ANGGRITA FITRIANA
Puji dan syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT karena dengan
rahmat, hidayah dan ridho-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi
dengan judul “Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi n-Heksana Umbi Eleutherine
palmifolia Terhadap Escherichia coli Dengan Metode Difusi Cakram” dengan
tepat waktu dalam mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi
Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.
Dalam penyelesaian skripsi ini, penulis tentunya menghadapi berbagai
macam rintangan namun Alhamdulillah dapat dilalui berkat dukungan dan bantuan
dari berbagai pihak. Oleh karena itu, penulis ingin menyampaikan rasa terimakasih
kepada :
1. Allah SWT yang telah memberikan rahmat-Nya baik dalam segi kesehatan
lahir dan batin maupun kemudahan dalam penyusunan dan penyelesaiannya.
2. Kedua orangtua tercinta Ibu Dewi dan Bapak Suroto, Nenek dan keluarga
karena telah mendukung dan mendo’akan yang terbaik bagi penulis dalam
penyelesaian skripsi ini, serta selalu memberikan semangat kepada penulis dan
mengingatkan bahwa bersama kesulitan selalu ada kemudahan.
3. Ibu Siti Rofida, S. Si., M. Farm., Apt selaku dosen pembimbing I yang dengan
penuh kesabaran memberikan pengertian, arahan, dukungan serta bimbingan
kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.
4. Bapak Ahmad Shobrun Jamil, S.Si., M.P. Selaku dosen pembimbing II yang
telah memberikan arahan, dukungan serta bimbingan kepada penulis agar dapat
menyelesaikan skripsi ini.
5. Ibu Dian Ermawati, M. Farm., Apt. dan Ibu Ika Ratna Hidayati, S. Farm.,
M.Sc., Apt selaku tim penguji yang telah memberikan kritik dan saran untuk
meyempurnakan skripsi ini.
6. Ibu Ika Ratna Hidayati, S. Farm., M.Sc., Apt selaku dosen wali atas
bimbingannya selama ini
7. Ibu Dian Ermawati, M. Farm., Apt. selaku Ketua Program Studi Farmasi yang
telah membantu kelancaran pengerjaan skripsi penulis.
iv
8. Ibu Raditya Weka Nugraheni, S. Farm, Apt selaku ketua Laboratorium Farmasi
yang telah memberikan fasilitas kepada penulis sehingga penulis dapat
menyelsaikan penelitian di Laboratorium Farmasi.
9. Mbak Susi, Mbak Evi, Mas Ferdi, dan Mas Dhani selaku laboran yang
membantu penulis dalam penelitian untuk menyempurnakan skripsi ini
10. dr. Desy Andari selaku Kepala Laboratorium Biomedik PPD UMM yang telah
mengijinkan penulis melakukan penelitian di Laboratium tersebut.
11. Mexi Kurniawan, terimakasih karena sudah membantu dalam segala hal,
mendengarkan semua keluh kesah yang tak dapat tersampaikan, bersabar
dalam menghadapi mood yang tak beraturan, terimakasih karena sudah
menemani sejauh ini, dan insyaAllah akan terus seperti ini jika Allah meridhoi
12. Seluruh dosen Farmasi dan Seluruh dosen Fakultas Kedokteran yang telah
membimbing dan memberikan ilmu pengetahuan kepada penulis.
13. Angga dan Uwais selaku adik penulis, terimakasih sudah menjadi
penyemangat penulis dalam menjadi pribadi yang lebih baik.
14. Annisa Kusumawardani selaku teman PESMABA, teman sekelas, teman
seperantauan, teman satu tim Skripsi karena sudah membantu penulis dalam
menyempurnakan naskah ini, terimakasih atas motivasinya, terimakasih karena
telah menjadi teman segalanya.
15. Teman-teman dalam tim skripsi, terimakasih atas bantuannya dalam
penyempurnaan skripsi ini.
16. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu, yang memberikan
bantuannya, baik moril maupun material.
Dalam penulisan skripsi ini penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari
kesempurnaan. Maka penulis akan menerima segala bentuk kritik dan saran yang
membangun. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak, khusunya bagi
penulis, para pembaca di bidang kefarmasian.
Malang, 28 Mei 2018
Penulis
Anggrita Fitriana
v
DAFTAR ISI
Halaman
Lembar Pengesahan ..................................................................................... ii
Lembar Pengujian ....................................................................................... iii
KATA PENGANTAR ................................................................................. iv
RINGKASAN .............................................................................................. vi
ABSTRAK .................................................................................................. vii
DAFTAR ISI ................................................................................................ ix
DAFTAR TABEL....................................................................................... xii
DAFTAR GAMBAR ................................................................................. xiii
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................. xiv
DAFTAR SINGKATAN ............................................................................ xv
BAB I PENDAHULUAN ........................................................................ 1
1.1 Latar Belakang........................................................................ 1
1.2 Rumusan Masalah .................................................................. 5
1.3 Tujuan Penelitian .................................................................... 5
1.4 Manfaat Penelitian .................................................................. 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA .............................................................. 6
2.1 Tinjauan Tentang Eleutherine palmifolia L ........................... 6
2.1.1 Deskripsi ........................................................................ 6
2.1.2 Klasifikasi ...................................................................... 6
2.1.3 Nama Daerah ................................................................. 7
2.1.4 Khasiat ........................................................................... 7
2.1.5 Kandungan Senyawa ..................................................... 7
2.1.6 Aktivitas Antibakteri Senyawa Metabolit Sekunder ..... 9
2.2 Tinjauan Tentang Penyakit Diare ......................................... 11
2.2.1 Definisi Diare............................................................... 11
2.2.2 Klasifikasi Diare .......................................................... 12
2.2.3 Penyebab Diare ............................................................ 12
2.2.4 Gejala Diare ................................................................. 14
2.3 Tinjauan Tentang Bakteri Escherichia coli .......................... 15
2.3.1 Deskripsi ...................................................................... 15
2.3.2 Klasifikasi Bakteri E. coli ............................................ 16
2.3.3 Uji Kualitatif E.coli ..................................................... 16
2.4 Pewarnaan Gram .................................................................. 17
2.5 Tinjauan Antibiotik-Antibakteri ........................................... 18
2.5.1 Mekanisme Resistensi Antibiotik ................................ 20
2.5.2 Mekanisme Kerja Cefotaxime...................................... 21
2.5.3 Metode Pengujian Aktivitas Antibakteri ..................... 22
2.6 Tinjauan Tentang Ekstrak..................................................... 23
2.7 Tinjauan Tentang Ekstraksi .................................................. 24
ix
2.7.1 Cara Dingin .................................................................. 25
2.7.2 Cara Panas ................................................................... 26
2.8 Tinjauan Tentang Pelarut ..................................................... 27
2.9 Tinjauan Kromatografi Lapis Tipis ...................................... 29
2.9.1 Fasa diam ..................................................................... 30
2.9.2 Fasa gerak .................................................................... 30
BAB III KERANGKA KONSEPTUAL ................................................. 32
3.1 Bagan Kerangka Konseptual ................................................ 32
3.2 Kerangka Konseptual ........................................................... 33
BAB IV METODE PENELITIAN.......................................................... 36
4.1 Jenis Penelitian ..................................................................... 36
4.2 Lokasi Penelitian .................................................................. 36
4.3 Instrumen Penelitian ............................................................. 36
4.3.1 Pembuatan Serbuk Simplisia ....................................... 36
4.3.2 Proses Ekstraksi ........................................................... 36
4.3.3 Pengujian Difusi Cakram ............................................. 37
4.3.4 Pemisahan Senyawa dengan KLT ............................... 37
4.4 Bahan Penelitian ................................................................... 38
4.4.1 Bahan Uji ..................................................................... 38
4.4.2 Determinasi Tanaman .................................................. 38
4.4.3 Proses Ektraksi dan Fraksinasi .................................... 38
4.4.4 Pengujian Difusi Cakram ............................................. 39
4.4.5 Identifikasi Senyawa dengan KLT .............................. 39
4.5 Variabel Penelitian ............................................................... 39
4.5.1 Variabel Bebas ............................................................. 39
4.5.2 Variabel Terikat ........................................................... 39
4.6 Sterilisasi .............................................................................. 39
4.6.1 Sterilisasi Kering ......................................................... 40
4.6.2 Sterilisasi Basah ........................................................... 40
4.7 Metode Penelitian ................................................................. 40
4.7.1 Rancangan Penelitian................................................... 40
4.7.2 Kerangka Operasional ................................................. 41
4.8 Prosedur Kerja ...................................................................... 42
4.8.1 Pembuatan Simplisia ................................................... 42
4.8.2 Prosedur Kerja ............................................................. 43
4.8.3 Tahap Pengujian .......................................................... 49
4.9 Analisis Data ........................................................................ 52
BAB V HASIL PENELITIAN ............................................................... 53
5.1 Determinasi Umbi Eleutherine palmifolia ........................... 53
5.2 Pembuatan Serbuk Simplisia Umbi Eleutherine palmifolia . 53
5.3 Pengukuran Kandungan Lengas (MC) Umbi E. palmifolia . 54
5.4 Ekstrak Kental Fraksi N-Heksana Umbi E. palmifolia ........ 55
x
5.5 Uji KLT Kandungan Senyawa Fraksi n-Heksana Umbi
Eleutherine palmifolia .......................................................... 56
5.5.1 Identifikasi Senyawa Golongan Alkaloida .................. 57
5.5.2 Identifikasi Senyawa Golongan Terpenoid ................. 57
5.5.3 Identifikasi Senyawa Golongan Flavonoid .................. 58
5.5.4 Identifikasi Senyawa Golongan Polifenol/Tanin ......... 59
5.5.5 Identifikasi Senyawa Golongan Antrakuinon .............. 59
5.6 Pewarnaan Bakteri Escherichia coli ..................................... 60
5.7 Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi n-Heksana Umbi Eleutherine
palmifolia Terhadap Bakteri Escherichia coli ...................... 61
BAB VI PEMBAHASAN ......................................................................... 65
6.1 Pembahasan .......................................................................... 65
BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN .................................................. 77
7.1 Kesimpulan ........................................................................... 77
7.2 Saran ..................................................................................... 77
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................. 78
xi
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
II. 1 Hasil Skrining fitokimia ekstrak etanol 96% dan fraksi-fraksinya ..... 8
II. 2 Sifat fisika dan kimia pelarut n-Heksana .......................................... 28
IV. 1 Tabel Standar Kekeruhan menurut Mc. Farland............................... 47
IV. 2 Rancangan Data Uji Aktivitas Antibakteri ....................................... 52
V. 1 Pengayakan Derajat Kehalusan Serbuk Simplisia E.palmifolia........ 53
V. 2 Nilai Kadar Air Simplisia Serbuk Umbi E. palmifolia ..................... 54
V. 3 Hasil Identifikasi Organoleptis fraksi n-heksana Umbi
E.palmifolia ...................................................................................... 56
V. 4 Hasil KLT dari Fraksi N-Heksana Umbi E. palmifolia .................... 60
V. 5 Hasil Uji Antibakteri Fraksi n-Heksana Umbi E. palmifolia
Menggunakan Metode Difusi Cakram terhadap E coli .................... 62
xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
Gambar 2. 1 Tanaman bawang Dayak ( Eleutherine palmifolia) ............... 6
Gambar 2. 2 Bakteri Escherichia coli ...................................................... 15
Gambar 2. 3 Struktur Kimia Cefotaxime .................................................. 21
Gambar 2. 4 Mekanisme Kerja Antibiotik β-laktam pada Dinding sel
Gram Positif dan Gram Negatif ........................................... 22
Gambar 3. 1 Kerangka konseptual ........................................................... 32
Gambar 4. 1 Bagan Alir Proses Fraksinasi n-Heksana ............................. 41
Gambar 4. 2 Bagan Alir Uji Aktivitas Antibakteri ................................... 42
Gambar 4. 3 Bagan Alir Proses Pembuatan Fraksi n-Heksana Umbi
E. palmifolia......................................................................... 44
Gambar 4. 4 Skema Preparasi Bakteri ...................................................... 48
Gambar 4. 5 Bagan Alir Pengujian Penghambatan Pertumbuhan Bakteri
Dengan Metode Difusi Cakram ........................................... 51
Gambar 5. 1 Umbi E. palmifolia .............................................................. 54
Gambar 5. 2 Ekstrak Kental Fraksi n-Heksana ........................................ 55
Gambar 5. 3 Optimasi Fase gerak ............................................................ 56
Gambar 5. 4 Hasil Identifikasi Senyawa Golongan Alkaloida ................. 57
Gambar 5. 5 Hasil Identifikasi Senyawa Golongan Terpenoid ................ 58
Gambar 5. 6 Hasil Identifikasi Senyawa Golongan Flavonoid ................ 58
Gambar 5. 7 Hasil Identifikasi Senyawa Golongan Polifenol .................. 59
Gambar 5. 8 Hasil Identifikasi Senyawa Golongan Antrakuinon ............ 60
Gambar 5. 9 Pewarnaan Peremajaan Bakteri E.coli ................................. 61
Gambar 5. 10 Pewarnaan Gram ................................................................ 61
Gambar 5. 11 Rata-rata Diameter Zona Hambar Fraksi n-Heksana Umbi E.
palmifolia terhadap Pertumbuhan Bakteri E.coli ............... 63
Gambar 5. 12 Hasil Pengujian Difusi Cakram Fraksi n-Heksana umbi E.
palmifolia ........................................................................... 64
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
Lampiran 1 Daftar Riwayat Hidup ........................................................... 85
Lampiran 2 Surat Tugas Akhir ................................................................. 86
Lampiran 3 Determinasi Tanaman ........................................................... 87
Lampiran 4 Sertifikasi Bakteri ................................................................. 88
Lampiran 5 Surat Keterangan Penelitian.................................................. 89
Lampiran 6 Surat Laboratorium Sintesa .................................................. 90
Lampiran 7 Perhitungan ........................................................................... 91
Lampiran 8 Bagan Alir ............................................................................ 92
Lampiran 9 Data dan Hasil Penelitian...................................................... 97
Lampiran 10 Alat dan Bahan ................................................................. 100
Lampiran 11 Surat Pernyataan Keaslian Penelitian ............................... 106
Lampiran 12 Hasil Deteksi Plagiasi ...................................................... 107
xiv
DAFTAR SINGKATAN
xv
DAFTAR PUSTAKA
Alamsyah, H.K., Ita, W., dam Agus, S., 2014. Aktivitas Antibakteri Ekstrak
Rumput Laut (Sargassum Cinereum ) (J.G. Agardh) Dari Perairan Pulau
Panjang Jepara Terhadap Bakteri Escherichia coli Dan Staphylococcus
Epidermidis. Journal Of Marine Research. Volume 3, Nomor 2,
Halaman 69-78.
Amalia, S., Sri, W., dan Eka K.U., 2014. Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi N-
Heksana Kulit Buah Naga Merah (Hylocereus Polyrhizus Britton & Rose)
Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923. Traditional
Medicine Journal, 19(2). Universitas Tanjungpura. Pontianak.
Ansel, CH., Norred WP., Roth, IL. 1969. Antimicrobial Activity Of Dimethyl
Sulfoxide Againts Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, and
Bacillus megaterium. Journal of Pharmaceutical Science Vol. 58, Issue
7, July 1969
BPOM. 2005. Standarisasi Ekstrak Tumbuhan Obat Indonesia, Salah satu Tahapan
Penting dalam Mengembangkan Obat Asli Indonesia. Jakarta : Buletin
InfoPOM Vol. 6 No. 4
Cavalieri, S.J., I.D. Rankin., R.J. Harbeck., R.S. Sautter., Y.S. McCarter., S.E.
Sharp., J.H. Ortez., dan C.A. Spiegel. 2005. Manual of Antimicrobial
Susceptibility Testing. American Society for Microbiology, USA.
78
Clinical and Laboratory Standards Institute, 2017. Performance Standards for
Antimicrobial Susceotibility Testing. Ed 27th. USA
Fitri, L dan Yekki, Y, 2011. Isolasi Dan Pengamatan Morfologi Koloni Bakteri
Kitinolitik. Jurnal Ilmiah Pendidikan Biologi, Biologi Edukasi Vol.3
No. 2 hal 20-25, Desember. Banda Aceh
79
Hendra R, Ahmad S, Sukari A, Shukor MY, Oskoueian E. 2011. Flavonoid analyses
and antimicrobial activity of various parts of Phaleria macrocarpa
(Scheff) Boerl fruit. International Journal of Molecular Sciences. 12:
3422-3431
Kameswari, M.S., Hapsari, M., dan Besung, I. N. K., 2013. Perasan Daun
Mengkudu (Morinda citrifolia) Menghambat Pertumbuhan Bakteri
Escherichia coli secara In Vitro. Indonesia Medicus Veterinus 2(2) : 216
– 224.
Laksmi. 2004. Uji Kepekaan Isolat Bakteri E.coli Usapan Tinja Pasien Diare
di Rumah Sakit Islam Surakarta. Fakultas Farmasi Univesitas
Muhammadiyah Surakarta. Surakarta. Skripsi. Tidak dipublikasikan
80
Markham, K.R., 1988, Cara Mengidentifikasi Flavonoid, diterjemahkan oleh
Kosasih Padmawinata, Penerbit ITB, Bandung
Mierza, V, dkk. 2011. Skrinig Fitokimia dan Uji Efek Antibakteri Ekstrak
Etanol Umbi Bawang Sabrang (Eleutherine palmifolia Merr.).
Prosiding Seminar Nasional Biologi hal 340-351. Universitas Sumatera
Utara. Sumatera Utara
Munawaroh, S., dan Handayani P.A,. 2010. Ekstraksi Minyak Daun Jeruk Purut
(Citrus hystrix D.C) dengan Pelarut Etanol dan N-Heksana. Jurnal
Kompetensi Teknik Vol. 2. NO. 1. November. Program Studi Teknik
Kimia, Universitas Negeri Semarang. Semarang.
Neu HC, Gootz TD. 1996. Antimicrobial Chemotherapy, 4th edition Chapter
11. University of Texas Medical Branch. Galveston.
Ngajow, M., Jemmy A., dan Vanda S.K. 2013. Pengaruh Antibakteri Ekstrak Kulit
Batang Matoa (Pometia pinnata) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus
Secara In Vitro. E-Journal MIPA UNSRAT Vol 2, No. 2 2013
Noviana, H. 2004. Pola Kepekaan Antibiotika Escherichia coli yang Diisolasi dari
Berbagai Spesimen Klinis. Jurnal Kedokteran Trisakti Vol. 23 No.4
2004
Nuria, M.C., Faizatun A., dan Sumantri. 2009. Uji Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
Jarak Pagar ( Jatropha cuircas L) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus
ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, dan Salmonella typhi ATCC
1408. Jurnal Ilmu – ilmu Pertanian. 5: 26 -37.
Nuria, M.C, Zumrotul C., Syahar B., dan Risha F.F. 2014. Penelusuran Potensi
Fraksi N-Heksana Dan Etil Asetat Dari Ekstrak Metanol Daun Gugur
81
Ketapang (Terminalia Catappa L.) Sebagai Antidiare. Fakultas Farmasi
Universitas Wahid Hasyim Semarang
Nuria, M. C., Faizatun, Arvin, Sumantri. 2009. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak
Etanol Daun Jarak Pagar (Jatropa curcas L) Terhadap Bakteri
Stapphylococcus aureus ATCC 25923, Escheria coli ATCC 25922 dan
Salmonella typhi ATCC 1408. Mediagro. (2):26-37
Pratita, M.Y.E dan Surya R. P, 2012. Isolasi Dan Identifikasi Bakteri Termofilik
Dari Sumber Mata Air Panas Di Songgoriti Setelah Dua Hari Inkubasi.
Jurnal Teknik Pomits Vol. 1, No. 1, hal 1-5. Surabaya
Purwantoro, R.S., Agusta, A., dan Praptiwi. 2009. Aktivitas Antibakteri Ekstrak
Daun Schefflera elliptica (Blume) Harms. Proisiding Seminar Nasional
HUT Kebun Raya Cibodas Ke-159 ISBN 978-979-99448-6-3
Rahminiwati, M., Aulia A.M.P, Siti S., Andriyanto, Soeripto, Unang P. 2010.
Bioprospeksi Ekstrak Jahe Gajah Sebagai Anti-CRD: Kajian Aktivitas
Antibakteri Terhadap Mycoplasma Galliseptikum dan E. Coli. Jurnal
Ilmu Pertanian Indonesia, April 2010, hlm. 7-13 Vol. 15 No.1. Institut
Pertanian Bogor. Bogor
Rubiyanto, D. 2016. Teknik Dasar Kromatografi Edisi 1 Cetakan Kedua hal. 29-
33. Yogyakarta : Deepublish.
Sa’adah, H dan Henny N. 2015. Perbandingan Pelarut Etanol Dan Air Pada
Pembuatan Ekstrak Umbi Bawang Tiwai (Eleutherine Americana Merr)
82
Menggunakan Metode Maserasi. Jurnal Ilmiah Manuntung, 1(2), 149-
153, 2015. Akademi Farmasi Semarang
Sari, F.P., dan S. M. Sari. 2011. Ekstraksi Zat Aktif Antimikroba dari Tanaman
Yodium (Jatropha multifida Linn) sebagai Bahan Baku Alternatif
Antibiotik Alami. Fakultas Teknik Universitas Diponegoro, Semarang.
Susanti, A.D., Dwi, A., Gita, G.P., Yosephine, G.B., 2012. Polaritas Pelarut
Sebagai Pertimbangan Dalam Pemilihan Pelarut Untuk Ekstraksi
Minyak Bekatul Dari Bekatul Varietas Ketan (Oryza sativa glatinosa).
Fakultas Teknik. Universitas Sebelas Maret Surakarta. Surakarta
The Center for Food Security and Public Health. 2016. Enterohemorrhagic
Escherichia coli and Other E. coli Causing Hemolytic Uremic
Syndrome. Iowa State University
Tjay, T.H., dan Kirana R,. 2007. Obat-obat Penting : Khasiat, Penggunaan dan
Efek-efek Sampingnya. Jakarta. Penerbit PT Elex Media Komputindo.
Utami, P., dan Desti E., 2013. The Miracle of Herbs. Jakarta. Penerbit Agro Media
Pustaka
83
Welch, R.A. 2006. The Genus Escherichia. Chapter 3.3. Prokaryotes (2006)
6:60–71
Widiyanti, N.L.P.M. dan Ristiati N.P, 2004. Analisis Kualitatif Bakteri Koliform
Pada Depo Air Minum Isi Ulang di Kota Singaraja Bali. Jurnal Ekologi
Kesehatan Vol. 3 No. 1, April. Singaraja.
Winangsih, E.P., dan Sarjana, P., 2013. Pengaruh Metode Pengeringan Terhadap
Kualitas Simplisia Lempuyang Wangi (Zingiber aromaticum L.). Buletin
Anatomi dan Fisiologi. 21(1), 19-25.
Zein, U., Khalid H.S, dan Josia G. 2014. Diare Akut Disebabkan Bakteri.
Fakultas Kedokteran Divisi Penyakit Tropik dan Infeksi Bagian Ilmu
Penyakit Dalam Universitas Sumatera Utara. Sumatera Utara.
84