendah (0,5 g / g karbomer), penambahan
agarosa sangat penting untuk mendapatkan gel dengan perilaku padat. Bahkan, gel
(P.Agar.0) dibuat dari agarosa tetapi tanpa karbomer, dengan pH yang sama
(5.8) dan tunduk pada termal yang sama
pengobatan sebagai P.Ethyl-a, menyebabkan pembentukan gel yang lebih lemah (G 0 = 528 Pa di
10 rad / s untuk P.NaOH.0 vs G 0 = 300 Pa untuk
P.Agar.0, Sumber Daya Online 4). Di sisi lain, viskositas
dispersi dibuat dari karbomer tetapi tanpa agarosa, dengan pH yang sama
(5.8) dan dikenai autoklaf sebagai P.Ethyl-a, tidak dimodifikasi oleh
perawatan termal. Untuk semua formulasi, viskositas dispersi
tidak dimodifikasi ketika pH di bawah 4. Hasil ini menunjukkan bahwa
keberadaan agarosa dan karbomer kontemporer pada pH di atas 4 adalah
diperlukan untuk mendapatkan karakteristik padat seperti P.Ethyl-a, P.NaOH.0 dan
P.Ethanol.0. Secara khusus, mereka menyarankan bahwa di hadapan agarosa
dan dengan proses yang bergantung pada pH, karbomer membentuk semi-IPN, di mana
jaringan agarose membuat struktur tiga dimensi dengan
interpenetrasi dari karbomer mikroel cross-linked (Gbr. 11). Ini
struktur distabilkan oleh ikatan sekunder, yang mungkin terganggu sekitar
80 C untuk P.Ethyl-a dan P.Ethanol.0 dan sekitar 90 C untuk P.NaOH.0, ketika a
Terjadi transisi yang bergantung pada struktur dari perilaku seperti padat ke cair.
Seperti dijelaskan, peningkatan pH menentukan pelepasan karbomer
rantai dan dapat mempromosikan ketersediaan situs yang mengikat untuk interaksi,
menstabilkan semi-IPN. Pemanasan juga dapat mempengaruhi mobilitas polimer
rantai, memungkinkan pembentukan jaringan dan mempromosikan perubahan
konformasi yang tidak digulung. Mekanisme serupa diusulkan untuk
pembentukan gel agarose-kitosan dan skala mikro siklodekstrin / carbopol
IPNs [48, 49].
Mempertimbangkan hasil keseluruhan, P.NaOH.0 dipilih untuk RSV
studi rilis. Sepengetahuan kami, sebagian besar hidrogel sebagai rilis yang dapat disuntikkan
sistem untuk pengiriman lokal RSV terhadap neurodegenerasi adalah
tidak dilaporkan dalam literatur. Namun, beberapa data tentang terapeutik
persyaratan tersedia untuk beberapa aplikasi, menunjukkan bahwa
pengembangan sistem pengiriman berkelanjutan mungkin merupakan strategi yang menarik
untuk mencapai kemanjuran yang diinginkan dengan tetap mempertahankan plasma yang rendah
dan berkelanjutan
konsentrasi. Sebagai contoh, RSV menunjukkan perlindungan kardiovaskular saat oral dikirimkan
pada 20–50 mg / kg setiap hari (untuk orang dewasa, mewakili 20 mg / kg
sekitar 140 kali jumlah maksimum RSV dalam satu liter anggur merah
[50]), tetapi rute alternatif meningkatkan ketersediaan hayati obat; khususnya, setiap hari
pemberian intravena atau intraperitoneal efektif pada 1 mg / kg [51].
RSV in vitro menghambat proliferasi keratinosit manusia bahkan pada
konsentrasi submikromolar, sedangkan pada 40-100 l M adalah sitotoksik untuk ini
sel. Selanjutnya, pada konsentrasi 50 mg / mL menghambat replikasi P. acnes,
sedangkan pada konsentrasi 200 mg / mL itu adalah bakterisidal [19]. Berkaitan dengan
neurodegenerasi, dilaporkan bahwa RSV sedikit toksik pada sel SK-N-BE
dari konsentrasi 10 l M, sedangkan pada konsentrasi
7,5 l M mencegah toksisitas yang dipicu oleh HM. M mencegah racun yang dipicu oleh HM.
Mencegah toksisitas yang dipicu oleh HM. Mencegah toksisitas yang dipicu oleh HM. Mencegah
toksisitas yang dipicu oleh HM. Mencegah toksisitas yang dipicu oleh HM. Mencegah toksisitas
yang dipicu oleh HM, mencegah toksisitas yang dipicu oleh H 2 O 2 atau 6). -hydroxydopamine di
dalam atau 6-hydroxydopamine di dalam atau 6-hydroxydopamine di dalam atau 6-
hydroxydopamine di dalam atau 6-hydroxydopamine di dalam atau 6-hydroxydopamine di dalam
atau 6-hydroxydopamine di dalam
model vitro dari stres oksidatif [6].
Untuk studi rilis kami, kami telah mencampur dispersi polimer dengan a
solusi RSV dalam etanol dengan dosis kelarutan jenuh. Obat
memuat mungkin merupakan langkah kritis, dalam arti jika dimuat setelah gel
formasi, dispersi obat dapat menjadi tidak homogen dalam
hidrogel. Di sisi lain, obat bisa terdegradasi jika dimuat sebelumnya
pembentukan gel. Memuat RSV selama proses pendinginan (sekitar 40 C)
telah memungkinkan untuk mendapatkan dispersi obat yang homogen di dalam
hidrogel, mencegah degradasi termal. Setelah rilis meledak di dalam
jam pertama, rilis lambat masih terdeteksi hingga akhir
percobaan. Menurut analisis spektrofotometri dari
supernatan, pada akhir tes (7 hari) hidrogel dilepaskan
80% dari obat dimuat. Meskipun pendahuluan, hasil ini menyarankan
bahwa RSV memuat dalam P.NaOH.0 semi-IPNs dapat memperpanjang ketersediaannya dan
dengan demikian meningkatkan potensi terapeutiknya. Bahkan, penelitian sebelumnya telah
menunjukkan
bahwa setelah pemberian intravena untuk kelinci (20 mg / kg), yang terbesar
Konsentrasi RSV dalam plasma (42,8 ± 4,4 l M, 5 menit setelah perawatan)
berkurang menjadi 0,9 ± 0,2 l M pada 1 jam. Jika konsentrasi yang sama diberikan
secara lisan, konsentrasi terbesar dalam plasma (2-3 lM pada tikus dan
sekitar 1 l M pada kelinci atau tikus, diukur pada 5 menit) berkurang menjadi kurang
dari 0,1 l M pada 1 jam [50].
5. Kesimpulan
Dalam penelitian ini, hidrogel didasarkan pada kombinasi jaringan agarosa dan
mikroel karbomer dalam struktur semi-IPN dikembangkan, dioptimalkan dan
diuji sebagai sistem rilis RSV. Mereka berperilaku sebagai cairan kental setelah
proses pemanasan dan gel seperti padat setelah pendinginan untuk fisiologis
suhu, dengan demikian merupakan keuntungan untuk pemuatan obat. Pengaturan
proses memungkinkan memperoleh hidrogel steril dalam satu langkah. Itu
sitokompatibilitas dari formulasi yang diusulkan dibuktikan dengan
terstandarisasi
model in vitro. Hasil ini merupakan titik awal untuk studi masa depan
ditujukan untuk mengembangkan sistem rilis RSV.
Ucapan Terima Kasih Penulis berterima kasih kepada Lubrizol Corporation karena menyediakan
Carbopol 974P
NF dan buletin teknis tentang produk ini.