PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.

com

PENUNTUN PRAKTIKUM
Ilmu Dasar Keperawatan
(IDK II)

Pengenalan
Alat & Bahan di Lab Mikrobiologi
Media & Morfologi Bakteri dan Jamur
Cara Mengasingkan Bakteri
 ORIENTASI
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

TOPIK :

1. Alat dan Bahan pemeriksaan laboratorium mikrobiologi

2. Media perbenihan bakteri

TUJUAN :

1. Mengetahui berbagai macam Alat dan Bahan pemeriksaan

laboratorium mikrobiologi
2. Mengetahui berbagai macam media perbenihan bakteri
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

I. Alat dan Bahan Untuk Pemeriksaan di

Laboratorium Mikrobiologi

1. Tabung
a. Peragian
b. Perbenihan
c. Reaksi
d. Ulir
e. Durham

2. Cawan petri
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

3. Labu / kolf 4. Pipet

a. Biasa a. Pasteur
b. Erlenmeyer b. ukuran biasa
c. Balon
 6. Gelas ukur
5. Saringan Kuman

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

 8. Sentir bunsen

7. Sengkelit

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

 9. Untuk bakteri anaerob

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

 Inkubator :
digunakan mengeramkan media yang telah ditanami mikroorganisme
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

dan untuk menyimpan bahan pemeriksaan dimana bakteri terkandung

akan mati bila disimpan di dalam lemari es (misal : cairan cerebrospinal)

10. Inkubator biasa 11. Inkubator CO2

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

12. MIKROSKOP

Untuk melihat objek atau detail yang terlalu kecil oleh mata

Fungsi :
- Mengidentifikasi mikroorganisme

- Mengetahui struktur dan morfologi bakteri, badan inklusi, efek

sitopatogenik dan lain-lain

- Menghitung jumlah mikroorganisme

 Media Perbenihan Bakteri
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Tujuan :

1. Mengetahui cara membiakkan, mengasingkan dan menyimpan

bakteri dalam laboratorium untuk waktu yang lama
2. Mempelajari sifat-sifat pertumbuhan / koloni bakteri
3. Mempelajari sifat-sifat biokimia bakteri

Pembiakan dan Pertumbuhan Bakteri

Media pertumbuhan bakteri digunakan untuk :

* Isolasi
* Transportasi
* Persemaian
* Diferensiasi bakteri
 Berbagai Media perbenihan :
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Misal :

+ zat warna untuk indikator aktivitas metabolisme bakteri

+ darah, serum, vitamin untuk bakteri dengan aktivitas tinggi

(Medium Diperkaya : Agar Darah )

Perbenihan padat ( agar 1,5 – 2 %); lempeng dan tabung

Untuk menghambat pertumbuhan bakteri secara selektif digunakan

Medium Selektif : Salmonella Shigella. PEA, EMB(Eosin Methyllen
Blue)

Untuk membedakan beberapa jenis bakteri digunakan Medium

Diferensial : ENDO, EMB
 Agar Salmonella shigella
Agar Endo

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

 Agar Darah

Agar TCBS

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

 Agar Muller Hinton

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

 Media selektif: Agar PEA
(Phenylethyl Alcohol)
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Guna: medium selektif untuk

menghambat pertumbuhan bakteri
Gram negatif

Prinsip: PEA mencegah

pertumbuhan bakteri Gram negatif
dengan merusak struktur lipid pd
membran sel bakteri Gram negatif

Keterangan Gambar:
Gambar A (agar PEA) & Gambar B
(agar nutrien)
+ Bakteri Gram positif
- Bakteri Gram negatif
 Media diferensial: Agar DO (Deoxycholate & Citrate)
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Guna: mengisolasi & membedakan bbrp

anggota family Enterobacteriaceae.

Prinsip:
- DOC mengandung natrium deoxycholate
dan sitrat yg bekerja menghambat
pertumbuhan bakteri Gram-positive
-Juga mengandung gula laktosa yg
membedakan bakteri enterik yang
melakukan atau tidak fermentasi laktosa
Fermentasi laktosa tampak dari warna
merah yg ditimbulkan (berhubungan dg pH
netral)

Reaksi yang tampak pd gambar:.

A. Fermentasi laktosa tinggi
B. Pertumbuhan bakteri Gram-positive
kurang
C. Tidak ada fermentasi
D. Fermentasi laktosa tinggi
 Perbenihan transpor
Perbenihan semisolid
(agar 0,2 – 0,5 %)

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

 Perbenihan Cair

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

 Persiapan / Pembuatan media
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Persiapan / pembuatan media biasanya dilakukan di ruang

khusus (dapur media)

1. Timbangan Kasar Timbangan analitik

 Otoklaf :
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Digunakan untuk sterilisasi

perbenihan menggunakan uap panas
(121 0C, 20’)
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Hot Air Sterilizer (Oven) :

Digunakan untuk sterilisasi alat-alat

gelas dan lainnya yang tahan dengan
pemanasan kering (dry Heat)

- 160 0C selama 60’

- 170 0C selama 40’

- 180 0C selama 20’

 LEMARI PENDINGIN (REFRIGERATOR)
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Alat ini digunakan untuk :

- Menyimpan media steril yang

siap pasti, agar isi dan mutu
media tersebut tidak berubah

- Menyimpan untuk sementara

waktu bahan/spesimen yang
belum sempat diperiksa agar
tidak mengalami perubahan

- Menyimpan cakram antibiotika

yang belum terpakai agar tidak
mengalami perubahan
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

MORFOLOGI KOLONI BAKTERI DAN

CARA MENGASINGKAN BAKTERI

Tujuan :

1. Mengetahui jenis-jenis bakteri berdasarkan

morfologi koloninya

2. Mengetahui hal-hal yang perlu diperhatikan

dalam mempelajari koloni bakteri

3. Mengetahui bahwa sifat-sifat koloni dapat

dipakai untuk membantu identifikasi bakteri
 Bakteri akan memberikan pertumbuhan koloni yang
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

berbeda pada media perbenihan bila dilihat secara

makroskopik. Perbedaan ini disebut karakteristik
pertumbuhan, yang selanjutnya akan digunakan sebagai
dasar penggolongan taksonomi.

Hal-hal yang perlu diperhatikan dalam mempelajari suatu

koloni bakteri , baik pada agar lempeng dan agar tabung :
1. Ukurannya (diameternya)
2. Ada atau tidaknya pigmen
3. Menonjol atau rata
4. Keruh atau bening, suram atau mengkilat
5. Permukaan rata (Smooth) atau tidak rata (Rough)
6. Pinggiran rata atau tidak
7. Menjalar atau tidak
8. Konsistensi (Berlendir atau tidak)
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

1. Koloni S (Smooth) :
E. coli, Salmonella, Vibrio,
Shigella, Staphylococcus

2. Koloni R (Rough) :
Bacillus subtilis

3. Koloni menjalar :
Proteus sp.

4. Koloni beranyaman :
Bacillus mycoides

5. Koloni berlendir/mukoid :
Klebsiella sp.
 Koloni rough
Koloni smooth

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

 Koloni Beranyaman
Koloni Menjalar

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

 Koloni Mukoid

PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

 KOLONI BERPIGMEN
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

5 6 Keterangan :
1 2 3 4
1. Staphylococcus aureus

2. Staphylococcus citreus

3. Staphylococcus epidermidis

4. Serratia marcescens

5. Chromobacterium violaceum

6. Pseudomonas aeruginosa
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Serratia marcescens Micrococcus luteus

Chromobacterium violaceum Pseudomonas aeroginosa

 Bakteri yang dibiakkan pada agar darah lempeng, perlu diperhatikan
keadaan sekeliling koloni apakah terbentuk zona hemolisis atau
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

tidak.

1. Zona berwarna hijau atau keruh, disebut hemolisis tip alfa

(hemodigesti)
2. Zona jernih tidak berwarna, disebut hemolisis tip beta
(hemolisis)
3. Tidak ada zona, disebut hemolisis tip gamma (non hemolisis)
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com
 MIKOLOGI
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Ciri – ciri :

a. Dinding sel : glukan , manan dam khitin

b. Sel eukariota ; Tidak berklorofil ; Bersifat heterotrof
c. Uniseluler : Yeast /ragi / khamir
Multiseluler : mold (kapang)
d. Reproduksi : seksual dan aseksual
e. Perbenihan : agar Sabouraud
f. Pewarnaan :
KOH 10 % ; PAS (Peridic Acid Schiff); LPCB
Perak metenamin (gomori) ;
g. Pertumbuhan : Suhu (28 oC – 35 oC) ; pH (4,5 – 6,5)
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Morfologi koloni

1. Ragi

Koloni bulat ≈ bakteri,
cembung, halus dan
licin

Membentuk koloni
basah, warna putih
kekuningan
Biakan candida albicans
pada agar sabouraud
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

Biakan Aspergillus niger

pada agar sabouraud

2. Kapang

Sel memanjang dan

bercabang

Koloni : kering,
padat seperti kapas
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

B. CARA MENGASINGKAN BAKTERI

Untuk mempelajari koloni bakteri dan dapat mengasingkannya dari

suatu biakan / bahan pemeriksaan, perlu didapatkan koloni-koloni
yang terpisah.

Pemisahan koloni bakteri dapat dilakukan dengan memakai sudip

gelas berbentuk L untuk menggoreskan bahan di seluruh
permukaan perbenihan atau memakai sengkelit dengan membuat
garis-garis sejajar
(Penipisan Koch)

Tujuan :
Mengetahui cara mengasingkan bakteri dari suatu bahan
pemeriksaan / biakan
 CARA MENGASINGKAN BAKTERI
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com

(Penipisan KOCH)

Tujuan :
Mengetahui cara mengasing-
kan bakteri dari suatu bahan
pemeriksaan / biakan
2

1
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com
PDF Created with deskPDF PDF Writer - Trial :: http://www.docudesk.com