Mengapa perlu dilakukan pewarnaan ? • Mikroorganisme seperti bakteri umumnya sulit dilihat dengan mikroskop cahaya karena tidak mengadsorpsi ataupun membiaskan cahaya. Alasan inilah yang menyebabkan zat warna digunalan untuk mewarnai mikroorganisme karena zat warna mengadsorpsi dan membiaskan cahaya sehingga kontras mikroorganisme dengan lingkungannya akan ditingkatkan.
• Salah satu metode pewarnaan adalah pengecatan gram
History • Hans Christian Gram (1853-1938) mengembangakan teknik pewarnaan gram untuk membedakan pneumokokus dan klebsiella Pewarnaan Gram • Salah satu metode untuk membedakan spesies bakteri berdasarkan komponen dinding selnya menjadi 2 kelompok besar yaitu gram positif dan gram negative. Ciri Bakteri Gram Positif Contoh Bakteri Gram Positif Ciri Bakteri Gram Negatif Contoh Bakteri Gram Negatif Komposisi Dinding Sel Bakteri Reagen apa saja yang diperlukan? Prinsip Dasar
Gram positive bacteria akan Gram negative bacteria akan
menahan dan mengikat melepaskan senyawa Kristal senawa senyawa idone violet dan akan mengikat complex yang terbentuk dari warna berikutnya yaitu KI dan I2 dengan warna safranin -> merah Kristal violet sewaktu pewarnaan -> ungu Alat dan Bahan • Kristal violet • Gram’s iodine • Etanol • Safranin • Hidrogen peroksida 3% • Ose • Lampu spiritus • Glass slide • Mikroskop Prosedur Kerja TES KATALASE • Untuk mendeteksi enzim katalase pada bakteri
Ambil sebagian koloni
bakteri ( koloni yg Teteskan 1 tetes Amati dengan kaca sama dengan yang hydrogen peroksida pembesar. Apakah dilakukan pengecatan 3% diatas koloni terbentuk gelembung- 2 H2O2 + katalase → 2 H2O + O2 gram) dengan tusuk tersebut gelembung udara gigi steril, taruh diatas glass slide. TES KATALASE