Manual de Laboratorio
PRACTICA Núm. 1
EL MICROSCOPIO
I. OBJETIVO
II. INTRODUCCION
Antonio van Leeuwenhoek, en 1676, gran apasionado en pulir lentes que utilizaba
para examinar gran variedad de materiales, fue el primero en observar bacterias y
protozoarios en agua de lluvia, en infusiones diversas y en su sarro dental.
MICROSCOPIO OPTICO
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AMPLIFICACION
PODER DE RESOLUCION
APERTURA NUMERICA
Esta expresión, que suele abreviarse AN, indica la cantidad de luz que entra en un
objetivo desde un punto del campo del microscopio. Tal valor es de suma
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La AN de una lente depende del índice de refracción (N) del medio que llena el
espacio entre el objeto y la parte frontal del objetivo, y del ángulo (µ) de los rayos
de luz más oblicuos que puedan entrar al objetivo. La fórmula para calcular la AN
es:
AN = N x sen µ/2
El aire tiene un índice de refracción de 1.0, que limita la resolución que se puede
obtener, pero se puede incrementar la AN poniendo aceite de inmersión entre el
espécimen y el objetivo, aumentando así el poder de resolución del microscopio.
TIPOS DE MICROSCOPIO
Simple.
Compuesto.
Tiene varias lentes combinadas, capaces de producir gran aumento. (Fig. 1.1)
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Cuando sólo se pretende estudiar las estructuras externas de una muestra, no son
necesarios cortes ultrafinos, pudiéndose realizar la observación directa en MET,
después de aplicar una tinción negativa. También se puede usar el MEB.
METODOS DE MICROSCOPIA
La forma y estructura de las bacterias se revelan con más claridad cuando son
desecadas sobre un portaobjetos y son coloreadas o examinadas contra un fondo
teñido. Existen diversas técnicas de tinción.
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1. Base.
2. Soporte.
3. Bisagra de inclinación.
4. Brazo.
5. Cuerpo del tubo.
6. Tubo intercambiable.
7. Revólver.
8. Tornillo macrométrico.
9. Tornillo micrométrico.
10. Platina y Pinzas de la platina.
11. Fuente de luz.
12. Condensador.
13. Diafragma.
14. Objetivos: Seco débil, Seco fuerte y de Inmersión.
15. Oculares.
Sirven para mantener en posición las partes ópticas esenciales. La base y el brazo
son fuertes, para disminuir la vibración.
Tubo intercambiable.
Sirven para enfocar, logrando que la muestra se vea nítida y clara, ya que
permiten subir y bajar todo el cuerpo del tubo junto con sus lentes y en
microscopios modernos, junto con la platina.
El tornillo micrométrico permite subir o bajar muy ligeramente.
Platina.
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Pinzas de la Platina.
Estos sirven para mover la muestra que está sobre la platina, hacia arriba, abajo,
derecha ó izquierda, hasta enfocar el campo adecuado.
Fuente de Luz.
Se encuentra colocada debajo del objeto; ésta emite la luz que pasa por el
condensador, para después iluminar la preparación.
Condensador.
Diafragma.
Objetivos.
También está marcado como 10X. Tiene una lente en el extremo mucho
más grande que cualquiera de los otros objetivos.
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Este objetivo esta marcado “oil inmer” o “homog inmer” que significa
inmersión homogénea. También está marcado “1/12” (1/12 de pulgada,
1.9 mm, 1.8 mm) y con 97X ó 100X.
Las marcas 10X, 45X y 97X con que suelen estar marcados los objetivos
del microscopio corresponden a la potencia amplificadora, y las letras
“N.A.”, a la apertura numérica.
Mientras mayor sea la cifra “N.A.”, mayor será el detalle que revela el
objetivo.
Oculares.
Son tubos cortos, cada uno con dos lentes. La función de éstos es amplificar la
imagen del objeto formado por el objetivo.
Los oculares están marcados “5X”, “10X”, etc. indicando que amplían la imagen
del objetivo 5 veces, 10 veces, etc.
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6. Para enfocar, bajar el objetivo que se va a usar con el uso del tornillo
macrométrico hasta donde tope, sin forzarlo, luego enfocar primero con el
tornillo macrométrico y una vez que se ha localizado el campo, usar el tornillo
micrométrico para enfocar adecuadamente.
7. Con respecto al objetivo de inmersión, hay que tener mucho cuidado, ya que la
distancia focal es muy corta y habrá que emplear únicamente el tornillo
micrométrico y no el macrométrico debido a que se puede dañar la preparación
y la lente del objetivo, para su utilización es recomendable:
8. Evitar girar el revólver de los objetivos sin antes levantar el tubo óptico del
microscopio.
9. Recordar que el objetivo 45X es más largo que el de 10X y más todavía que el
de inmersión, por lo que deberá tenerse cuidado, pues si llegan a rozar, la
platina los inutiliza permanentemente.
10. Cuando se vaya a utilizar el objetivo seco fuerte (45X), hacer primero el
enfoque de la preparación con el objetivo seco débil, luego, girar el revólver de
tal manera que el siguiente objetivo sea el seco fuerte, cuidando que la lente
no tope con la preparación.
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− Microcultivo.
− Preparaciones teñidas.
− Aceite de inmersión.
− Hisopos.
− Papel absorbente.
− Microscopio.
IV. TECNICA
2. Dibujar lo observado.
MICROCULTIVO:
.
Seco fuerte. Seco débil
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PREPARACION TEÑIDA:
Objetivo de inmersión.
V. CUESTIONARIO
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